HPLC法測定頭孢氨芐膠囊含量

1、    HPLC法測定頭孢氨芐膠囊含量        摘要目的：介紹一種用反相高效液相色譜法測定頭孢氨芐膠囊的方法。方法：以Shim-Pack CLC-ODS(150mm×6m,10m)為色譜柱，甲醇-水(7030)為流動相，檢測波長262nm,外標(biāo)法定量。結(jié)果：頭孢氨芐濃度線性范圍為100900g/ml,相關(guān)系數(shù)r=0.9999,方法回收率為99.9%,RSD為0.72%。結(jié)論：方法簡便快速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可作為頭孢氨芐制劑的質(zhì)量控制方法。關(guān)鍵詞頭孢氨芐；高效液相

2、色譜法Determination of capsulas cefalexini by HPLCZhou Jingan(Zhou JA)Quzhou Medicine Checking Bureau,Zhejiang 324002ABSTRACTOBJECTIVE：Introduce a method of determining cefalexini capsulaein by a reversed-phase HPLC method.METHOD:The seperation was performed with an analytical shim-pack CLC-ODS column(

3、150mm×6mm id,10m).The mobile phase was methanol water(7030).The UV detector was set at 262mm.RESULTS:The linear range was from 100900g/ml(r=0.9999).The recovery was 99.7%.The relative standard deviation was 0.47%.CONCLUSION:The method was simple,accurate,reliable,and can be used for the quality

4、 control of capsulae cefalexini.KEY WORDScefalexini,HPLC頭孢氨芐(Cephalexin)又稱先鋒，主要用于耐青霉素的葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、大腸桿菌等的感染，是臨床上常用抗生素之一。目前，其含量測定方法有容量分析法，紫外分光光度法以及熒光光度法。本文采用反相高效液相色譜法，測定頭孢氨芐膠囊含量，具有方法簡便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。1儀器與試藥日本島津LC-10AD高效液相色譜儀;SPD-10A紫外檢測器;C-R6A色譜數(shù)據(jù)處理機(jī);SQC-50超聲波清洗器(上海超聲波儀器廠)。甲醇(分析純)市售，頭孢氨芐對照品(中國藥品生物制品檢定所，化學(xué)對照

5、品，批號:0408-9506,含量:91.7%),頭孢氨芐膠囊及原料藥(浙江巨化集團(tuán)藥廠)。2色譜條件日本島津Shim-pack CLC-ODS柱(150mm×6mm,10m),G-ODS保護(hù)柱，流動相：甲醇-水(7030),流動速:1.0ml/min,檢測波長:262nm,靈敏度:0.1AUFS,紙速:2mm/min,衰減(ATT):2mV,柱溫為室溫，進(jìn)樣:10l。3實驗方法3.1線性關(guān)系(標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備)精密稱取頭孢氨芐對照品約50mg,置50ml量瓶中，加流動相適量使溶解，并稀釋至刻度，分別吸取1,3,5,7和9ml置10ml量瓶中用流動相稀釋至刻度。得頭孢氨芐系列標(biāo)準(zhǔn)濃度溶

6、液100900g/ml。按上述色譜條件分別取10l進(jìn)樣作色譜(1)，以頭孢氨芐濃度(g/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行直線方程回歸分析。得方程:A=136.3c-332.9,相關(guān)系數(shù)r=0.9999。1頭孢氨芐對照品(a)與頭孢氨芐膠囊(b)的色譜實驗結(jié)果表明：頭孢氨芐濃度在100900g/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。3.2精密度試驗精密稱取頭孢氨芐對照品5份，分別用流動相配制成每毫升含頭孢氨芐約0.5mg溶液，按含量測定方法，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，其日內(nèi)RSD=0.4%,日間RSD=0.47%,結(jié)果表明系統(tǒng)穩(wěn)定。3.3回收率試驗精密稱取頭孢氨芐對照品適量，濃度按線性范圍由高到低每種各5份，按

7、處方比例加入輔料，制成供試液，經(jīng)0.45m膜濾過，取續(xù)濾液10l按樣品含量測定法。頭孢氨芐平均回收率為99.9%,RSD為0.72%。結(jié)果表明頭孢氨芐膠囊制劑中所含輔料對含量測定結(jié)果無干擾(見表1)。4樣品含量測定表1回收率試驗加入量/mg測得量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/%11.2611.35100.820.3120.0998.9226.3026.41100.499.90.7230.8330.7799.842.4042.2199.6取裝量差異檢查項后內(nèi)容物混勻，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于頭孢氨芐25mg)置50ml量瓶中，加流動相溶解，并稀釋到刻度。另取頭孢氨芐對照品適量制成含頭孢氨芐0.5mg/ml對照液，按上述色譜條件，測定峰面積，以外標(biāo)法計算頭孢氨芐含量。本法測定頭孢氨芐膠囊含量與中國藥典方法結(jié)果比較見表2。 表2頭孢氨芐膠囊含量測定結(jié)果樣品批號HPLC法/%中國藥典法/%97040299.3100.897010299.6100.197060194.593.497010398.699.197022499.999.65討論本方法測定頭孢氨芐膠囊含量、流動