藥物分析實驗2012

1、/*藥物分析實驗上海工程技術(shù)大學(xué)制藥工程系/*目錄實驗一葡萄糖酸鈣片的分析2實驗二葡萄糖的一般雜質(zhì)檢查5實驗三阿司匹林腸溶片的分析11實驗四過氧化苯甲酰凝膠的分析15實驗五鹽酸小蘗堿片的分析17實驗六紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚片的含量24實驗七維生素 AD滴劑中維生素A 的鑒別與含量測定26實驗八牛黃解毒片的鑒別30/*實驗一葡萄糖酸鈣片的分析【目的要求】1. 掌握葡萄糖酸鈣片鑒別實驗的原理；2. 掌握滴定法測定葡萄糖酸鈣片含量的原理與操作?！净驹怼克幬顲OO-HCOHHOH,H 2OCa 2+HOHHOHCH 2OH2本品含葡萄糖酸鈣（ C12H 22CaO14· H2 O

2、）應(yīng)為標示量的 95.0%-105.0% 性狀 ：本品為白色片。1 原理(1) 鑒別： 與苯肼反應(yīng)本品在酸性條件下與苯肼反應(yīng)生成黃色的結(jié)晶。 本品與三氯化鐵 本品在無色火焰中燃燒，火焰即顯磚紅色。( 2) 含量測定鈣紫紅素先與鈣離子絡(luò)合生成紫紅色絡(luò)合物，隨著EDTA 絡(luò)合劑的加入，由于EDTA 與鈣離子的配位能力強于鈣指示劑與鈣離子的配位能力，而使鈣紫紅素先與鈣離子絡(luò)合生成紫紅色絡(luò)合物中的鈣離子被EDTA 奪取，將指示劑游離出來， 溶液即顯示游離指示劑的顏色，從而指示滴定的終點。/*【實驗操作】（一）鑒別 ：1 與三氯化鐵反應(yīng)取本品一片，研細，加溫熱的水10mL ，振搖，過濾，吸取5mL 溶液

3、，加 FeCl3溶液一滴，應(yīng)顯深黃色。2 燃燒顯色取鉑絲，用鹽酸浸濕后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯磚紅色。3 與苯肼反應(yīng)取本品約 0.5g, 置試管中，加水5 mL , 微熱溶解后，加冰醋酸0.7mL 與新蒸的苯肼 1mL ，置水浴上加熱 30 分鐘，放冷，用玻璃棒擦試管的內(nèi)壁，漸生成黃色的結(jié)晶。（二）含量測定：取本品5 片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于葡萄糖酸鈣1g），加水50 毫升，微熱使葡萄糖酸鈣溶解，放冷至室溫，移植至100mL容量瓶中，再用水稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取濾液25mL ，加水 75mL ，加氫氧化鈉溶液 15mL 與鈣紫紅素 0.1g

4、，用 EDTA 溶液滴定至溶液自紫色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兯{色。每1mLEDTA 溶液（ 0.05mol/L ）相當于 22.42mg 的葡萄糖酸鈣。標示量 ,(%)=V EDTA ×22.42 ×100×W 1/(1000 ×W 2×25×0.5 ×5)×100%W 1:5 片藥品的重量 (g)W 2: 稱重溶解的藥品重量VEDTA滴定消耗的 EDTA 溶液的體積。/*實驗二葡萄糖的一般雜質(zhì)檢查一.目的要求1 了解葡萄糖的全檢過程；2 掌握氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽及熾灼殘渣等一般雜質(zhì)檢查原理、操作方法及雜質(zhì)限量計算；

5、3 掌握旋光法 216 定葡萄糖注射液含量的基本原理、操作方法及結(jié)果計算；4 正確使用納氏比色管、檢砷器、高溫爐及旋光儀，熟悉旋光儀的構(gòu)造、以及保養(yǎng)。二 . 基本原理葡萄糖分子結(jié)構(gòu)中的五個碳都是手性碳原子，具有旋光性。一定條件下的旋光度是旋光性物質(zhì)的特性常數(shù)，測定葡萄糖的比旋度具有初步鑒別及估測純度的意義。葡萄糖分子中具有醛基，還原堿性酒石酸銅生成紅色氧化亞銅沉淀。本品除了檢查氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬，砷鹽等一般雜質(zhì)外，還需檢查溶液的澄清度與顏色（目的是檢查水不溶性物質(zhì)或有色雜質(zhì)）、乙酸溶液的澄清度（目的是檢查醇不溶性雜質(zhì)，如蛋白質(zhì)等）、亞硫酸鹽與可溶性淀粉（因為制備時使用的醇可能帶有亞硫

6、酸鹽，而可溶性淀粉為引入的中間體）。旋光度與溶液的濃度（c）和偏振光透過溶液的厚度（l）成正比。當偏振光通過厚 1dm 且每 1ml 中含有旋光性物質(zhì)1g 的溶液，使用光線波長為鈉光D 線（ 589.3nm），穩(wěn)定溫度為 t 記時，測得的旋光度稱為該物質(zhì)的比旋度，以t 。葡萄糖的比旋度 t 為 52.75°。所以，測定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。三. 實驗操作/*一性狀本品為無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末；無臭，味甜。取本品約 10.81g 精密稱定，置 100ml 量瓶中，加水適量與氨試液0.2ml，溶解后水稀釋至刻度，搖勻，放置10 分鐘，在 25時測定比旋度，應(yīng)為52.

7、5°至 53.0°。二鑒別取本品約 0.2g，加水 5ml 溶解后，緩緩滴入溫熱的堿性酒石酸銅試液中，即產(chǎn)生氧化亞銅紅色沉淀。三檢查1酸度取本品 2g，加新沸過的冷水20ml 溶解后，加酚酞指示液3 滴與氫化鈉滴定濃（ 0.02mol/l ） 0.20ml，應(yīng)顯粉紅色。2溶液的澄清度與顏色取本品 5g，置 25ml 納氏比色管中，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至 10ml ，溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與號濁度標準液比較，不得更濃；如顯色，與對照液（取比色用氯化鈷溶液10ml ，比色用重鉻酸鉀溶液30ml 與比色用硫酸銅溶液 20ml, 加水稀釋成 100ml） 0.4ml 加

8、水稀釋至 10ml 比較，不得更深。3乙醇溶液的澄清度取本品 1g，加 90% 乙醇 30ml ，置水浴上加熱回流約10min，溶液應(yīng)澄清。4亞硫酸鹽與可溶性淀粉取本品 1g，加水 10ml 溶解后，加碘試液1 滴，應(yīng)即顯黃色。5干燥失重取本品置與供試品同樣條件下干燥至恒重的扁形稱量瓶中，將供試品平鋪于瓶底，厚度不超過5 ，加蓋，精密稱定。將稱量瓶放入潔凈的培養(yǎng)皿中，瓶蓋半開或置瓶旁，放入105干燥箱中干燥。取出后迅速蓋好瓶蓋，置干燥器內(nèi)放冷至室溫，迅速精密稱重（放置時間與稱重順序與空稱量瓶一致）。再于 105干燥箱中干/*燥至恒重，即得。減失重量不得過9.5% 。6蛋白質(zhì)取本品 1.0g，加

9、水 10ml 溶解后，加磺基水楊酸溶液（1 5） 3ml ，不得發(fā)生沉淀。7氯化物取本品 0.6g，置 50ml 納氏比色管中，加水溶解使成約25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使調(diào)pH 試紙顯中性），再加稀硝酸 10ml （溶液如不澄清，應(yīng)濾過） ，加水使成約 40ml ，搖勻，即得供試溶液。 另取標準氯化納溶液（ 10g/ml 的 Cl ）6ml,置 50ml 納氏比色管中，加稀硝酸 10ml，加水使成約 40ml，搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液 1ml ，用水稀釋至 50ml ，搖勻，在暗處放置 5min ，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比濁， 供試

10、溶液不得比對照溶液更濃（ 0.01% ）。8硫酸鹽取本品 2g，置 50ml 納氏比色管中，加水溶解使成約40ml （溶液如顯堿性，可滴加鹽酸使遇pH 試紙顯中性；溶液如不澄清，應(yīng)濾過）加稀鹽酸2ml ，搖勻，即得供試溶液。另取標準硫酸鉀溶液（100 gSO4/ml ）2ml,置 50ml 納氏比色管中，加水使成約40ml ，加稀鹽酸2ml, 搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入 25% 氯化鋇溶液 5ml, 用水稀釋至 50ml,充分搖勻，放置10min ，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比濁，供試溶液不得比對照溶液更濃（0.01% ）。9鐵鹽取本品 2g，置 50ml

11、 納氏比色管中，加水20ml 溶解后，加硝酸3 滴，緩緩煮沸 5min ，放冷，加水稀釋使成 45ml, 加硫氰酸銨溶液 （30100）3ml,搖勻，如顯色，與標準鐵溶液（ 10 gFe/ml）2ml 用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.001%）。10重金屬取 50ml 納氏比色管兩支，甲管中加標準鉛液（Pb8g/ml ）一定量與醋酸鹽緩沖液（ pH3.5 ）2ml, 用水稀釋至25ml ：若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管一致；再在甲乙兩管中分別加硫代/*乙酰胺試液各2ml,搖勻，放置2min ，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色

12、與甲管比較，不得更深（重金屬不得過5ppm）。四 . 注意事項限度檢查應(yīng)遵循平行操作原則，即供試管與對照管的實驗條件應(yīng)盡可能一致，包括實驗用具的選擇、試劑與事業(yè)的量取方法及加入順序、反應(yīng)時間的長短等。1.比色、比濁前應(yīng)使比色管內(nèi)試劑充分混勻。比色方法是將兩管同置于白色背景上，從側(cè)面或自上而下觀察；比濁方法是將兩管同置于黑色背景上，從上向下垂直觀察。所用比色管刻度高低差異不應(yīng)超過2ml, 使用過的比色管應(yīng)及時清洗，注意不能用毛刷刷洗，可用硫酸洗液浸泡。一般情況下可取1 份供試品進行檢查，對供試品和對照管各復(fù)檢2 份，方可判定。五. 思考題1 葡萄糖的檢查項目中哪些屬于一般雜質(zhì)？哪些屬于特殊雜質(zhì)？

13、試述它們的來源及檢查意義。2 亞硝酸鹽和可溶性淀粉超標會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？3 氯化物、重金屬及砷鹽檢查中的操作注意事項有哪些？比濁檢查時為什么應(yīng)將反應(yīng)液稀釋后再加沉淀劑？/*實驗三阿司匹林腸溶片的分析【目的要求】1. 熟悉片劑分析的項目與方法；2. 掌握阿司匹林鑒別實驗的原理及與藥物結(jié)構(gòu)的關(guān)系；3. 掌握兩步滴定法測定阿司匹林片含量的原理與操作， 及容量分析法測定片劑含量的計算方法?！净驹怼克幬颫COHOOCCH3C9H 8O4性狀：本品為腸溶包衣片，除去包衣后顯白色。本品含阿司匹林（C9H8O4 ）應(yīng)為標示量的 95.0%-105.0%1 原理（1） 鑒別： 三氯化鐵反應(yīng)水楊酸及其鹽在中性或

14、弱酸性條件下，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物。阿司匹林加熱水解生成水楊酸，可用三氯化鐵反應(yīng)鑒別。 水解反應(yīng)阿司匹林與碳酸鈉試液加熱，酯鍵水解，得水楊酸鈉和醋酸鈉，加過量稀硫酸酸化后，生成水楊酸沉淀，并發(fā)生醋酸得臭氣，因此可用水解反應(yīng)鑒別。(2) 檢查 阿司匹林游離水楊酸得檢查a. 雜質(zhì)來源游離水楊酸為阿司匹林生產(chǎn)中未反應(yīng)的原料或貯存過程中的水解產(chǎn)物/*b. 檢查方法阿司匹林無游離酚羥基，不與高鐵鹽溶液作用，而水楊酸則磕與之反應(yīng)生成生成紫堇色此種方法稱為對照法，極為靈敏，可檢測出1ug 的游離水楊酸。(3) 含量測定阿司匹林分子結(jié)構(gòu)中含有酯鍵，易水解成水楊酸和醋酸，片劑中為防止酯鍵水解

15、加入少量酒石酸或枸櫞酸做穩(wěn)定劑，因此在片劑中有酸性雜質(zhì)，含量測定時為消除酸性雜質(zhì)干擾，采用兩步滴定法。第一步 中和，消除酸性雜質(zhì)（酸性附加劑和降解產(chǎn)物）的干擾酒石酸枸櫞酸 NaOH鈉鹽 H 2O水楊酸醋酸COOHCOONaOCOCH 3+ NaOHOCOCH 3 + H 2O第二步水解后剩余滴定COOHCOONaOCOCH 3+ NaOHOH + CH 3COONa2NaOH+ H 2SO4Na2SO4 + 2H 2O【實驗操作】（一）鑒別與三氯化鐵反應(yīng)取本品的細分適量（相當于阿司匹林0.1g） ,加水 10mL ，煮沸，放冷，加三氯化/*鐵試液一滴， 即顯紫堇色。（二）檢查：游離水楊酸取本品

16、 3 片，研細，用乙醇30mL 分次研磨，并移入100mL 容量瓶中，充分振搖，用水稀釋致刻度，搖勻，立即過濾，精密量取濾液10mL ，致 50mL 納氏比色管中，用水稀釋致50mL ，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液（取1mol/L 鹽酸溶液 1mL, 加硫酸鐵銨指示液2mL 后再加水適量使成100mL ）3mL ，搖勻，三十秒內(nèi)如顯色，與對照液（精密量取0.01% 水楊酸溶液 4.5mL ，加乙醇 3mL ， 0.05酒石酸溶液 1mL ，用水稀釋致 50mL, 再加上述新制的稀硫酸鐵銨溶液3mL, 搖勻）比較，不得更深（1.5% ）（三）含量測定：取本品 10 片，研細，用中性乙醇70mL 分

17、數(shù)次研磨，并移入100mL 容量瓶中，充分振搖，再用水適量洗滌研缽數(shù)次，洗液合并于100mL 容量瓶中，再用水稀釋致刻度，搖勻，過濾，精密量取濾液30mL （相當于阿司匹林0.3g），致錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）10mL, 振搖，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3 滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L ）致溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L ） 40mL ，置水浴上加熱15 分鐘并時時振搖，迅速放冷致室溫，用硫酸滴定液（ 0.05mol/L ）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正，每1mL 氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L ）相當于 18.02mgC9H 8O

18、4100CH 2SO4× 2×（ V 硫酸空白 V 硫酸供試）× 18.02 ×30× 100%阿司匹林標示量，0.1 ×0.1 ×1000 ×10（四）注意事項：1掌握片劑的取樣方法，并正確計算取樣量范圍。/*2中和操作要快，避免阿司匹林在堿中水解。3加堿、加熱水解阿司匹林應(yīng)不時振搖，保證水解完全；然后迅速放冷·，盡量避免堿液在受熱時吸收二氧化碳。/*實驗四過氧化苯甲酰凝膠的分析【目的要求】3. 熟悉凝膠劑分析的方法；4. 掌握阿過氧化苯甲酰凝膠分析的原理與操作。藥物OC OOO性狀 本品為白色乳膠粘稠

19、體. 本品含過氧化苯甲酰 (C 14H 10O4)應(yīng)為標示量的90.0%110.0%【基本原理】本品具有氧化性，把碘化鉀氧化為單質(zhì)碘，再用硫代硫酸鈉滴定生成的碘，根據(jù)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積即可計算出過氧化苯甲酰的含量。【實驗操作】（一）鑒別1取本品適量 (約相當于過氧化苯甲酰50mg), 加丙酮 5mL ，用玻棒擠壓使過氧化苯甲酰溶解，加碘化鉀試液2mL ，溶液呈紅棕色，加硫代硫酸鈉試液5mL ，紅棕色應(yīng)消失。2取本品適量 (約相當于過氧化苯甲酰100mg), 加丙酮 10mL ，用玻棒擠壓，過濾，濾液作為供試溶液，另取過氧化苯甲酰標準品，用丙酮溶解并制成每1mL 中含10mg 的溶液作為對

20、照液。吸取上述兩種溶液各5 微升，分別點于同一硅膠薄層板上，/*以甲苯 -二氯甲烷 -冰醋酸 (50:2:1) 為展開劑，展開 后，涼干，置紫外燈下(254nm) 檢示。供試品溶液所顯主斑點的顏色與位置應(yīng)與對照溶液的主斑點相同。（二）含量測定 :精密稱取本品適量 (約相當于過氧化苯甲酰200mg)，置 100mL 碘量瓶中， 放置片刻，使供試品平鋪于碘瓶底層，加丙酮30mL ，用玻棒擠壓使過氧化苯甲酰溶解完全，用少量丙酮沖洗玻棒，洗液并入溶液中，加碘化鉀試液5mL ，密塞，搖勻，于暗處放置 10 分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液滴定至無色，用力振搖30 秒，放置 2 分鐘，如仍為無色，即為終點。 1m

21、L 硫代硫酸鈉 (0.1mol/L) 相當于 12.11mg 的過氧化苯甲酰 .標示量 (%)=c v12.11 100%0.1mc 硫代硫酸鈉的濃度 (mol/L)v 消耗的硫代硫酸鈉的體積(mL)m 稱取的樣品中按說明書的標示應(yīng)含過氧化苯甲酰的質(zhì)量(mg)（三）注意事項1樣品轉(zhuǎn)移要完全，玻棒上黏附的樣品要全部沖洗到碘瓶中，否則測定結(jié)果偏低。2滴定終點的確定要準確，放置2 分鐘仍為無色，即為終點。/*實驗五鹽酸小蘗堿片的分析【目的要求】1 . 掌握鹽酸小蘗堿片鑒別實驗的原理；2. 掌握氧化還原反應(yīng)滴定法測定鹽酸小蘗堿片含量的原理與操作。性狀 本品為黃色片或糖衣片+MeONOMeOOCl -,

22、 2H2 O本品含鹽酸小蘗堿（ C20H 18ClNO 4· 2H2O ）應(yīng)為標示量的93.0107.0%1 原理(1) 鑒別：堿性溶液與丙酮作用生成沉淀本品水溶液與氫氧化鈉試液作用生成季胺堿型小蘗堿而呈橙紅色，再與丙酮作用生成黃色的丙酮小蘗堿沉淀。MeO+NNaOHCl -, 2H2OMeOOO+MeONOH-OMeOO橙紅色/*MeO+ONOMeOOOH-CH3CCH 3OH3CCCH2MeONOMeOO黃色 氧化顯色本品溶于稀鹽酸，可被漂白粉氧化而顯櫻紅色。 與沒食子酸作用而顯色本品溶于硫酸，再與沒食子酸的乙醇溶液作用，水浴加熱后顯翠綠色。（2）含量測定本品用重鉻酸鉀氧化后，

23、剩余重鉻酸鉀以間接碘量法測定。用過量重鉻酸鉀滴定液氧化供試品中的鹽酸小蘗堿，剩余的重鉻酸鉀將碘化鉀氧化為碘，再用硫代硫酸鈉滴定碘，即可測出剩余的重鉻酸鉀滴定液的毫升數(shù)，并以空白試驗校正， 測出重鉻酸鉀滴定液的總體積。 空白試驗和樣品試驗兩次毫升數(shù)之差，即為氧化供試品所消耗的重鉻酸鉀滴定液的毫升數(shù)?！緦嶒灢僮鳌浚ㄒ唬╄b別1.取本品 0.1g, 加水 10mL, 緩緩加熱溶解后，過濾，濾液備用，加氫氧化鈉試液4滴，放冷（必要時過濾）, 加丙酮 8 滴，即發(fā)生渾濁。2. 取本品約 5mg，加稀鹽酸 2mL ，攪拌，加漂白粉少量，即現(xiàn)櫻紅色3. 取本品約 0.1g, 加水 20mL, 緩緩加熱溶解后，

24、加硝酸 0.3mL ，冷卻，放置 10 分鐘，/*濾過，取濾液 5mL, 加入硝酸銀溶液，出現(xiàn)白色凝膠狀沉淀。（二）含量測定：取本品 20 片，如為糖衣片，注意去除糖衣，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于鹽酸小蘗堿0.3g） , 置燒杯中，加沸水150mL ，攪拌，使鹽酸小蘗堿溶解，放冷，移入250 容量瓶中，精密加重鉻酸鉀滴定液50mL ，加水至刻度，振搖5 分鐘，用干燥濾紙濾過，精密量取濾液100mL ，置250mL具塞錐形瓶中，加碘化鉀2g，振搖使溶解，加鹽酸溶液10mL, 密塞，搖勻，在暗處放置10 分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液滴定，至近終點時，加淀粉指示液2mL ，繼續(xù)滴定至藍色消失

25、，溶液呈亮綠色，并將 滴 定 的結(jié) 果用 空 白 實 驗 校 正 。 1mL重鉻酸鉀滴定液相當于12.39mg 的C HClNO·2H O。2018420.0136W 1(V 0V1) C1標示量 =200.016676 100%W 2100W 3250W 1 20 片總重 gW 2 供試品重 gW 3 供試品的標示量gC 硫代硫酸鈉的濃度， mol/LV 0 空白實驗消耗硫代硫酸鈉體積V 1 樣品消耗硫代硫酸鈉體積/*實驗六紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚片的含量 目的要求 1 熟悉片劑分析的基本操作；2 掌握紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚片含量的基本原理和方法。 基本原理 1 藥物

26、HOONCH3HC 8H 9NO 2 151.16本品為白色片、薄膜衣或明膠包衣片，除去包衣后顯白色。含對乙酰氨基酚(C 8H 9NO 2)應(yīng)為標示量的95.0%105.0% 。2 原理對乙酰氨基酚在0.4% 氫氧化鈉溶液中，于257nm 波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測定。其片劑的溶液經(jīng)干燥濾紙濾過，輔料不再干擾測定。 儀器與試劑 （一） 儀器紫外 -可見分光光度計、容量瓶、移液管、過濾裝置。（二） 試劑對乙酰氨基酚片、 0.4% 氫氧化鈉溶液 實驗操作 取本品 10 片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于對乙酰氨基酚40 ），置 250ml 量瓶中，加

27、 0.4%氫氧化鈉溶液 50ml 及水 50ml，振搖 15min，加水至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液 5ml，置 100ml 量瓶中，加 0.4%氫氧化鈉溶液 10ml，加水至刻度，搖勻，照紫外 - 可見分光光度法（中國藥典 2005 年版二部附錄 A），在/*1%257nm的波長處測定吸光度，按C8H 9NO 2 的吸光 系數(shù)（ E）為 715 計算，即得。1cmAW1 %×D×V×標示量 %= E1cm L ×100W×100%標示量式中V 為溶液的體積， ml。 注意事項 1 對乙酰氨基酚片中含有輔料，因此紫外分析前應(yīng)進行過濾操作。

28、本實驗先定容，后過濾，過濾時，所用儀器均需干燥。棄去初濾液，量取續(xù)濾液進行分析，以保持濃度的一致，從而保證結(jié)果的準確。2 本實驗用吸光系數(shù)法測定含量，其優(yōu)點是操作簡便、快捷，不必用對照品。但該法受儀器精度、操作及環(huán)境因素等影響較大，因此測定前必須對紫外- 可見分光光度計進行校正與檢定，波長、吸光度的準確度、雜散光均應(yīng)符合要求，才能保證結(jié)果的準確。3 吸光系數(shù)法通常都是在最大吸收波長出測定吸光度，因為在此波長處測定靈敏度高，且波長稍有偏差對吸光度影響不大。4 紫外 - 可見分光光度法測定時，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1 的石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰波長±

29、2nm以內(nèi)測試幾個點的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。除另有規(guī)定外，吸收豐波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的波長±2nm 以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。思考題1 簡述片劑過濾得操作要點。2 采用吸光系數(shù)法測定藥物含量時，是否要對儀器進行校正和檢定，為什么？/*實驗七維生素 AD滴劑中維生素A 的鑒別與含量測定一、目的要求1 復(fù)習(xí)并掌握維生素A 鑒別反應(yīng)的實驗原理。2 復(fù)習(xí)并掌握三點校正法測定維生素A 含量的實驗原理。3 掌握三點校正法測定維生素A 含量的操作方法。4 掌握三點校正法的計算方法。5 掌握滴劑的含量測定步驟及其計算方法。二

30、、儀器及試藥（一）器材紫外 -可見分光光度儀，比色皿，電熱恒溫干燥箱，萬分之一分析天平，托盤天平（精度 0.01g），稱量瓶，稱量紙，藥匙，研缽， ，量筒（ 5ml、 10ml、 50ml、 100ml），膠頭滴管，刻度吸管（ 1ml 、 2ml ），容量瓶（ 100ml) ，計算器，溫度計，濕度計（二）試藥維生素 AD 滴劑，純化水，三氯甲烷（分析純，無水乙醇） ，三氯化銻（分析純），環(huán)己烷（分析純）三、實驗準備25% 三氯化銻的三氯甲烷溶液：取三氯化銻25g，加三氯甲烷使溶解成100ml，即得。四、實驗原理及方法（一） 鑒別三氯化銻反應(yīng)實驗原理：維生素 A 在飽和無水三氯化銻的無醇氯仿溶液

31、中即顯藍色，漸變紫紅。反應(yīng)機理為維生素A 與三氯化銻（）中存在的親電試劑氯化高銻（）反應(yīng)，生成/*不穩(wěn)定的藍色碳正離子，反應(yīng)式如下：CH3CH3CH3CH 2CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3OCH 2CH3SbCl 3CH 3CH 2OCRCH 3CH 3CH 3SbCl5.RCOO實驗方法：取本品，加三氯甲烷稀釋成每1ml 中含維生素 A1020U 的溶液；取1ml，加 25% 三氯化銻的三氯甲烷溶液2ml ，即顯藍色至藍紫色，放置后，藍色漸消褪。（二） 含量測定三點校正法實驗原理：用分光光度法測定維生素A 在特定波長處的吸光度來計算其含量。由于維生素 A 制劑中含有

32、稀釋用油， 且維生素 A 原料藥中混有其他雜質(zhì)， 因此測定吸光度中含有無關(guān)吸收引入的誤差，需用校正公式校正以得到正確結(jié)果。其詳細內(nèi)容參見附錄 -D。實驗方法：取裝量項下的內(nèi)容物適量，精密稱定，加環(huán)己烷溶解并定量稀釋制成每1ml 中含915U 的溶液，照紫外 -可見分光光度法，測定其吸收峰的波長，并在表9 所列各波長1%處測定吸光度，計算各吸光度與波長328nm 處吸光度的幣值和波長328nm 處的 E1cm值。表 9維生素 A 測定第一法的藥典規(guī)定值波長（ nm）測得吸光度吸光度比值計算值藥典規(guī)定值300A1A1/A30.555316A2A2/A30.907328A3A3/A31.000340

33、A4A4/A30.811360A5A5/A30.299/*1如果吸收峰波長在326329nm 之間，且所測得各波長吸光度比值不超過表中規(guī)定的± 0.02,可用下式計算含量：1%每 1g 供試品中含有的維生素A 的單位 = E1cm （ 328nm）× 19002如果吸收峰波長在326329nm 之間，但所測得的各波長吸光度比值超過表中規(guī)定值的± 0.02，應(yīng)按下式求出校正后的吸光度，然后再計算含量：A328（校正） =3.52(2A328-A 316-A 340)3如果在 328nm 處的校正吸光度與未校正吸光度相差不超過±3.0% ，則不用校正吸光度，

34、仍以未經(jīng)校正的吸光度計算含量。4如果校正吸光度與未校正吸光度相差在-15% 至-3% 之間，則以校正吸光度計算含量。5如果校正吸光度超出未校正吸光度的-15% 至 -3% 的范圍，或者吸收峰波長不在326329nm 之間，則供試品須按下述第二法測定。第二法的詳細描述參見附錄-D 。中國藥典（ 2005）規(guī)定，本品含維生素A 應(yīng)為標示量的 90.0%120.0% 。五、注意事項1 鑒別反應(yīng)必須在無水、無醇的條件下進行。因此，所用儀器必須干燥無水，所用試劑必須為無水試劑，所用三氯甲烷中必須不含醇。2 維生素 A 遇光易氧化變質(zhì)，實驗應(yīng)盡量在暗處快速進行。3 維生素 A 測定注意事項的詳細描述參見附

35、錄-D 。4 紫外 -可見分光光度法注意事項的詳細描述參見附錄-A 。5 滴劑分析注意事項的詳細描述參見附錄-D 。六、計算維生素 A 的含量測定計算參見含量測定中的實驗方法及附錄-D 相關(guān)內(nèi)容。/*七、思考題1 鑒別反應(yīng)為何必須在無水、無醇的條件下進行？2 為何不直接以紫外 -可見分光光度法測定維生素A 的含量，而要采用較為繁瑣的三點校正法？用于測定的三點該如何選擇？3 應(yīng)用三點校正法測定維生素A 的含量，何時采用第一法，何時采用第二法？第二法如何操作？4 計算式中的參數(shù)1900 是如何得來的？/*實驗八牛黃解毒片的鑒別 目的要求 1. 掌握中藥制劑定性分析的一般原理和方法 ;2. 掌握牛黃

36、解毒片的原理及有關(guān)操作 . 基本原理 1.處方人工牛黃5g雄黃 50g石膏 200g大黃 200g黃芩 150g桔梗 100g冰片 25g甘草 50g2. 原理(1) 顯微鑒別法利用顯微鏡來觀察中藥制劑中原藥材的組織、細胞或內(nèi)含物等特征，從而鑒別制劑的處方組成。凡以藥材粉碎后直接制成制劑或添加有粉末藥材的制劑，由于其在制作過程中原藥材的顯微特征仍保留在制劑中，因此均可用顯微鑒別法進行鑒別。本實驗用顯微鑒別法鑒別大黃和雄黃。(2) 微量升華法可用于鑒別中藥制劑中具有升華性質(zhì)的化學(xué)成分。本實驗采用微量升華法鑒別冰片。冰片的升華物加一定試劑處理后顯出不同顏色。(3) 顯色反應(yīng)則利用顏色反應(yīng)鑒別中藥制劑的組成。本實驗利用黃酮類成分和蒽醌