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文檔簡介

1、聚磷菌的篩選及原生質體融合構建耐熱高效PAOs【摘要】 本論文從采自西安市北石橋污水凈化中心和山東威海市污水處理廠的活性污泥中分離、純化得到15株具有不同菌落形態(tài)的純菌株,通過藍白斑實驗、PHB染色和多聚磷酸鹽染色實驗以及聚磷能力測定實驗等方法篩選出一株高效的PAOs菌株,并將其命名為XB7。該菌株在YG培養(yǎng)基平板上呈白色,菌落形態(tài)不規(guī)則、表面粗糙、不透明,邊緣較平整,有臭味。顯微鏡下觀察該菌呈桿狀,革蘭氏陰性。生理生化反應鑒定為甲基紅試驗、V.P.試驗、檸檬酸鹽試驗、H2S試驗、淀粉水解試驗呈陰性,氧化酶反應、硝酸鹽還原反應、明膠液化實驗呈陽性,且具運動性。參照Bergeys Manual

2、of Determinative Bacteriology和常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊,初步確定菌株XB7為惡臭假單胞菌(Pseudomonas putida)。對菌株XB7的生長特性研究表明,其最適生長pH為7.5,此時菌體濃度的OD值為0.93、聚磷率為92.4%。當pH小于6.0或大于8.5時,菌株XB7的生長受到抑制,聚磷能力偏低。當pH為5.5時,其聚磷率只有36%。菌株XB7的最適生長溫度為25,此時菌體濃度OD600值為0.915,. 更多還原【Abstract】 In this paper, fifteen strains with different colony sha

3、pe were isolated from activated sludge of two sewage factories. Highest efficient PAOs, named XB7, was screened by using screening method of blue-and white-colored testing, PHB staining, poly-P and phosphorus capacity. The colony of this screening stain was white, irregular shape, rough surface, opa

4、que, smooth margin fishy smell in the YG media. Its was long rods and gram-positive under the microscope. Physiological and biochemical tests we. 更多還原 【關鍵詞】 聚磷菌; 生物除磷; 菌種篩選; 生長特性; He-Ne激光; 耐熱性; 【Key words】 Phosphorus accumulation organisms(PAOs); Biological phosphorus removal; strain screening;

5、 Growth characters; He-Ne laser; Heat resistance; 中文摘要 2-3 Abstract 3-4 第一章 文獻綜述 8-24 1 研究背景 8-9 2 國內(nèi)外污水除磷方法的研究現(xiàn)狀 9-11 3 生物除磷的研究進展 11-15 3.1 水生生物法 11 3.2 微-植聯(lián)合法 11-12 3.3 微生物除磷 12-15 4 原生質體融合 15-22 4.1 原生質體的制備及其影響因素 15-17 4.2 原生質體融合方法 17-19 4.3 原生質體再生的方法和影響因素 19-20 4.4 融合子的篩選與鑒定 20-21 4.5 原生質體融合技術在污

6、水處理中的應用 21-22 5 本論文的研究目的、意義和主要內(nèi)容 22-24 5.1 論文研究的目的和意義 22-23 5.2 論文主要的研究內(nèi)容 23-24 第二章 PAOs高效菌株的篩選和鑒定 24-37 1 實驗材料 24-27 1.1 樣品來源 24 1.2 培養(yǎng)基 24-26 1.3 主要設備和儀器 26 1.4 分析方法 26-27 2 實驗方法 27-31 2.1 PAOs菌株的馴化與富集 27 2.2 PAOs菌株的分離和純化 27-28 2.3 APOS菌株的篩選 28-29 2.4 PAOs菌株的鑒定 29-31 3 結果與討論 31-36 3.1 PAOs的分離篩選結果

7、31-32 3.2 染色篩選結果 32-34 3.3 聚磷能力篩選結果 34-35 3.4 PAOs菌株的鑒定結果 35-36 4 小結 36-37 第三章 PAOs高效菌株的生長特性研究 37-43 1 實驗材料 37-38 1.1 菌種 37 1.2 培養(yǎng)基 37 1.3 主要設備和儀器 37-38 1.4 分析方法 38 2 實驗方法 38-39 2.1 種子液的制備 38 2.2 PAOs的生長曲線測定 38 2.3 PAOs的pH敏感實驗 38 2.4 PAOs的溫度敏感實驗 38-39 3 結果與討論 39-42 3.1 PAOs的生長曲線 39-40 3.2 PAOs的pH敏感實

8、驗結果 40-41 3.3 PAOs的溫度敏感實驗結果 41-42 4 小結 42-43 第四章 He-Ne激光-PEG復合誘導原生質體融合構建耐熱高效 PAOs 43-56 1 實驗材料 43-44 1.1 實驗菌株 43 1.2 培養(yǎng)基及主要實驗溶液 43-44 1.3 主要儀器和設備 44 1.4 分析方法 44 2 實驗方法 44-47 2.1 實驗菌株的活化和菌懸液的制備 44-45 2.2 原生質體的制備 45 2.3 原生質體的再生 45-46 2.4 雙親原生質體滅活 46 2.5 激光-PEG復合誘導原生質體的融合 46 2.6 融合子的檢出和穩(wěn)定性的測定 46-47 2.7 融合子的生長條件和聚磷能力研究 47 3 結果與討論 47-54 3.1 制備雙親原生質體的最佳酶解條件 47-48 3.2 原生質體的制備率和再生率 48-49 3.3 雙親原生質體滅活 49-50 3

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