SQ8000三重四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀操作作業(yè)指導(dǎo)書解讀

1、.文件編號版本/修訂號A / 0TSQ8000三重四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用操作規(guī)程發(fā)布日期2015-XX-XX實施日期2015-XX-XXTSQ8000三重四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀操作規(guī)程 非受控：（蓋章） 受 控：（蓋章）受控編號：編制：年 月 日審核：年 月 日批準(zhǔn)：年 月 日1 目的制定TSQ8000三重四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀使用操作規(guī)程，確保操作人員能正確規(guī)范的使用氣質(zhì)聯(lián)用儀進行檢測工作。2 適用范圍本操作規(guī)程適用于TSQ8000三重四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的使用。3 操作規(guī)程3.1 開機3.1.1氣體 儀器需用到氣體：氦氣（純度99.999%）、氬氣（純度99.999%）。使用時，先

2、打開鋼瓶閥門，再順時針擰動氣壓表閥門至顯示壓力氦氣為0.40.6MPa，氬氣氣壓應(yīng)為0.4MPa。3.1.2分別打開GC和MS以及自動進樣器電源開關(guān)，此時儀器自動進入開機自檢狀態(tài)，同時會啟動真空泵開始抽真空，等待儀器所有指示燈均變成綠色。3.1.3開啟電腦，輸入密碼“TSQ8000”，雙擊桌面圖標(biāo)，進入界面后，觀察“Foreline pressure”項參數(shù)值，其數(shù)值在80mTorr左右，則真空度達(dá)到測試要求；若未達(dá)到則需繼續(xù)等待直到真空度符合要求（通常儀器開機真空度達(dá)到要求需要10-20小時）。3.2調(diào)諧3.2.1在TSQ8000 Evo Dashboard操作界面點擊“Instrument

3、 Control”進入界面：輸入MS transfer Ine temp：280，Ion sourcetemp：300，點擊“Send”，等待升溫。3.2.2檢漏 在TSQ8000 Evo Dashboard操作界面點擊“Manual Tune”進入手動調(diào)諧界面，點擊界面中“Start Scan”按鈕進行檢漏，出現(xiàn)圖譜后點擊“Stop Scan”停止掃描。氮峰和氧峰強度比約為4:1則可能漏氣此處水峰強度不應(yīng)大于108若圖中水峰（18.1）強度小于108，且氮氧峰正常則表示不漏氣。3.2.3調(diào)諧檢查 在“Manual Tune”界面下，將參數(shù)Spectra設(shè)置為Full，Cal.gas leve

4、l選擇EI，點擊“Start Scan”，等待圖譜穩(wěn)定后點擊“Stop Scan”。正常情況下此圖譜中應(yīng)出現(xiàn)69.1、100、131.0、219.0、264.0、414.0、502等7個特征峰，而且69.1峰強度應(yīng)在107以上，100峰左右無雜峰。此時儀器處于正常狀態(tài)，可以直接進入測試工作，無需調(diào)諧。若峰強度過低，峰形不正常，而且做過更換燈絲、離子源等維護工作，則必須要進行調(diào)諧。具體調(diào)諧步驟參照工作電腦上TSQ8000User Guide CN或GC-MS Tmg Course視頻教程中TSQ8000調(diào)諧章節(jié)進行操作。3.3方法建立3.3.1查閱標(biāo)準(zhǔn)，了解待測目標(biāo)化合物名稱（中英文名稱）、相對

5、分子質(zhì)量、可能出現(xiàn)的特征離子。3.3.2設(shè)置儀器方法a.點擊桌面圖標(biāo)，打開TraceFinder軟件，進入軟件操作界面：菜單欄模塊儀器參數(shù)顯示模塊采集數(shù)據(jù)實時顯示模塊儀器狀態(tài)顯示燈選中“Method Development”，點擊“Instrument View”后，點擊File下拉菜單下“New Instrument Method”或點擊左上角符號，進入新建儀器方法參數(shù)設(shè)置界面。b.點擊TRACE 1300 Series GC圖標(biāo)，進入氣相參數(shù)設(shè)置：Oven柱溫箱：Max temperature：輸入色譜柱最高耐受溫度（查色譜柱信息）；Pre-run timeout：液體進樣輸入30min，

6、頂空進樣輸入999min；Ramps：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)或經(jīng)驗設(shè)置相應(yīng)的升溫程序。S/SL（front）前分流不分流進樣口S/SL mode：若分流進樣，選Split；若不分流進樣，選Splitless；Temperature：勾選，輸入溫度（一般參照標(biāo)準(zhǔn)方法）；Split flow：勾選，數(shù)值：50-60mL/min；Carrier mode：選擇Constant Flow（恒流）；Flow：勾選，數(shù)值根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)或資料（一般為1.01.5mL/min）；Vacuum compensation：勾選；Carrier gas saver：勾選；Split ratio（分流比）：若選擇分流進樣，需輸入相應(yīng)數(shù)值

7、（如分流比1:50，則輸入50）。其他參數(shù)均使用默認(rèn)值。PTV（back）后程序升溫進樣口和Run Table一般不使用，均為默認(rèn)即可。c.點擊TriPlus RSH Autosampler圖標(biāo)，若為液體進樣：點選GC Liquids；頂空進樣：點選GC Headspace，然后點擊“Create New Method”按鈕進入自動進樣器參數(shù)設(shè)置：一般只需要設(shè)置General和Washes兩項參數(shù)。GeneralSampler volume（進樣體積）：根據(jù)需要填寫；Plunger strokes：不少于6次；Air and filling mode：AutoSample type：Visco

8、us（粘性）；其他參數(shù)均可按默認(rèn)參數(shù)。WashesNumber of solvents：若單一溶劑清洗選擇Single，多溶劑清洗選Multiple。其他參數(shù)根據(jù)自身實驗需要設(shè)置。Pre-injection：進樣前清洗方式；Rinse：樣品潤洗；Post-injection：進樣后清洗方式。清洗溶劑可根據(jù)實驗樣品的溶劑來選擇，如樣品溶劑為正己烷，則可用正己烷作為洗液。d.點擊TSQ Series，進入質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置Method type：選擇Acquisition General模式（普通模式）MS transfer line temp（傳輸線）：280或參考標(biāo)準(zhǔn)；Ion source temp

9、（離子源）：300或參考標(biāo)準(zhǔn)；Ionization mode（離子源類型）：EIRun completion：選擇GC run time。Scans（掃描參數(shù)）模塊對于標(biāo)準(zhǔn)方法的初次驗證，通常先做fullscan（全掃描）以初步定性目標(biāo)物質(zhì)，參數(shù)設(shè)置如下：Time：35min（為了避免溶劑對燈絲的影響，等待溶劑已經(jīng)通過燈絲后才開啟燈絲）；SRM,SIM,Scan Masses：全掃時輸入需掃描的離子范圍（01000極限掃描范圍），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)或自己查閱的資料確定；Product Mass：不填；Neutral Loss Mass：不填；Collision Energy：不填；Tune file n

10、ame：雙擊選擇Auto Tune_EIGroups模塊右鍵選擇Emission Current在出現(xiàn)的表格欄里去掉勾選，Emission Current欄輸入25。最后保存并命名方法（如6clben）,至此儀器方法設(shè)置完畢。3.3.3SRM方法開發(fā)本節(jié)內(nèi)容主要介紹利用AutoSRM功能模塊進行SRM模式下子母離子的尋找及CE碰撞能的優(yōu)化，從而獲得SRM檢測模式下需要的各類參數(shù)。操作如下：a.選擇母離子雙擊桌面圖標(biāo)，選擇AutoSRM，進入操作界面：此界面需要設(shè)置參數(shù)有： Mode：Precursor IonInstrument Method：選擇需要使用的儀器方法，即新建的儀器方法“6clb

11、en”；Mass range（掃描范圍）：一般為50-M（目標(biāo)物質(zhì)量數(shù)）+50或100；Start time：35min；Stop time：勾選Use GC Run Time；單元格參數(shù)，Name：目標(biāo)化合物名稱；RT（保留時間）：任意值；Vial Position：樣品瓶號。輸入完畢后點擊，選擇Save study設(shè)置保存路徑及文件名稱點擊Save，點擊菜單欄開始運行，結(jié)果如下：將光標(biāo)選中在目標(biāo)峰之上勾選3個強度較大的母離子首先在圖譜顯示模塊用鼠標(biāo)選中目標(biāo)化合物的色譜峰，在Mass by highest intensity模塊中選中3個強度較大的碎片離子作為母離子，點擊左上角 圖標(biāo)將其推送

12、至右邊Working List模塊，再點擊推送至下一級。b.選擇子離子在新彈出界面點擊，再點擊則系統(tǒng)自動根據(jù)所需要的數(shù)據(jù)量來確定所需要采集數(shù)據(jù)的次數(shù)，等待系統(tǒng)采集數(shù)據(jù)完畢出現(xiàn)如下結(jié)果：此時在左側(cè)文件顯示模塊中依次選中每個數(shù)據(jù)，則右邊模塊會顯示相應(yīng)生成的子離子，從子離子列表中選擇一個強度較大的作為子離子推送至Working List。完成所有子離子的選擇后，點擊推送至下一級。c.優(yōu)化碰撞能（CE）在進入此界面后，將SRM energy ranger選擇為：Targeted，然后按之前方法保存并運行；如同第2步選擇子離子方法依次選擇最優(yōu)CE能，推送至Working List后點擊生成列表。設(shè)置保存

13、路徑以及文件名稱（如6clben_in.csv），如圖：d.建立SRM儀器方法再次打開儀器方法“6clben”，在TSQ Series模塊中將Method type改為Acquisition-Timed其他參數(shù)不變。在Scans表格欄上點擊“Link to external file”選擇在第3步中保存的“6clben_in.csv”文件，點擊“OK”后再次點擊“Link to external file”斷開鏈接。選擇另存為，將方法重新命名，如“6clben _SRM”。至此方法開發(fā)完成。3.4數(shù)據(jù)采集儀器方法進樣體積樣品瓶號保存路徑文件名稱點擊桌面圖標(biāo)，打開TraceFinder分析軟件，

14、進入軟件操作界面，點擊圖標(biāo)：根據(jù)上圖標(biāo)識依次填入：文件名稱、保存路徑、進樣瓶號、進樣體積以及采用的儀器方法（即最后另存的“6clben _SRM”方法）。輸入完成后，在導(dǎo)航欄中Acquire點擊采集：若要單獨采集，則選中需要采集數(shù)據(jù)的項目欄，點擊“Sample”按鈕；若要采集全列表，則可直接點擊“Sequence”按鈕。出現(xiàn)如圖確認(rèn)框，確定三個模塊均被勾選，Start Device為第一個勾選后點擊OK，設(shè)備開始采集數(shù)據(jù)。等待數(shù)據(jù)采集完成后，接下來做數(shù)據(jù)處理工作。3.5數(shù)據(jù)處理3.5.1建立數(shù)據(jù)處理方法（主方法）a.打開儀器方法“6clben _SRM”，在導(dǎo)航欄中TSQ Series下拉菜單

15、中選擇“Create Compound Database export file”，點擊“Create Export File”設(shè)置保存路徑及文件名稱(6clben_ batabase.csv)。b.回到主菜單界面，選擇“Method Development”，點擊“Compound Database”，在導(dǎo)航Compound Database下菜單下選擇“Import Compound”找到上一步保存的文件（6clben_ batabase.csv）并打開：點擊Import按鈕，如下：此為新導(dǎo)入的化合物信息保存新更新過的數(shù)據(jù)庫文件。c.回到主菜單界面，選擇“Method Developmen

16、t”“Method View”，點擊新建主方法：窗口選擇“Select compounds from CDB”，點擊“OK”：勾選待測目標(biāo)化合物（如6clben），點擊“Add Select compounds to method”：Ion range calc method：選擇Average；Instrument Method：選擇之前創(chuàng)建的SRM方法“6clben_SRM”。在左側(cè)菜單欄中選擇Compounds再在右側(cè)模塊列表中選中Detection，此時點擊窗口頂部導(dǎo)航欄中“Method View”下拉單中的“Associate a raw data file”，導(dǎo)入任意一個在“3.4

17、步驟”中采集的數(shù)據(jù)文件。選擇好后點擊“OK”，出現(xiàn)如下界面：完成后，分別選中Detection旁邊的Calibration編輯校準(zhǔn)曲線參數(shù)：定量方法（外/內(nèi)標(biāo)法）、計算方式（面積/峰高）、是否過原點、計量單位等；Calibration levels編輯校準(zhǔn)曲線的級別（點數(shù)）及各級別的濃度信息等。Calibration編輯界面Calibration levels編輯界面編輯完以上參數(shù)后，點擊左上角，選擇保存路徑并命名文件（如：6clben）此方法名稱可以與儀器方法一樣，并不沖突。數(shù)據(jù)處理主方法建立完畢。3.5.2建立批處理列表選中中菜單欄左下角Analysis選中Batch View： 點擊新建

18、批處理列表：在此窗口中選擇好文件保存路徑，定量方法則Type：Quan；定性方法Type：Screening；Method：選擇新建立保存的主方法（6clben），最后在New Batch中輸入名稱（如6clben或其他），點擊Create；未采集的數(shù)據(jù)圖標(biāo)顯示藍(lán)色此界面下可以編輯樣品序列，也可以直接導(dǎo)入之前已經(jīng)采集好的數(shù)據(jù)直接運行處理，導(dǎo)入數(shù)據(jù)操作，鼠標(biāo)雙擊Filename（文件名稱）下單元格，在彈出窗口中選擇需要處理的數(shù)據(jù)文件，點擊Open（按Shift鍵可多選）；需要注意樣品類型已采集未處理數(shù)據(jù)圖標(biāo)顯示黃色待處理數(shù)據(jù)導(dǎo)入后，需注意的是Sample type（樣品類型），系統(tǒng)會默認(rèn)初始是U

19、nknown（未知樣），若是其他類型樣品則雙擊單元格，在下拉菜單中選擇相應(yīng)類型：標(biāo)準(zhǔn)樣品（Cal Std）、質(zhì)控樣品（QC Std）、溶劑（Solvent）等。設(shè)置完成以后點擊頂端工具欄中開始運行處理：已處理完畢數(shù)據(jù)圖標(biāo)顯示綠色 處理完成后點擊保存后可查看數(shù)據(jù)。3.6數(shù)據(jù)查看及報告打印3.6.1數(shù)據(jù)查看數(shù)據(jù)處理完成以后，在左側(cè)菜單欄選擇Data Review，選擇其下Compound View出現(xiàn)數(shù)據(jù)查看結(jié)果：如上圖，Compounds模塊：目標(biāo)化合物名稱及保留時間信息；Sample Results模塊：顯示樣品數(shù)據(jù)處理結(jié)果，樣品編號、類型、峰面積/峰高以及濃度等；Compounds Deta

20、ils：目標(biāo)物圖譜，包括定量及定性離子；Calibration Curve：校準(zhǔn)曲線信息。以上信息查看無誤后即可打印報告。3.6.2報告打印在左側(cè)菜單欄選擇Report View，界面如下：在Template列表里選擇合適的報告模板，可以使用Preview進行預(yù)覽，選擇完成以后，勾選PDF或Print選項，再點擊Generate生成報告，至此操作完成。3.7關(guān)機系統(tǒng)關(guān)機順序一般為：運行質(zhì)譜關(guān)機程序關(guān)閉氣相關(guān)閉自動進樣器關(guān)閉載氣關(guān)閉電腦工作站3.7.1質(zhì)譜關(guān)機打開TSQ Series軟件：點擊Instrument Control將離子源和傳輸線溫度設(shè)置為100或以下，降溫以后點擊Shut Dow

21、n按鈕執(zhí)行質(zhì)譜關(guān)機程序，待到Turbo-pump speed參數(shù)由100%降到0%時，即可關(guān)閉質(zhì)譜電源。（詳細(xì)：工作站電腦桌面文件中：質(zhì)譜儀（TSQ8000）/系統(tǒng)開關(guān)機/系統(tǒng)關(guān)機視頻操作。）3.7.2氣相關(guān)機在TraceFinder工作站中打開新建儀器方法窗口，在氣相S/SL(front)參數(shù)設(shè)置面板中：將Temperature、Flow、Split flow、Carrier options中的勾選均去掉，然后點擊窗口頂部“TRACE1300”在下拉單中選擇“Send Method to GC”，然后待汽化室溫度降至100以下即可關(guān)閉電源。3.7.3關(guān)閉自動進樣器 打開TraceFinder

22、工作站；在Real time status模塊下選擇DevicesTriPuls RSH Autosamper，點擊Terminal：在此操作面板下，單擊RobotArmLeft進入界面后，再單擊左下角Options選擇Park Tool，此時儀器會自動將進樣針放下，然后在點擊Move To Home，使移動臂回到原位后即可關(guān)閉自動進樣器電源。 最后關(guān)閉載氣及工作站和電腦，關(guān)機完成。使用完成后，在儀器設(shè)備使用記錄表上填寫相應(yīng)記錄。4 儀器維護4.1儀器日常操作維護主要如下表內(nèi)容：序號維護內(nèi)容維護時機/周期操作方法氣相端1更換進樣隔墊進樣隔墊在使用100次以后容易出現(xiàn)漏氣現(xiàn)象，因此需要定期更換（

23、通常在進樣100針左右更換）。參照儀器電腦桌面“GC-MS Trng Course CN”中“氣相/系統(tǒng)維護和保養(yǎng)”視頻的操作方法執(zhí)行2更換襯管長期使用變臟以后，或出現(xiàn)殘留峰等考慮更換，在樣品量大的時候，兩周更換清洗一次。參照儀器電腦桌面“GC-MS Trng Course CN”中“氣相/系統(tǒng)維護和保養(yǎng)”視頻的操作方法執(zhí)行3更換載氣過濾器當(dāng)過濾器使用一段時間后，若果里面填充材料均已變色，則需要更換過濾器。參照儀器電腦桌面“GC-MS Trng Course CN”中“氣相/系統(tǒng)維護和保養(yǎng)”視頻的操作方法執(zhí)行4清洗進樣針當(dāng)樣品比較復(fù)雜且量較多時，應(yīng)取下進樣針進行清洗，一周一次。使用丙酮超聲清洗

24、30min后，用甲醇或正己烷潤洗后，自然晾干。5色譜柱老化及更換老化新柱安裝后必須老化；當(dāng)樣品較復(fù)雜或是做常規(guī)空白是會有雜質(zhì)峰出現(xiàn)，考慮老化；更換色譜柱以后也需要老化。參照儀器電腦桌面“GC-MS Trng Course CN”中“氣相/系統(tǒng)維護和保養(yǎng)”視頻的操作方法執(zhí)行更換當(dāng)項目需求不同型號的色譜柱時，則需要更換色譜柱；老色譜柱已經(jīng)壞了，不能使用時更換色譜柱。質(zhì)譜端1質(zhì)譜檢漏質(zhì)譜剛開機，準(zhǔn)備作業(yè)之前需要檢漏；參照儀器電腦桌面“GC-MS Trng Course CN”中“質(zhì)譜儀（TSQ8000）/系統(tǒng)維護”視頻中操作方法進行2離子源維護隨著儀器的使用，用于樣品離子化和傳輸?shù)碾x子源部分會富集越來越多的污染物，而導(dǎo)致靈敏度下降，因此需要將離子源去下清洗。當(dāng)發(fā)覺檢測靈敏度不夠，且離子源有一段時間沒清洗時，考慮清洗；如樣品較多且復(fù)雜時，考慮一個月清洗一次。參照儀器電腦桌面“GC-MS Trng Course CN”中“質(zhì)譜儀（TSQ8000）/系統(tǒng)維護”視頻中操作方法進行序號維護內(nèi)容維護時機/周期操作方法3添加校正液校正液（FC43）作為質(zhì)譜調(diào)諧使用的基準(zhǔn)物質(zhì)，需要一年添加一次，每次約100微升