檢測(cè)系統(tǒng)分析性能評(píng)價(jià)

1、 第一節(jié) 系統(tǒng)及其分析性能評(píng)價(jià)程序 1目的 規(guī)范檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能評(píng)價(jià)程序，對(duì)新購(gòu)置的檢測(cè)系統(tǒng)在正式用于檢測(cè)標(biāo)本前對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，確認(rèn)檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能符合臨床要求，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。2范圍 適用于生化科定量檢驗(yàn)項(xiàng)目的各類(lèi)檢測(cè)系統(tǒng)。3職責(zé) 技術(shù)負(fù)責(zé)人和生化科主任共同負(fù)責(zé)檢測(cè)系統(tǒng)分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法的設(shè)計(jì)，生化科主任負(fù)責(zé)組織檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。 4定義和術(shù)語(yǔ) 4.1檢測(cè)系統(tǒng)完成一個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)量控制程序、保養(yǎng)計(jì)劃等的組合為檢測(cè)系統(tǒng)，若手工操作還包括具體操作人員。 4.2檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能 檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能包括不精密度、不準(zhǔn)確度、病

2、人結(jié)果可報(bào)告范圍、分析靈敏度、分析特異性和生物參考區(qū)間等。4.3檢測(cè)系統(tǒng)分析性能評(píng)價(jià)的方式4.3.1檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的評(píng)價(jià)(evaluation)：對(duì)實(shí)驗(yàn)室白行開(kāi)發(fā)或研究的新檢測(cè)系統(tǒng)或檢驗(yàn)方法的分析性能進(jìn)行確定，包括不精密度、不準(zhǔn)確度、病人結(jié)果可報(bào)告范圍、分析靈敏度、分析特異性和生物參考區(qū)間等基本性能的實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)，使其檢驗(yàn)結(jié)果符合臨床要求，以說(shuō)明檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的可靠性。 432檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的確認(rèn)(verification)：對(duì)實(shí)驗(yàn)室新購(gòu)置的已被政府有關(guān)部門(mén)認(rèn)可了其分析性能的檢測(cè)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室在投入進(jìn)行常規(guī)病人標(biāo)本檢測(cè)前，需對(duì)廠(chǎng)商提供的性能資料中的幾個(gè)分析性能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以確認(rèn)該檢測(cè)系統(tǒng)是否具有預(yù)

3、期的水平。對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的確認(rèn)包括不精密度、不準(zhǔn)確度和病人結(jié)果可報(bào)告范圍三種性能的評(píng)估。對(duì)于低值在臨床上特別有意義的項(xiàng)目需要增加分析靈敏度性能的評(píng)估。 433檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的核實(shí)(demonstration)：對(duì)實(shí)驗(yàn)室新購(gòu)置的已被許多實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用的檢測(cè)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室期望核實(shí)該系統(tǒng)已被認(rèn)可的性能而進(jìn)行的評(píng)估實(shí)驗(yàn)為核實(shí)。評(píng)估時(shí)以最少的必需的實(shí)驗(yàn)去核實(shí)，說(shuō)明可以得到和廠(chǎng)商報(bào)告一致的不精密度和不準(zhǔn)確度，也可以和其他用戶(hù)的性能一致。對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的核實(shí)包括不精密度和不準(zhǔn)確度二種性能的核實(shí)。5 程序檢測(cè)系統(tǒng)分析性能評(píng)價(jià)流程及采用的評(píng)價(jià)方法見(jiàn)圖6-1-1。 圖 6-1-1 檢驗(yàn)系統(tǒng)分析性能評(píng)價(jià)流程

4、及方法6 參考文獻(xiàn)【1】馮仁豐.臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制技術(shù)基礎(chǔ).第2版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2007:76-215 第二節(jié) 精密度性能評(píng)價(jià)程序 1目的規(guī)范檢測(cè)系統(tǒng)的精密度分析性能評(píng)價(jià)程序，對(duì)新購(gòu)置的檢測(cè)系統(tǒng)在正式用于檢測(cè)標(biāo)本前對(duì)其不精密度性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，確認(rèn)檢測(cè)系統(tǒng)的隨機(jī)分析誤差符合臨床要求。2范圍本操作規(guī)程適用于免疫室所有定量及半定量的檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)精密度驗(yàn)證試驗(yàn)。3職責(zé) 技術(shù)負(fù)責(zé)人和免疫室共同負(fù)責(zé)檢測(cè)系統(tǒng)精密度分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)，免疫室組長(zhǎng)負(fù)責(zé)組織檢測(cè)系統(tǒng)的精密度分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。4定義和術(shù)語(yǔ)4.1精密度(precision) 指在規(guī)定條件下所獲得獨(dú)立測(cè)量結(jié)果的接近程度。4.2 精密

5、度(imprecision) 指特定條件下各獨(dú)立測(cè)量結(jié)果的分散程度。4.3重復(fù)性條件(repeatability conditions)指獨(dú)立的檢測(cè)結(jié)果是在較短時(shí)間內(nèi)，在同一實(shí)驗(yàn)室由同一操作人員于相同的儀器上運(yùn)用同一方法對(duì)同一檢測(cè)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)所獲得。4.4批內(nèi)精密度指在相同檢測(cè)條件下對(duì)同一待測(cè)物進(jìn)行連續(xù)測(cè)量所得結(jié)果的接近程度，以前稱(chēng)作。4.5重現(xiàn)性條件(reproducibility conditions)指檢測(cè)結(jié)果由不同操作人員在不同的儀器上運(yùn)用同一方法對(duì)相同檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行測(cè)定所獲得。 4.6重現(xiàn)性(reproducibility)指在變化的檢測(cè)條件下對(duì)同一待測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)所獲得結(jié)果的接近程度。

6、4.7批(run)指在檢測(cè)系統(tǒng)真實(shí)性和精密度穩(wěn)定的間隔期，一般不超過(guò)24h或少于2h。 4.8樣本(sample) 指源白總體的一個(gè)或多個(gè)部分，能提供總體的信息，通常作為總體的結(jié)論基礎(chǔ)。4.9中間精密度(intermediate precision) 指同一實(shí)驗(yàn)室中間精密度條件下的精密度。4.10中間精密度條件(intermediate precision conditions) 指測(cè)量結(jié)果是在不同操作條件下在同一儀器上運(yùn)用相同的檢驗(yàn)方法對(duì)同一檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行測(cè)量所獲得。 411不精密度的分類(lèi) 可分為批內(nèi)、批間、日內(nèi)、日問(wèn)、儀器內(nèi)以及“室內(nèi)不精密度。 5程序 51參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(C

7、LSI)頒布的EP5A2文件定量測(cè)量方法的精密度性能評(píng)價(jià)批準(zhǔn)指南(第2版)進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)精密度性能評(píng)價(jià)。 511基本要求和注意事項(xiàng)5111實(shí)驗(yàn)樣品要穩(wěn)定，其基質(zhì)組成應(yīng)盡可能與臨床樣本相似。實(shí)驗(yàn)樣品的濃度盡可能選擇與廠(chǎng)商聲明性能相近的濃度或接近該項(xiàng)目醫(yī)學(xué)決定水平的濃度。通常選擇穩(wěn)定性好的、血清基質(zhì)的質(zhì)控物作為實(shí)驗(yàn)樣品。 5112注意冰凍保存實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)分析物的穩(wěn)定性。嚴(yán)格控制凍融的時(shí)間、混勻的操作手法。 5113實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格按照廠(chǎng)商操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)，按照室內(nèi)質(zhì)量控制程序進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控，用于室內(nèi)質(zhì)量控制的控制品不可以作為實(shí)驗(yàn)樣品。如果出現(xiàn)失控?cái)?shù)據(jù)，則應(yīng)查找原因，重做實(shí)驗(yàn)。5114在正式實(shí)

8、驗(yàn)前操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程序、校準(zhǔn)程序、保養(yǎng)程序以及檢測(cè)程序等，熟悉評(píng)價(jià)方案。512實(shí)驗(yàn)的具體程序 5121實(shí)驗(yàn)程序：對(duì)穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)樣品每日進(jìn)行2批實(shí)驗(yàn)，批間相隔的時(shí)間不少于2h，每批樣品做雙份測(cè)定，共做20d實(shí)驗(yàn)。5122結(jié)果統(tǒng)計(jì)：20d共有80個(gè)結(jié)果，40對(duì)。每對(duì)結(jié)果間的差是每批的批內(nèi)差。在20d共有40批，這些差值客觀(guān)地反映了較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的批內(nèi)不精密度；對(duì)每批的雙份結(jié)果以均值表示，每日做2批，2批均值間的差值表示這一天的批問(wèn)差，減去其中批內(nèi)差的成分，即為批間不精密度。求每日均值，20d共有20個(gè)每日均值，這些均值間的差值表示天間差，扣除內(nèi)含的批間差因素即為天間不精密度。計(jì)算公式如下：S

9、批內(nèi)=式中，S批內(nèi)：批內(nèi)不精密度的標(biāo)準(zhǔn)差；i=1：總和從第1天始計(jì)；2：一天內(nèi)實(shí)驗(yàn)的批數(shù)；j：批數(shù)的序號(hào)；j=l：總和要從每天的第1批開(kāi)始計(jì)，4I：組成總和的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的個(gè)數(shù)。A=式中，A：批間變異的估計(jì)值，I：實(shí)驗(yàn)總天數(shù)，xi小第i1天的第l批結(jié)果的均值，Xi2第i天的第2批結(jié)果的均值，2I：在I天內(nèi)實(shí)驗(yàn)的總批數(shù)。式中，B：天間變異估計(jì)值；xi，：第i天2批4個(gè)結(jié)果的均值；x：實(shí)驗(yàn)在i天內(nèi)所有結(jié)果的總均值。式中，S天間：天間標(biāo)準(zhǔn)差；S總:總標(biāo)準(zhǔn)差，CV總：總不精密度。 5123結(jié)果判斷：從美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評(píng)估允許誤差表中查閱評(píng)價(jià)項(xiàng)目的允許誤差范圍，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)的批內(nèi)不精密度和天間不精密

10、度小于允許誤差范圍的14和13作為檢測(cè)系統(tǒng)不精密度性能的可接受標(biāo)準(zhǔn)，且又小于廠(chǎng)商提供的精密度性能指標(biāo)，說(shuō)明由實(shí)驗(yàn)估計(jì)的檢測(cè)系統(tǒng)的不精密度性能可接受，符合要求。若大于判斷限，檢測(cè)系統(tǒng)的不精密度是否符合要求；應(yīng)再進(jìn)一步做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理作出判斷。52參照美國(guó)國(guó)家臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)的EP 1 5A2文件用戶(hù)對(duì)精密度和準(zhǔn)確度性能的核實(shí)試驗(yàn)批準(zhǔn)指南(第2版)進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)精密度性能評(píng)價(jià)。 521參照EP 1 5一A2文件進(jìn)行精密度性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的基本要求和注意事項(xiàng)同上。 522實(shí)驗(yàn)程序：實(shí)驗(yàn)方案根據(jù)廠(chǎng)家聲明的批內(nèi)精密度(內(nèi))和總的室內(nèi)精密度(仃總)比例關(guān)系分為3種情況： 如果萬(wàn)批內(nèi)23仃總：每天

11、分析1個(gè)批次，2個(gè)濃度，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定3次，連續(xù)3d。 如果仃批內(nèi)與仃總相對(duì)關(guān)系未知：每天分析1個(gè)批次，2個(gè)濃度，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定4次，連續(xù)5d。 523結(jié)果統(tǒng)計(jì)5231批內(nèi)不精密度(S批內(nèi))的計(jì)算：其中：代數(shù)和；D：總天數(shù)(3或5)；n：每批重復(fù)測(cè)定次數(shù)(3或4)；Xdi：每天每次的結(jié)果；：一天中所有結(jié)果的均值。5232總不精密度(S總)的計(jì)算：先計(jì)算變量B其中：某天所有結(jié)果的均值；X：所有結(jié)果的均值。利用公式計(jì)算S總：其中形：每批重復(fù)的測(cè)定次數(shù)(3或4)。5233估計(jì)的批內(nèi)精密度與聲明的批內(nèi)精密度比較：通過(guò)估計(jì)的批內(nèi)精密度與廠(chǎng)家聲明的精密度的比較，驗(yàn)證廠(chǎng)家所聲明的批內(nèi)精密度。如果廠(chǎng)家聲明

12、的批內(nèi)精密度用變異系數(shù)(CV)表示，按下列公式轉(zhuǎn)換為分析物所有檢測(cè)結(jié)果的均值的標(biāo)準(zhǔn)差：其中CV批內(nèi)是廠(chǎng)家聲明的批內(nèi)CV。 如果估計(jì)的批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差小于廠(chǎng)家的聲明，則核實(shí)了批內(nèi)精密度與廠(chǎng)家聲明一致。如果批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差大于廠(chǎng)家聲明的批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差，有可能這種差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可利用下面步驟來(lái)進(jìn)行差異的顯著性檢驗(yàn)： 計(jì)算批內(nèi)精密度的自由度V，一個(gè)實(shí)驗(yàn)持續(xù)D天，每批重復(fù)n次，V=D(n一1)。對(duì)于推薦持續(xù)3 d和5d的實(shí)驗(yàn)：V=6或1 5。確定自由度為V百分點(diǎn)為(lai)的x 2分布值C。其中a為錯(cuò)誤拒絕率(通常為5)，l是測(cè)試水平個(gè)數(shù)。對(duì)于水平個(gè)數(shù)為2、3、4的實(shí)驗(yàn)，與C對(duì)應(yīng)的百分點(diǎn)分別975、98.33%和9

13、8.75%。對(duì)于推薦的3D和5D實(shí)驗(yàn)方案，水平，C值分別為14.45和27.49。計(jì)算驗(yàn)證值：如果S批內(nèi)小于驗(yàn)證值，廠(chǎng)家聲明的批內(nèi)精密度通過(guò)驗(yàn)證。如果聲明的批內(nèi)精密度未被驗(yàn)證，應(yīng)聯(lián)系廠(chǎng)家技術(shù)部門(mén)。.4估計(jì)的總精密度與廠(chǎng)家聲明的總精密度的比較：如果廠(chǎng)家聲明的總精密度以CV表示，轉(zhuǎn)換為分折物所有檢測(cè)結(jié)果均值的標(biāo)準(zhǔn)差： 其中CV總為廠(chǎng)家聲明的總CV值。如果估計(jì)的總標(biāo)準(zhǔn)差小于廠(chǎng)家聲明的總標(biāo)準(zhǔn)差，則核實(shí)了總的精密度與廠(chǎng)家聲明一致的；如果總的標(biāo)準(zhǔn)差大于廠(chǎng)家聲明，有可能這種差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可利用下面4步來(lái)進(jìn)行的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性檢驗(yàn)： 計(jì)算總精密度的自由度T，一個(gè)實(shí)驗(yàn)持續(xù)D天，每批重復(fù)n次：確定自由度為V時(shí)百分

14、點(diǎn)為（ia/i）d的x分布值C。（同上）計(jì)算機(jī)驗(yàn)證：如果S總小于驗(yàn)證值，廠(chǎng)家聲明的總精密度通過(guò)用戶(hù)核實(shí)。如果S總超過(guò)驗(yàn)證值，廠(chǎng)家聲明的總精密度未通過(guò)用戶(hù)核實(shí)，應(yīng)聯(lián)系廠(chǎng)家技術(shù)部門(mén)。5支持性文件定量臨床檢驗(yàn)方法的不精密度評(píng)價(jià)程序。6質(zhì)量記錄表JYZX-PF025-001 市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心精密度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表。JYZX-PF025-002 市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心精密度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表。CHAPTER6 檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能評(píng)價(jià)程序 第三節(jié) 正確度性能評(píng)價(jià)程序 文件編號(hào)：版本號(hào)：1目的 規(guī)范檢測(cè)系統(tǒng)的正確度性能評(píng)價(jià)程序，對(duì)新購(gòu)置的檢測(cè)系統(tǒng)在正式用于檢測(cè)標(biāo)本前對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的不正確度分析性能進(jìn)行評(píng)

15、估，確認(rèn)新檢測(cè)系統(tǒng)的偏倚是否在允許誤差范圍內(nèi)。2范圍 適用于本實(shí)驗(yàn)室所有檢測(cè)項(xiàng)目。3職責(zé) 技術(shù)負(fù)責(zé)人和免疫室組長(zhǎng)共同負(fù)責(zé)檢測(cè)系統(tǒng)正確度分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法的設(shè)計(jì)，免疫室負(fù)責(zé)組織進(jìn)行本室檢測(cè)系統(tǒng)的正確度分析性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。4定義和術(shù)語(yǔ)4.1準(zhǔn)確度（accuracy) 指檢測(cè)結(jié)果與被測(cè)量真值之間的一致程度。4.2不準(zhǔn)確度（inaccuracy） 指檢測(cè)值與真值數(shù)量上的差異。通常用來(lái)衡量準(zhǔn)確度的好壞。4.3正確度（truness) 指大批檢測(cè)結(jié)果的均值與真值的一致程度。通常用統(tǒng)計(jì)量“偏倚（bias）”來(lái)表示。4.4偏倚 （bias） 指測(cè)量結(jié)果的預(yù)期值與可接受值間的差異。以檢測(cè)計(jì)量單位或百分率表示，即

16、平均值與參考值的差異。 45誤差（error）指對(duì)于真值或?qū)τ诳山邮艿摹㈩A(yù)期真值或參考值的偏離，分為隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差。 4.6系統(tǒng)誤差(systematic error) 指可重復(fù)條件下，對(duì)相同的被測(cè)量無(wú)數(shù)次檢測(cè)結(jié)果的均值與被測(cè)量真值的差異。用統(tǒng)計(jì)量偏倚表示。 4.7隨機(jī)誤差(random error) 在可重復(fù)的條件下，對(duì)相同的被測(cè)量無(wú)數(shù)次檢測(cè)結(jié)果與檢測(cè)結(jié)果的均值差異。以該均值下的標(biāo)準(zhǔn)差大小來(lái)衡量。 4.8總誤差(total error) 能影響分析結(jié)果準(zhǔn)確度的確定誤差的組合，包括隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差，是不準(zhǔn)確度的估計(jì)值。5程序51參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)于2002年頒布的E

17、P9一A2文件即用患者樣本進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)及偏倚評(píng)估批準(zhǔn)指南(第2版)進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)正確度性能評(píng)價(jià)。 51.1基本要求和注意事項(xiàng)樣本準(zhǔn)備：在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，按照操作規(guī)程收集新鮮患者標(biāo)本。至少收集40個(gè)標(biāo)本，每個(gè)樣本必須有足夠量以備兩種方法作雙份測(cè)定。各個(gè)標(biāo)本分析物含量越寬越好，盡可能使50的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本分析物的含量不在參考區(qū)間內(nèi)，避免使用對(duì)任一方法有干擾的標(biāo)本。比較方法的選擇：實(shí)驗(yàn)室原有的方法、廠(chǎng)家聲明的方法和公認(rèn)的參考方法都可作為比較方法。比較方法應(yīng)具有比實(shí)驗(yàn)方法更好的精密度，不受已知干擾物質(zhì)的干擾，使用與實(shí)驗(yàn)方法相同的單位，結(jié)果具有溯源性。另外，比較方法的分析測(cè)量范圍應(yīng)與實(shí)

18、驗(yàn)方法大致相同。在正式實(shí)驗(yàn)前操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程序、校準(zhǔn)程序、保養(yǎng)程序以及檢測(cè)程序等，熟悉評(píng)價(jià)方案。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格按照室內(nèi)質(zhì)量控制程序進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控，任一方法出現(xiàn)失控時(shí)應(yīng)重新測(cè)定，直到達(dá)到要求的樣本數(shù)為止。5.1.2實(shí)驗(yàn)程序 使用兩種方法每天測(cè)定8個(gè)樣本，每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)定2次，共測(cè)定5d。每種方法進(jìn)行樣本的重復(fù)測(cè)定中，指定第一次測(cè)定順序，按反向順序檢測(cè)第2次。在2h內(nèi)測(cè)定完畢，以確保分析物的穩(wěn)定。5.1.3實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步檢查：設(shè)定比較方法測(cè)定結(jié)果為X值，實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定結(jié)果為y值，若有n個(gè)標(biāo)本，則有2n個(gè)X和y對(duì)的結(jié)果。檢查每

19、一方法內(nèi)雙份測(cè)定有無(wú)離群值，以4倍的各方法差值的均值為判斷限，所有差值都在限值內(nèi)說(shuō)明雙份測(cè)定結(jié)果符合要求。作圖了解線(xiàn)性關(guān)系和觀(guān)察有無(wú)明顯離群點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)結(jié)果點(diǎn)于X、y坐標(biāo)紙上，圖中標(biāo)出斜率為1通過(guò)零點(diǎn)的直線(xiàn)，另外作(Y-X)、X關(guān)系圖，繪出斜率為O、截距為1的直線(xiàn)，看圖了解實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否具有良好線(xiàn)性關(guān)系，檢查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)有無(wú)明顯離群點(diǎn)。若有，應(yīng)對(duì)X、y配對(duì)值作離群值計(jì)算。以4倍的平均差值為判斷限，所有差值都不應(yīng)超出限值。檢驗(yàn)標(biāo)本內(nèi)分析物含量分布是否適當(dāng)：用相關(guān)系數(shù)r檢驗(yàn)X取值范圍是否適當(dāng)，一般要求rO975或rO95，認(rèn)為X范圍是合適的。若rO975，應(yīng)繼續(xù)做實(shí)驗(yàn)，擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍

20、。線(xiàn)性回歸統(tǒng)計(jì)：以回歸式r=bX+a_口表示2n對(duì)數(shù)據(jù)的直線(xiàn)趨勢(shì)，b和a分別表示兩種方法間的比例誤差和恒定誤差。根據(jù)臨床使用要求，可在各個(gè)臨床決定水平濃度Xc處，了解y方法引入后相對(duì)于X方法的系統(tǒng)誤差(SE)。514臨床可接受性能判斷 與美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)(CLIA8 8)的性能要求比較，以其允許誤差的12作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，由方法學(xué)比較評(píng)估的系統(tǒng)誤差(姬)或預(yù)期偏倚小于允許誤差的12，認(rèn)為不同檢測(cè)系統(tǒng)間的系統(tǒng)誤差或相對(duì)偏差屬臨床可接受水平。新檢測(cè)系統(tǒng)或新方法可應(yīng)用于臨床。 52參照美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)于200 1年出版的EP 1 5A文件用戶(hù)對(duì)精密度和準(zhǔn)確度

21、性能的核實(shí)試驗(yàn)批準(zhǔn)指南進(jìn)行兩種方法間病人標(biāo)本結(jié)果的比較，對(duì)新檢測(cè)系統(tǒng)正確度性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。 521基本要求和注意事項(xiàng) 5211樣本準(zhǔn)備：按照操作規(guī)程收集20份患者標(biāo)本，其濃度應(yīng)分布整個(gè)線(xiàn)性范圍，不使用超出線(xiàn)性范圍的標(biāo)本。每個(gè)標(biāo)本應(yīng)儲(chǔ)存收集足夠的標(biāo)本量。5212比較方法的選擇、人員、操作等方面的注意事項(xiàng)同5.211。 522實(shí)驗(yàn)程序：實(shí)驗(yàn)方法和比較方法都有質(zhì)控程序控制的情況下，用二種分析方法分別檢測(cè)這20份標(biāo)本?？稍谕惶鞕z測(cè)完20個(gè)標(biāo)本；也可持續(xù)3至4d，每日測(cè)定57個(gè)標(biāo)本。后者得到的結(jié)論較前者可靠。每種分析方法檢測(cè)都應(yīng)在4h內(nèi)完成，如果是儲(chǔ)存的標(biāo)本應(yīng)在復(fù)融后12h內(nèi)檢測(cè)完畢。 523實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處

22、理與統(tǒng)計(jì)分析 5231計(jì)算每個(gè)標(biāo)本兩種方法間結(jié)果的差值 偏偏 (bi)=(試驗(yàn)方法結(jié)果i比較方法結(jié)果i)偏偏的百分比(bi)=1 00 X(試驗(yàn)方法結(jié)果i比較方法結(jié)果i)比較方法結(jié)果i。 5232畫(huà)出每個(gè)標(biāo)本兩種方法結(jié)果的偏倚或百分比偏倚圖，水平軸代表比較方法，垂直軸代表偏倚或百分比偏倚。觀(guān)察偏倚圖，檢查兩種方法間在檢測(cè)的濃度范圍內(nèi)標(biāo)本結(jié)果差異是否相對(duì)一致，如果一致則可用下面的平均偏倚去與廠(chǎng)家聲明比較；如果沒(méi)有一致性，將數(shù)據(jù)分割成幾部分，每部分?jǐn)?shù)據(jù)獨(dú)立計(jì)算平均偏倚。 5233計(jì)算兩種方法間的平均偏偏5234計(jì)算偏倚或百分比偏倚的標(biāo)準(zhǔn)差 5235估計(jì)的偏倚與廠(chǎng)家聲明的偏倚比較：如果偏倚或百分比偏

23、倚小于廠(chǎng)家聲明的偏倚或百分比偏倚，則已核實(shí)了偏倚與廠(chǎng)家聲明的偏倚一致。如果大于廠(chǎng)家聲明的偏倚或百分比偏倚，有可能這種差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可用下面步驟進(jìn)行差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)：假設(shè)一個(gè)錯(cuò)誤拒絕率為a，通常選a=1或a=5；確定tx9n一1的值，n代表病人標(biāo)本的數(shù)量；計(jì)算偏倚驗(yàn)證值：其中P是廠(chǎng)家聲明的偏倚值。如果估計(jì)的偏倚萬(wàn)小于驗(yàn)證值，就核實(shí)偏倚與廠(chǎng)家聲明偏倚一致。 如果使用百分比偏倚，計(jì)算百分比偏倚驗(yàn)證值：其中是廠(chǎng)家聲明的百分比偏倚值。如果估計(jì)的百分比偏倚小于驗(yàn)證值，就核實(shí)百分比偏倚與廠(chǎng)家聲明百分比偏倚一致。 53參照EP 1 5A文件對(duì)定值參考物質(zhì)檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的正確度性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。 531定值參

24、考物來(lái)源：定值參考物可以有多個(gè)來(lái)源，可以是已用參考方法或決定性方法定值的新鮮冰凍人血清或其他一些未摻入成分的人物質(zhì)，可從美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局(NIST)和CAP獲得；從能力比對(duì)試驗(yàn)中獲得的參考物；廠(chǎng)家提供的正確度確認(rèn)物或質(zhì)控物；實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)評(píng)物；由第三方提供的已用一些不同方法定值的物質(zhì)。532通過(guò)檢測(cè)參考物進(jìn)行正確度核實(shí)的程序：選擇適合評(píng)價(jià)的檢驗(yàn)方法最易獲得的材料。至少要求測(cè)定2個(gè)水平，選擇的水平應(yīng)能代表該方法的最低和最高測(cè)量范圍。實(shí)驗(yàn)前充分混勻分析物，用實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)測(cè)定2次，將檢測(cè)結(jié)果與說(shuō)明書(shū)標(biāo)示值或靶值進(jìn)行比對(duì)，計(jì)算偏倚，以CLIA，8 8的12作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，偏倚小于CLIA8 8的12，認(rèn)為新

25、檢測(cè)系統(tǒng)的偏倚屬臨床可接受水平，新檢測(cè)系統(tǒng)或新方法可應(yīng)用于臨床。 6質(zhì)量記錄表JYZXSH-TAB-04 1市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心正確度分析報(bào)告表(定值參考物)。JYZX-SH-TAB一042市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心正確度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表。 JYZX-SH-TAB-043市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心簡(jiǎn)易正確度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表。 7參考文獻(xiàn) 1楊有業(yè)，張秀明臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)第2版北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：1 1 81 4 12馮仁豐臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制技術(shù)基礎(chǔ)第2版上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2007：185-21 1 3NCCLS EP9-A2 Method comparison and bia

26、s estimation using patient samples；approvedguideline-second edition，20024NCCLS .EPl 5-A User demonstration of performance for precision and accuracy；approved guidelineWayne，PA：NCCLS，2001 第四節(jié) 分析測(cè)量范圍性能評(píng)價(jià)程序 文件編號(hào)：版本號(hào)： 1目的 對(duì)新購(gòu)置的檢測(cè)系統(tǒng)在正式用于檢測(cè)標(biāo)本前對(duì)其分析測(cè)量范圍進(jìn)行評(píng)估；確定該方法的分析測(cè)量范圍，以保證臨床檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2范圍 適用于生化科定量檢驗(yàn)項(xiàng)目的各類(lèi)檢測(cè)系統(tǒng)

27、。 3職責(zé) 技術(shù)負(fù)責(zé)人和生化科主任共同負(fù)責(zé)檢測(cè)系統(tǒng)分析測(cè)量范圍性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法的設(shè)計(jì)，生化科主任負(fù)責(zé)組織進(jìn)行本組檢測(cè)系統(tǒng)的分析測(cè)量范圍性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。 4定義和術(shù)語(yǔ)41分析測(cè)量范圍(analytical measurement range，AMR)指患者樣本未經(jīng)任何處理，由檢測(cè)系統(tǒng)直接測(cè)量得到的可靠結(jié)果范圍，在此范圍內(nèi)一系列不同樣本分析物的測(cè)量值與其實(shí)際濃度呈線(xiàn)性比例關(guān)系。42臨床可報(bào)告范圍(clinical reportable range，CRR)指定量檢驗(yàn)項(xiàng)目向臨床能報(bào)告的檢測(cè)范圍，患者樣本可經(jīng)稀釋、濃縮或其他預(yù)處理。多數(shù)定量檢測(cè)項(xiàng)目的CRR比AMR窄，可通過(guò)最大濃縮度來(lái)確定CRR。對(duì)于C

28、RR大于A(yíng)MR的檢驗(yàn)項(xiàng)目需進(jìn)行最大稀釋度驗(yàn)證試驗(yàn)，并結(jié)合臨床決定水平和功能靈敏度來(lái)共同確定該項(xiàng)目的CRR。43線(xiàn)性范圍(1inear range)指覆蓋檢測(cè)系統(tǒng)的可接受線(xiàn)性關(guān)系的范圍，非線(xiàn)性誤差小于設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。44線(xiàn)性(1inearity) 檢測(cè)樣本時(shí)，在一定范圍內(nèi)可以直接按比例關(guān)系得出分析物含量的能力。 5程序 51參照平均斜率法進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)分析測(cè)量范圍性能評(píng)價(jià)。511基本要求和注意事項(xiàng)5111實(shí)驗(yàn)前詳細(xì)查閱評(píng)價(jià)項(xiàng)目的試劑說(shuō)明書(shū)，記錄所有評(píng)價(jià)項(xiàng)目的分析測(cè)量范圍以便于選擇合適濃度的樣本。 5112進(jìn)行分析測(cè)量范圍實(shí)驗(yàn)的樣品必須和真實(shí)標(biāo)本盡可能相似，和真實(shí)標(biāo)本具有相同的基質(zhì)狀態(tài)。盡量收集5個(gè)或以上

29、系列濃度的實(shí)驗(yàn)樣品，濃度范圍遍布整個(gè)預(yù)期分析測(cè)量范圍，最高濃度的樣品應(yīng)達(dá)到分析測(cè)量范圍的上限，各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)含分析物濃度呈等比例關(guān)系。 5113可通過(guò)在低濃度水平的病人樣本中添加分析物儲(chǔ)存液的方法制備高濃度水平的試驗(yàn)樣本。加入量原則上少于總體積10%。 5114低濃度樣本盡量直接從患者樣本中收集，若難以收集到低限樣品，可收集高值樣品，用生理鹽水作系列不同程度稀釋?zhuān)纬上盗性u(píng)價(jià)樣品。5115在正式實(shí)驗(yàn)前操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程序、校準(zhǔn)程序、保養(yǎng)程序以及檢測(cè)程序等，熟悉評(píng)價(jià)方案。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格按照室內(nèi)質(zhì)量控制程序進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控，在質(zhì)控在控的情況下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程注意檢測(cè)系統(tǒng)或方法的批間重現(xiàn)性

30、。按不同的測(cè)量順序完成檢測(cè)。512實(shí)驗(yàn)程序：在臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)手機(jī)高值和低集，按1 L、O8L+O2H、O6L+O4H、O4L+O6H、O2L+O8H、1H等不同稀釋濃度形成系列濃度血清，對(duì)系列血清在檢測(cè)系統(tǒng)上檢測(cè)，每個(gè)樣本按隨機(jī)方式重復(fù)測(cè)定4次。在一個(gè)分析內(nèi)完成。513實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析5131初步的數(shù)據(jù)檢查和離群值檢查：檢查數(shù)據(jù)有無(wú)明顯大的差異，如果確定為分析或技術(shù)性問(wèn)題，糾正后整批數(shù)據(jù)重做；若無(wú)明顯大的差異，目視每組數(shù)據(jù)內(nèi)有無(wú)離群值。一個(gè)離群值可以從數(shù)據(jù)中刪除。如果發(fā)現(xiàn)兩個(gè)或以上不可解釋的離群值，就應(yīng)懷疑檢測(cè)系統(tǒng)的性能。查找問(wèn)題原因，必要時(shí)請(qǐng)求生產(chǎn)廠(chǎng)家協(xié)助。觀(guān)察每個(gè)濃度水平的各響應(yīng)量間的差異，

31、若為線(xiàn)性，各組的斜率大致相等。斜率上的 增加或降低是非線(xiàn)性的指示。 5132在坐標(biāo)紙上，以x表示各實(shí)驗(yàn)樣品的預(yù)期值，以y表示各實(shí)驗(yàn)樣品的實(shí)測(cè)值，將所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖上。513.3若所有實(shí)驗(yàn)點(diǎn)在坐標(biāo)紙呈明顯直線(xiàn)趨勢(shì)，用直線(xiàn)回歸統(tǒng)計(jì)對(duì)數(shù)據(jù)作處理，得直線(xiàn)回歸。若b很接近1，a近于O，則可直接判斷該測(cè)定方法分析測(cè)量范圍在實(shí)驗(yàn)已涉及濃度。5134若b不接近1，以較大；如6103，有可能是b和1之間有統(tǒng)計(jì)上顯著性差異。重新對(duì)所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，是高濃度處還是低濃度處的實(shí)測(cè)值和預(yù)期值之間有較大偏倚。嘗試舍去某組數(shù)據(jù)，另作回歸統(tǒng)計(jì)。若縮小分析范圍后回歸式有明顯改善b近于1，a于O，則縮小的分析范圍是真實(shí)的分析測(cè)

32、量范圍。52參照CLSI EP 6-A文件進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)分析測(cè)量范圍性能評(píng)價(jià)。521基本要求和注意事項(xiàng) 5211人員準(zhǔn)備：在正式實(shí)驗(yàn)前操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程序、校準(zhǔn)程序、保養(yǎng)程序以及檢測(cè)程序等，熟悉評(píng)價(jià)方案，正確收集標(biāo)本。 5212實(shí)驗(yàn)時(shí)間：全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)盡可能在較短的時(shí)間內(nèi)收集，如可能，單個(gè)分析試驗(yàn)最好在1 d內(nèi)完成。5213實(shí)驗(yàn)樣本：實(shí)驗(yàn)樣本應(yīng)與臨床測(cè)試所用的樣本類(lèi)型相類(lèi)似，樣本要有足夠量，所用樣本沒(méi)有使實(shí)驗(yàn)無(wú)效的干擾，全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)盡可能在較短的時(shí)間內(nèi)收集；5個(gè)濃度是可靠確定線(xiàn)性范圍和進(jìn)行多項(xiàng)回歸的最小數(shù)，推薦用高值和低值濃度的樣本按比例精確配成等間距的不同濃度樣本，一般情況下，用廠(chǎng)家推

33、薦的稀釋液對(duì)病人樣本進(jìn)行稀釋。鹽水由于基質(zhì)效應(yīng)可能會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果，此時(shí)稀釋液盡量用最小量；評(píng)價(jià)分析測(cè)量范圍時(shí)，要包括下 522實(shí)驗(yàn)程序：在臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)收集高值和低值的病人樣本血清，按1 L、O8L+O2H、O6L+O4H、O4L+O6H、O2L+O8H、1H等不同稀釋濃度形成系列濃度血清，對(duì)系列血清在檢測(cè)系統(tǒng)上檢測(cè)，每個(gè)樣本按隨機(jī)方式重復(fù)測(cè)定2次。 523實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析5231依照系列濃度血清的配制稀釋關(guān)系計(jì)算出各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)含分析物的濃度，為系列濃度樣品的預(yù)期值。按實(shí)驗(yàn)要求對(duì)系列濃度血清進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，計(jì)算均值，此值為系列濃度樣品的實(shí)測(cè)值，和預(yù)期值形成6對(duì)預(yù)期值、實(shí)測(cè)值。 5232確定線(xiàn)性范

34、圍：借助Excel、SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行二元一次、二元二次、二元三次的回歸統(tǒng)計(jì)。各個(gè)多項(xiàng)式回歸方程表達(dá)式及自由度見(jiàn)表6-4-1。一次多項(xiàng)式模式為直線(xiàn)，這是判斷分析方法是否為線(xiàn)性的最佳模CHAPTER 檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能評(píng)價(jià)程序式。二次多項(xiàng)式模式為拋物反應(yīng)曲線(xiàn)，有曲線(xiàn)上升或下降二種。三次多項(xiàng)式模式為“S形反應(yīng)曲線(xiàn)，在測(cè)量范圍的兩端呈非線(xiàn)性。 回歸系數(shù)用6f表示，在二項(xiàng)式中，62是非線(xiàn)性系數(shù)；在三次式中，62和易3是非線(xiàn)性系數(shù)。計(jì)算每個(gè)非線(xiàn)性系數(shù)的斜率求標(biāo)準(zhǔn)差SEi，然后進(jìn)行多檢驗(yàn)，以檢驗(yàn)非線(xiàn)性系數(shù)是否在統(tǒng)計(jì)學(xué)上是顯著的，即系數(shù)和O是否有顯著性差異。前2個(gè)系數(shù)60和6】不用分析，因?yàn)樗鼈?/p>

35、不反映非線(xiàn)性。對(duì)62和63的檢驗(yàn)為：自由度為是線(xiàn)性實(shí)驗(yàn)的樣品或濃度組數(shù)；尺是每個(gè)樣品重復(fù)檢測(cè)的次數(shù),Rdf是回歸分析時(shí)占用的自由度。計(jì)算出df值，查t值表的t值(雙側(cè)，a=O05)，如果沒(méi)有一個(gè)非線(xiàn)性系數(shù)b2和b3(pO05)，說(shuō)明數(shù)據(jù)是顯著的，存在線(xiàn)性關(guān)系。如果二次多項(xiàng)式模式中的62或三次多項(xiàng)式模式中的b2和b3中任一個(gè)和0比較有顯著差異(p005)，說(shuō)明該數(shù)據(jù)組存在非線(xiàn)性關(guān)系。5233非線(xiàn)性程度的判斷：當(dāng)檢測(cè)到數(shù)據(jù)組呈非線(xiàn)性時(shí)，需通過(guò)計(jì)算回歸標(biāo)準(zhǔn)誤(Syx)，確定最適的二次多項(xiàng)式或三次多項(xiàng)式模型。Syx是測(cè)量均值與模型對(duì)應(yīng)值的差值量度，因而Syx越小，說(shuō)明該模型越適合數(shù)據(jù)組。先通過(guò)以下公式

36、計(jì)算每一個(gè)濃度處的線(xiàn)性偏離(deviation from linearity，DL)：X的取值范圍從x1到x5，p(xi)為最適多項(xiàng)式回歸模型在xi處的值，因而DLi，為在每個(gè)不同濃度處二次多項(xiàng)式模型與一次多項(xiàng)式(線(xiàn)性)模型的差值，或三次多項(xiàng)式模型與一次多項(xiàng)式(線(xiàn)性)模型的差值，也即非線(xiàn)性模型與線(xiàn)性模型在每個(gè)濃度點(diǎn)的差值。DLi的單位應(yīng)與預(yù)先設(shè)定的目標(biāo)一致，以便進(jìn)行比較。 將每個(gè)濃度水平處的DLi與設(shè)定的誤差范圍比較，如果DLi小于預(yù)先設(shè)定誤差，即使檢測(cè)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的非線(xiàn)性，引入的誤差不超過(guò)臨床允許誤差，在臨床上可以接受。如果任二個(gè)點(diǎn)DLi超過(guò)設(shè)定目標(biāo)，則代表該點(diǎn)可能是非線(xiàn)性，應(yīng)試圖找到非線(xiàn)性的

37、原因(樣本準(zhǔn)備、干擾物質(zhì)、儀器校準(zhǔn)等)和觀(guān)察測(cè)量值與預(yù)期值散點(diǎn)圖，判斷非線(xiàn)性是在分析濃度范圍的兩端或是中間。若在兩端，嘗試舍去DL，最大值的濃度點(diǎn)，重新進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。5234實(shí)驗(yàn)隨機(jī)誤差對(duì)判斷的影響：線(xiàn)性評(píng)估應(yīng)考慮隨機(jī)誤差的影響，重復(fù)測(cè)量?jī)纱螘r(shí)，可以用以下公式計(jì)算雙份檢測(cè)值的差值(重復(fù)測(cè)量誤差)：巧l和12分別為重復(fù)結(jié)果的2個(gè)值。如果用到百分比值，則用CVr, L為樣本數(shù)，重復(fù)測(cè)量次數(shù)為2。5235簡(jiǎn)要步驟：實(shí)驗(yàn)室先設(shè)定的分析項(xiàng)目的重復(fù)性和線(xiàn)性的允許誤差范圍。根據(jù)公式計(jì)算重復(fù)測(cè)量誤差，若重復(fù)測(cè)量誤差小于設(shè)定的誤差目標(biāo)，不精密度符合要求。再對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多項(xiàng)式回歸分析處理，查f界值表，判斷b2、

38、b3的顯著性，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否呈線(xiàn)性。6質(zhì)量記錄表JYZXPF025一TAB一0 1 0市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心分析測(cè)量范圍性能評(píng)價(jià)分析表。7參考文獻(xiàn)1楊有業(yè)，張秀明臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)第2版北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：1 681 752馮仁豐臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制技術(shù)基礎(chǔ)第2版上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2007：138176 第五節(jié) 分析靈敏度性能評(píng)價(jià)程序文件編號(hào)：版本號(hào)： 1目的 規(guī)范檢測(cè)系統(tǒng)的分析靈敏度性能評(píng)價(jià)程序，對(duì)新購(gòu)置的檢測(cè)系統(tǒng)在正式用于檢測(cè)標(biāo)本前對(duì)其分析靈敏度或檢測(cè)限進(jìn)行確定。 2范圍 ， 適用于生化科在低值有明顯臨床意義的定量檢驗(yàn)項(xiàng)目的檢測(cè)系統(tǒng)。 3職責(zé) 技術(shù)負(fù)責(zé)人和生化科主任共同負(fù)

39、責(zé)檢測(cè)系統(tǒng)分析靈敏度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法的設(shè)計(jì)，生化科主任負(fù)責(zé)組織進(jìn)行本科檢測(cè)系統(tǒng)的分析靈敏度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。 4定義和術(shù)語(yǔ) 41檢鋇IJ低限(LLD) 指樣品單次檢測(cè)可以達(dá)到的非空白檢測(cè)響應(yīng)量對(duì)應(yīng)的分析物量。 42生物檢測(cè)限(BLD) 指某樣品單次檢測(cè)可能具有的最小響應(yīng)量剛大于LLD響應(yīng)量時(shí)，該樣品內(nèi)含有的分析物濃度。43功能靈敏度(FS)指檢測(cè)系統(tǒng)可定量報(bào)告分析物的最低濃度。 、44空白限(LOB) 指在規(guī)定的可能性條件下，空白樣品被觀(guān)察到的最大檢測(cè)結(jié)果。45檢出低值(LoD)指在規(guī)定的可能性條件下可以檢出的樣本中分析物的最小量。46定量檢測(cè)限(LoQ)指在規(guī)定的可接受精密度和正確度條件下，能定量檢出的

40、樣本中分析物的最小量。 5程序51檢測(cè)低限、生物檢測(cè)限和功能靈敏度評(píng)價(jià)511樣本準(zhǔn)備5111空白樣本的準(zhǔn)備：空白樣本是不含有分析物的樣本。理想的空白樣本應(yīng)具有和患者樣本相同的基質(zhì)，可使用術(shù)后已無(wú)某疾病的病人樣品。另外，常使用檢測(cè)系統(tǒng)的系列校準(zhǔn)品中的“零濃度校準(zhǔn)品或不含分析物的樣品專(zhuān)用稀釋液作為空白樣本。 5112檢測(cè)限樣本的準(zhǔn)備：用空白樣本加入分析物配制成幾份檢測(cè)限樣品。加入的分析物量應(yīng)是廠(chǎng)商說(shuō)明的檢測(cè)限濃度。檢測(cè)限樣品的濃度應(yīng)介于預(yù)期檢測(cè)限濃度l4倍的范圍內(nèi)。512實(shí)驗(yàn)程序 5121 1陂集空白樣本，一份空白樣本用作空白，其他用于制備檢測(cè)限樣本。將純化的分析物加入該空白樣本，并用空白樣本作系

41、列稀釋?zhuān)M成O(空白)、025、050、1O、20、40、80等濃度的系列檢測(cè)限樣品。 5122空白樣本批內(nèi)重復(fù)測(cè)定1 2次；系列檢測(cè)限樣品天間重復(fù)測(cè)定1 2次。 513實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 5131求檢測(cè)低限(LLD)：計(jì)算空白樣品的吸光度均值么空白和標(biāo)準(zhǔn)差s空白。采用997的可能性來(lái)估計(jì)檢測(cè)低限?？瞻讟悠肺舛染导?倍標(biāo)準(zhǔn)差即為L(zhǎng)LD。 5132求生物檢測(cè)限(BLD)：生物檢測(cè)限(BLD)的計(jì)算公式為： 95的可能性BLD=LLD+2S檢測(cè)限樣品 99的可能性BLD=LLD+3S檢測(cè)限樣品 5133功能靈敏度(Fs)：以日間不精密度(cy)為20時(shí)對(duì)應(yīng)檢測(cè)限樣品具有的平均濃度即為FS。 52

42、參照CLSI EP一1 7A文件進(jìn)行靈敏度性能評(píng)價(jià)。 521實(shí)驗(yàn)要求 ，5211整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)處于穩(wěn)定的工作狀態(tài)，無(wú)試劑批號(hào)的改變和校準(zhǔn)的改變，操作人員相對(duì)固定。 5212確定必要的實(shí)驗(yàn)樣品數(shù)和重復(fù)檢測(cè)數(shù)。綜合考慮精密度和費(fèi)用，建議確定LoD的最小檢測(cè)數(shù)為60(包括空白樣品和低濃度樣品)，在驗(yàn)證廠(chǎng)商的LoB和LoD H寸，應(yīng)在LoB處和聲明水平處的樣品至少進(jìn)行20次檢測(cè)。 5213空白和低濃度樣品的準(zhǔn)備同本節(jié)511。 522實(shí)驗(yàn)程序 對(duì)一個(gè)或數(shù)個(gè)空白樣本進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，測(cè)定次數(shù)為60次；對(duì)6個(gè)低濃度樣品進(jìn)行天間重復(fù)測(cè)定，樣品的濃度范圍在LoB到4倍的LoB之間，共1 0d。記錄每次的濃度

43、值。 523實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 5231 LoB的確定程序，查看空白值實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，若實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，使用參數(shù)程序估計(jì)LoB，計(jì)算公式如下： LoB=,uB+1645 crb 式中，伽和印分別為空白樣品檢測(cè)值的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。 若空白值呈非正態(tài)分布，此時(shí)用非參數(shù)方法估計(jì)第95百分位數(shù)的值，即將數(shù)據(jù)由小到大排列，依據(jù)大小排列的NB值，估計(jì)第95百分位數(shù)所在位置為NB(951 00) +05的值?？瞻追植枷拗档陌俜治粩?shù)(PctB)，即空白分布尾部去掉百分口后的臨界值被稱(chēng)為空白限(LoB)。計(jì)算公式如下： LoB=PctB(100一a)。 5232 LoD的確定程序：若低水平樣品檢測(cè)結(jié)果呈正態(tài)分布，首先

44、計(jì)算這些低水平精密度的綜合估計(jì)值，即多個(gè)低濃度樣品的綜合標(biāo)準(zhǔn)差(SDs)，計(jì)算公式如下： 式中 ，代表不同低濃度樣品的自由度(依此類(lèi)推)LoD暫定=LoB+SDs 式中，是標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布第95百分位數(shù)值的校正因子=164511(4f 式中，f是估計(jì)綜合標(biāo)準(zhǔn)差SDs的自由度。 若低水平樣品檢測(cè)結(jié)果不呈正態(tài)分布，或不能轉(zhuǎn)化為正態(tài)分布，按非參數(shù)方法估計(jì)LoD，計(jì)算公式如下： LoD=LoB+D 式中，D是低濃度樣品測(cè)定中位數(shù)的值和低濃度樣品的第5個(gè)百分位數(shù)值的間距。5233 LoQ的確定程序，LoQ是指能可靠檢出分析物的最低實(shí)際濃度，并在該濃度下的總誤差符合準(zhǔn)確度要求(臨床應(yīng)用可接受)，室驗(yàn)室可根據(jù)實(shí)

45、驗(yàn)室的需求、室間質(zhì)評(píng)結(jié)果和廠(chǎng)商的聲明白行設(shè)定總誤差目標(biāo)。一個(gè)樣本重復(fù)測(cè)量的均值和可接受的參考值之間的差異是偏差的估計(jì)值；在同一水平使用多個(gè)樣本，差異的均數(shù)是正確度的估計(jì)值；多個(gè)樣本的混合標(biāo)準(zhǔn)差(SDs)是精密度的估計(jì)值。綜合這些估計(jì)值即可獲得該水平下總誤差(TE)的估計(jì)值：TE=偏差+2SDs，如果這個(gè)估計(jì)值小于設(shè)定的總誤差目標(biāo)，則LoD=LoQ。6質(zhì)量記錄表 JYZX-PF0 1 5一TAB008 市人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心分析靈敏度分析報(bào)告表。7參考文獻(xiàn) 1】楊有業(yè)，張秀明臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)第2版北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：1 421 67 2】馮仁豐臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制技術(shù)基礎(chǔ)第2版上海：上

46、海科學(xué)技術(shù)出版社，2007：11 1137 3CLSI EP-1 7A.Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation；ApprovedGuideline .2004:1-39 第六節(jié) 生物參考區(qū)間的確定和驗(yàn)證程序文件編號(hào)：版本號(hào)： 1目的規(guī)范各生化檢測(cè)項(xiàng)目生物參考區(qū)間的確定和驗(yàn)證程序，以滿(mǎn)足醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理和實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的基本要求。 2適用范圍 本程序適用于生化檢測(cè)項(xiàng)目生物參考值區(qū)間的確定和驗(yàn)證。 3職責(zé) 31生化科主任負(fù)責(zé)對(duì)本科各檢測(cè)項(xiàng)目生物參考值區(qū)間的確定和驗(yàn)證。 32檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心

47、主任批準(zhǔn)評(píng)審后的生物參考區(qū)間。 4定義和術(shù)語(yǔ) 41參考個(gè)體(reference individual) 依據(jù)臨床對(duì)某個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的使用要求確定選擇原則，以此選擇檢測(cè)參考值的個(gè)體。確定參考個(gè)體的健康狀態(tài)非常重要。 42參考總體(reference population) 所有參考個(gè)體的總和。注意：參考總體中的參考個(gè)體數(shù)量通常未知，因此它是一個(gè)假設(shè)的實(shí)體。43參考抽樣組(reference sample group)能夠代表參考總體的足夠數(shù)量的個(gè)體。44參考值(reference value)通過(guò)對(duì)參考個(gè)體特殊類(lèi)型的量的觀(guān)察或測(cè)量而獲得的值。45參考范圍(reference distribution

48、)所有參考抽樣組的各個(gè)參考值的集合即為參考范圍。46參考限(reference limit)依據(jù)所有參考值的分布特性以及臨床使用要求，選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行歸納分析后確定的限值，包括參考上限和參考下限。參考值的一部分小于或等于參考下限，一部分大于或等于參考上限。47參考區(qū)間(reference interval)介于參考上限和參考下限之間的值，包括參考上限和參考下限。在某些情況下可能只有一個(gè)參考上限，若該限為“X，則相應(yīng)的參考區(qū)間為OX。48觀(guān)測(cè)值(observed value) 即患者檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)觀(guān)察或測(cè)量受試者某樣本而獲得的值。臨床可用該值與參考值、參考范圍、參考限或參考區(qū)間相比較。上述

49、8個(gè)術(shù)語(yǔ)之間的關(guān)系，見(jiàn)圖6-6-1。圖6-6-1 各術(shù)語(yǔ)之間的關(guān)系 5程序 51實(shí)驗(yàn)室在開(kāi)展新的檢驗(yàn)項(xiàng)目、改變現(xiàn)用的檢測(cè)系統(tǒng)和在工作過(guò)程中發(fā)現(xiàn)某一特定參考區(qū)間對(duì)參考人群不適用時(shí)都應(yīng)重新對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目的生物參考值區(qū)間重新進(jìn)行確定或驗(yàn)證。 52實(shí)驗(yàn)室應(yīng)為檢測(cè)的所有檢驗(yàn)項(xiàng)目提供可靠的生物參考值區(qū)間。53生物參考區(qū)間的設(shè)立可直接采用國(guó)家權(quán)威機(jī)構(gòu)或權(quán)威刊物發(fā)表的適合實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間；也可白行建立生物參考區(qū)間或直接引用試劑供應(yīng)商提供的生物參考區(qū)間。但這種情況下需對(duì)引用的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證確認(rèn)。 54生物參考值區(qū)間的確定程序 參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)頒布的臨床實(shí)驗(yàn)室如何定義和確定參考區(qū)間

50、批準(zhǔn)指南即l CLSI C28-A2文件進(jìn)行定量檢驗(yàn)項(xiàng)目生物參考區(qū)間的確定。具體步驟如下： 541查閱文獻(xiàn)，列出該項(xiàng)目的生物變異和分析干擾因素，供選擇參考個(gè)體時(shí)參考。 542建立參考個(gè)體的選擇、排除和分組標(biāo)準(zhǔn)，并設(shè)計(jì)一個(gè)合適的調(diào)查表，該調(diào)查表能在潛在的參考個(gè)體中顯示這些標(biāo)準(zhǔn)。 543為參考區(qū)間研究的參與者編制書(shū)面知情同意書(shū)，參考個(gè)體填寫(xiě)調(diào)查表。 544根據(jù)調(diào)查表和其他健康評(píng)價(jià)結(jié)果對(duì)參考個(gè)體進(jìn)行分類(lèi)。5.4.5依據(jù)排除標(biāo)準(zhǔn)從參考樣品組中排除不符合要求的候選對(duì)象。 546設(shè)定可信限，確定合適的參考個(gè)體數(shù)。 547將樣品采集前和采集時(shí)對(duì)受檢者的要求詳細(xì)告訴各個(gè)受檢參考個(gè)體，的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。 548正

51、確收集和處理標(biāo)本，處理方式須與為病人進(jìn)行的常規(guī)操作一致。 549在良好的控制條件下，用事先指定的方法對(duì)處理好的樣品進(jìn)行檢測(cè)，獲得參考結(jié)果。 541 0檢查參考值數(shù)據(jù)，繪制直方圖，了解數(shù)據(jù)的分布特征。 5411檢查有無(wú)明顯的誤差或離群值，若有，按事先約定的原則剔除不符合要求的數(shù)據(jù)，再補(bǔ)上必需的數(shù)據(jù)。 541 2分析參考值，如選擇一種評(píng)估方法，估計(jì)參考限和參考區(qū)間(如果合適，可對(duì)參考區(qū)間進(jìn)行分組)。 541 3記錄以上所有步驟和程序，并歸檔保存。 55參考個(gè)體的選擇 551建立一個(gè)健康標(biāo)準(zhǔn)，以便對(duì)納入的參考個(gè)體所處的健康狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估，編寫(xiě)評(píng)估調(diào)查表，根據(jù)健康標(biāo)準(zhǔn)排除非健康者。 552在選擇參考個(gè)體

52、時(shí)，還應(yīng)考慮是否需要分組。最?？紤]的是按年齡和性別分組。此外，晝夜變化、飲食習(xí)慣、運(yùn)動(dòng)、空腹或非空腹、地區(qū)差異等因素也應(yīng)充分考慮。553在確定參考個(gè)體對(duì)象時(shí)不要集中于青年人，應(yīng)盡可能選擇與使用該項(xiàng)目的臨床病人分布組成相近。 56分析前和分析中需要考慮的因素 561分析前受試者的準(zhǔn)備，參考個(gè)體的選擇必須嚴(yán)格控制許多因素，受試者準(zhǔn)備不充分或偏離標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確或數(shù)據(jù)的偏離。做好受檢參考個(gè)體采樣前的準(zhǔn)備工作，制定出采樣前對(duì)受檢者的具體要求。并對(duì)受檢參考個(gè)體事前做解釋?zhuān)笥枰耘浜稀?62樣本的采集、處理和儲(chǔ)存5621血液標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)編制臨床標(biāo)本采集手冊(cè)，正確指導(dǎo)臨床進(jìn)行樣本采集、處理和儲(chǔ)存，以便臨床醫(yī)師能適當(dāng)?shù)乩脜⒖紖^(qū)間合理解釋檢驗(yàn)結(jié)果。5622排泄物和分泌物：如果采集的標(biāo)本是來(lái)自血液之外的其他液體，在臨床標(biāo)本采集手冊(cè)中同樣要制定一個(gè)指南來(lái)指導(dǎo)這些標(biāo)本的收集、運(yùn)輸和處理。5623溫度：按要求在特定的溫度條件下(如37，室溫或冰凍)收集、處理和儲(chǔ)存樣品