P2實驗室的建設(shè)與使用指南

1、P2實驗室的建設(shè)與使用指南    二級生物安全實驗室的選址  1 就選址而言，盡管二級生物安全實驗室沒有特殊的要求，但是從生物安全角度講該實驗室所處的位置比較理想。主實驗室技術(shù)參數(shù)：  1、潔凈度8級Cleanliness Class  8  大于等于0.5m的塵粒數(shù)大于352000粒/m3352粒/L到小于等于352000粒/m3(3520粒/L),大于等于3m的塵粒數(shù)大于3000粒/m3(3粒/L)到小于等30000粒/m3(30粒/L)。 2、照度：最低300Lx, 3、噪聲：6

2、0dB 4、相對濕度：30%65% 5、溫度：18-256、壓差：-10Pa  7、氣流方向：單相流，從清潔區(qū)流向污染區(qū)8、墻面、吊頂：彩鋼板：鋼板厚度0.426，15克覆膜9、鋁合金：門窗用電泳材質(zhì)，其余均采用噴塑。10、凈化門：帶觀察窗，閉門器11、高效送風(fēng)口：不銹鋼沖壓成型 12、 地面：PVC卷材13、洗手盆：不銹鋼材質(zhì)，內(nèi)含感應(yīng)水龍頭、自動干手器  14、傳遞窗：不銹鋼機(jī)械連鎖 15、洗眼器：不銹鋼臺式16、送風(fēng)機(jī)組：內(nèi)含新風(fēng)口、新風(fēng)回風(fēng)混合段、送風(fēng)段、均流段維修段、中效段、出風(fēng)段、消聲段17、排風(fēng)機(jī)組：出口有高效過濾器過濾

3、 18、操作臺：貼面理化板19、入口處有國際通用生物安全危險符號，同時有標(biāo)明實驗室名稱、預(yù)防措施負(fù)責(zé)人、緊急聯(lián)絡(luò)方的有機(jī)玻璃板。在出口處有黑暗中可明確識別的安全出口標(biāo)志。  圍護(hù)結(jié)構(gòu)  BSL1實驗室  1)  無需特殊選址，普通建筑物即可，但應(yīng)有防止節(jié)肢動物和嚙 齒動物進(jìn)入的設(shè)計。  2)  每個實驗室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。  3)  在實驗室門口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個人便裝與實驗室工作服分開放置。  4)  實驗室的墻壁、天花板和地面應(yīng)

4、平整、易清潔、不滲水、耐 化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地面應(yīng)防滑不得鋪設(shè)地毯。5)  實驗臺面應(yīng)防水，耐腐蝕、耐熱。  6)  實驗室中的廚柜和實驗臺應(yīng)牢固。廚柜、實驗臺彼此之間應(yīng) 保持一定距離，以便于清潔。  7)  實驗室如有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。  8)實驗室內(nèi)應(yīng)保證工作照明，防止不必要的反光和強(qiáng)光。 9) 應(yīng)有適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備。 BSL-2實驗室  1)  滿足BSL1的要求。  2)  實驗室門應(yīng)帶鎖并可自動關(guān)

5、閉。實驗室的門應(yīng)有可視窗。 3)   應(yīng)有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實驗室工作區(qū) 域外還應(yīng)當(dāng)有供長期使用的存儲空間。 4)  在實驗室內(nèi)應(yīng)使用專門的工作服；應(yīng)戴乳膠手套。 5) 在實驗室的工作區(qū)域外應(yīng)有存放個人衣物的條件。 6) 在實驗室所在的建筑內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查 驗證，以保證符合要求。  7應(yīng)在實驗室內(nèi)配備生物安全柜。  8) 應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。  9) 應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。 

6、; 10) 有可靠的電力供給和應(yīng)急照明。必要時，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、 生物安全柜、冰箱等應(yīng)設(shè)備用電源。  11) 實驗室出口應(yīng)有在黑暗中可明確識別的標(biāo)識。 下面分類詳細(xì)介紹如下：  1  實驗室圍護(hù)結(jié)構(gòu)采用彩鋼板材料，外表光滑、耐腐蝕、防水，所有縫隙可靠密封，便于清潔消毒，且防震、防火。  2   天花板、地板、墻壁間的交角均為圓弧形，且可靠密封。 3   地面采用PVC材料，防滲漏、無接縫、光潔、防滑。4   實驗室

7、的所有門均可自動關(guān)閉。  5   實驗臺面采用理化板，防水、耐腐蝕、耐熱。 6   所有入口處均能防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進(jìn)入。 7   實驗室出口有在黑暗中可明確識別的標(biāo)識。  平面結(jié)構(gòu)與分區(qū)  1   分區(qū)：分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)  1.1  清潔區(qū)：用于實驗人員辦公活動、休息的區(qū)域。  1.2  半污染區(qū)：即緩沖走廊，用于標(biāo)本的傳送、廢物的輸出、進(jìn)入更衣室，

8、   1.3  污染區(qū)：是實驗室的核心區(qū)域，用于實驗操作。  2   設(shè)置：包括配電箱、空調(diào)、更衣柜、II級生物安全柜、實驗臺、洗手池、洗眼器、傳遞窗等。   實驗室消毒隔離要求  1   要求  1.1  實驗室相對獨(dú)立，通過隔離門與公共部位相隔。實驗核心區(qū)應(yīng)包括實驗室間及與相連的緩沖走廊，明確劃分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。 1.2  實驗室內(nèi)所有物品應(yīng)專用，需帶出時必須嚴(yán)格消毒。 1.3&#

9、160; 實驗室工作人員進(jìn)入實驗室應(yīng)穿戴好個人防護(hù)用品 1.4  培養(yǎng)基、組織、體液等必須放入防漏密閉的容器內(nèi)儲運(yùn)。 1.5  血清學(xué)試驗、致病菌檢測、樣品處理及分裝應(yīng)在II級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。  1.6  樣本離心時，離心機(jī)應(yīng)放在排毒柜內(nèi)或生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，以防產(chǎn)生氣溶膠或濺出。  1.7  實驗過程中使用的器材、實驗廢棄物均應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行消毒、滅菌處理。  1.8  實驗完畢，先消毒物體外表，再按規(guī)定程序脫下個人防護(hù)用品，并進(jìn)行空氣消

10、毒。  1.9  離開實驗室前，必須按有關(guān)規(guī)定清潔消毒雙手。1.10 儀器設(shè)備運(yùn)出實驗室前必須按有關(guān)規(guī)定進(jìn)行嚴(yán)格消毒。2   消毒方法2.1  實驗室內(nèi)空氣消毒2.1.1 可使用送排風(fēng)系統(tǒng)加強(qiáng)通風(fēng)。2.1.2 紫外線燈管、燈車適用于無人室內(nèi)空氣、物體外表的消毒。常用的室內(nèi)懸吊式紫外線燈1.5W/m70MW/cm2，照射時間不少于60分鐘。2.2  實驗室外表消毒2.2.1 地面實驗室地面要濕式掃，禁止干拖干掃。需消毒時，可用有效氯為500-1000mg/L

11、的含氯消毒液噴灑或拖地，消毒液用量不小于100ml/m3和清潔區(qū)拖把應(yīng)專用，不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分鐘，再用水清洗干凈，懸掛晾干，最好在陽光下曬干后備用。2.2.2 物體外表的消毒或低水平消毒方法。3.14 存在較多有機(jī)物(如血液、分泌物、排泄物)的物品消毒時，應(yīng)加大消毒藥物的使用劑量和/或處長作用時間。3.1.5 消毒物品微生物污染特別嚴(yán)重時，應(yīng)加大消毒劑的的使用劑量和/或處長作用時間。3.1.6 選擇外表消毒方法，應(yīng)考慮外表性質(zhì)，光滑外表可選擇紫外線消毒器近距離照射或消毒液擦拭，多孔材料外表可采用噴霧消毒法。 3.2

12、0; 消毒器械和消毒液應(yīng)有衛(wèi)生許可批文。3.2.1 消毒產(chǎn)品應(yīng)在有效期內(nèi)使用，應(yīng)按照說明書標(biāo)示的作用濃度(或強(qiáng)度)、作用時間和使用方法進(jìn)行消毒操作。連續(xù)使用的消毒劑應(yīng)定期測試有效成分含量并及時更換。3.2.2 消毒、滅菌設(shè)備應(yīng)定期測定消毒或滅菌效果。大型消毒、滅菌設(shè)備在正式使用前和大修后，應(yīng)通過性能檢測，證明可以有效使用。 4   注意事項4.1  要減少消毒處理對人體的傷害、對物品的破壞、對環(huán)境的影響。4.2  根據(jù)被消毒物品的理化性狀，選擇相容性好的消毒劑。耐高溫、耐濕的物品和器材

13、，首選高壓蒸汽滅菌；金屬、玻璃器材、油劑類和干粉類等可選干熱滅菌。畏熱、畏濕、畏腐蝕及貴重物品，可選環(huán)氧乙烷薰蒸消毒、滅菌。4.3  用于人體消毒的消毒劑應(yīng)選擇對人體皮膚粘膜刺激較小的消毒劑。4.4  用于環(huán)境消毒的消毒劑，要嚴(yán)格按照消毒對象、目標(biāo)污染物種類以及污染程度，以其到達(dá)有效不污染環(huán)境為前提，合理選擇消毒劑使用濃度和作用時間。  實驗室廢棄物管理1   實驗后的廢棄物如不及時處置則會污染環(huán)境，從而對工作人員造成危害，因此有關(guān)人員必須嚴(yán)格按規(guī)定執(zhí)行。2   實驗樣本在處理和進(jìn)行實

14、驗室檢測時產(chǎn)生的廢棄物，如平皿、吸頭盒、塑料試管等應(yīng)放入適當(dāng)?shù)娜萜骰驀?yán)格防漏的高壓袋內(nèi)。3   實驗過程中產(chǎn)和生的污染性液體物質(zhì)、廢棄的液體標(biāo)本、培養(yǎng)物等應(yīng)放在盛有消毒液的嚴(yán)格防專用容器中，并及時加蓋。4   進(jìn)行實驗所必須使用的銳器，如一次性注射器、針頭、微量移液器吸頭、玻璃器具、手術(shù)刀片及碎玻璃，必須放入指定專用的堅壁容器中，加蓋密封。  5   以上所有盛有廢棄物的容器，在每次實驗完成后，應(yīng)送高壓滅菌。 6   實驗室所有垃圾及用過的乳膠手套、隔離衣

15、、口罩、一次性帽子等，裝于相應(yīng)的污物袋內(nèi)，經(jīng)高壓消毒處理后丟棄。7   所有臨床標(biāo)本在留驗期過后，均應(yīng)高壓消毒處理后再進(jìn)行后續(xù)處理。8   高壓鍋應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，嚴(yán)格按使用說明操作，確保在121條件下，高壓至少30分鐘，以到達(dá)有關(guān)滅菌消毒要求。9   所有實驗產(chǎn)生的廢棄物，必須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒后方能運(yùn)出實驗區(qū)，并送到指定地點(diǎn)集中燃燒處理。10  空化學(xué)制品容器m10.1 非危險性的空化學(xué)制品：依照通則消毒后，按普通廢棄物分類處理。10.2 危險性空化學(xué)制品：不得將危險性

16、空化學(xué)品容器按普通廢棄物處理。根據(jù)有關(guān)危險化學(xué)制品處理方法進(jìn)行相應(yīng)無害化處理或由上級主管部門處理。11  如果遇到本作業(yè)指導(dǎo)書中未提及的情況，請與實驗室安全部門聯(lián)系。  常規(guī)安全操作規(guī)程1  禁止非工作人員進(jìn)入實驗室，參觀實驗室等特殊情況須實驗室主任批準(zhǔn)方可進(jìn)入。2  嚴(yán)禁在實驗室工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化裝、存放食物和日常生活用品。  3  與實驗無關(guān)的物品不得帶入實驗室。4  接觸微生物或含有微生物的物品后，要洗手；離開實驗室前要脫掉并洗手。5 

17、0;實驗過程中，嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。6  每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒。7  以移液器吸取液體，嚴(yán)禁口吸。8  所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實驗室前必須經(jīng)可行的消毒或滅活，如高壓消毒。需運(yùn)出實驗室消毒的物品應(yīng)置于防滲漏的專用密閉容器內(nèi)。尖銳器具的安全操作規(guī)程10 制定有效的防鼠防蟲措施。11 實驗室入口須貼上醒目的生物危險標(biāo)志，注明危險因子、生物安全級別、實驗室負(fù)責(zé)人及其他相關(guān)負(fù)責(zé)人、 。  第二章  特殊安全操作規(guī)程  1

18、60; 實驗室相對獨(dú)立，明確劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，三區(qū)不得交叉，人流與物流分開。2  進(jìn)行感染性實驗時，禁止他人進(jìn)入實驗室，或必須經(jīng)實驗室主任同意方可進(jìn)入；免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員不得進(jìn)入實驗室，或必須經(jīng)實驗室主任同意方可進(jìn)入。3  工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測如乙型肝炎疫苗、卡介苗等。4  必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，檢測并出具報告，如有問題及時解決。5  實驗室主任應(yīng)制定規(guī)章制度和生物安全程序，并納入生物安全手冊，由實驗室負(fù)責(zé)人專門保管，工人員在進(jìn)入實驗室前要閱讀并在工作中遵照執(zhí)行；其他人員須告知其潛在風(fēng)險并符合進(jìn)入實驗室要求，經(jīng)實驗室主任允許方可進(jìn)入。  6  工作人員