血液中多縮葡糖濃度的測定

1、血液中多縮葡糖濃度的測定 曾令發(fā)03088046方法理論方法邁卡基/匹克法新方法理論方法 根據(jù)去掉血漿中的蛋白以后，所獲得的堿性濾液中沉淀銅絡(luò)合物，隨后測定沉淀中沉積的銅返回Metkaji和Pycjio法 離心作用于含多縮葡糖的血液并用yehephh取出血漿，將與獲得的血漿體積相同的10%的三錄乙酸加到血漿內(nèi)；二次離心溶液，向離心液內(nèi)加入94%的乙醇，將溶液比色，并根據(jù)已知濃度的多縮葡萄糖溶液制作的標準曲線進行計算。理論方法和邁卡基/匹克法的缺點n 理論方法 : 極費時間而且不準確，因為血液中往往也存在與銅形成絡(luò)合物的其他物質(zhì)n “邁”法 : 費勞力并占用相當長的時間（每一樣品需一小時）。此外

2、，方法不夠準確，因為在加入乙醇后溶液的光密度不能保持恒定，而迅速 改變。 返回推薦方法n目的：縮短測定時間并提高測定的準確度n方法：離心或靜置含多縮葡糖的，用3.8%的檸檬酸鈉，以9：1的比例穩(wěn)定了的血液制劑。把0.1毫升預(yù)先制備的0.9%的NaCl溶液中的凝血酶溶液（活度為2.5單位/毫升）加到0.2毫升的被研究的血漿內(nèi)。在凝血酶的作用下測定血漿的凝固時間。原理n 按照測定血液中多縮葡糖濃度的方法，包括用化學(xué)試劑處理原血液或起血漿，將樣品用凝血酶溶液處理，測定凝血的時間并根據(jù)下式子測定多縮葡糖的濃度多縮葡糖=at+bt+c 式中t為凝血時間，a,b,及c 為考慮到多縮葡糖性質(zhì)是系數(shù)。好處：可

3、以縮短分析時間達數(shù)分鐘。此外，該方法減輕了勞力，因為它不要求第二次離心作用及制作標準曲線。由于在引用公式時利用了從前已知方法測定的血液中多縮葡糖的平均值。故提高了方法的準確度。測定血液中多縮葡糖濃度用的系數(shù)制劑 系 數(shù) abc 多聚甘氨酸 0.146 -5.57 53.13復(fù)多聚甘氨酸 0.234 -10.15 110.0血液樣品的取樣時間凝血時間 血液中制劑的濃度已知方法推薦方法 多聚甘氨酸6%制劑加入前 19.5 0.2 經(jīng)過10分鐘 10.3 0.1 11.34 1.03 11.242小時 12.4 0.2 6.28 1.5 6.514小時 15.1 0.1 2.47 0.6 2.31

4、復(fù)多聚甘氨酸10%制劑加入前 21.7 1.8 經(jīng)過10分鐘 11.5 1.05 24.9 0.2 24.222小時 14.0 0.8 13.2 1.35 13.764小時 19.0 1.0 2.83 0.35 1.62例題n例1. 取0.2毫升含有多聚甘氨酸的血漿，倒入0.1毫升的凝血酶溶液，用秒表測定時間，該時間為15.1秒。按公式計算血液中的多聚甘氨酸。n多聚甘氨酸=0.146*t-5.57*t+53.13 =0.146*228.01-5.57*15.1+53.13 =2.31所以，血液中多縮葡糖的濃度為2.31毫克/毫升n例2. 取0.4毫升含有復(fù)多聚甘氨酸的血漿，將其靜置，倒入0.1毫升的凝血酶溶液，用秒表測定時間t，該時間為15秒。按公式計算血液中的復(fù)多聚甘氨酸。 復(fù)多聚甘氨酸=0.