儀器分析實(shí)驗(yàn).doc

1、實(shí)驗(yàn)一 乙酸的電位滴定分析及離解常數(shù)的測定一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?  通過醋酸的電位滴定，掌握電位滴定的基本操作和滴定終點(diǎn)的計(jì)算方法。2  學(xué)習(xí)測定弱酸常數(shù)的原理和方法，鞏固弱酸離解平衡的基本概念。二、 實(shí)驗(yàn)原理電位滴定法是在滴定過程中根據(jù)指示電位和參比電極的電位差或溶液的pH值的突躍來確定終點(diǎn)的方法。在酸堿電位滴定過程中，隨著滴定劑的不斷加入，被測物與滴定劑發(fā)生反應(yīng)，溶液pH值不斷變化，就能確定滴定終點(diǎn)。滴定過程中，每加一次滴定劑，測一次pH值，在接近化學(xué)計(jì)量點(diǎn)時(shí)，每次滴定劑加入量要小到0.10mL，滴定到超過化學(xué)計(jì)量點(diǎn)為止。這樣就得到一系列滴定劑用量V和相應(yīng)的pH值數(shù)據(jù)。常用的

2、確定滴定終點(diǎn)的方法有以下幾種。（1）繪pHV曲線法 以滴定劑用量V為橫坐標(biāo)，以pH值為縱坐標(biāo)，繪制pHV曲線。作兩條與滴定曲線相切的45°傾斜的直線，等份線與直線的交點(diǎn)即為滴定終點(diǎn)，如圖3-10（a）所示。（2）繪pH/VV曲線法 pH/V代表pH的變化值一次微商與對應(yīng)的加入滴定劑體積的增量（V）的比。繪制pH/VV曲線的最高點(diǎn)即為滴定終點(diǎn)圖3-10(b)。（3）二級微商法 繪制（pH/）V曲線。（pH/V）V曲線上一個最高點(diǎn)，這個最高點(diǎn)下即是pH /等于零的時(shí)候，這就是滴定終點(diǎn)法。該法也可不經(jīng)繪圖而直接由內(nèi)插法確定滴定終點(diǎn)圖3-10（c）。確定滴定體積以后，從pHV曲線上查出HAc

3、被中和一半時(shí)（1/2Ve）的pH值。此時(shí)，pH=pKa,從而計(jì)算出Ka。醋酸在水溶液中電離如下：其離解常數(shù)為當(dāng)醋酸被中和了一半時(shí)，溶液中：Ac-=HAc，根據(jù)以上平衡式，此時(shí)Ka=H+，即pKa=pH。因此，pHV圖中Ve所處的pH值即為pKa，從而可求出醋酸的酸常數(shù)Ka。三、 儀器和試劑儀器：pHS-3c型酸度計(jì)，電磁攪拌器，pH復(fù)合電極，10mL半微量堿式滴定管，100mL小燒杯，10.00mL移液管，100mL容量瓶。試劑：0.1mol/LHAc，0.1000mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液，pH=4.00（25）和pH=6.86（25）的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液。四、 實(shí)驗(yàn)步驟1 打開酸度計(jì)電

4、源開關(guān)，預(yù)熱30min。接好復(fù)合玻璃電極。2用pH=6.86（25）和pH=4.00(25)的緩沖溶液將pHs-3C型酸度計(jì)進(jìn)行兩點(diǎn)定位。3 粗測： 準(zhǔn)確吸取醋酸試液10.00mL于100mL小燒杯中，再加水約20mL。放入攪拌磁子，浸入pH復(fù)合電極。開啟電磁攪拌器（注意磁子不能碰到電極），用0.1000mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，1mL讀數(shù)一次，待到超過化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，初步確定滴定終點(diǎn)。3. 細(xì)測： 同上，準(zhǔn)確吸取醋酸試液10.00mL于100mL小燒杯中，再加水20.00mL。放入攪拌磁子，浸入pH復(fù)合電極和甘汞電極。開啟電磁攪拌器，用0.1000mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)

5、行滴定，滴定開始時(shí)每點(diǎn)隔1mL讀數(shù)一次，在Vep處和化學(xué)計(jì)量點(diǎn)附近時(shí)間隔0.10mL讀數(shù)一次，記錄每個點(diǎn)對應(yīng)的體積和pH值。4  數(shù)據(jù)處理（1）      根據(jù)記錄的體積和pH值數(shù)據(jù)，計(jì)算各點(diǎn)對應(yīng)的V和pH值     （2） 繪制pHV和（pH/V）V曲線，分別確定滴定終Vep。    （4）二級微商法由內(nèi)插法確定終點(diǎn)Vep。（5）   計(jì)算原始試液中醋酸的濃度，以g.L-1 表示。（6） 

6、60;     在pHV曲線上查出體積相當(dāng)運(yùn)Vep的pH值，即為HAc的電離常數(shù)pKa,并與文獻(xiàn)值比較（=1.76×），分析產(chǎn)生誤差的原因。（5）           pH，V，pHV,pH/可計(jì)算或編程處理。五、 注意事項(xiàng)1  pH復(fù)合電極在使用前必須在KCl溶液中浸泡活化24h，電極膜很薄易碎，使用時(shí)十分小心。2 切勿把攪拌磁子連同廢液一起倒掉。六、 思考與討論1  用電位滴定法確定終點(diǎn)與指示劑法相比有何優(yōu)缺點(diǎn)？

7、2  當(dāng)醋酸完全被氫氧化鈉中和時(shí)，反應(yīng)終點(diǎn)的pH值是否等于7？為什么？實(shí)驗(yàn)二 啤酒總酸的測定一、 目的要求：1、了解電位滴定的特點(diǎn)及應(yīng)用范圍2、掌握啤酒總酸的測定方法二、 實(shí)驗(yàn)原理：啤酒中含有各種酸類200種以上，這些酸及其鹽類物質(zhì)控制著啤酒的pH值和總酸的含量。(總酸度：所有酸性成分的總量，用每100mL酒樣所消耗的NaOH mmol數(shù)來表示。)啤酒總酸的檢驗(yàn)和控制是十分重要的?！盁o酸不成酒”，啤酒中含適量的可滴定總酸，能賦予啤酒以柔和清爽的口感；但總量過高或聞起來有明顯的酸味也是不行的，它是啤酒可能發(fā)生了酸敗的一個明顯信號。國標(biāo)規(guī)定啤酒總酸度應(yīng)2.6mmol/100mL酒樣，在實(shí)

8、際生產(chǎn)中則控制在2.0mmol/100mL酒樣。本實(shí)驗(yàn)利用酸堿中和原理，以NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定啤酒樣品中的總酸。但因?yàn)槠【剖呛姿猁}的弱酸性溶液，有較強(qiáng)的緩沖能力，所以在化學(xué)計(jì)量點(diǎn)處沒有明顯的突越（如圖所示），用指示劑指示的話不能看到顏色的明顯變化?？梢杂胮H計(jì)在滴定過程中隨時(shí)測定溶液的pH值至pH=9時(shí)即為滴定終點(diǎn)。即使啤酒顏色較深也不妨礙滴定。圖 3 NaOH滴定啤酒總酸滴定曲線三、 儀器與試劑：1、儀器 pHS-3C型酸度計(jì)、pH復(fù)合電極、堿式滴定管、磁力攪拌器2、試劑 濃度大約為0.1mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液 市售啤酒四、 實(shí)驗(yàn)步驟：1、酸度計(jì)的調(diào)試 將酸度計(jì)預(yù)熱30min。將p

9、H=6.86(25時(shí))的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液置于塑料燒杯中，放入攪拌子，將復(fù)合電極插入標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中，開動攪拌器，對酸度計(jì)進(jìn)行定位。再用pH=4.00的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液校核，使儀器讀數(shù)與該溫度下的文獻(xiàn)值相差再±0.02單位之內(nèi)。2、樣品的處理 用傾注法將啤酒來回脫氣50次準(zhǔn)確移取50.00mL酒樣于100mL燒杯中置于400C水浴鍋中保溫30分鐘并不時(shí)振搖以除去殘余的二氧化碳然后冷卻至室溫。3、在燒杯中放入攪拌子，以適當(dāng)?shù)乃俣冗M(jìn)行攪拌。用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，每加1.0mL NaOH記錄一次pH值，到pH=8.5時(shí)，每0.1mL記錄一次數(shù)據(jù)，用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至pH=9.00時(shí)，記錄下所

10、用NaOH的體積V(mL)，繼續(xù)滴至pH=9.5止。根據(jù)所得數(shù)據(jù)繪出NaOH滴定啤酒總酸的滴定曲線。4、啤酒總酸的測定由定義可知，總酸度(mmol)=（pH9.00），并判斷測定啤酒總酸度是否合格。五、 思考題：1、本實(shí)驗(yàn)為什么不能用指示劑法指示終點(diǎn)，而可以用電位滴定法？本實(shí)驗(yàn)的誤差來源有哪些？1、 電位滴定有哪些特點(diǎn)？2、 本實(shí)驗(yàn)的誤差來源有哪些？實(shí)驗(yàn)三 氟離子選擇性電極測定幾種牙膏中游離氟一、 目的要求：學(xué)習(xí)氟離子選擇型電極測定微量F-離子的原理和方法二、 實(shí)驗(yàn)原理：氟是人體必需的微量元素之一。適量的氟可增強(qiáng)牙齒鈣的抗酸性，抑制細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生酸，能夠堅(jiān)固骨骼和牙齒，預(yù)防齲齒；但氟濃度過高，又

11、會影響牙齒和骨骼的發(fā)育，出現(xiàn)氟斑牙、氟骨病等慢性氟中毒，甚至?xí)霈F(xiàn)惡心、嘔吐、心率不齊等急性氟中毒。如果人體每公斤含氟量達(dá)到3264 mg就會導(dǎo)致死亡。含氟牙膏中氟含量較高，且為游離態(tài)，所以牙膏中游離氟的檢測非常必要。根據(jù)GB8372-2001該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：含氟牙膏總氟量要大于等于牙膏總重的0.04%，并小于等于0.15%；可溶氟或游離氟則必須大于等于0.04%。氟離子選擇性電極是一種以LaF3單晶膜為敏感膜、NaF+NaCl為內(nèi)參比溶液、Ag-AgCl為內(nèi)參比電極的電化學(xué)傳感器。以氟電極作指示電極，飽和甘汞電極(SCE)為參比電極，同時(shí)浸入含氟待測液中組成工作電池Hg，Hg2Cl2|KCl(飽

12、和)|F-待測液|LaF3|NaF，NaCl|AgCl，Ag在待測溶液中加入TISAB，控制待測溶液離子強(qiáng)度恒定時(shí)，電池的電動勢與溶液中氟離子濃度的對數(shù)呈線性關(guān)系。25時(shí)， 本實(shí)驗(yàn)采用GB8372-2001的方法進(jìn)行測定。本方法測定的是游離的氟離子濃度，某些高價(jià)陽離子(例如三價(jià)鐵、鋁、和四價(jià)硅)及氫離子能與氟離子絡(luò)合而有干擾，應(yīng)在塑料燒杯內(nèi)進(jìn)行測量。三、 儀器與試劑：1、儀器 pHS-3C型酸度計(jì)、氟離子選擇性電極、飽和甘汞電極、磁力攪拌器、離心機(jī)2、試劑(1) 95mg/L F-離子標(biāo)準(zhǔn)溶液：將分析純NaF在1200C烘干2h，并冷卻。準(zhǔn)確稱取NaF（Mr41.99）0.2100g，用去離子

13、水溶解，移入1L容量瓶，稀釋至刻度，得到95mg/L F-離子標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后存在聚乙烯瓶中待用。(2) 總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖溶液TISAB：于1000 mL 燒杯中加入500 mL 水和57 mL 冰醋酸，58g NaCl，12g二水合檸檬酸鈉，攪拌至溶解。繼續(xù)滴加50NaOH溶液，至溶液pH值5.0-5.5之間，冷卻至室溫，并稀釋至1000 mL。(3) 含氟牙膏3支四、 實(shí)驗(yàn)步驟：1、樣品制備 從含氟牙膏中稱取牙膏50g(精確至0.001g)置于50mL塑料燒杯中，逐漸加入去離子水?dāng)嚢枋谷芙?，轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，分別倒入2個具有刻度的10mL離心管中，使其重量相等。在

14、離心機(jī)上以2000r/min的速度離心30min，冷卻至室溫。取其上清液備用。2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 分別準(zhǔn)確吸取95 mg/L F-離子儲備溶液0.50 mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、2.50 mL，置于25mL容量瓶中，加入TISAB2.5mL，用水稀釋至刻度得標(biāo)準(zhǔn)溶液。3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 將配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液按濃度由低到高的順序逐一轉(zhuǎn)移至塑料小燒杯中，將氟離子選擇性電極和飽和甘汞電極浸入液面下，并放入攪拌子。開動攪拌器，調(diào)節(jié)至合適的速度，攪拌23min，至讀數(shù)穩(wěn)定時(shí)，讀取各溶液的電動勢值。測量結(jié)果列表記錄。4、牙膏中游離氟的測定 吸取步驟1中所制上清液0.50mL（根據(jù)情

15、況而定）置于50mL容量瓶中，加TISAB 5.0mL，用去離子水稀釋至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入塑料小燒杯中，以相同的速度進(jìn)行攪拌，讀數(shù)穩(wěn)定后讀取其電位值。 五、 數(shù)據(jù)處理：1. 將配制的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液所測定的數(shù)據(jù)，用計(jì)算機(jī)處理有關(guān)數(shù)據(jù)，以lgc或?yàn)闄M坐標(biāo) ，相應(yīng)的電位值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。也可在普通坐標(biāo)紙上作E(mV)lgC 圖.2. 根據(jù)牙膏樣品所測得的電位值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程，計(jì)算樣品溶液的濃度值，并計(jì)算出相應(yīng)牙膏中游離氟的含量（以質(zhì)量百分含量表示），并判斷各樣品中牙膏含氟量是否合格。六、 思考題：1、本實(shí)驗(yàn)測定的是F-離子的活度還是濃度？為什么？2、為什么實(shí)驗(yàn)中要加入TISAB？其組成

16、如何？各起什么作用？實(shí)驗(yàn)四 鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵一、 目的要求：1、掌握722型分光光度計(jì)的使用方法2、掌握分光光度法測定鐵的原理和方法二、 實(shí)驗(yàn)原理：測定微量鐵時(shí)，通常用鹽酸羥胺將Fe3+離子還原為Fe2+，在pH為29的范圍內(nèi)，F(xiàn)e2+與鄰二氮菲(又稱鄰菲羅啉)生成穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物(C12H8N3)Fe2+，其lgK穩(wěn)=21.3，max=510nm，510=1.1×104L·mol-1·cm-1，鐵含量在0.16g·mL-1范圍內(nèi)遵守比耳定律。有關(guān)反應(yīng)式如下：用分光光度法測定物質(zhì)的含量,一般采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法,即：配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在實(shí)

17、驗(yàn)條件下依次測量各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度(A)，以溶液濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在同樣實(shí)驗(yàn)條件下，測定待測液的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度值，即可計(jì)算試樣中被測物質(zhì)的含量。分光光度分析中，顯色反應(yīng)的條件，如：溶液酸度、顯色劑用量、絡(luò)合物的穩(wěn)定性等都應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)來確定。三、 儀器與試劑：1、儀器 722型分光光度計(jì)；恒溫水浴鍋2、試劑(1)0.0100 mg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取 g鐵銨釩于小燒杯中，加少量水和20 mL1：1 硫酸溶液，溶解后，定量轉(zhuǎn)移導(dǎo)1L 容量瓶中，定容。 供繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線用。(2)1鹽酸羥胺水溶液 用時(shí)現(xiàn)配。(3)0.1鄰二氮菲水溶液

18、避光保存，顏色變暗時(shí)即不能使用。(4)1M NaAc緩沖溶液四、 實(shí)驗(yàn)步驟：1、吸收曲線的繪制 用吸量管吸取3.0mL 0.0100 mg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于25mL容量瓶中，加入1.5 mL1鹽酸羥胺溶液，搖勻后，加入2.5mLHAcNaAc緩沖溶液溶液和2.5mL0.1鄰二氮菲溶液，搖勻，放置10 min。在分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，以試劑空白溶液（即上述不加標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液得溶液）為參比，在440560nm之間，測定溶液的吸光度。在490 nm530 nm之間每隔5nm 測定一次吸光度，其它范圍每隔10nm測定一次。每改變一次波長，都應(yīng)重新調(diào)整參比溶液的透光率為100。記錄

19、測定波長與對應(yīng)的吸光度數(shù)據(jù)，以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸收曲線。選擇吸收峰最大值所對應(yīng)的波長為工作波長。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 用吸量管分別準(zhǔn)確移取1.00，2.00，3.00， 4.00，5.00 mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液于25mL容量瓶中，分別加入鹽酸羥胺溶液，搖勻后，加入2.5mLNaAc緩沖溶液溶液和2.5mL0.1鄰二氮菲溶液，搖勻，放置10 min。在722型分光光度計(jì)上，以試劑空白溶液為參比，用1cm比色皿，在最大吸收波長下測量各顯色標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。以鐵的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、鐵含量測定 用吸量管移取適量未知液于25mL容量瓶中，依次加入1.5mL鹽酸

20、羥胺溶液，搖勻后，加入2.5mLNaAc緩沖溶液溶液和2.5mL0.1鄰二氮菲溶液，搖勻，放置10 min。在所選定的工作波長下，以試劑空白溶液為參比，測定吸光度。 五 數(shù)據(jù)處理1. 記錄測定波長與對應(yīng)的吸光度數(shù)據(jù)，以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸收曲線。選擇吸收峰最大值所對應(yīng)的波長為工作波長。2. 將配制的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液所測定的數(shù)據(jù)，用計(jì)算機(jī)處理有關(guān)數(shù)據(jù)，以鐵的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算測試液濃度，計(jì)算原始未知液中鐵的含量（以mg/mL計(jì)）。六 思考題：1.吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線有何區(qū)別？各有何實(shí)際意義？2.根據(jù)有關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算鄰二氮菲-

21、Fe()絡(luò)合物在最大波長下的摩爾吸光系數(shù)。實(shí)驗(yàn)五 分光光度法測定鄰二氮菲Fe(II)絡(luò)合物的組成一、目的要求：1、 熟練掌握722型分光光度計(jì)的使用方法2、 掌握利用摩爾比法測定鄰二氮菲Fe(II)絡(luò)合物的組成的原理和方法二、實(shí)驗(yàn)原理：絡(luò)合物組成的確定是研究絡(luò)合反應(yīng)平衡的基本問題之一。金屬離子M和絡(luò)合劑L形成絡(luò)合物的反應(yīng)為：MnLMLnAmaxn cL/cMCD圖51 摩爾比法測定絡(luò)合物組成A式中，n為絡(luò)合物的配位數(shù)，可用摩爾比法（或稱飽和法）進(jìn)行測定，即配制一系列溶液， 各溶液的金屬離子濃度、酸度、溫度等條件恒定，只改變配體的濃度，再絡(luò)合物的最大吸收波長處測定各溶液的吸光度，以吸光度對摩爾比

22、cL/cM作圖，如圖51所示。將曲線的線性部分延長線相交于一點(diǎn)，該點(diǎn)對應(yīng)的cL/cM值即為配位數(shù)n。摩爾比法適用于穩(wěn)定性較高，且絡(luò)合比較高的絡(luò)合物組成的測定。三儀器與試劑1、 儀器 722型分光光度計(jì)2、 試劑 5.0×10-4 mol.L1 鐵標(biāo)準(zhǔn)液；100g.L1鹽酸羥胺溶液；5.0×10-4mol.L1 鄰鄰二氮菲水溶液；1.0 mol.L1乙酸鈉溶液。四. 實(shí)驗(yàn)步驟：取9只25 mL容量瓶，各加入1.0 mL 10-3 5.0×10-4mol.L1 鐵標(biāo)準(zhǔn)液，0.5 mL100g.L1鹽酸羥胺溶液,搖勻，放置2 min。依次加入1.0，1.5，2.0，2.

23、5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 mL 5.0×10-41mol.L1 鄰二氮菲溶液，然后各加入2.5 mL 1.0 mol.L1 乙酸鈉溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。在510 nm處，用1 cm吸收池，以水為參比，測定各溶液的吸光度A。以A對cL/cM 作圖，將曲線直線部分延長并相交，根據(jù)交點(diǎn)位置確定絡(luò)合物的配位數(shù)n。五、 數(shù)據(jù)處理以A對cL/cM 作圖，將曲線直線部分延長并相交，根據(jù)交點(diǎn)位置確定絡(luò)合物的配位數(shù)n。六、思考題1 在什么條件下，才可以使用摩爾比法測定絡(luò)合物的組成？2 在此實(shí)驗(yàn)條件下為什么可以用水作參比，而不必用試劑空白溶液作參比？實(shí)驗(yàn)六 薄層色譜分離鑒定有機(jī)化

24、合物一、目的與要求1、 了解薄層色譜法的基本原理2、 熟悉薄層色譜法的基本操作二、實(shí)驗(yàn)原理薄層色譜法是一種微量、快速、簡易、靈敏的分析方法，其原理為吸附色譜或分配色譜。吸附色譜是利用混合物中各組分被吸附劑吸附能力的不同以及在流動相中溶解度的不同而使之分離。分配色譜則是利用混合物中各組分在固定相和流動相中的分配系數(shù)不同而使之分離。其特點(diǎn)是將吸附劑（固定相）均勻地鋪在玻璃板上制成薄層，把欲分離的試樣點(diǎn)加在薄層上，然后用合適的溶劑展開，通過化合物自身顏色或顯色劑顯色后，在板上出現(xiàn)一系列斑點(diǎn)，從而達(dá)到分離鑒定和定量測定的目的。通常用比移值（Rf）表示溶質(zhì)（樣品）移動和展開劑（流動相）移動的關(guān)系。如下圖

25、所示：在一定條件下（溶劑組成、溫度、薄板的性質(zhì)等）Rf值為常數(shù)，借此可作為分析的依據(jù)。Rf值可由下式得到：化合物A的 化合物B的a，b展開后斑點(diǎn)中心到原點(diǎn)中心的距離，cmc 原點(diǎn)中心與溶劑前沿之間的距離，cmRf1，若Rf=0表明溶質(zhì)不能移動。物質(zhì)間的Rf值相差越大，分離的效果越理想。三、儀器與試劑1、儀器 研缽、布氏漏斗、層析缸（或500 mL大燒杯）、玻璃板（或載玻片） 2、試劑： 硅膠H、羧甲基纖維素鈉溶液（0.5）；1 %鄰-、對-硝基苯酚的二氯甲烷溶液及二者的1:1混合溶液。四、實(shí)驗(yàn)步驟1、制板及活化稱取適量硅膠H ，置于干凈的研缽中，按照每克硅膠H 2.53mL溶劑的比例加入0.5

26、羧甲基纖維素鈉溶液，立即研磨，調(diào)成糊狀。可采用平鋪法進(jìn)行鋪板: 將調(diào)制好的薄層糊倒在備用的玻板上（注意在玻板的背面的一端做好標(biāo)記，該端不要浸入展開劑），用玻棒初步攤開，用拇指和食指抓住玻板一端，在桌面上反復(fù)震動數(shù)次，待薄層糊鋪展均勻后，平放在平臺上即可。薄層厚度一般為13mm。薄層板室溫下晾干，置于110烘箱中活化30min，取出稍冷后置于干燥器中干燥、備用。2、點(diǎn)樣在距薄層板一端約1cm處用鉛筆輕請畫出一條水平橫線作為起始線。用平口毛細(xì)管吸取樣品溶液在起始線上點(diǎn)樣。用另外兩根毛細(xì)管分別吸取%鄰-、對-硝基苯酚的二氯甲烷溶液也在起始線上點(diǎn)樣。每兩個樣點(diǎn)之間的距離應(yīng)不小于1cm。若溶液太稀，可在

27、溶劑揮發(fā)后再在原處重復(fù)點(diǎn)樣，樣品點(diǎn)直徑應(yīng)2mm。3、 展開采用上行法展開：這是最常用的一種展開方式，是將點(diǎn)有樣點(diǎn)的薄層端向下浸入展開劑(0.5cm厚)中，上端以傾斜狀或垂直狀靠在內(nèi)壁或支架上(圖3.3.4-5（b）)。如果是干板只能與平面成5-10°的近水平傾斜放置 (圖3.3.4-5（a）)。（a）傾斜上行法展開1色譜缸 2薄層板 3展開（b）直立式展開1色譜缸 2薄層板 3展開劑 4展開劑蒸氣圖3.3.4-5 上行展開法上行法展開的距離一般為10-15 cm，展開時(shí)間約為30 min左右，最快者只需幾分鐘,最慢者需2-3 h。在層析缸中加入適量體積比為二氯甲烷作展開劑。將點(diǎn)好樣的

28、薄層板放入其中，使點(diǎn)樣一端向下，展開劑不應(yīng)浸沒樣點(diǎn)。蓋好蓋子，放置一段時(shí)間，觀察展開情況。當(dāng)展開劑前沿上升至距板上端約1cm時(shí)取出，并立即用鉛筆畫出前沿的位置。4、 測量和計(jì)算用尺量出展開劑前沿及各樣點(diǎn)到起始線的距離，計(jì)算各樣點(diǎn)的Rf值。將色素混合物展開后的各樣點(diǎn)與單一組樣點(diǎn)進(jìn)行對照，判斷成分。六、 思考題1、如何判斷混合物展開后各樣點(diǎn)的成分？依據(jù)是什么？2、實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意哪些問題？實(shí)驗(yàn)七 庫侖滴定法測定維生素C 一、目的要求 1學(xué)習(xí)和掌握庫侖滴定法和永停終點(diǎn)法的原理。 2學(xué)習(xí)和掌握庫侖滴定法的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 二、實(shí)驗(yàn)原理 庫侖滴定法是建立在恒電流電解基礎(chǔ)上的一種電化學(xué)分析方法，可用于常量或痕量物質(zhì)

29、的測定。通過電解時(shí)的電極反應(yīng)定量產(chǎn)生“滴定劑”與待測定物質(zhì)之間發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。根據(jù)法拉第定律由電解時(shí)通過溶液的電量計(jì)算待測物質(zhì)的含量。在電解過程中應(yīng)使電解電極上只進(jìn)行生成滴定劑的反應(yīng)，而且電解的電流效率是100%。滴定時(shí)須選定適當(dāng)?shù)姆椒▉碇甘窘K點(diǎn)，通常可以采用指示劑或電化學(xué)方法指示終點(diǎn)。 在弱酸性介質(zhì)中，I離子極容易以100%的電流效率在鉑電極上氧化生成I2，電生的I2可以定量的與溶液中的維生素C產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)而定量的測定維生素C的含量。利用電流滴定法確定重點(diǎn)時(shí)，在到達(dá)計(jì)量點(diǎn)前，庫侖池中只有Vc,Vc 和I-，而Vc,Vc是一對不可逆電對，在指示電極上加150mv 的極化電壓下，不發(fā)生電極反應(yīng)，所

30、以知識回路上的電流幾乎為零；但當(dāng)溶液中的Vc反應(yīng)完全后，稍過量的的I2使溶液中有了可逆電對I2/I-。該電對在指示電極上發(fā)生反應(yīng)，指示回路上電流升高，指示終點(diǎn)到達(dá)。本實(shí)驗(yàn)利用雙極化電極（雙鉑電極）電流上升法指示終點(diǎn)（永停終點(diǎn)法）。記錄電解過程中所消耗的電量，根據(jù)法拉第定律關(guān)系，可以計(jì)算出發(fā)生電解反應(yīng)的物質(zhì)的量，進(jìn)而根據(jù)Vc 與I2反應(yīng)的計(jì)量關(guān)系求得Vc的量（或含量）。電極反應(yīng)和化學(xué)反應(yīng)如下：電極反應(yīng)：3I = I3 + 2e 滴定反應(yīng)：VcI3Vc+3I-陽極產(chǎn)生的I2將抗壞血酸（又名維生素C，分子式C6H8O6）分子中的烯二醇結(jié)構(gòu)定量氧化為二酮基， 陰極反應(yīng)為 ：2H+ + 2e = H2

31、根據(jù)法拉第定律可計(jì)算出抗壞血酸的量。計(jì)算公式為mQMVc/nF m，MVc 分別代表被測物VC 的質(zhì)量、分子量；n 為電極反應(yīng)的電子轉(zhuǎn)移數(shù)；Q為庫侖滴定過程中所消耗的電解電量；F為法拉第常數(shù)。三、實(shí)驗(yàn)用品 1儀器 KLT-1 型通用庫侖儀 電磁攪拌器 容量瓶（100mL，500mL） 移液管（1mL，5mL）2藥品 抗壞血酸（A.R） 維生素C 片劑(或果汁飲料) 10% KI 鹽酸（A.R） 四、操作步驟 1電解液的配制 10%KI0.01 M HCl混合液為電解液。 2樣品溶液的配制 取一片維生素C 片劑在研缽中研細(xì)，用新煮沸過的蒸餾水與0.01MHCl溶液溶解配成25mL溶液。果汁飲料可

32、直接移取適量進(jìn)行測定. 3鉑電極的預(yù)處理 將鉑電極浸入熱的1:1 HNO3中（在通風(fēng)櫥中進(jìn)行），取出，用去離子水沖洗凈。 4儀器預(yù)熱、熟悉儀器操作 開啟通用庫侖儀電源前，所有按鍵處于釋放狀態(tài)，“工作、停止”開關(guān)置“停止”，電解電流一般選擇為10 mA擋。開啟通用庫侖儀電源，預(yù)熱10min。 5預(yù)電解 進(jìn)行預(yù)電解的目的是消除電解液中I3的干擾。將50 mL 電解液注入到電解杯中，加入一定量的抗壞血酸溶液，連接好各電極接線，開動攪拌器，通用庫侖儀的終點(diǎn)指示方式為“電流上升”檔，極化電勢鐘表電勢器預(yù)先調(diào)在0.4的位置，按下啟動按鍵，按下極化電勢按鍵，調(diào)節(jié)指示電極的極化電勢為150 mV，松開極化電勢

33、按鍵，等表頭指針稍穩(wěn)定，按下電解按鈕，指示燈滅，調(diào)節(jié)電解電流為10 mA，開始電解。電解至終點(diǎn)時(shí)表針開始向右突變，紅燈即亮，儀器讀數(shù)即為總消耗的電量毫庫侖數(shù)。 6每次吸取0.30 mL樣品溶液注入到含有預(yù)電解后的50 mL 電解液的電解杯中，按上述步驟進(jìn)行測定。平行測定三次。 7測定結(jié)束后，使儀器各按鍵處于啟始狀態(tài)，關(guān)閉電源，清洗電極和電解池。 五、數(shù)據(jù)處理根據(jù)樣品消耗的電量計(jì)算出每片維生素C藥片中維生素C的含量，并與標(biāo)示值（100mg/片）比較。六、注意事項(xiàng)：電解系統(tǒng)中雙鉑片為電解陽極，電解陰極內(nèi)應(yīng)裝有電解液，且液面要高于電解池內(nèi)的液面。七 思考題 1不進(jìn)行預(yù)電解對測定結(jié)果會產(chǎn)生什么影響？

34、2為什么要用新煮沸過的蒸餾水配制溶液？ 實(shí)驗(yàn)八 恒電流庫侖滴定法測定鉻（）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.學(xué)習(xí)庫侖滴定電位法指示重點(diǎn)的基本原理。2.掌握庫侖滴定法測定鉻的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。3.學(xué)習(xí)KLT-1型庫侖滴定儀的使用。二、實(shí)驗(yàn)原理庫侖滴定是通過電解產(chǎn)生的物質(zhì)作為“滴定劑”（電生滴定劑）來測定被測物的一種分析方法。在分析時(shí)，以100的電流效率產(chǎn)生的一種物質(zhì)（滴定劑），與被分析物質(zhì)進(jìn)行定量的化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)的終點(diǎn)可借助指示劑、電位法、電流法等進(jìn)行確定。這種滴定方法所需的滴定劑不是由滴定管加入的，而是借助于電解方法產(chǎn)生出來的，滴定劑的量與電解所消耗的電量（庫侖數(shù)）成正比，所以稱為“庫侖滴定”。六價(jià)鉻是環(huán)境污染的重要金屬離子，對鉻的