中國藥典-2015-四部通則-9205 藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則

1、9205 藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則 本指導原則是用于指導藥品微生物檢驗用的潔凈室等受控環(huán)境微生物污染情況的監(jiān)測和控制。 藥品潔凈實驗室是指用于藥品無菌或微生物檢驗用的潔凈實驗室、隔離系統(tǒng)及其他受控環(huán)境。藥品潔凈實驗室的潔凈級別按空氣懸浮粒子大小和數(shù)量的不同參考現(xiàn)行“藥品生產質量管理規(guī)范”分為A、B、C、D 4個級別。為維持藥品潔凈實驗室操作環(huán)境的穩(wěn)定性、確保藥品質量安全及檢測結果的準確性，應對藥品潔凈實驗室進行微生物監(jiān)測和控制，使受控環(huán)境維持可接受的微生物污染風險水平。 本指導原則包括人員要求、初次使用的潔凈實驗室參數(shù)確認、微生物監(jiān)測方法、監(jiān)測頻次及監(jiān)測項目、監(jiān)測標準、警戒限和糾

2、偏限、數(shù)據(jù)分析及偏差處理、微生物鑒定和微生物控制。 人員 從事藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制的人員應符合現(xiàn)行中國藥典通則中“藥品微生物實驗室質量管理指導原則（通則9203）”的相關要求。 確認 初次使用的潔凈實驗室應進行參數(shù)確認，確認參數(shù)包括物理參數(shù)、空氣懸浮粒子和微生物。潔凈實驗室若有超凈工作臺、空氣調節(jié)系統(tǒng)等關鍵設備發(fā)生重大變化時應重新進行參數(shù)測試。 藥品潔凈實驗室物理參數(shù)的測試應當在微生物監(jiān)測方案實施之前進行，確保操作順暢，保證設備系統(tǒng)的運行能力和可靠性。主要的物理參數(shù)包括高效空氣過濾器完整性，氣流組織、空氣流速（平均風速），換氣次數(shù)、壓差、溫度和相對濕度等，測試應在模擬正常檢測條件下進

3、行。 各級別潔凈環(huán)境物理參數(shù)建議標準及最長監(jiān)測周期見表1，必要時，各實驗室應根據(jù)潔凈實驗室使用用途、檢測藥品的特性等制定適宜的參數(shù)標準。物理參數(shù)測試方法參照潔凈室施工及驗收規(guī)范的現(xiàn)行國家標準中附錄D3高效空氣過濾器現(xiàn)場掃描檢漏方法、附錄E12氣流的檢測、附 錄E1風量和風速的檢測、附錄E2靜壓差的檢測、附錄E5溫濕度的檢測進行。 初次使用的潔凈實驗室其空氣懸浮粒子和微生物的確認及監(jiān)測照以下“監(jiān)測”進行。 監(jiān)測 藥品潔凈實驗室應定期進行微生物監(jiān)測，內容包括非生物活性的空氣懸浮粒子數(shù)和有生物活性的微生物監(jiān)測，其中微生物監(jiān)測包括環(huán)境浮游菌和沉降菌監(jiān)測，及關鍵的檢測臺面、人員操作服表面及5指手套等的微

4、生物監(jiān)測。 當潔凈區(qū)有超凈工作臺、空氣調節(jié)系統(tǒng)等關鍵設備發(fā)生重大改變時應重新進行監(jiān)測；當微生物監(jiān)測結果或樣品測定結果產生偏離，經(jīng)評估潔凈區(qū)可能存在被污染的風險時，應對潔凈區(qū)進行清潔消毒后重新進行監(jiān)測。 1. 監(jiān)測方法 藥品潔凈實驗室懸浮粒子的監(jiān)測照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行；沉降菌的監(jiān)測照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行；浮游菌的監(jiān)測照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行。 表面微生物測定是對環(huán)境、設備和人員的表面微生物進行監(jiān)測，方法包括接觸碟法和擦拭法。接觸碟法是將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對規(guī)則表面或平面進行取樣，然后

5、置合適的溫度下培養(yǎng)一定時間并計數(shù)，每碟取樣面積約為 25cm2，微生物計數(shù)結果以cfu/碟報告；擦拭法是接觸碟法的補充，用于不規(guī)則表面的微生物監(jiān)測，特別是設備的不規(guī)則表面。擦拭法的擦拭面積應采用合適尺寸的無菌模板或標尺確定，取樣后，將拭子置合適的緩沖液或培養(yǎng)基中，充分振蕩，然后采用適宜的方法計數(shù)，每個拭子取樣面積為約25cm2，微生物計數(shù)結果以cfu/拭子報告。接觸碟法和擦拭法采用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和時間同浮游菌或沉降菌監(jiān)測。表面菌測定應在實驗結束后進行。 環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA），必要時可加入適宜的中和劑，當監(jiān)測結果有疑似真菌或考慮季節(jié)

6、因素影響時，可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）。 在藥品潔凈實驗室監(jiān)控中，監(jiān)測頻次及監(jiān)測項目建議按表2進行。 注：每月一次。工作臺面沉降菌的日常監(jiān)測采樣點數(shù)不少于3個，且每個采樣點的平皿數(shù)應不少于1個。每季度一次 每半年一次。 如果出現(xiàn)連續(xù)超過糾偏限和警戒限、關鍵區(qū)域內發(fā)現(xiàn)有污染微生物存在、空氣凈化系統(tǒng)進行任何重大的維修、消毒規(guī)程改變、設備有重大維修或增加、潔凈室（區(qū)）結構或區(qū)域分布有重大變動、引起微生物污染的事故、日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)時應考慮修改監(jiān)測頻次。 2. 監(jiān)測標準 各潔凈級別空氣懸浮粒子的標準見表3、微生物監(jiān)測的動態(tài)標準見表4。 表3 各潔凈級別空氣懸浮粒子的標準 懸浮粒

7、子最大允許數(shù)/立方米 潔凈度級別 靜態(tài) 動態(tài) 0. 5m 5. 0m 0.5m 5.0m A級 3520 20 3520 20 B級 3520 29 352000 2900 C級 352000 2900 3520000 29000 D級 3520000 29000 不作規(guī)定 不作規(guī)定 注：表中各數(shù)值均為平均值；單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。 3. 警戒限和糾偏限 藥品潔凈實驗室應根據(jù)歷史數(shù)據(jù)，結合不同潔凈區(qū)域的標準，采用適宜的方法，制定適當?shù)奈⑸锉O(jiān)測警戒限和糾偏限。限度確定后，應定期回顧評價，如歷史數(shù)據(jù)表明環(huán)境有所改善，限度應作出相應調整

8、以反映環(huán)境實際質量狀況。表5列出了各級別潔凈環(huán)境微生物糾偏限參考值。 注：數(shù)據(jù)表示建議的環(huán)境質量水平，也可根據(jù)檢測或分析方法的類型確定微生物糾偏限度標準；可根據(jù)潔凈區(qū)域用途、檢測藥品的特性等需要增加沉降碟數(shù)；A級環(huán)境的樣本，正常情況下應無微生物污染。 4. 數(shù)據(jù)分析及偏差處理 數(shù)據(jù)分析 應當對日常環(huán)境監(jiān)測的數(shù)據(jù)進行分析和回顧，通過收集的數(shù)據(jù)和趨勢分析，總結和評估潔凈實驗室是否受控，評估警戒限和糾偏限是否適合，評估所采取的糾偏措施是否合適。 應當正確評估微生物污染，不僅僅關注微生物數(shù)量，更應關注微生物污染檢出的頻率，往往在一個采樣周期內同一環(huán)境中多點發(fā)現(xiàn)微生物污染，可能預示著風險增加，應仔細評估

9、。幾個位點同時有污染的現(xiàn)象也可能由不規(guī)范的采樣操作引起，所以在得出環(huán)境可能失控的結論之前，應仔細回顧采樣操作過程。在污染后的幾天對環(huán)境進行重新采樣是沒有意義的，因為采樣過程不具有可重復性。 偏差處理 當微生物監(jiān)測結果超出糾偏限度時，應當按照偏差處理規(guī)程進行報告、記錄、調查、處理以及采取糾正措施，并對糾正措施的有效性進行評估。 5. 微生物鑒定 建議對受控環(huán)境收集到的微生物進行適當水平的鑒定，微生物菌群信息有助于預期常見菌群，并有助于評估清潔或消毒規(guī)程、方法、清潔劑或消毒劑及微生物監(jiān)測方法的有效性，尤其當超過監(jiān)測限度時，微生物鑒定信息有助于污染源的調査。關鍵區(qū)域分離到的菌落應先于非關鍵區(qū)域進行鑒定。微生物鑒定參照微生物鑒定指導原則（通則9204）進行。 微生物控制 為了保證藥品潔凈實驗室環(huán)境維持適當?shù)乃剑⑻幱谑芸貭顟B(tài)，除保持空調系統(tǒng)的良好運行狀態(tài)，對設施進行良好維護外，潔凈室內人員應嚴格遵守良好的行為規(guī)范，并定期進行環(huán)境監(jiān)控，減少人員干預比監(jiān)測更有效。其次是通過有效控制人員和物品的移動，適當?shù)目刂茰囟群蜐穸取Ｎ⑸锟刂拼胧┻€包括良好的清潔和衛(wèi)生處理，應定期對藥品潔凈實驗室進行清潔和消毒，應當監(jiān)測消毒劑和清潔劑的微生物污染狀況，并在規(guī)定