四君子護(hù)康顆粒劑的主要藥效學(xué)研究

1、主要藥效學(xué)研究 四君子湯可以促進(jìn)MTL的分泌,改善和促進(jìn)胃腸動(dòng)力，治療脾胃氣虛證。對(duì)面色萎白，語聲低微，氣短乏力，食少便溏，舌淡苔白，脈虛弱等均有療效。（常用于慢性胃炎、胃及十二指腸潰瘍等屬脾氣虛者。） 研究資料 中醫(yī)認(rèn)為脾的主要功能是“脾主運(yùn)化”,脾失健運(yùn)則機(jī)體的消化、吸收等功能減退,說明中醫(yī)學(xué)“脾”的主要生理功能及病理表現(xiàn)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)消化系統(tǒng)關(guān)系密切。觀察消化道各部分消化功能及影響因素是研究中醫(yī)“脾主運(yùn)化”理論的重要組成部分。胃腸激素在調(diào)節(jié)胃腸道的消化吸收等活動(dòng)中起著非常重要的作用,膽囊收縮素(cholecysto-kinin, CCK)、胃動(dòng)素(motilin, MTL)與動(dòng)物的胃腸運(yùn)動(dòng)功

2、能密切相關(guān)。但目前的相關(guān)文獻(xiàn)多局限于胃腸運(yùn)動(dòng)或胃腸激素的單方面研究,對(duì)胃腸道消化功能的多層面研究較少。因此,筆者等以利血平建立大鼠脾虛模型,檢測(cè)胃肌電活動(dòng)和胃腸運(yùn)動(dòng)的變化,以及胃和小腸內(nèi)CCK和MTL蛋白含量的變化,探討健脾補(bǔ)虛經(jīng)典方劑四君子湯對(duì)脾虛大鼠消化運(yùn)動(dòng)功能的影響。1材料與方法1.1藥品及主要試劑 儀器健康雄性SD大鼠36只(體重290±20 g),北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。利血平注射液(1 mg/mL,批號(hào)090409)購(gòu)自廣東邦民制藥廠有限公司;四君子湯顆粒(批號(hào)080301)購(gòu)自湖北武當(dāng)生物制藥有限公司;羧甲基纖維素鈉購(gòu)自sigma公司;速眠新購(gòu)自軍需大學(xué)獸

3、醫(yī)研究所(批號(hào)20080310);蛋白提取試劑盒、蛋白BCA法測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京凱基生物科技有限公司; CCK、MTLELISA測(cè)定試劑盒購(gòu)自R&B公司;生物醫(yī)學(xué)信號(hào)采集處理系統(tǒng)(Pclab-UE, China);超低溫冰箱(SANYO, Japan); 680型酶標(biāo)儀(BIO-RAD, USA)。1.2動(dòng)物分組和模型處理 供試大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d(每天給予充足的飼料和飲水),隨機(jī)分為3組:對(duì)照組、脾虛組和治療組。脾虛組、治療組腹腔注射利血平0. 5 mg/kg·d1,對(duì)照組腹腔注射相應(yīng)劑量的生理鹽水;同時(shí),四君子湯治療組灌服四君子湯8 mL/kg·d(劑量根據(jù)人和

4、大鼠體表面積換算,約合生藥0. 233 g/mL),對(duì)照組和脾虛組灌服相應(yīng)劑量的生理鹽水,連續(xù)7 d。每天觀測(cè)大鼠臨床表現(xiàn),于試驗(yàn)0、8、15 d測(cè)定各組大鼠體重變化。1.3胃排空率的測(cè)定 取羧甲基纖維素鈉10 g,溶于250 mL蒸餾水中,加入奶粉16 g,糖8 g,淀粉8 g,活性炭3 g,攪拌均勻最后制成約300 mL營(yíng)養(yǎng)性半固體糊,冰箱冷藏,用前2 h取出,恢復(fù)至室溫。試驗(yàn)14 d,禁食24 h,每組隨機(jī)取4只大鼠按10mL/kg營(yíng)養(yǎng)性半固體糊灌胃,灌胃前稱定營(yíng)養(yǎng)性半固體糊重量。30 min后斷頸法處死大鼠,剖腹取全部胃腸,自幽門切跡處取胃,拭干稱重,沿胃大彎剪開胃體,洗去胃內(nèi)容物后拭

5、干,稱凈重。計(jì)算胃排空率(% ) =1-(胃全重-胃凈重)÷營(yíng)養(yǎng)性半固體糊重量×100。1.4腸推進(jìn)功能測(cè)定 自盲腸處取上述大鼠的全腸,不加牽拉鋪平于白紙上,分別量取自幽門括約肌至營(yíng)養(yǎng)性半固體糊最前端(營(yíng)養(yǎng)性半固體糊移動(dòng)距離)及至盲腸(幽-盲全長(zhǎng))的距離。計(jì)算腸推進(jìn)比(% ) = (營(yíng)養(yǎng)性半固體糊移動(dòng)距離÷幽-盲全長(zhǎng))×100。1.5胃竇肌電測(cè)定 試驗(yàn)15 d,從每組剩余大鼠中隨機(jī)取4只,速眠新按1 mL/kg肌肉注射麻醉后,仰臥保定,打開腹腔,將一對(duì)正負(fù)電極(間距1. 5 mm)置于胃竇漿膜下,接地電極置于左下肢骨骼肌內(nèi)。在麻醉狀態(tài)下記錄胃肌電變化,每

6、次記錄30 min,計(jì)算機(jī)采集胃肌電波形及頻率的變化。1.6胃腸道組織中CCK和MTL蛋白含量 變化試驗(yàn)15 d,將每組剩余4只大鼠斷頸處死,浸入75%酒精3-5次,取出置于無菌容器中。在無菌條件下取出胃和小腸,立即用生理鹽水沖洗干凈,分別取胃竇(從胃幽門至胃小旁角切跡處取胃竇腹側(cè)壁全層組織)、十二指腸(距離幽門口5 cm處)、空腸(距離幽門口20 cm)、回腸(接近盲腸15 cm處),迅速置于液氮中, -80保存。提取試驗(yàn)各組大鼠胃竇、十二指腸、空腸和回腸中總蛋白,用BCA法測(cè)定總蛋白含量, ELISA檢測(cè)CCK和MTL含量,嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。1.7統(tǒng)計(jì)處理用DPS7. 05統(tǒng)計(jì)軟件,

7、顯著性分析采用方差分析,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2結(jié)果2.1臨床癥狀脾虛組在注射利血平后第3天開始出現(xiàn)明顯腹瀉癥狀,第5天開始出現(xiàn)肛周污穢,消瘦,被毛枯槁無光澤,精神萎靡、扎堆、拱背等癥狀。治療組糞便基本成形,體重上升,無明顯萎靡、扎堆、拱背癥狀,與脾虛組比較,癥狀明顯好轉(zhuǎn)。2.2四君子湯對(duì)胃排空和腸推進(jìn)影響與對(duì)照組比較,脾虛組胃排空率下降,腸推進(jìn)率升高,差異極顯著(P<0. 01)。治療組胃排空率升高,腸推進(jìn)率降低,與對(duì)照組無明顯差異,但與脾虛組比較差異極顯著(P<0. 01)。見表1。2.3 胃竇肌電變化對(duì)采集的胃電信號(hào)記錄曲線進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比較,脾虛組胃電

8、振幅和頻率均顯著降低(P<0. 05);與脾虛組比較,治療組胃電振幅和頻率顯著升高(P<0. 05),但治療組胃電振幅未能恢復(fù)到對(duì)照組水平。見表2、圖1。2.4四君子湯對(duì)脾虛大鼠胃腸道CCK和MTL蛋白表達(dá)的影響 脾虛組CCK含量在胃竇內(nèi)升高,在十二指腸和空腸內(nèi)降低,與對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05);與脾虛組比較,治療組CCK蛋白含量在胃竇內(nèi)降低,在十二指腸和空腸內(nèi)回升,除空腸內(nèi)CCK蛋白含量與對(duì)照組比較差異顯著(P<0. 05)外,其他均恢復(fù)至對(duì)照組水平。MTL蛋白含量?jī)H在空腸內(nèi)存在生物統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,脾虛組MTL蛋白含量降低,與對(duì)照組和治療組比較差異極顯著(P<

9、;0. 01);治療組和對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見圖2。3討論 利血平是一種主要作用于去甲腎上腺素能神經(jīng)末梢的抗高血壓藥,能夠耗竭腎上腺素能神經(jīng)末梢內(nèi)兒茶酚胺類遞質(zhì),使動(dòng)物出現(xiàn)交感神經(jīng)功能低下、副交感神經(jīng)功能亢進(jìn)等癥狀,進(jìn)而造成胃腸功能紊亂。適量的利血平可以在大鼠、家兔、豚鼠等多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中制造脾虛模型,其癥狀與人類最常見的以消化機(jī)能紊亂為主,并伴有神經(jīng)內(nèi)分泌功能紊亂的脾虛證型相似,可靠性和重現(xiàn)性都比較強(qiáng),且簡(jiǎn)單易行,因此,利血平致動(dòng)物脾虛模型是脾虛實(shí)驗(yàn)研究的常用模型。本試驗(yàn)中,脾虛組大鼠出現(xiàn)被毛枯槁、嗜臥、縮蜷、消瘦、飲食減少、糞便溏薄等癥狀,與前人報(bào)道結(jié)果相同,證明脾虛證模型構(gòu)建成功。治療組在

10、試驗(yàn)15 d時(shí),無明顯被毛枯槁、嗜臥、縮蜷、消瘦等癥狀,飲食基本正常,糞便基本成形,與脾虛組有明顯差異。說明四君子湯能補(bǔ)脾助運(yùn),對(duì)脾虛證有治療作用。中醫(yī)理論中,脾的主要功能是“主運(yùn)化”。脾失健運(yùn)則機(jī)體的消化、吸收等功能減退,說明中醫(yī)學(xué)“脾”的主要生理功能及病理表現(xiàn)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)消化系統(tǒng)的關(guān)系密切。脾虛常伴有不同程度的胃腸動(dòng)力障礙。前人研究發(fā)現(xiàn),脾虛時(shí)胃腸運(yùn)動(dòng)節(jié)律紊亂,胃排空加快或延遲,腸推進(jìn)加快但隨病情加重而減弱。胃腸的運(yùn)動(dòng)形式都依賴于平滑肌電活動(dòng)。胃肌電是由胃各不同部位的平滑肌所產(chǎn)生,胃不同部位平滑肌產(chǎn)生的胃肌電具有其本身固有且各不相同的頻率。通常認(rèn)為,靜息電位的周期性變化形成了慢波的自發(fā)基本電

11、節(jié)律。慢波影響胃腸平滑肌的緊張性,但并不直接引起平滑肌的收縮。慢波觸發(fā)動(dòng)作電位的發(fā)生,在慢波上迭加的動(dòng)作電位才能引起平滑肌收縮。近年來研究表明,胃肌電活動(dòng)異常是胃動(dòng)力障礙性疾病發(fā)病的主要原因之一。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,脾虛大鼠胃電振幅和頻率降低,胃排空功能下降,腸蠕動(dòng)加快,反映出脾虛時(shí)胃肌電紊亂,胃腸運(yùn)動(dòng)失調(diào),臨床表現(xiàn)出腹瀉、糞便溏薄等癥狀,長(zhǎng)期消化吸收功能低下會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物消瘦、精神萎靡等。經(jīng)四君子湯治療后,胃肌電振幅和頻率上升,胃排空加快,腸推進(jìn)減緩,證明四君子湯對(duì)脾虛大鼠表現(xiàn)出調(diào)節(jié)紊亂的胃肌電活動(dòng),從而興奮運(yùn)動(dòng)功能低下的胃,抑制運(yùn)動(dòng)功能亢進(jìn)的腸道,具有不同的調(diào)節(jié)作用。這主要是因?yàn)樗木訙梢哉{(diào)整紊

12、亂的消化道電節(jié)律和振幅10, 11,進(jìn)而對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。脾虛證是以胃腸道消化吸收功能降低為主要表現(xiàn)的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)紊亂、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝低下的一種虛損性疾病。胃腸激素的作用涉及胃腸道分泌、運(yùn)動(dòng)、吸收、水電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)等幾乎所有的胃腸功能調(diào)節(jié)。其中, CCK和MTL是胃腸道產(chǎn)生的主要以胃腸系為效應(yīng)器官的調(diào)節(jié)肽。消化系統(tǒng)中的CCK由主要分布在十二指腸及空腸上端的細(xì)胞分泌,可以促進(jìn)胃幽門括約肌收縮,抑制胃基礎(chǔ)緊張度與自發(fā)性收縮,從而對(duì)胃排空起抑制作用。其在腸道運(yùn)動(dòng)中主要抑制近端十二指腸蠕動(dòng),促進(jìn)遠(yuǎn)端十二指腸和空腸蠕動(dòng)。研究發(fā)現(xiàn)脾虛組大鼠胃竇內(nèi)CCK明顯升高,而十二指腸和空腸內(nèi)CCK顯著下降,表現(xiàn)出小腸蠕動(dòng)

13、加快,胃排空受抑制。治療組大鼠消化道內(nèi)的CCK水平與對(duì)照組比較無顯著差異,說明四君子湯對(duì)脾虛大鼠消化道內(nèi)胃腸激素的異常有治療作用。MTL是一種重要的調(diào)節(jié)胃腸消化功能的胃腸激素,在機(jī)體內(nèi)分布廣泛,其生理作用主要是影響胃腸運(yùn)動(dòng)功能,在消化期間,血漿胃動(dòng)素呈周期性釋放,引起胃和小腸MMC相,誘發(fā)胃強(qiáng)烈收縮和小腸明顯的分節(jié)運(yùn)動(dòng),對(duì)胃腸道內(nèi)容物起向后推移的作用。脾虛時(shí),消化道內(nèi)MTL含量異?？蓪?dǎo)致胃肌電節(jié)律紊亂,從而造成胃腸道機(jī)械運(yùn)動(dòng)功能紊亂,且消化道內(nèi)MTL的含量與胃肌電節(jié)律呈正相關(guān)性。本試驗(yàn)中,脾虛組大鼠MTL水平明顯下降,導(dǎo)致胃肌電振幅和頻率下降,從而造成胃平滑肌松弛,張力及蠕動(dòng)減弱,胃排空時(shí)間延

14、長(zhǎng)四君子湯治療后,MTL水平明顯上升,說明四君子湯可以促進(jìn)MTL的分泌,改善和促進(jìn)胃腸動(dòng)力,這是四君子湯通過健脾作用加強(qiáng)“運(yùn)化水谷”的機(jī)理之一。此外，通過對(duì)脾虛大鼠血清消化酶和胃腸激素的影響，發(fā)現(xiàn)四君子湯對(duì)胃腸道胃竇局部GAS的含量具有調(diào)節(jié)作用,并間接降低了胃酸和胃蛋白酶過量分泌,對(duì)消化道起保護(hù)作用。1材料與方法1.1材料利血平注射液(1 mg/mL,批號(hào)090409)購(gòu)自廣東邦民制藥廠有限公司;四君子湯顆粒(批號(hào)080301)購(gòu)自湖北武當(dāng)生物制藥有限公司;血清淀粉酶、血清脂肪酶測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建成生物研究所;反轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)自BIO-RAD公司。1.2動(dòng)物分組健康、成年雄性SD大鼠24只,體

15、重(290±20)g,購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。隨機(jī)分成3組:對(duì)照組,脾虛組,治療組。適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d。試驗(yàn)期間自由飲水,飼喂固體飼料。1.3試驗(yàn)處理脾虛組、治療組腹腔注射利血平0.5 mg/kg·d3,對(duì)照組腹腔注射相應(yīng)劑量的生理鹽水,連續(xù)7 d。從8 d開始,治療組灌服四君子湯8 mL/kg·d(劑量根據(jù)人和大鼠體表面積換算,約合生藥0.233 g/mL),對(duì)照組和脾虛組灌服相應(yīng)劑量的生理鹽水,連續(xù)7 d。每天觀測(cè)記錄大鼠臨床表現(xiàn),于試驗(yàn)0 d、8 d、15 d測(cè)定各組大鼠體重變化。試驗(yàn)15 d,眼球采血。頸椎脫臼處死大鼠。將處死的大鼠浸入75%酒

16、精35次,取出置于無菌容器中。在無菌條件下,取出胃和小腸,立即用生理鹽水沖洗干凈,分別從胃竇(從胃幽門至胃小旁角切跡處,取胃竇腹側(cè)壁全層組織)、十二指腸(距離幽門口5 cm處)、空腸(距離幽門口20 cm處)、回腸(接近盲腸15 cm處),迅速置于液氮中,-80保存。1.4血清淀粉酶和脂肪酶的測(cè)定將眼球采血的血樣,37放置60 min,4下3 000 r/min離心10 min,取上清分裝,-80保存,待測(cè)。血清在1周內(nèi),按試劑盒說明書操作測(cè)定淀粉酶和脂肪酶活性。1.5試驗(yàn)大鼠胃腸組織中VIP和GAS mRNA表達(dá)差異參照GenBank大鼠基因序列采用Primer5.0軟件設(shè)計(jì)了3對(duì)引物,由北

17、京奧科生物技術(shù)有限責(zé)任公司合成,引物序列及參數(shù)見表1。以-ac-tin為內(nèi)參,計(jì)算樣本和-actin的比值。1.6 統(tǒng)計(jì)處理用DPS 7.05統(tǒng)計(jì)軟件,顯著性分析采用方差分析,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2結(jié)果與分析2.1 臨床表現(xiàn)大鼠在注射利血平后3 d開始出現(xiàn)明顯的拉稀癥狀, 5 d開始出現(xiàn)肛周污穢、消瘦、活動(dòng)頻度下降、扎堆、拱背、瞇眼、被毛枯槁無光澤等癥狀。上述癥狀與前人報(bào)道的結(jié)果相同,說明脾虛證模型構(gòu)建成功。四君子湯治療后,上述癥狀均有明顯好轉(zhuǎn)。試驗(yàn)0 d,各組體重?zé)o明顯差異;試驗(yàn)8 d,脾虛組和治療組體重下降,顯著低于對(duì)照組(P<0.05),治療組與脾虛組無明顯差異;試

18、驗(yàn)15 d,脾虛組體重顯著低于對(duì)照組(P<0.05),與治療組差異不明顯,治療組體重顯著低于對(duì)照組(P<0.05)(見表2)。2.2血清中消化酶活力變化脾虛組血清淀粉酶極顯著下降,低于對(duì)照組(P<0.01);治療組極顯著(P<0.01)高于脾虛組和低于對(duì)照組。脾虛組血清脂肪酶顯著上升,高于對(duì)照組(P<0.05);治療組顯著(P<0.05)低于脾虛組而高于對(duì)照組(見表3)。血清淀粉酶活力(U/L) 1 241.2±±±8.0B血清脂肪酶活力(U/L) 33.5±±±28.7b2.3四君子湯對(duì)脾虛大鼠胃

19、腸道VIP和GASmRNA表達(dá)量的影響與對(duì)照組比,脾虛組VIPmRNA表達(dá)量在十二指腸顯著下降(P<0.05),在空腸顯著下降(P<0.05);GAS mRNA表達(dá)量在胃和回腸內(nèi)升高,在十二指腸和空腸下降,與對(duì)照組比差異顯著(P<0.05)。與脾虛組比,治療組VIPmRNA表達(dá)量在十二指腸明顯上升(P<0.05);GAS mRNA表達(dá)量在十二指腸和空腸明顯升高(P<0.05),在回腸內(nèi)顯著降低(P<0.05)(見圖1)。3討論 利血平致大鼠脾虛是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中脾虛證模型的一種經(jīng)典造模方法。利血平主要通過降低交感神經(jīng)的功能,使副交感神經(jīng)功能相對(duì)或絕對(duì)亢進(jìn)。從而

20、出現(xiàn)體重減輕、腹瀉、耐寒力差等與臨床脾虛泄瀉相似的癥狀5。通過臨床指標(biāo)的觀測(cè),我們可以發(fā)現(xiàn)脾虛組出現(xiàn)瞇眼、被毛枯槁無光澤、扎堆、拱背、拉稀、消瘦等,表明大鼠脾虛模型已經(jīng)成功建立。經(jīng)四君子湯治療后,無明顯皮毛枯槁、嗜臥、縮蜷現(xiàn)象,糞便基本成形,采食和飲水恢復(fù)正常,體重有所恢復(fù)。說明四君子湯具有補(bǔ)脾助運(yùn)的功效,對(duì)脾虛證有良好的治療作用?！捌⒅鬟\(yùn)化”與消化系統(tǒng)關(guān)系密切,消化系統(tǒng)功能與形態(tài)的異常是脾虛最基本的病理變化。其中,胰腺外分泌功能的異常也是脾虛證發(fā)生的病理機(jī)制之一。血清淀粉酶和血清脂肪酶主要來自胰腺外分泌,吸收入血形成。當(dāng)胰腺發(fā)生病變時(shí),在胰腺內(nèi)合成的淀粉酶和脂肪酶等,因胰腺腺泡大量破壞,胰管

21、阻塞,阻礙了酶進(jìn)入十二指腸,從而返流入血,使其各自的血濃度驟然升高6。但血清淀粉酶活性在急性胰腺炎發(fā)病后48 h內(nèi)急劇升高,達(dá)到峰值后逐漸下降。本試驗(yàn)結(jié)果中脾虛組淀粉酶活性降低,脂肪酶活性升高,與對(duì)照組比差異明顯,提示脾虛時(shí)胰腺的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生了非急性炎性病變。前人研究證明,胰腺的炎性病變產(chǎn)生的炎性介質(zhì)、內(nèi)毒素、氧自由基等能夠引起胃腸神經(jīng)功能紊亂,致腸壁肌肉活動(dòng)紊亂,可導(dǎo)致胃腸運(yùn)動(dòng)障礙,影響胃腸道平滑肌的收縮7。因此,脾虛證可造成試驗(yàn)動(dòng)物消化功能紊亂。治療組與脾虛組比,淀粉酶活性升高,脂肪酶活性降低。說明四君子湯對(duì)脾虛導(dǎo)致的血清消化酶活性異常及胰腺損傷有治療作用,可以修復(fù)受破壞的胰腺腺泡,疏通

22、阻塞的胰管,促進(jìn)胃腸道的消化功能。在關(guān)于胃腸消化功能障礙的發(fā)病機(jī)理研究過程中,研究者發(fā)現(xiàn)胃腸激素是調(diào)節(jié)胃腸消化吸收功能的一個(gè)重要因素。胃腸道局部組織中胃腸激素含量的變化可以影響胃腸消化吸收機(jī)能狀況8。VIP和GAS是影響胃腸消化功能的重要胃腸激素VIP利血平致大鼠脾虛是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中脾虛證模型的一種經(jīng)典造模方法。利血平主要通過降低交感神經(jīng)的功能,使副交感神經(jīng)功能相對(duì)或絕對(duì)亢進(jìn)。從而出現(xiàn)體重減輕、腹瀉、耐寒力差等與臨床脾虛泄瀉相似的癥狀。通過臨床指標(biāo)的觀測(cè),我們可以發(fā)現(xiàn)脾虛組出現(xiàn)瞇眼、被毛枯槁無光澤、扎堆、拱背、拉稀、消瘦等,表明大鼠脾虛模型已經(jīng)成功建立。經(jīng)四君子湯治療后,無明顯皮毛枯槁、嗜臥、

23、縮蜷現(xiàn)象,糞便基本成形,采食和飲水恢復(fù)正常,體重有所恢復(fù)。說明四君子湯具有補(bǔ)脾助運(yùn)的功效,對(duì)脾虛證有良好的治療作用。“脾主運(yùn)化”與消化系統(tǒng)關(guān)系密切,消化系統(tǒng)功能與形態(tài)的異常是脾虛最基本的病理變化。其中,胰腺外分泌功能的異常也是脾虛證發(fā)生的病理機(jī)制之一。血清淀粉酶和血清脂肪酶主要來自胰腺外分泌,吸收入血形成。當(dāng)胰腺發(fā)生病變時(shí),在胰腺內(nèi)合成的淀粉酶和脂肪酶等,因胰腺腺泡大量破壞,胰管阻塞,阻礙了酶進(jìn)入十二指腸,從而返流入血,使其各自的血濃度驟然升高。但血清淀粉酶活性在急性胰腺炎發(fā)病后48 h內(nèi)急劇升高,達(dá)到峰值后逐漸下降。本試驗(yàn)結(jié)果中脾虛組淀粉酶活性降低,脂肪酶活性升高,與對(duì)照組比差異明顯,提示脾

24、虛時(shí)胰腺的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生了非急性炎性病變。前人研究證明,胰腺的炎性病變產(chǎn)生的炎性介質(zhì)、內(nèi)毒素、氧自由基等能夠引起胃腸神經(jīng)功能紊亂,致腸壁肌肉活動(dòng)紊亂,可導(dǎo)致胃腸運(yùn)動(dòng)障礙,影響胃腸道平滑肌的收縮。因此,脾虛證可造成試驗(yàn)動(dòng)物消化功能紊亂。治療組與脾虛組比,淀粉酶活性升高,脂肪酶活性降低。說明四君子湯對(duì)脾虛導(dǎo)致的血清消化酶活性異常及胰腺損傷有治療作用,可以修復(fù)受破壞的胰腺腺泡,疏通阻塞的胰管,促進(jìn)胃腸道的消化功能。在關(guān)于胃腸消化功能障礙的發(fā)病機(jī)理研究過程中,研究者發(fā)現(xiàn)胃腸激素是調(diào)節(jié)胃腸消化吸收功能的一個(gè)重要因素。胃腸道局部組織中胃腸激素含量的變化可以影響胃腸消化吸收機(jī)能狀況。VIP和GAS是影響胃腸

25、消化功能的重要胃腸激素。VIP是非腎上腺非膽堿能(NANC)抑制性神經(jīng)遞質(zhì),在整個(gè)胃腸道均有分布。VIP可引起整體胃腸道環(huán)形平滑肌的松弛。同時(shí),脾虛導(dǎo)致的胰腺炎性病變可造成VIP的分泌異常。由試驗(yàn)研究可知,脾虛組與對(duì)照組比,胃腸道內(nèi)VIP含量降低;治療組雖未完全恢復(fù)到對(duì)照組水平,但相比脾虛組已經(jīng)有所好轉(zhuǎn)。VIP含量減低,則胃腸道平滑肌松弛功能下降,腸道蠕動(dòng)加快,導(dǎo)致水和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收不完全即排出,造成便溏。四君子湯可以通過對(duì)胰腺的修復(fù)和調(diào)節(jié)局部胃腸道內(nèi)VIP含量,進(jìn)而調(diào)節(jié)胃腸道的消化吸收功能。GAS由G細(xì)胞產(chǎn)生,大多數(shù)GAS在胃竇區(qū)域分泌,其他部位含量較少。GAS幾乎對(duì)整個(gè)胃腸道都有作用,可

26、強(qiáng)烈刺激胃壁細(xì)胞分泌胃酸;促進(jìn)胃蛋白酶、胰液、胰泌素和膽汁中水、鹽的分泌;能增加黏膜血流量,促進(jìn)黏膜細(xì)胞分裂分化,使黏膜增厚,促進(jìn)胃腸道黏膜生長(zhǎng)。本試驗(yàn)中,脾虛組胃竇內(nèi)GAS升高,我們可推測(cè),因胃酸大量分泌和黏膜血流量的增加,胃壁受胃酸侵蝕受損傷,黏膜充血,胃部消化功能下降;十二指腸和空腸內(nèi)的GAS含量下降,導(dǎo)致黏膜細(xì)胞增殖能力下降,腸壁變薄,腸黏膜絨毛變短,消化吸收能力降低。治療組胃竇內(nèi)GAS含量比脾虛組少,說明四君子湯對(duì)胃腸道胃竇局部GAS的含量具有調(diào)節(jié)作用,并間接降低了胃酸和胃蛋白酶過量分泌,對(duì)消化道起保護(hù)作用。【參考文獻(xiàn)】:1趙寧,賈紅偉,張皖東,等.理中丸對(duì)利血平所致脾虛大鼠血清中細(xì)胞因子的影響J.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 13(8): 588-589.2李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 2006: 162-163.3 Gafvelin G, CarlquistM