PCR熒光檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)質(zhì)控規(guī)程

1、 PCR熒光檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)質(zhì)量控制規(guī)程一. 微量加樣器的使用規(guī)定 1微量加樣器校正：: 使用微量加樣器吸10l 10次是否為100l。 2加樣前吸頭潤(rùn)濕： 當(dāng)吸頭排空時(shí)，仍會(huì)有一些殘留的液體以薄膜的形式吸附在吸頭里面，所以，在加樣時(shí)先吸打液體數(shù)次，充分潤(rùn)濕吸頭管腔,以保證加樣的一致性。 3加樣時(shí)吸頭應(yīng)靠試管壁：加樣時(shí)吸頭的液體順著管壁流出，防止液滴的形成由于其表面張力的作用而阻止樣本的釋放。 4吸頭是否與加樣器上吸頭套筒密封：樣器上吸頭與套筒密封完好。5加樣時(shí)注意第一停點(diǎn)和第二停點(diǎn)：吸液是應(yīng)注意大拇指按下按鈕至第一停點(diǎn)，緩慢慢慢吸入液體。停留1s，然后將吸頭提離液面。用吸紙抹去吸嘴外面可能黏附

2、的液滴。放液時(shí)經(jīng)過(guò)第一停點(diǎn)，停1-2s后，繼續(xù)按壓到第二停點(diǎn)，排出殘余液體。 6PCR反應(yīng)原液由于有甘油在冷的狀態(tài)較黏稠,易于1次吸取數(shù)人份，慢一些。 7邊加邊看,直觀估計(jì),防止跳管。 8低溫冷藏批量DNA提取液、PCR反應(yīng)液A和B取出時(shí)是否充分混勻后,分裝使用，PCR反應(yīng)液A和B是否避光低溫冷藏和使用。9配PCR反應(yīng)液應(yīng)先加緩沖液再加PCR反應(yīng)液充分混勻,必要時(shí)倒置混勻,再離心,或用滅菌吸頭上下吸幾次。 10PCR反應(yīng)液（包括樣品）應(yīng)充分混勻:保證PCR反應(yīng)曲線呈S形，全陰性樣品呈近似水平曲線。二PCR試驗(yàn)操作規(guī)程程序操作檢查操作1混勻方法每一次提醒注意倒置混勻、移液器吹打、震蕩，50000

3、rpm離心1分鐘。2取血清樣本1）因水分蒸發(fā)變濃2）凍狀、混濁按（1）法混勻,再取25µl加水5µl混勻。溫水浴37溶解按（1）法混勻,或12000rpm離心5分鐘，取清液。3取質(zhì)控品凍狀、混濁溫水浴37溶解按（1）法混勻或12000rpm離心5分鐘，取清液。4血清樣本稀釋混勻血清陰性血清40µl加陽(yáng)性血清10µl，按（1）法混勻。5倍稀釋5質(zhì)控品稀釋混勻質(zhì)控品血清稀釋液40µl加質(zhì)控品10µl，按（1）法混勻5倍稀釋。6血清樣本DNA提取DNA提取液完好血清樣本按（1）法混勻，取30µl加DNA提取液60µl，按

4、（1）法混勻，98 8分鐘變性, 0冷卻2-3分鐘，12000rpm，離心10分鐘,吸取上清液。7質(zhì)控品DNA變性分裝，有效，呈清液狀態(tài)，未反復(fù)加熱、凍融質(zhì)控品按（1）法混勻，取30µl5000rpm離心1分鐘，98 5分鐘變性,5000rpm，離心1分鐘,吸取上清液。8PCR反應(yīng)液混勻狀態(tài)取25µl反應(yīng)液加5µl提取DNA，按（1）法混勻，5000rpm離心1分鐘， 5000rpm，離心1分鐘,吸取上清液。9PCR反應(yīng)室溫10-30PCR反應(yīng)槽四角不放管。10設(shè)陰性對(duì)照陰性混勻血清CT3811陽(yáng)性參考品各濃度呈梯度以PCRA反應(yīng)液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，呈直線。12陰性質(zhì)

5、控品B各濃度呈梯度以PCRA和B反應(yīng)液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，呈直線。*血清稀釋液：全陰性血清再加2倍HBV DNA提取液混勻, 5000rpm，離心1分鐘，混勻血清98 5分鐘變性,12000rpm，離心10分鐘,吸取上清液。三.超凈工作臺(tái)的使用、維護(hù)保養(yǎng)與清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 1.目的 建立一個(gè)超凈工作臺(tái)的使用、維護(hù)保養(yǎng)與清潔標(biāo)準(zhǔn)操作程序，使操作過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化。 2.職責(zé) 質(zhì)量部QC負(fù)責(zé)本文件的起草，質(zhì)量部及QC檢驗(yàn)人員負(fù)責(zé)本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施。 3.范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于超凈工作臺(tái)的使用、維護(hù)和保養(yǎng)與清潔。 4.內(nèi)容 4.1超凈工作臺(tái)的主要組成部分：高效過(guò)濾器、中效過(guò)濾器、通風(fēng)機(jī)、電氣控制及排氣管道部分。 4.2安放

6、點(diǎn)的選擇： 應(yīng)安放于衛(wèi)生條件較好的地方，便于清潔，門窗能夠密封以避免外界的污染空氣對(duì)室內(nèi)的影響。 安放位置應(yīng)遠(yuǎn)離有震動(dòng)及噪音大的地方。 嚴(yán)禁安放在產(chǎn)生大塵粒及氣流大的地方，以保證操作區(qū)空氣的正常流動(dòng)。 4.3使用前的檢查： 接通超凈工作臺(tái)的電源。 旋開(kāi)風(fēng)機(jī)開(kāi)關(guān)，使風(fēng)機(jī)開(kāi)始正常運(yùn)轉(zhuǎn)，這時(shí)應(yīng)檢查高效過(guò)濾器出風(fēng)面是否有風(fēng)送出。 檢查照明及紫外設(shè)備能否正常運(yùn)行，如不能正常運(yùn)行則通知工程部檢修。 工作前必須對(duì)工作臺(tái)周圍環(huán)境及空氣進(jìn)行超凈處理，認(rèn)真進(jìn)行清潔工作，并采用紫外線滅菌法進(jìn)行滅菌處理。 凈化工作區(qū)內(nèi)嚴(yán)禁存放不必要的物品，以保持潔凈氣流流動(dòng)不受干擾。 4.4使用： 使用工作臺(tái)時(shí)，先經(jīng)過(guò)清潔液浸泡的紗

7、布擦拭臺(tái)面，然后用消毒劑擦拭消毒。 接通電源，提前50分鐘打開(kāi)紫外燈照射消毒，處理凈化工作區(qū)內(nèi)工作臺(tái)表面積累的微生物，30分鐘后，關(guān)閉紫外燈，開(kāi)啟送風(fēng)機(jī)。 工作臺(tái)面上，不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內(nèi)的潔凈氣流不受干擾。 操作結(jié)束后，清理工作臺(tái)面，收集各廢棄物，關(guān)閉風(fēng)機(jī)及照明開(kāi)關(guān)，用清潔劑及消毒劑擦拭消毒。 最后開(kāi)啟工作臺(tái)紫外燈，照射消毒30分鐘后，關(guān)閉紫外燈，切斷電源。 每二月用風(fēng)速計(jì)測(cè)量一次工作區(qū)平均風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)調(diào)節(jié)調(diào)壓器手柄，改變風(fēng)機(jī)輸入電壓，使工作臺(tái)處于最佳狀況。 每月進(jìn)行一次維護(hù)檢查，并填寫維護(hù)記錄。 4.5清潔 每次使用完畢，立即清潔儀器，懸掛標(biāo)識(shí)，并填寫儀器

8、使用記錄。 取樣結(jié)束后，先用毛刷刷去潔凈工作區(qū)的雜物和浮塵。 用細(xì)軟布擦拭工作臺(tái)表面污跡、污垢目測(cè)無(wú)清潔劑殘留，用清潔布擦干。 要經(jīng)常用紗布沾上酒精將紫外線殺菌燈表面擦干凈,保持表面清潔,否則會(huì)影響殺菌能力. 效果評(píng)價(jià):設(shè)備內(nèi)外表面應(yīng)該光亮整潔，沒(méi)有污跡。 四.檢驗(yàn)方法操作規(guī)范1.混勻：反應(yīng)液混勻，按人份量取出，加樣，再混勻后5000 rpm離心數(shù)秒(按原說(shuō)明進(jìn)行)。2.準(zhǔn)確：反應(yīng)液及樣本混勻后,每一步加樣準(zhǔn)確(按原說(shuō)明進(jìn)行)。3.新鮮血清樣本： 血清樣本混勻后離心（5000 rpm離心數(shù)秒），取30l，加2倍量DNA提取液60l混勻100 8-9分鐘變性，放置冰箱0冷卻2-3分鐘, 1200

9、0rpm離心5分鐘，取出全部上清液置另1管混勻，再取5l加樣。4. 長(zhǎng)期放置冰箱冷藏血清樣本：取25l，加無(wú)菌水5l加2倍量DNA提取液60l混勻98 8-9分鐘變性，放置冰箱0冷卻2-3分鐘, 12000rpm離心5分鐘，取出全部上清液置另1管混勻，再取5l加樣.5. DNA提取液處理并冷藏保存血清樣本：DNA提取液處理：血清樣本混勻，取200l，加DNA提取液400l混勻98 5分鐘變性，放置冰箱0冷卻2-3分鐘, 12000rpm離心5分鐘，取出全部上清液置另1管混勻，冷藏保存，按100l /管分裝冷藏保存.保存血清樣本使用：取1管分裝冷藏保存血清樣本，融化后混勻，5000 rpm離心數(shù)

10、秒，再取30-40l 98 5-6分鐘變性，放置冰箱0冷卻2-3分鐘, 5000 rpm離心數(shù)秒，再取5l加樣.6.質(zhì)粒DNA有關(guān)質(zhì)控品（P和N）：用全陰性血清與質(zhì)粒DNA按9:1混勻, 5000rpm，離心1分鐘,再加2倍HBV DNA提取液混勻, 5000rpm，離心1分鐘，混勻血清98 5分鐘變性,12000rpm，離心10分鐘,吸取上清液, 取出全部上清液置另1管混勻，冷藏保存，按100l /管分裝冷藏保存.有關(guān)質(zhì)控品使用：取1管分裝冷藏保存質(zhì)控品，融化后混勻，5000 rpm離心數(shù)秒，再取30-40l 98 5-6分鐘變性，放置冰箱0冷卻2-3分鐘, 5000 rpm離心數(shù)秒，再取5

11、l加樣.五.防止熒光定量PCR產(chǎn)物污染的質(zhì)控規(guī)程1.目的規(guī)范熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)的操作過(guò)程，確保操作過(guò)程中無(wú)PCR產(chǎn)物污染。2.適用范圍本規(guī)范適用于熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)的操作過(guò)程。該規(guī)程參照中華人民共和國(guó)艾滋病核酸檢測(cè)技術(shù)規(guī)范。3.職責(zé)劃分操作人員按照此標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范進(jìn)行熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)，質(zhì)檢部經(jīng)理負(fù)責(zé)監(jiān)督。4.質(zhì)量保證體系4.1實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)工作區(qū)質(zhì)控體系實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)工作區(qū)原則上應(yīng)分為四個(gè)獨(dú)立工作區(qū)，分別是試劑準(zhǔn)備區(qū)(GMP車間超凈工作室)、樣品處理區(qū)（質(zhì)檢室1）、擴(kuò)增區(qū)（質(zhì)檢室2）和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)（質(zhì)檢室3）。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。各區(qū)的功能是：(1)樣品處理區(qū)：

12、樣品登記、分裝。各種組織勻漿或細(xì)胞裂解，進(jìn)行核酸提取、保存和加樣。（2)試劑準(zhǔn)備區(qū)：PCR擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。(3)擴(kuò)增區(qū)：普通PCR擴(kuò)增及熒光定量PCR擴(kuò)增。 (4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳、雜交、成像、測(cè)定、結(jié)果分析、報(bào)告。4.1.2用有效的方法對(duì)操作區(qū)域和共用器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒推薦的程序是：a. 實(shí)驗(yàn)前將次氯酸鈉溶液或70%乙醇涂布于操作臺(tái)或器具表面，兩分鐘后用紙巾擦除。b. 移入盛放污染材料的器皿、所需的試劑、耗材和樣品，進(jìn)行試驗(yàn)。c. 一個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域在同一時(shí)間段只進(jìn)行一種實(shí)驗(yàn)。d.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后移出個(gè)人專用材料至個(gè)人專用區(qū)域保管；封好污染材料盛放器皿并移出至污

13、物袋；移出共用器具至專門區(qū)域保管；將次氯酸鈉溶液或70%乙醇涂布于操作臺(tái)或器具表面，兩分鐘后用紙巾擦除；打開(kāi)紫外燈照射至少15分鐘。4.1.3實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)必須穿好實(shí)驗(yàn)工作服，并戴口罩，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)根據(jù)要求戴不同規(guī)格的手套。4.1.4 PCR產(chǎn)物分析使用相對(duì)封閉的系統(tǒng)或共用分析軟件時(shí)，如特定的凝膠成像分析檢測(cè)系統(tǒng)及分析軟件或熒光定量PCR儀及分析軟件，每位實(shí)驗(yàn)人員都要準(zhǔn)確的命名自己的設(shè)置程序及分析結(jié)果，使用完畢后需收拾好所用的儀器并保存好自己的實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。 各區(qū)域的儀器、設(shè)備、器具和試劑應(yīng)為該區(qū)專用，不得交叉使用。 4.2 熒光定量PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)過(guò)程控制體系：樣品的采集和處理.1用于普通PC

14、R或熒光定量PCR檢測(cè)的樣品有細(xì)胞、全血、血漿、各種組織和其他分泌物，有時(shí)還包括生物制品。.2采集樣品應(yīng)避免微生物和核酸污染（所用器皿必須無(wú)菌或?qū)儆谝淮涡杂闷?，RNA類樣品所用器皿必須沒(méi)有RNA酶污染）。.3處理樣品應(yīng)在樣品處理區(qū)由專人進(jìn)行。處理和保存用于抽提DNA或RNA的樣品應(yīng)避免DNA或RNA酶造成的降解，通常要求在采樣后1小時(shí)內(nèi)處理并低溫保存。.4處理后的樣品應(yīng)分裝、標(biāo)記（需用防水的筆填寫），并做好實(shí)驗(yàn)記錄，凍存于-20以下，DNA或RNA類樣品應(yīng)凍存于-60或保存在液氮中。核酸（RNA/DNA）提取4.2.2.1應(yīng)在規(guī)定的區(qū)域內(nèi)由專人按相應(yīng)程序進(jìn)行。.2應(yīng)保證無(wú)細(xì)菌及核酸污染，實(shí)驗(yàn)材

15、料和容器應(yīng)經(jīng)過(guò)消毒處理并一次性使用。.3提取RNA時(shí)應(yīng)避免RNA酶污染，抽提RNA樣品實(shí)驗(yàn)使用的移液器及離心管等用品必須用DEPC處理，去除RNA酶。.4 配制RNA逆轉(zhuǎn)錄或DNA反應(yīng)試劑，所有操作超過(guò)10分鐘時(shí)應(yīng)將反應(yīng)管置于冰盒內(nèi)，防止各種酶及樣品DNA或RNA降解。.3進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時(shí)應(yīng)避免RNA酶污染，實(shí)驗(yàn)使用的移液器及離心管等用品必須用DEPC處理，去除RNA酶。.4擴(kuò)增儀應(yīng)預(yù)熱，時(shí)間不少于20分鐘。.5 進(jìn)行內(nèi)參基因的擴(kuò)增（actin或GAPDH），并設(shè)置遞增PCR循環(huán)數(shù)，電泳確定逆轉(zhuǎn)錄的效率及CDNA樣品的起始濃度，為熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備，成功的逆轉(zhuǎn)錄樣品在PCR擴(kuò)增時(shí)25個(gè)循

16、環(huán)即可見(jiàn)清晰的內(nèi)參條帶。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)：.1應(yīng)在樣品處理區(qū)內(nèi)加樣?？焖贉?zhǔn)確的將樣品DNA或RNA小心加入裝有反應(yīng)液體的反應(yīng)管內(nèi)，蓋緊蓋子并做好標(biāo)記。.2操作超過(guò)10分鐘時(shí)應(yīng)將反應(yīng)管置于冰盒內(nèi)，防止酶降解及副反應(yīng)發(fā)生。.3嚴(yán)格按照熒光定量PCR儀的操作手冊(cè)啟動(dòng)機(jī)器，設(shè)置實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增程序，保存文件，最好以日期及樣品名稱命。PCR擴(kuò)增儀應(yīng)預(yù)熱，時(shí)間不少于20分鐘。.5將反應(yīng)管置于擴(kuò)增儀上，開(kāi)始擴(kuò)增。.6反應(yīng)結(jié)束時(shí)停止實(shí)驗(yàn)程序，取出反應(yīng)產(chǎn)物，20保存。.7擴(kuò)增結(jié)果分析和定量按照操作手冊(cè)進(jìn)行，對(duì)三孔平行的實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須首先判斷其是否準(zhǔn)確（孔間差異>0.3時(shí)應(yīng)考慮舍棄該孔數(shù)據(jù)，并重新進(jìn)行該樣品的熒光定

17、量PCR實(shí)驗(yàn)），然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出各樣品的濃度。.8結(jié)果報(bào)告中應(yīng)注明使用的實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)儀器及樣品種類和樣品量。4.3 客戶溝通質(zhì)量體系：4.3.1收到樣品后，由專業(yè)的負(fù)責(zé)人進(jìn)行樣品的清點(diǎn)和整理工作，以確保樣品數(shù)目的準(zhǔn)確性和樣品的有效性。如有問(wèn)題，應(yīng)及時(shí)的與客戶進(jìn)行溝通。在確保樣品無(wú)誤和有效的情況下，由專業(yè)的技術(shù)人員進(jìn)行樣品的處理工作核酸的抽提工作（按照標(biāo)準(zhǔn)操作）；并進(jìn)行抽提的DNA或RNA的濃度測(cè)定。在此步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將結(jié)果整理，并及時(shí)的發(fā)送給客戶。如有問(wèn)題出現(xiàn)，則和客戶及時(shí)溝通，保證實(shí)驗(yàn)的下一步工作。在確保核酸的抽提正確和有效的前提下，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄的實(shí)驗(yàn)過(guò)程（按照標(biāo)準(zhǔn)操作進(jìn)行

18、）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將結(jié)果整理，并及時(shí)的發(fā)送給客戶。如有問(wèn)題出現(xiàn)，則和客戶及時(shí)溝通，保證實(shí)驗(yàn)的下一步工作。在確保逆轉(zhuǎn)錄正確和有效的前提下，進(jìn)行樣品的預(yù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程。摸索檢測(cè)基因的反應(yīng)條件，并將結(jié)果及時(shí)通知客戶。在預(yù)實(shí)驗(yàn)成功的前提下，進(jìn)行正式的熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后，每周和客戶進(jìn)行一次溝通（可以通過(guò)電話或e-mail及網(wǎng)絡(luò)方式），匯報(bào)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展情況，并認(rèn)真記錄客戶提出的建議和意見(jiàn)，對(duì)出現(xiàn)的問(wèn)題隨時(shí)協(xié)商解決。六試劑盒的生產(chǎn)和制備 1試劑盒的生產(chǎn)和制備地點(diǎn) 在GMP凈化車間進(jìn)行，凈化車間內(nèi)工作的人員應(yīng)穿著符合要求的工作服和帽子。選材、式樣及穿戴方式應(yīng)與生產(chǎn)操作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)，并不得混用。

19、2工藝用水 制水設(shè)備應(yīng)滿足水質(zhì)要求并通過(guò)驗(yàn)證，經(jīng)滅菌處理。3微量加樣器 使用前后用滅菌消毒的紙包好，置傳遞窗，紫外線消除DNA30分鐘。4生產(chǎn)區(qū)域定期清潔、清洗和消毒 生產(chǎn)區(qū)域定期清潔、清洗和消毒，高風(fēng)險(xiǎn)的生物活性物料其操作應(yīng)使用單獨(dú)的空氣凈化系統(tǒng)，與相鄰區(qū)域保持負(fù)壓，排出的空氣不能循環(huán)使用。5 質(zhì)粒DNA制備和提純 在質(zhì)粒DNA制備和提純過(guò)程中,所有器具都應(yīng)滅菌消毒，紫外線照射，確保無(wú)質(zhì)粒DNA和PCR產(chǎn)物污染。質(zhì)粒DNA制備和提純后，立即分裝，置放于用高壓處理的容器中，60保存，防止質(zhì)粒DNA擴(kuò)散和被PCR產(chǎn)物汽溶膠污染。6 病毒(HBV)核酸定量標(biāo)準(zhǔn)品、陰性參考品、陽(yáng)性參考品，質(zhì)粒DNA

20、和PCR產(chǎn)物污染防止 將標(biāo)準(zhǔn)品和參考品包裝表面清除質(zhì)粒DNA和PCR產(chǎn)物污染后，在超凈工作條件下，分裝，置放于用高壓滅菌處理的容器中，60保存，防止質(zhì)粒DNA擴(kuò)散和被PCR產(chǎn)物汽溶膠污染。7 PCR反應(yīng)管的中PCR反應(yīng)產(chǎn)物污染消除 應(yīng)用尿嘧啶-N-糖基化酶（UNG酶）對(duì)DNA中dUTP的酶解作用酶PCR反應(yīng)產(chǎn)物DNA.將UNG酶100 u單位濃度稀液稀釋到0.5u/µl ,每支PCR反應(yīng)管中加入0.2µl,進(jìn)行UNG酶解,消除污染。含dUTP的10mM dNTP配制:原材料: dATP 100mM /250 µl; dGTP 100mM /250

21、81;l; dCTP 100mM /250 µl; dTATP 100mM /250 µl;dUTP 100mM /250 µl。配制10mM dNTP:dATP 100mM /20 µl; dGTP 100mM /20 µl;dCTP 100mM /20 µl; dTTP 100mM /10 µl;dUTP 100mM /10 µl; 合計(jì)25 mM /80 µl ,稀釋2.5倍-10 mM /200 µl。PCR循環(huán)條件按以下設(shè)置：37 5分鐘UNG酶解反應(yīng)，93 3分鐘預(yù)變性，然后93 3

22、0秒-55 30秒循環(huán)10次，93 30秒-55 60秒循環(huán)30次。37 5分鐘UNG酶解反應(yīng),使PCR反應(yīng)產(chǎn)物污染完全消除。七.質(zhì)量監(jiān)控點(diǎn)：工序質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制項(xiàng)目頻次生產(chǎn)前原輔料由指定供應(yīng)商提供批批檢驗(yàn)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)每一進(jìn)廠批次內(nèi)包裝材料外包裝材料純化水符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1次/周校準(zhǔn)原輔料符合配制要求 配制物料品種、數(shù)量1次/批投料計(jì)量設(shè)備經(jīng)過(guò)校驗(yàn),在有效期內(nèi)雙人復(fù)核稱量克隆菌種保存與純化純化菌種菌種復(fù)壯、純化、防污染1次/2月陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品制備質(zhì)粒制備純度、濃度1次/批陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品制備配制、分裝、低溫保存       &

23、#160;陰性質(zhì)控品制備血清蛋白制備無(wú)HBV、配制、分裝、低溫保存1次/批PCR反應(yīng)液制備防污染、移液器精確加量、配制、分裝、低溫保存隨時(shí)/班包裝包材數(shù)量、無(wú)破損、色澤統(tǒng)一隨時(shí)/班批號(hào)正確、清晰成品數(shù)量準(zhǔn)確、包裝碼放符合要求試劑盒保存低溫潔凈防止反復(fù)凍融，出現(xiàn)菌斑隨時(shí)/班八.生物安全準(zhǔn)則本標(biāo)準(zhǔn)旨在規(guī)范臨床實(shí)驗(yàn)室的安全管理，內(nèi)容著重在實(shí)驗(yàn)室和工作人員安全的一般要求，防火、用電、化學(xué)危險(xiǎn)物品、微生物的安全要求，以保證實(shí)驗(yàn)室的安全運(yùn)作，將事故控制在最低限度。為各級(jí)臨床實(shí)驗(yàn)室的安全管理提供依據(jù)。1.工作人員和實(shí)驗(yàn)室安全的一般要求1.1實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)絕對(duì)禁止吸煙。1.2實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)不得有食物、飲料及存在

24、“手口”接觸可能的其它物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)的冰箱禁止存放食物。1.3實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)禁止使用化妝品進(jìn)行化妝。1.4處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時(shí)，須使用安全鏡、面罩或其它保護(hù)眼睛和面部的防護(hù)用品。工作人員在實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)區(qū)內(nèi)不要佩戴隱形眼鏡，除非同時(shí)使用護(hù)目鏡或面罩。使用、處理能夠通過(guò)粘膜和皮膚感染的試劑，或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時(shí)，必須佩帶護(hù)目鏡、面罩或面具式呼吸器。1.5實(shí)驗(yàn)室工作人員在脫下手套后、離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前、接觸患者前后、以及在進(jìn)食或吸煙前都應(yīng)該洗手。接觸血液、體液或其它污染物時(shí)，應(yīng)立即洗手。1.6外衣（實(shí)驗(yàn)服、工作服、和圍裙）應(yīng)懸掛在遠(yuǎn)離散熱器、蒸汽管道、供暖裝置、以及有明火的地方，不要掛在壓縮

25、氣瓶或滅火器上，也不要掛在門的玻璃隔板上，妨礙視線?！扒鍧崱钡暮汀胺乔鍧崱钡膫€(gè)人防護(hù)服要分開(kāi)存放。1.7實(shí)驗(yàn)室的出口和通道必須保持暢通無(wú)阻，不準(zhǔn)堆放物品、垃圾、裝置、或設(shè)備。安全門必須保持暢通，不得堵塞。防火門前不能堆物，以確保失火時(shí)能夠自動(dòng)關(guān)閉。2.實(shí)驗(yàn)室用電安全準(zhǔn)則2.1作為儀器維護(hù)措施的一部分，應(yīng)進(jìn)行年度的安全用電檢查并建立檔案記錄。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)裝有足夠的插座，分布要合理，以減少在插座上接上其它多用插座和避免拖拉過(guò)多的電線。2.2所有電器設(shè)備的維修與維護(hù)只能由取得正式資格的維修人員進(jìn)行。3.實(shí)驗(yàn)室微生物安全準(zhǔn)則在臨床實(shí)驗(yàn)室，工作人員在接觸標(biāo)本和操作過(guò)程中，可能被感染。臨床實(shí)驗(yàn)室可能接觸的微生物可分為三類：病毒、細(xì)菌、其他具有高毒力的病原體，如出血熱病毒和立克次體。因?yàn)閺牟∈泛腕w檢不能可靠