生物技術(shù)制藥題庫

1、名詞解釋1、生物技術(shù)制藥：即采用現(xiàn)代生物技術(shù),借助某些微生物、植物、動(dòng)物生產(chǎn)醫(yī)藥品。2、基因工程制藥：指利用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)或多肽類藥物。3、細(xì)胞工程制藥：是利用動(dòng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥物的技術(shù)。4、酶工程制藥：是將酶或活細(xì)胞固定化后用于藥品生產(chǎn)的技術(shù)。5、發(fā)酵工程制藥：指利用微生物代謝過程生產(chǎn)藥物的技術(shù)。6、抗體工程制藥：利用抗原和抗體的特異性結(jié)合性質(zhì)生產(chǎn)藥物的技術(shù)。7、先導(dǎo)化合物 ：通過優(yōu)化藥用、減少毒性和副作用可以使其轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N新藥的化合物。8、生物藥物的定義：是指運(yùn)用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、

2、生物技術(shù)、藥學(xué)等學(xué)科的原理和方法制造的一類用于預(yù)防、治療和診斷的制品。9貼壁細(xì)胞：生長須有貼附的支持物表面，依靠貼附因子生長。10、懸浮細(xì)胞：生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長。如血液淋巴細(xì)胞、生產(chǎn)干擾素的Namalwa(那馬瓦)細(xì)胞。11、兼性貼壁細(xì)胞：生長不嚴(yán)格依賴支持物。如中國地倉鼠卵巢細(xì)胞，小鼠L929細(xì)胞。12牛痘病毒：構(gòu)建多價(jià)疫苗腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒：用于基因治療桿狀病毒：用于外源基因表達(dá)13、生物堿：含氮有機(jī)化合物14、生理活性物質(zhì)：對(duì)細(xì)胞內(nèi)生化代謝和生理活動(dòng)起著調(diào)節(jié)作用。15、植物抗毒素（phytoalexins）是指在植物防御系統(tǒng)內(nèi)能對(duì)抗微生物進(jìn)攻的某些次級(jí)代謝產(chǎn)物

3、，有些時(shí)候連續(xù)合成，有些時(shí)候在被刺激下才會(huì)產(chǎn)生抗毒素，或僅在被誘導(dǎo)下其產(chǎn)量才能增加。16、生物轉(zhuǎn)化定義（biotransformation,bioconversion）：也稱生物催化（biocatalysis）,是指利用生物離體培養(yǎng)細(xì)胞，固定化的植物（或微生物）細(xì)胞或從這些有機(jī)體中分離得到的酶等，對(duì)外源底物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾而獲得更有價(jià)值產(chǎn)物的一種技術(shù)。 17、抗體（antibody，Ab）： 是B細(xì)胞在抗原的刺激下分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生具有與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白。18、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。19、多

4、克隆抗體：由多個(gè)克隆細(xì)胞產(chǎn)生的針對(duì)多種抗原決定簇的混合抗體制劑。也稱第一代人工抗體20、基因工程抗體：是利用DNA重組技術(shù)，通過對(duì)抗體分子基因結(jié)構(gòu)與功能了解，有目的地在基因水平上對(duì)抗體分子進(jìn)行切割、拼接或修飾，或者直接合成基因序列，再將基因?qū)爰?xì)胞表達(dá)產(chǎn)生的一類抗體，也稱第三代抗體21、藥用酶：指可用于預(yù)防和治療疾病的酶。22、酶法制藥：指利用酶的催化作用而將前體物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有藥用功效的物質(zhì)的過程。23、自然選育：在生產(chǎn)過程中，不經(jīng)過人工誘變處理，根據(jù)菌種的自發(fā)突變而進(jìn)行菌種篩選的過程，叫做自然選育或自然分離。 填空1、生物藥物原料以天然的生物材料為主，包括人體、動(dòng)物、植物、微生物和各種海洋生

5、物等。2 、注射用藥要求，對(duì)藥品制劑的均一性、安全性、穩(wěn)定性、有效性等3、檢驗(yàn)上的特殊性由于生物藥物具有特殊的生理功能，（生物藥物的活性檢驗(yàn)）4、蛋白質(zhì)類藥物的分離純化方法：（1）沉淀法 蛋白質(zhì)、酶的初步純化往往用沉淀法。其原理是使蛋白質(zhì)膠體顆粒破碎，從而沉淀蛋白質(zhì)。常用的有鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、與靶物質(zhì)結(jié)合沉淀法（如抗原抗體）等。（2）按分子大小分離的方法 有超濾法和透析法（即膜分離法）、凝膠層析法、超速離心法等。其中膜分離法可用于生物大分子的濃縮、分級(jí)和脫鹽。（3）按分子所帶電荷進(jìn)行分離的方法 氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶均為兩性電解質(zhì)。根據(jù)它們的等電點(diǎn)不同，調(diào)節(jié)pH值進(jìn)行交換

6、、電泳、等電聚焦法等。（4）親和層析法 大部分生物活性物質(zhì)都有其作用的靶物質(zhì)，如酶與底物（或抑制劑）、抗原與抗體、激素與受體等。5、核酸類藥物的分離純化方法：提取法和發(fā)酵法6、糖類藥物的分離純化方法：非降解法、降解法。分離方法：沉淀法和離子交換層析法7、脂類藥物的分離純化方法：沉淀法和離子交換層析法8、氨基酸的生產(chǎn)方法：蛋白質(zhì)水解法、發(fā)酵法、化學(xué)合成與酶促合成法9、氨基酸的分離方法：沉淀法、吸附法和離子交換法。10、基因工程菌的培養(yǎng)方式：分批培養(yǎng)、補(bǔ)料分批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、透析培養(yǎng)（利用膜的半透性）、固定化培養(yǎng)（對(duì)分泌型菌有利）基因工程菌培養(yǎng)原則11、細(xì)胞收集： 離心法、膜分離法。 細(xì)胞破碎：機(jī)

7、械破碎法、非機(jī)械破碎法物理、化學(xué)和生物學(xué)法12、貼壁細(xì)胞兩種形態(tài)：成纖維細(xì)胞型 、上皮細(xì)胞型13、真核細(xì)胞基因表達(dá)載體種類：病毒載體、質(zhì)粒載體14、培養(yǎng)基的種類：天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基15、誘導(dǎo)子分類：內(nèi)源性誘導(dǎo)子、外源性誘導(dǎo)子16、免疫法包括：體內(nèi)免疫法、體外免疫法 、脾內(nèi)免疫法17突變分為：點(diǎn)突變和染色體畸變 。 點(diǎn)突變分為：堿基對(duì)置換和編碼組錯(cuò)位突變（發(fā)生一個(gè)基因范圍內(nèi)） 染色體畸變（染色體結(jié)構(gòu)的變化）包括缺失、倒位、重復(fù)、易位和染色體數(shù)目變化等結(jié)構(gòu)變化，通過分離篩選，可獲得具有優(yōu)良性狀的變異菌株。 嘧啶與嘌呤 嘧啶與嘧啶 簡答1、基因工程制藥研究內(nèi)容：答：（1）藥物品種的

8、開發(fā)（2）基因工程疫苗（3）基因工程抗體（4）基因診斷與基因治療（5）建立新藥的篩選模型（6）改良菌種以產(chǎn)生新的微生物藥物（7）改進(jìn)藥物生產(chǎn)工藝（8）轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物生產(chǎn)蛋白質(zhì)類藥物2、生物技術(shù)制藥的特征答：1、高技術(shù)2、高投入3、長周期4、高風(fēng)險(xiǎn)5、高收益3、藥理學(xué)特性（1）治療的針對(duì)性強(qiáng) 治療的生理、生化機(jī)制合理，療效可靠。如細(xì)胞色素c為呼吸鏈的一個(gè)重要成員，用它治療因組織缺氧所引起的一系列疾病，效果顯著。（2）藥理活性高 生物藥物是精制出來的高活性物質(zhì)，因此具有高效的藥理活性（3）毒副作用小，營養(yǎng)價(jià)值高（4）生物副作用常有發(fā)生 (5)用量少，價(jià)值高4、生物藥物按藥物的化學(xué)本質(zhì)和化學(xué)特性來分

9、；答：（1）氨基酸及其衍生物類藥物（2）多肽和蛋白質(zhì)類藥物（3）酶和輔酶類藥物（4）核酸及其降解物和衍生物類藥物（5）糖類藥物（6）脂類藥物（7）細(xì)胞生長因子類（8）生物制品類5、生物藥物按原料的來源分類答：（1）人體組織來源的生物藥物：（2）動(dòng)物組織來源的生物藥物：（3）植物組織來源的生物藥物（4）微生物來源的藥物（5）海洋生物來源的藥物；6、生物藥物按生理功能和用途分類答：（1）治療藥物（2）預(yù)防藥物（3）診斷藥物（4）其它生物醫(yī)藥用品7、生物藥物原料選擇 選擇原則主要為答：有效成分含量高、原料來源豐富，易得；原料中雜質(zhì)含量少；原料成本低等；另外植物原料采收具有季節(jié)性、微生物原料要注意微生

10、物生長的對(duì)數(shù)期、動(dòng)物原料有的要注意動(dòng)物的年齡與性別。8、原料的保存方法主要有答：（1）冷凍法（2）有機(jī)溶劑脫水法（3）防腐劑保鮮法9、生物藥物的提取方法答：（1）是磨切法，（2）是壓力法，（3）是反復(fù)凍融，（4）是超聲波振蕩破碎法，（5）是自溶法或酶解法10、人類來源的其它原料的利用答：人胎盤的應(yīng)用：人胎盤丙種球蛋白、人胎盤白蛋白、人胎盤RNA酶抑制劑；人尿的綜合利用：11、人血漿白蛋白制備工藝要點(diǎn)：答：（1）絡(luò)合（利凡諾（雷佛奴爾;利凡諾;乳酸依沙吖啶沉淀）：血漿在攪拌下用NaHCO3調(diào)節(jié)pH至8.6，加入等體積的2%利凡諾溶液，充分?jǐn)嚢韬箪o置24h，分離上清與絡(luò)合物沉淀。（2）解離：在沉淀

11、中加滅菌蒸餾水。用0.5mol/LHCl調(diào)節(jié)pH至弱酸性，加NaCl至0.15%0.2%，攪拌下解離。加熱去雜蛋白：充分解離后，65恒溫1h，離心分離出上清液。（3）熱處理（60 ，10h）：滅活病毒（4）檢驗(yàn)方法：凍干品為白色疏松物體。白蛋白含量占95 %以上，水分<1%，水溶后pH為6.67.2，硫酸銨殘留量<0.01%，細(xì)菌學(xué)和熱源質(zhì)檢測合格。12、動(dòng)物來源藥物的特點(diǎn)答：1、具有生物藥物的共同特點(diǎn)，2、來源豐富3、種屬間差異的考慮13、植物來源藥物的特點(diǎn)答：1種類多2結(jié)構(gòu)復(fù)雜3小分子4大分子14、生物技術(shù)在海洋藥物研究與發(fā)展中的重要作用。答：1、細(xì)胞工程、基因工程、酶工程2、

12、開發(fā)海洋生物基因工程藥物3、開發(fā)海洋生物細(xì)胞工程藥物4、加強(qiáng)海洋微生物藥物的開發(fā)5、住研究內(nèi)容：用基因工程技術(shù)研究抗腫瘤藥物。15、基因工程藥物的發(fā)展趨勢答： 1、研發(fā)新型生物藥物的新模式2、人類基因組計(jì)劃與基因工程新藥的研發(fā)3、藥物靶標(biāo)天然配基的發(fā)現(xiàn)和新藥的研發(fā)4、構(gòu)建生物分子庫以發(fā)現(xiàn)新藥5、蛋白質(zhì)工程與新藥研究6、糖基化工程與新藥研究7、代謝工程組合生物學(xué)與新藥研發(fā)8、新型生物藥物制劑的研究16：利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)藥物的優(yōu)點(diǎn)：答：1、大量生產(chǎn)過去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床使用提供有效的保障；2、可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便對(duì)其生理、生化和結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入的研究，從而擴(kuò)大這些

13、物質(zhì)的應(yīng)用范圍；3、可以發(fā)現(xiàn)、挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)；4、內(nèi)源生理活性物質(zhì)在作為藥物使用時(shí)存在的不足之處，可通過基因工程和蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造和去除5、可獲得新型化合物，擴(kuò)大藥物篩選來源。17：集落刺激因子臨床應(yīng)用答：1腫瘤化療輔助治療2骨髓移植3骨髓異常增生綜合癥及再生障礙性貧血4艾滋病18：表皮生長因子臨床應(yīng)用：答：1消化管潰瘍和燒傷的治療； 2增加皮膚和牙齒生長 3角膜移植、角膜損傷修復(fù)、白內(nèi)障外科手術(shù) 4傷口愈合及皮膚潰瘍19：心鈉素及利鈉多肽家族作用； 答：1使血液向血管外移動(dòng)，降低心臟的負(fù)荷2增加腎血流量3協(xié)調(diào)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周的活動(dòng)20：基因工程藥物制藥的主要程序答：目的基因

14、的克隆構(gòu)建DAN重組體DAN重組體轉(zhuǎn)入宿主菌構(gòu)建工程菌工程菌發(fā)酵表達(dá)產(chǎn)物的分離純化產(chǎn)品的檢驗(yàn)等21、最佳的基因表達(dá)體系：答：1，目的基因的表達(dá)產(chǎn)量高2，表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定3，生物活性高4，表達(dá)產(chǎn)物容易分離純化22、表達(dá)特點(diǎn)答：1不存在信號(hào)肽，多為胞內(nèi)產(chǎn)物，提取困難2分泌能力不足，常形成不溶性的包含體3蛋白質(zhì)不能糖基化4產(chǎn)物蛋白質(zhì)氮端多一個(gè)甲硫氨酸殘基5 內(nèi)毒素及蛋白酶的破壞6表達(dá)水平高7 培養(yǎng)周期短 8抗污染能力強(qiáng)23、影響目的基因在酵母菌中表達(dá)的因素答：（1）外源基因的拷貝數(shù)（2）外源基因的表達(dá)效率啟動(dòng)子（3）外源蛋白的糖基化（4）宿主菌株的影響24、質(zhì)粒不穩(wěn)定產(chǎn)生的原因答：含質(zhì)粒菌產(chǎn)生不含質(zhì)粒子

15、代菌的頻率和質(zhì)粒丟失率 這兩種菌比生長速率差異的大小。25、提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法答：1、選擇合適的宿主菌2、選擇合適的載體3、選擇壓力抗菌素抑制質(zhì)粒丟失菌的生長，提高質(zhì)粒穩(wěn)定性。4、分階段控制培養(yǎng)5、控制培養(yǎng)條件溫度、pH、培養(yǎng)基組分和溶解氧濃度6、固定化26、重組工程菌培養(yǎng)過程包括:答：搖瓶操作基因工程菌生長的基礎(chǔ)條件。 培養(yǎng)罐操作確定培養(yǎng)參數(shù)和控制方案以及順序。27、影響發(fā)酵的主要因素： 答：培養(yǎng)基的影響接種量的影響 溫度的影響 溶解氧的影響 誘導(dǎo)時(shí)機(jī)的影響 pH的影響28、基因工程藥物的分離純化特點(diǎn)：答：表達(dá)產(chǎn)物在初始料中含量較低；含有大量細(xì)胞及代謝產(chǎn)物；表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定性差，易失活變性；表

16、達(dá)產(chǎn)物的種類繁多、結(jié)構(gòu)不一、活性各異；對(duì)其質(zhì)量要求純度高、無菌、無熱原。29、建立分離純化工藝需了解的各種因素答：1、含目的產(chǎn)物的起始料的特點(diǎn) 包括：菌種的類型及其代謝特性。原材料培養(yǎng)基的來源及其質(zhì)量。生產(chǎn)工藝及條件。初始物料的物理、化學(xué)和生物學(xué)特性。物料中雜質(zhì)的種類和性質(zhì)目的產(chǎn)物特性產(chǎn)品質(zhì)量的要求30、基因工程藥物的質(zhì)量控制理化性質(zhì)鑒定答：（1）非特異性鑒別（2）特異性鑒別（3）相對(duì)分子質(zhì)量測定（4）等電點(diǎn)測定（5）肽圖分析（6）氨基酸組成分析（7）部分氨基酸序列分析（8）蛋白質(zhì)二硫鍵分析31、雜質(zhì)檢測答：（1）蛋白質(zhì)雜質(zhì)（2）非蛋白類雜質(zhì)32、動(dòng)物細(xì)胞的生理特點(diǎn)答：細(xì)胞的分裂周期長細(xì)胞生長

17、需貼附于基質(zhì),并有接觸抑制現(xiàn)象。正常二倍體細(xì)胞的生長壽命是有限的動(dòng)物細(xì)胞對(duì)周圍環(huán)境十分敏感動(dòng)物細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基要求高動(dòng)物細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成途徑和修飾功能與細(xì)菌不同。33、病毒作為載體的優(yōu)點(diǎn)：答：雙鏈DNA，易重組 插入78kb DNA不影響正常病毒粒子的形成。多角體蛋白和病毒粒子的形成無直接關(guān)系多角體蛋白基因有非常強(qiáng)的啟動(dòng)子用光學(xué)顯微鏡可看到多角體，可以此作為標(biāo)記物，選陽性克隆。如用家蠶桿狀病毒，還可在蠶體表達(dá)外源基因34、小牛血清的作用答：提供生長因子和激素提供貼附因子和伸展因子提供結(jié)合蛋白提供必需脂肪酸和微量元素35、無血清培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn)答:提高重復(fù)性減少微生物污染供應(yīng)充足穩(wěn)定產(chǎn)品易純化避免血清因素

18、對(duì)細(xì)胞的毒性減少血清中蛋白對(duì)生物測定的干擾36、細(xì)胞體外培養(yǎng)基本條件:答：無菌營養(yǎng)充足,防止有害物質(zhì)氧氣隨時(shí)清除代謝有害物質(zhì)良好的生存外環(huán)境 pH :7.2-7.4 滲透壓:290-300mOsm/Kg（毫滲透摩爾）溫度:37+0.5及時(shí)分種37、植物組織培養(yǎng)過程再分化答：離體的植物器官、組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽植物體38、影響植物次級(jí)代謝產(chǎn)物累積的因素答; 1、生物條件：外植體、季節(jié)、休眠、分化等；2、物理?xiàng)l件：溫度、光（光照時(shí)間、光強(qiáng)、光質(zhì)）、通氣（氧氣）、酸度和滲透壓；3、化學(xué)條件：無機(jī)鹽、碳源、物質(zhì)生長調(diào)節(jié)劑、維生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物質(zhì)和前體等4、工業(yè)培

19、養(yǎng)條件：培養(yǎng)罐類型、通氣、攪拌和培養(yǎng)方式。39、誘導(dǎo)子的作用機(jī)制答：1、膜脂超氧化和膜結(jié)構(gòu)功能的改變2、形成和積累抗微生物的低相對(duì)分子質(zhì)量植保素3、蛋白酶抑制物的積累保護(hù)機(jī)體4、合成和分泌降解微生物細(xì)胞壁的酶，從而抑制微生物生長40、植物生物轉(zhuǎn)化的意義答：（1）在植物細(xì)胞培養(yǎng)中，一些重要的次生代謝產(chǎn)物并不形成和累積。但是，這樣的培養(yǎng)物卻保留了將外源底物轉(zhuǎn)化為有用產(chǎn)物的能力。（2）生物轉(zhuǎn)化既可產(chǎn)生新的化合物、又可改造已有的化合物、增加目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量以及克服化學(xué)合成的缺點(diǎn)。（3） 植物細(xì)胞和器官培養(yǎng)由于催化多步反應(yīng)常常會(huì)產(chǎn)生中間體代謝產(chǎn)物，有助于我們闡明化合物的生物合成途徑。（4）催化反應(yīng)可以在比

20、較溫和環(huán)境下進(jìn)行，副產(chǎn)物較少、耗能少，安全以及減少開支等。（5）植物生物轉(zhuǎn)化系統(tǒng)可以與有機(jī)合成結(jié)合使用而相得益彰。41、抗體藥物的特異性答：1、與相關(guān)抗原的特異性結(jié)合2、對(duì)腫瘤靶細(xì)胞的選擇性殺傷作用3、在動(dòng)物體內(nèi)的靶向性分布4、對(duì)相關(guān)的腫瘤顯示更強(qiáng)的療效5、在臨床使用取得確定的療效42、抗體作為治療劑的作用答：(1)直接使抗原失去活性(2)使免疫效應(yīng)細(xì)胞將其吞噬并加以破壞(3)使抗原表面弱化而易于受補(bǔ)體破壞43、單克隆抗體特點(diǎn)答：高特異性: 均一性:來源穩(wěn)定： 44、藥用酶生產(chǎn)細(xì)胞的選擇答：1、選擇條件：（1）酶的產(chǎn)量高，可通過篩選、誘變、或采用基因工程、細(xì)胞工程等技術(shù)獲得。 （2）容易培養(yǎng)和

21、管理（3）產(chǎn)酶穩(wěn)定性好（4）有利于酶的分離純化（5）安全可靠2、生產(chǎn)菌的來源（1）菌種保藏機(jī)構(gòu)和有關(guān)部門獲得（2）自然界篩選，土壤、深海、溫泉、火山、森林等菌種采集地3、產(chǎn)酶菌的篩選（1）菌種采集（2）菌種的分離初篩（3）純化（4）復(fù)篩（5） 生產(chǎn)性能鑒定等 45、菌種選育目的答：1防止菌種退化2 解決生產(chǎn)實(shí)際問題 3提高生產(chǎn)能力 4提高產(chǎn)品質(zhì)量 5 開發(fā)新產(chǎn)品 46、自然選育的目的：答：1淘汰衰弱菌；2 保存優(yōu)良菌； 3 可純化菌種；4防止菌種衰退； 5 穩(wěn)定生產(chǎn)和提高產(chǎn)量；47、種子擴(kuò)培的目的 答：1接種量的需要 ；2菌種的馴化 ；3縮短發(fā)酵時(shí)間 ；4保證生產(chǎn)水平 。48、種子的選取條件答

22、：1菌種細(xì)胞的生長活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵罐后能迅速生長，遲緩期短 ； 2生理形狀穩(wěn)定 ；3菌體總量及濃度能滿足大容量發(fā)酵罐的要求 ；4無雜菌污染 ；5保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。 49、工業(yè)微生物的培養(yǎng)類型 答： 酶制劑兩步：第一步：菌體培養(yǎng)基+葡萄糖菌體生長酶合成通氣微生物生長酶合成抑制 菌體生長條件（營養(yǎng)期）第二步：大量繁殖的菌種收集菌體濃縮物洗滌放入產(chǎn)酶培養(yǎng)基中（添加誘導(dǎo)物）菌體產(chǎn)酶 產(chǎn)酶條件（自我繁殖期）酶制劑兩步法特點(diǎn)：將菌體生長條件（營養(yǎng)期）與產(chǎn)酶條件（自我繁殖期）區(qū)分開來。50、菌種保藏基本原理 答：根據(jù)菌種的生理、生化特性，人為地創(chuàng)造條件使菌種的代謝活動(dòng)處于不活潑狀態(tài)。51、配制工業(yè)發(fā)酵培

23、養(yǎng)基的一般要求：答：1、營養(yǎng)物組成較豐富，濃度適當(dāng)，能滿足菌絲體菌種發(fā)芽和生長繁殖成大量具有生理功能的需要（產(chǎn)物合成潛力提高）2、在一定條件下，各種原材料彼此不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，理化性相對(duì)穩(wěn)定。3、粘度適中，滲透壓適當(dāng)。4、原材料品種及濃度對(duì)代謝產(chǎn)物生物合成過程要有利于主產(chǎn)物的生物合成，高產(chǎn)率維持時(shí)間長，副產(chǎn)物合成率要降至最低。5、不影響發(fā)酵過程的通氣和攪拌，便于產(chǎn)物的分離純化。6、原材料盡量選質(zhì)優(yōu)價(jià)廉、成本低。52、發(fā)酵染菌的危害 答：發(fā)酵染菌能給生產(chǎn)帶來嚴(yán)重危害，防止雜菌污染是任何發(fā)酵工廠的一項(xiàng)重要工作內(nèi)容。尤其是無菌程度要求高的液體深層發(fā)酵，污染防止工作的重要性更為突出。 53工業(yè)常用的滅菌

24、方法 答：1化學(xué)物質(zhì)滅菌 2 熱滅菌 3輻射滅菌 4過濾介質(zhì)除菌 54、菌種保藏所用的基質(zhì)答：1） 斜面：C/N比例少些，營養(yǎng)成分貧乏些防止產(chǎn)酸+代謝活動(dòng)+保藏時(shí)間2）砂土：洗凈防止含有機(jī)物影響菌代謝滅菌后產(chǎn)毒3）冷凍干燥：保護(hù)劑不能過度加熱防止產(chǎn)生有毒物（變性+分解） 名詞：1.基因表達(dá)：是指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有的加工。2融合蛋白：原核多肽和真核蛋白結(jié)合在一起稱融合蛋白3.比生長速率:菌體繁殖速率與培養(yǎng)基中菌體濃度之比4.對(duì)數(shù)生長期:細(xì)菌以最大比生長速率生長,是一個(gè)常數(shù)。5.“嚴(yán)緊反應(yīng)”是當(dāng)氨酰tRNA不足時(shí),核糖體在密碼子上停留,并合成被稱為魔點(diǎn)的ppGpp的結(jié)

25、果。6.細(xì)胞因子：由一類主要由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的、在體內(nèi)含量極低的，但具有多種生物學(xué)活性的小分子蛋白多肽或糖蛋白。10.白細(xì)胞介素（IL） ：是能夠介導(dǎo)白細(xì)胞間及其他細(xì)胞間相互作用的細(xì)胞因子。13腫瘤壞死因子：是一類能直接造成腫瘤細(xì)胞死亡的細(xì)胞因子。14.促血小板生成素：用于癌癥化療或放療引起的血小板減少癥15集落刺激因子： 選擇性刺激造血干細(xì)胞分化發(fā)育成某一細(xì)胞譜系的細(xì)胞因子的統(tǒng)稱16.激素：是由機(jī)體的特殊腺體合成和釋放，通過循環(huán)系統(tǒng)，作用于靶細(xì)胞受體的微量信息因子。18.外植體：用于植物組織培養(yǎng)的器官或組織，植物的部位如根、莖、葉、花、果、穗、胚珠、胚乳、花藥和花粉等均可作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)

26、。19.突變體：細(xì)胞本身發(fā)生遺傳變異或應(yīng)用誘變處理發(fā)生的遺傳變異所得的新細(xì)胞21. 誘導(dǎo)子：是在植物抗病生理過程中誘發(fā)植物產(chǎn)生植物抗毒素和引起植物過敏反應(yīng)的因子22.內(nèi)源性誘導(dǎo)子：來自植物細(xì)胞的分子，多為植物細(xì)胞壁在微生物作用下的降解產(chǎn)物及沉積在細(xì)胞壁上的木質(zhì)素。23.外源性誘導(dǎo)子：又稱真誘導(dǎo)子，指病原微生物在入侵植物時(shí)自身被降解的產(chǎn)物及其代謝產(chǎn)物27.誘變劑 ：能夠提高生物體突變頻率的物質(zhì)稱為誘變劑。28雜交育種 ：一般指兩個(gè)不同基因型的菌株通過接合或原生質(zhì)體的融合使遺傳物質(zhì)重新組合，再從中分離和篩選出具有新性狀的菌株 。29.生長因子： 從廣義上講，凡是微生物生長不可缺少的微量的有機(jī)物質(zhì)，

27、如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱生長因子。30.前體：在產(chǎn)物的生物合成過程中，被菌體直接用于產(chǎn)物合成而自身結(jié)構(gòu)無顯著改變的物質(zhì)稱為前體。31.產(chǎn)物促進(jìn)劑：是指那些非細(xì)胞生長所必須的營養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。 32.滅菌：指用化學(xué)的或物理學(xué)的方法殺滅或除掉物料或設(shè)備中所有的有生命的有機(jī)體的技術(shù)或工藝過程。 33.消毒： 用物理或化學(xué)方法殺死物料、容器、器具內(nèi)外的病原微生物。35. 單克隆抗體：僅識(shí)別抗原分子上同一抗原表位區(qū)的由同一克隆細(xì)胞產(chǎn)生的抗體填空：1. 菌種保藏方法：定期保藏法 、液體石蠟法、液體石蠟法、砂土管保藏法 、冷凍干燥保藏法、液氮保藏法 2、鏈霉菌優(yōu)點(diǎn)：

28、不致病、使用安全、分泌能力強(qiáng)、表達(dá)產(chǎn)物可糖基化。3.酵母菌優(yōu)點(diǎn) ：其基因組小，世代時(shí)間短，有單倍體雙倍體兩種形式，繁殖迅速，無毒性。能外分泌，產(chǎn)物可糖基化。4. 單克隆抗體特點(diǎn)：高特異性、均一性、來源穩(wěn)定5.主要基因工程表達(dá)體系比較：表達(dá)體系產(chǎn)物產(chǎn)生部位培養(yǎng)方式提純產(chǎn)物活性潛在危險(xiǎn)大腸桿菌多肽、蛋白質(zhì)、融合蛋白質(zhì)菌體內(nèi)容易部分高產(chǎn)一般對(duì)原核好對(duì)真核差不大酵母多肽、蛋白質(zhì)、糖基化蛋白菌體內(nèi)外分泌容易可高產(chǎn)菌體內(nèi)稍復(fù)雜真核的接近天然產(chǎn)物不大哺乳動(dòng)物完整糖基化蛋白外分泌較難成本高、可高產(chǎn)簡單可達(dá)天然產(chǎn)物需注意致癌6.一些比較重要的生物轉(zhuǎn)化類型:（1）羥基化（2）糖基化（3）醇和酮的氧化還原反應(yīng)（4）

29、、水解反應(yīng)（5）環(huán)氧化反應(yīng)6 、羰基還原反應(yīng)7、C-C雙鍵的還原反應(yīng)8.硝基還原反應(yīng)簡答：1、生物藥物按生理功能和用途分類（1）治療藥物（2）預(yù)防藥物（3）診斷藥物（4）其它生物醫(yī)藥用品2、生物藥物原料的選擇、預(yù)處理與保存方法（1）原料選擇 選擇原則主要為：有效成分含量高、原料來源豐富，易得；原料中雜質(zhì)含量少；原料成本低等；另外植物原料采收具有季節(jié)性、微生物原料要注意微生物生長的對(duì)數(shù)期、動(dòng)物原料有的要注意動(dòng)物的年齡與性別。（2）原料的預(yù)處理與保存：動(dòng)物原料采集后要立即處理，去除結(jié)締組織、脂肪組織等，并迅速冷凍貯存。植物原料確定后，要擇時(shí)采集并就地去除不用的的部分，有用部分保鮮處理，收集微生物時(shí)

30、要及時(shí)將菌細(xì)胞與培養(yǎng)液分開，進(jìn)行保鮮處理。3.生物藥物原料的保存方法主要有：（1）冷凍法（2）有機(jī)溶劑脫水法（3）防腐劑保鮮生物組織和細(xì)胞的破碎 常用的破碎方法一是磨切法、二是壓力法；三是反復(fù)凍融法，四是超聲波振蕩破碎法4、蛋白質(zhì)類藥物的分離純化方法（1）沉淀法常用的有鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、與靶物質(zhì)結(jié)合沉淀法（2）按分子大小分離的方法 有超濾法和透析法、凝膠層析法、超速離心法等。（3）按分子所帶電荷進(jìn)行分離的方法.根據(jù)它們的等電點(diǎn)不同，調(diào)節(jié)pH值進(jìn)行交換、電泳、等電聚焦法等。(4）親和層析法5、人體來源的生物藥物特點(diǎn)：（1）安全性好（2）效價(jià)高，療效可靠（3）穩(wěn)定性好人體來源的

31、生物藥物的研究意義（1）資源的有限性：人體來源是有限的（2）意義：從藥學(xué)角度研究清楚人體來源的結(jié)構(gòu)和功能，對(duì)于使用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)藥物具有重大意義，如胰島素的生產(chǎn)。6.基因工程藥物制藥的主要程序目的基因的克隆構(gòu)建DAN重組體DAN重組體轉(zhuǎn)入宿主菌構(gòu)建工程菌工程菌發(fā)酵表達(dá)產(chǎn)物的分離純化產(chǎn)品的檢驗(yàn)等7.逆轉(zhuǎn)錄法1、mRNA的純化2、cDNA第一鏈的合成3、cDNA第二鏈的合成4、cDNA克隆5、將重組體導(dǎo)入宿主細(xì)胞6、cDNA文庫的鑒定7、目的cDNA克隆的分離和鑒定8、大腸桿菌表達(dá)特點(diǎn)：不存在信號(hào)肽，多為胞內(nèi)產(chǎn)物，提取困難分泌能力不足，常形成不溶性的包含體蛋白質(zhì)不能糖基化產(chǎn)物蛋白質(zhì)氮端多一個(gè)甲硫

32、氨酸殘基 內(nèi)毒素及蛋白酶的破壞 表達(dá)水平高培養(yǎng)周期短 抗污染能力強(qiáng)9、真核基因在大腸桿菌中的表達(dá)形式：以融合蛋白的形式表達(dá)藥物基因 以非融合蛋白的形式表達(dá)藥物基因分泌型表達(dá)藥物基因10、枯草芽胞桿菌：分泌能力強(qiáng)，蛋白質(zhì)不形成包含體產(chǎn)物蛋白質(zhì)不能糖基化有很強(qiáng)的胞外蛋白酶對(duì)產(chǎn)物降解。 11.表達(dá)用的酵母宿主菌株應(yīng)具備下列要求：菌體生長力強(qiáng)；菌體內(nèi)源蛋白酶要較弱；菌株性能穩(wěn)定，常用的幾乎是突變株，避免使用回復(fù)突變率高的不穩(wěn)定體系；最好使用二倍體或多倍體菌株；分泌能力強(qiáng)。 12、絲狀真菌：分泌能力強(qiáng)，能正確進(jìn)行翻譯后加工,有成熟的發(fā)酵和后處理工藝。 13、哺乳動(dòng)物細(xì)胞 優(yōu)點(diǎn)：表達(dá)產(chǎn)物可由重組轉(zhuǎn)化細(xì)胞分

33、泌到培養(yǎng)液中，純化容易。產(chǎn)物是糖基化的接近天然物。 缺點(diǎn)：生長慢，生產(chǎn)率低，培養(yǎng)條件苛刻，費(fèi)用高，培養(yǎng)液濃度稀。14.菌體生長的控制:適當(dāng)提高pH分批培養(yǎng)中選擇不同的碳源 補(bǔ)料培養(yǎng)中控制補(bǔ)料速度連續(xù)培養(yǎng)中控制稀釋速率等15.質(zhì)粒不穩(wěn)定產(chǎn)生的兩個(gè)因素： 含質(zhì)粒菌產(chǎn)生不含質(zhì)粒子代菌的頻率和質(zhì)粒丟失率這兩種菌比生長速率差異的大小。 16.影響發(fā)酵的主要因素：培養(yǎng)基的影響接種量的影響 溫度的影響 溶解氧的影響 誘導(dǎo)時(shí)機(jī)的影響 pH的影響17、建立分離純化工藝需了解的各種因素1.含目的產(chǎn)物的起始料的特點(diǎn)：（菌種的類型及其代謝特性。原材料培養(yǎng)基的來源及其質(zhì)量。生產(chǎn)工藝及條件。初始物料的物理、化學(xué)和生物學(xué)特

34、性。）物料中雜質(zhì)的種類和性質(zhì)目的產(chǎn)物特性產(chǎn)品質(zhì)量的要求18、細(xì)胞破碎方法：物理破碎法： 高壓勻漿 高速珠磨法超聲破碎法 高壓擠壓法化學(xué)破碎法：滲透沖擊 增溶法 脂溶法 生物破碎法： 19、基因工程藥物目標(biāo)產(chǎn)物的質(zhì)量控制：1、生物學(xué)活性測定 2、理化性質(zhì)鑒定3、蛋白質(zhì)含量測定4、蛋白質(zhì)純度分析5、雜質(zhì)檢測6.穩(wěn)定性考察7.產(chǎn)品一致性的保證20.動(dòng)物細(xì)胞制藥特點(diǎn)：缺點(diǎn): 培養(yǎng)條件高、成本貴、產(chǎn)量低。優(yōu)點(diǎn): 多半分泌在胞外，收集純化方便；得到了較完善的翻譯后修飾，特別是糖基化，故與天然產(chǎn)品一致，更適于臨床。21.真核細(xì)胞基因表達(dá)使用的載體有兩類：毒載體質(zhì)粒載體22、細(xì)胞體外培養(yǎng)基本條件:無菌營養(yǎng)充足

35、,防止有害物質(zhì)氧氣隨時(shí)清除代謝有害物質(zhì)良好的生存外環(huán)境及時(shí)分種23.添加小牛血清的作用：提供生長因子和激素提供貼附因子和伸展因提供結(jié)合蛋白提供必需脂肪酸和微量元素24.無血清培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn)：提高重復(fù)性減少微生物污染供應(yīng)充足穩(wěn)定產(chǎn)品易純化避免血清因素對(duì)細(xì)胞的毒性減少血清中蛋白對(duì)生物測定的干擾25.外源性誘導(dǎo)子分類：多糖類、糖蛋白類、蛋白類、不飽和脂肪酸類26. 誘變劑：物理：紫外，快中子，等離子等 化學(xué)：硫酸二乙酯，亞硝基胍等27. 菌種保藏目的 ：提高菌種存活率和減少菌種的變異，盡量使菌種保持原有的優(yōu)良生產(chǎn)性能。隨時(shí)為生產(chǎn)、科研提供優(yōu)良菌種。28.菌種保藏基本原理 ：根據(jù)菌種的生理、生化特性，人為地創(chuàng)造條件使菌種的代謝活動(dòng)處于不活潑狀態(tài)。29.冷凍干燥時(shí)，凍結(jié)速度細(xì)胞內(nèi)形成冰晶細(xì)胞結(jié)構(gòu)機(jī)械損傷菌種死亡率導(dǎo)致菌種變異菌種性能衰退 30.影響培養(yǎng)基質(zhì)量的因素：原材料質(zhì)量的影響、水質(zhì)的影響、滅菌的影響、其他影響因素31.工業(yè)常用的滅菌方法： 化學(xué)物質(zhì)滅菌 熱滅菌 輻射滅菌 過濾介質(zhì)除菌 32.發(fā)酵雜菌污染途徑及防治 ： 種子帶菌的原因及防止 、設(shè)備滅菌不徹底 、