保健食品原料 番茄紅素（番茄源）

1、ICS C保健食品原料 番茄紅素（番茄源）Health food raw material lycopene (Tomato source)1 范圍1.1 本標(biāo)準(zhǔn)適用于以番茄（Lycopersicon esculentum Miller）果實(shí)及制品（包括番茄皮）為原料，以超臨界流體（包括二氧化碳等）或有機(jī)溶媒為萃取媒介經(jīng)萃取、分離、濃縮得到的產(chǎn)物（亦稱番茄紅素油樹脂）。1.2 本標(biāo)準(zhǔn)適用于以 1.1 節(jié)描述的產(chǎn)品為主要原料，根據(jù)保健食品產(chǎn)品劑型的需要，使用物理方法（如蒸餾、結(jié)晶、皂化等）以不同濃縮比例獲得的濃縮物。1.3 本標(biāo)準(zhǔn)適用于以 1.1 和 1.2 節(jié)描述的產(chǎn)品為主要原料，根據(jù)保健食品

2、產(chǎn)品劑型的需要，添加或不添加保健食品輔料，以不同比例稀釋和分布的油懸物（亦稱番茄紅素油）。2 分子式、結(jié)構(gòu)式和相對(duì)分子質(zhì)量2.1 分子式C40H562.2 結(jié)構(gòu)式全反式番茄紅素分子的結(jié)構(gòu)式2.3 相對(duì)分子質(zhì)量536.853 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容。注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 5009.11-2014 食品中總伸及無(wú)機(jī)伸的測(cè)定GB 5009.12-2017 食品中鉛的測(cè)定GB 5009.17 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定中國(guó)藥典 2020 版四部 08

3、61 殘留溶劑測(cè)定法4 技術(shù)要求4.1 感官要求（一）萃取物萃取物（亦稱番茄紅素油樹脂）的感官要求應(yīng)符合附表 1 的規(guī)定。表 1 萃取物的感官要求項(xiàng)目要求檢測(cè)方法感官要求色澤深紅至紫紅色取適量樣品置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光下，觀察其色澤、外觀，嗅其氣味，檢查有無(wú)異物。氣味具有生物源番茄紅素萃取物特有的滋味和氣味。狀態(tài)膏狀物或油狀高粘度流體，無(wú)肉眼可見外來(lái)異物。（二）濃縮物濃縮物（亦稱番茄紅素）的感官要求應(yīng)符合附表 2 的規(guī)定。表 2 濃縮物的感官要求項(xiàng)目要求檢測(cè)方法感官要求色澤深紅至紫黑色取適量樣品置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光下，觀察其色澤、外觀，嗅其氣味，檢查有無(wú)異物。氣味具有

4、生物源番茄紅素萃取物特有的滋味和氣味。狀態(tài)膏狀物或結(jié)晶（粉末），無(wú)肉眼可見外來(lái)異物。（三）油懸物油懸物（亦稱番茄紅素油）的感官要求應(yīng)符合附表 2 的規(guī)定。表 3 懸浮物的感官要求濃縮物項(xiàng)目要求檢測(cè)方法感官要求色澤深紅至紫黑色取適量樣品置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光下，觀察其色澤、外觀，嗅其氣味，檢查有無(wú)異物。氣味具有番茄源番茄紅素萃取物特有的滋味和氣味。狀態(tài)膏狀物或油狀懸浮物，無(wú)肉眼可見外來(lái)異物4.2 理化指標(biāo)萃取物、濃縮物和油懸物的理化指標(biāo)應(yīng)符合附表 4 的規(guī)定。表 4 萃取物、濃縮物和油懸物的理化指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法番茄紅素含量萃取物，%（W/W）1.5見附件 A濃縮物符合聲稱油懸物符

5、合聲稱鉛（Pb），mg/Kg 0.5GB 5009.12總砷（以 As 計(jì)），mg/Kg0.5GB 5009.11總汞（Hg），mg/Kg0.3GB 5009.17殘留溶劑 a正己烷，mg/Kg50.0中華人民共和國(guó)藥典（2020 版）四部 0861 殘留溶劑測(cè)定法乙酸乙酯，mg/Kg50.0注：a：超臨界流體萃取的產(chǎn)品除外。附件 AA.1 試劑番茄紅素含量的測(cè)定（1） 二氯甲烷（推薦含 0.05%（W/V）BHT）、石油醚（BP: 60-90ºC）為分析純?cè)噭＃?） 乙酸乙酯和乙腈為色譜純?cè)噭?，使用前?0.45m的微孔濾膜過(guò)濾。（3） 純化水（經(jīng)逆流滲透純化）。（4） 番茄紅素

6、參比樣品，純度為³90%（W/W，UV-VIS）。A.2 儀器和設(shè)備（1）天平（0.0001g）（2）超聲波水槽（90W）（3）冰箱（-20）（4） 高效液相色譜儀二元梯度洗脫系統(tǒng)配備二極管陣列檢測(cè)器。（5） 紫外-可見光分光光度計(jì)（可掃描 190-700nm）A.3.1 番茄紅素參比樣品的純度校準(zhǔn)A.3.1 取樣準(zhǔn)確稱取參比樣品約 0.0050g，置于 50mL 棕色容量瓶中。A.3.2 比色液的制備在 50mL 棕色容量瓶中用少量（通常 1-5mL）的二氯甲烷將稱取的參比樣品完全溶解（推薦超聲 15-30 秒），用石油醚定容制成儲(chǔ)備液。儲(chǔ)備液可在-20下避光保存 24 小時(shí)。準(zhǔn)確

7、量取 0.5mL 儲(chǔ)存液于 25mL 棕色容量瓶中，用石油醚定容制成比色液。比色液的吸光值應(yīng)控制在 0.3-0.7 之間，否則應(yīng)調(diào)整比色液的濃度， 重新測(cè)定其吸光值。根據(jù)調(diào)整過(guò)的稀釋倍數(shù)，按式（1）重新計(jì)算參比樣品中番茄紅素的含量。A.3.3 比色使用光程為 1cm 的比色杯，以石油醚為對(duì)照，在最大吸收波長(zhǎng)（max=472nm）下測(cè)定比色液的吸光值。A.3.4 根據(jù)下式計(jì)算參比樣品中番茄紅素的含量：式中：𝐶𝑅𝑆= A×V×稀釋倍數(shù)1𝑐𝑚𝐴1% ×𝑀

8、19877;𝑆（1）CRS參比樣品中番茄紅素的含量（%，W/W）A在溶液最大吸收波長(zhǎng)（max）下的吸光值V比色液的初始定容體積（mL），在此為 50mL。1cm1cmA1% 吸光系數(shù)。定義為：在 1 厘米光程的比色杯中 1%（W/V）濃度溶質(zhì)的理論吸收值。在石油醚中，番茄紅素在 max 處的 A1% =3450。MRS參比樣品質(zhì)量（g）A.4 樣品中番茄紅素含量的 C18-HPLC 測(cè)定A.4.1 參考色譜條件色譜柱：C18不銹鋼柱（250 mm×4.6 mm，5 m）或其它等效的色譜柱。流動(dòng)相A：乙腈:水= 9:1（V/V）。流動(dòng)相B：乙酸乙酯。線性梯度洗脫：在25

9、分鐘內(nèi)，流動(dòng)相B從0%增至100%：流速：1.0mL/min，二極管陣列 檢測(cè)器波長(zhǎng)范圍：260-600nm。色譜圖檢測(cè)波長(zhǎng)：472nm；進(jìn)樣量：10mL；柱溫：25°C。A.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及其線性范圍、重復(fù)性和加樣回收率的測(cè)定根據(jù)參比樣品中番茄紅素的含量（CRS，見 A3.4 節(jié)，非樣品量），從 A.3.2 節(jié)所述的儲(chǔ)備液中取一定量（通常為 1-1.5mL）的儲(chǔ)備液于 10mL 棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，使其中的番茄紅素濃度（CRS）為10.000mg/mL。然后逐級(jí)對(duì)半稀釋，制作 8 個(gè)濃度的工作液。在 A.3.2.1 所述參考色譜條件下，對(duì)不同工作液進(jìn)行色譜分析，得

10、到番茄紅素濃度-峰面積值標(biāo)準(zhǔn)曲線。在 0.081-5.000mg/mL范圍內(nèi)，線性回歸方程的R2>0.999，RSD£3.00%（n³6），加樣回收率³97.00%。A.4.3 樣品制備樣品（包括 1.1、1.2 和 1.3 節(jié)所述的萃取物、濃縮物和油懸物）在取樣前需在水浴中加熱至 50°C，經(jīng)過(guò)充分?jǐn)噭?dòng)，使其融化并均勻。在 25mL 棕色容量瓶中準(zhǔn)確稱取樣品 0.2000-0.5000g。在容量瓶中加入少量（通常 1-5mL）二氯甲烷，超聲 3 次，每次 15 秒，使之完全溶解后用二氯甲烷定容。準(zhǔn)確量取 0.20mL 定容液于25mL 棕色容量瓶

11、中，用二氯甲烷定容，用于高效液相色譜分析。A.4.4 樣品中番茄紅素的 C18-HPLC 分離和鑒定在 A.4.1 節(jié)所述色譜條件下，對(duì)樣品進(jìn)行色譜分析。圖 1 為番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)樣品的 C18-HPLC 色譜圖。圖2 為組分 I 的 UV-VIS 光譜圖。根據(jù)其保留時(shí)間和光譜特征（例如：max）與參比樣品的數(shù)據(jù)比較，鑒定色譜圖上組分 I 為番茄紅素組分。圖1 番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)樣品的C18-HPLC色譜圖。色譜條件：見A.3.2.1節(jié)。組分鑒定：組分I=番茄紅素。圖 2 組分 I 的 UV-VIS 光譜圖。溶劑：高效液相色譜流動(dòng)相。max=472nm。A4.5 樣品中番茄紅素的定量在色譜圖上積分計(jì)算番茄紅素組分的峰面積。以試樣中番茄紅素組分峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。A.4.6 計(jì)算按式（2）計(jì)算樣品中番茄紅素的含量。式中：𝐶𝑆= 𝐶𝑆𝐶