研究復(fù)方清脂顆粒對大鼠肝臟的毒性作用

1、研究復(fù)方清脂顆粒對大鼠肝臟的毒性作用    摘要：目的 研究復(fù)方清脂顆粒對大鼠肝臟的毒性作用。方法大鼠連續(xù)灌胃給予復(fù)方清脂顆粒生藥52，26和13 g/kg連續(xù)8周，同時(shí)設(shè)對照組。禁食12 h后用水合氯醛麻醉動(dòng)物，取肝臟稱重并計(jì)算肝系數(shù)，光鏡下做病理組織學(xué)檢查，并測定血清中AST，ALT，ALP和肝組織中SOD和MDA。結(jié)果復(fù)方清脂顆粒52 g/kg組大鼠的肝重、肝系數(shù)、肝組織中MDA量都明顯高于對照組，但SOD活力與對照組之間沒有明顯差別，26 g/kg組肝系數(shù)和肝組織中MDA高于對照組，13 g/kg組所有指標(biāo)與對照組之間均無顯著差異。病理組織學(xué)檢查

2、各組均未見肝組織有明顯病變。結(jié)論長期給予復(fù)方清脂顆粒52，26 g/kg，對肝臟有一定毒性但沒有造成肝臟的器質(zhì)性損傷，13 g/kg是無毒性作用劑量。 關(guān)鍵詞：  大鼠；肝毒性；超氧化物歧化酶；丙二醛    復(fù)方清脂顆粒是由決明子、澤瀉、姜黃、首烏等組成的中藥復(fù)方，經(jīng)藥效學(xué)研究證明能顯著降低血脂，大鼠藥效學(xué)有效劑量為5 g/kg。我們進(jìn)行了復(fù)方清脂顆粒大鼠肝毒性的實(shí)驗(yàn)研究?，F(xiàn)報(bào)道如下。1  器材與方法1.1  藥品和儀器 復(fù)方清脂顆粒，天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院藥學(xué)部提供，批號：20050103。天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸

3、氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司；丙二醛（MDA）試劑盒、超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒，南京建成生物工程研究所。JJ2000型精密電子天平，常熟雙杰測試儀器廠；AE200型電子分析天平，梅特勒-托利多儀器有限公司（上海）；Micro95型半自動(dòng)生化儀，荷蘭威圖科學(xué)公司；721分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠。1.2  動(dòng)物與分組 Wistar大鼠48只，雌雄各半，體重100120 g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司，合格證號：SCXK（京）2002-2003。飼養(yǎng)于天津中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，所用飼料為天津市華榮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司

4、生產(chǎn)。實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物分成四組：對照組,復(fù)方清脂顆粒52 g/kg組,復(fù)方清脂顆粒26 g/kg組，復(fù)方清脂顆粒13 g/kg組，每組12只。1.3 方法 每天上午按相應(yīng)劑量灌胃給藥1次，對照組給予潔凈自來水，并觀察動(dòng)物的一般狀況，連續(xù)8周。禁食12 h后，稱動(dòng)物體重用10%水合氯醛腹腔注射0.3 ml/100 g體重麻醉大鼠。腹主動(dòng)脈取血5 ml；解剖取肝臟稱重，在相同肝小葉上取一塊肝組織用福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片，H.E.染色，光鏡下做病理組織學(xué)檢查；另取0.2 g肝組織用生理鹽水作成10%的肝勻漿2 ml，用TBA比色法測定肝組織中MDA，將10%肝勻漿用生理鹽水稀釋成1%，用黃嘌呤

5、氧化酶法測定肝組織中SOD。1.4  數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)所有數(shù)據(jù)用±s表示。復(fù)方清脂顆粒各組與對照組之間比較使用t檢驗(yàn)。2  結(jié)果2.1  對大鼠肝臟重及肝系數(shù)的影響復(fù)方清脂顆粒52 g/kg組大鼠的肝臟明顯增大，肝重顯著高于對照組，26 g/kg組也有增大的趨勢；52，26 g/kg組大鼠的肝臟系數(shù)都顯著高于對照組，并呈現(xiàn)較明顯的劑量依賴關(guān)系。結(jié)果見表1。表1  復(fù)方清脂顆粒對肝臟重及肝系數(shù)的影響（略）2.2 對大鼠血清中AST，ALT，ALP的影響復(fù)方清脂顆粒各劑量組血清中AST，ALT，ALP與對照組均無顯著差別。結(jié)果見表2。表2 

6、 復(fù)方清脂顆粒對血清中AST，ALT和ALP的影響（略）2.3  對大鼠肝組織中SOD和MDA的影響復(fù)方清脂顆粒雌性大鼠所有劑量組MDA水平均明顯高于對照組，雄性大鼠僅52 g/kg組高于對照組；復(fù)方清脂顆粒各劑量組與對照組之間SOD的活力并無差別。結(jié)果見表3。表3  復(fù)方清脂顆粒對肝組織中SOD和MDA的影響（略）2.4 肝臟病理組織學(xué)檢查結(jié)果光鏡下觀察，復(fù)方清脂顆粒各組肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，與對照組無差異，均未見明顯病理改變。3 討論    復(fù)方清脂顆粒52，26 g/kg劑量下肝組織中，MDA水平明顯增高，可見在較大劑量復(fù)方清脂顆粒下，大鼠肝

7、臟中脂質(zhì)過氧化程度要較正常高，但是復(fù)方清脂顆粒各組中肝組織中SOD的活力并不低還略高于對照組，可見肝中SOD的合成并未受到明顯影響。復(fù)方清脂顆粒52 g/kg劑量組大鼠肝臟重明顯高于對照組，其它2個(gè)劑量組也有增大的趨勢，聯(lián)系到機(jī)體很多臟器在功能輕度受損時(shí)都有代償性增生，由此來對抗因?yàn)椴糠謸p傷或者單位效率降低而引起的臟器功能降低?？紤]至此，復(fù)方清脂顆粒組肝臟增大，肝臟中SOD的不降卻略增的趨勢可能正是自由基增多，SOD消耗增大而引起肝臟代償性增生的結(jié)果。病理組織學(xué)檢查，各組大鼠肝臟在光鏡下均未見明顯病理改變。血清中AST，ALT和ALP的無顯著變化，對此作了側(cè)面印證。  &#

8、160; 受傳統(tǒng)思想影響，一貫認(rèn)為中藥無毒、少毒的思想影響，目前國內(nèi)對中草藥的潛在毒性認(rèn)識(shí)和防范不足。復(fù)方中的澤瀉、決明子在中藥傳統(tǒng)毒性歸類中，均不認(rèn)為屬于毒性的藥材，在文獻(xiàn)的調(diào)研中，僅有極少的文獻(xiàn)有關(guān)澤瀉、決明子的毒性報(bào)道13。高芃等1的研究表明，決明子乙醇提取物連續(xù)灌胃90 d，5 g/kg就可以造成肝系數(shù)的明顯升高，13 g/kg AST即有顯著升高，肝臟未見明顯與藥物有關(guān)的病理改變；段雪英等2報(bào)道，33.3 g/kg的澤瀉水煎劑能造成肝系數(shù)的明顯升高，病理組織學(xué)檢查肝臟沒有病理改變。這些報(bào)道中的肝臟及相關(guān)酶等變化與我們研究中的情況極為相似。復(fù)方清脂顆粒26 g/kg劑量下，決明子約為4

9、.35 g/kg，澤瀉約為2.60 g/kg，均未達(dá)到所報(bào)道的毒性作用劑量，這提醒我們，我們應(yīng)當(dāng)注意小毒、無毒中藥間可能存在的毒性的疊加或協(xié)同作用。    復(fù)方清脂顆粒組的雌性大鼠3個(gè)劑量肝組織中MDA水平均較對照組高，而雄性大鼠只有52 g/kg組較對照組高，相比較而言雌性大鼠的肝臟內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度似乎更強(qiáng)，這可能與雌性大鼠體內(nèi)較高的雌激素水平有關(guān)。有報(bào)道4，制何首烏13 g/kg劑量，可使部分大鼠輕度肝脂肪病變,雌性大鼠較雄性大鼠多且重。連續(xù)給予雌激素類藥物乙烷雌酚60 mg/kg的雌性大鼠也有肝毒性表現(xiàn)5。在孕婦妊娠期間，某些比較敏感的婦女就可能會(huì)發(fā)生肝內(nèi)膽汁淤積。還有其它報(bào)