生脈散對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血液流變學(xué)及抗氧化作用的實(shí)驗(yàn)研究_

1、生脈散對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血液流變學(xué)及抗氧化作用的實(shí)驗(yàn)研究廖澤云1,姜錦林2,劉 紅1(1.湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院,湖北恩施445000;2.湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院,湖北恩施445000摘 要:目的:觀察古方生脈散口服液對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠的血液流變學(xué)及抗氧化作用的影響。方法:將W istar 大鼠45只隨機(jī)分為對照組、高脂血癥模型組(以下簡稱模型組和生脈散組,喂飼法建立高脂血癥大鼠模型,灌胃給藥4周,測定每組大鼠血脂成分、血液流變指標(biāo)和氧自由基的變化。結(jié)果:與對照組比較,模型組大鼠血中膽固醇(TC、甘油三酯(TG 、低密度脂蛋白(LDL -C升高,脂質(zhì)過氧化物(M DA 含量增加、超氧化物歧

2、化酶(SOD 及谷光甘肽過氧化物酶(GS H -PX 活性明顯降低,血液流變學(xué)異常;與模型組比較,生脈散組大鼠血漿中TC 、TG 值明顯降低,高密度脂蛋白(HDL -C升高,M DA 含量減少,SOD 及G S H -PX 活性增強(qiáng),血液黏度、紅細(xì)胞和血小板聚集能力明顯降低。結(jié)論:古方生脈散口服液能夠調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂代謝、改善血流狀態(tài)、清除氧自由基,對高脂血癥和心血管系統(tǒng)疾病有一定的治療作用。關(guān)鍵詞:生脈散;血液流變;氧自由基;高脂血癥中圖分類號:R 285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B 文章編號:1000-1719(200710-1478-02Effec ts of Traditional SHE

3、NG MAI SAN on Seru m L ipid and B lood R heology &Oxygen F ree Radical of Hyperli p ide m iaM ode lR atsL I AO Ze yun 1,JIAN G J i n lin 2,LIU H ong 1(1.M e d ical S chool of H ubei Instit u te for N ati onalities ,Enshi 445000,H ubei ,China ;2.The A ff ili a te d H osp it a l of M edica l Schoo

4、l of H ubei Ins titute for N ationalities ,E nshi 445000,H ubei ,ChinaAbstract :O bjective :T o study the preventi ve and hea lth e ffects o f S H EN G M A I SAN on hyperli p i de m i a .M ethod s :45W istarra ts w ere d i v i ded i n t o three groups :contro l group ,m ode l group and Shengm a i sa

5、n g roup .W i star ra ts were fed respec ti ve l y w ithstandard d i et ,15w eeks later ,to measure seru m lipi d ,blood rheo l ogy and oxyg en free radical i n rats .R esu lt :A t the end o f expe r i m ent ,the serum TC ,TG and LDL -C lev els of model groups w ere h i ghe r than the contro l g rou

6、ps ,the qua lity ofM DA w ere high e r ,the acti v ity o f SOD and G S H -PX w ere l ow er ,b l ood rheo logy w ere si gn ifi cantl y changed .the se ru m T C and TG levels of S H EN G M A I SAN g roup we re s i gnificantl y l ow er t han t he m ode l group ,HDL -C was higher ,t he qua li ty ofM DA

7、w ere l ow er ,the ac ti v iti es of S OD and GS H -PX we re hi gher ,blood v i scos i ty ,the ab ility o fRBC and plate l e t aggregati on w ere si gnificantly lo w er .Conclusion:S H EN G M A I SAN can regu l a te hyper lipi de m ia rats serum li p i d and li poprote i n ,i m prove he r mo rrheo l

8、ogy ,c l ean oxy gen free radica ,l there w ere preven tive and health e ffects o f T raditi ona l S H EN G M A I SAN on hyper lipi de m ia and cardiovascu lar d i sease .K eywords :S H EN G M A I SAN ;b l ood rheo l ogy ;oxygen free rad i ca ;l hyperli p i de m i a收稿日期:2007-05-24基金項(xiàng)目:湖北省衛(wèi)生廳資助項(xiàng)目(J X

9、 I B120作者簡介:廖澤云(1965-,男(土家族,湖北恩施人,副教授,碩士,主要從事中藥藥理基礎(chǔ)研究。古方 生脈散 乃中醫(yī)名方,功能主治:益氣生津、養(yǎng)心補(bǔ)肺,臨床上常用于治療氣陰兩虛患者,有大補(bǔ)元?dú)?、固脫?fù)脈的功效。主要由人參、麥冬、五味子組成,其有效成分為人參皂苷、麥冬皂苷、麥冬黃酮、五味子素等,有多種藥理作用。有研究表明,生脈散可以改變動(dòng)物血脂成分及脂蛋白組分,影響血液流變學(xué)指標(biāo),并且有一定的抗氧化能力1-3。本實(shí)驗(yàn)通過高脂血癥大鼠動(dòng)物模型,觀察了生脈散口服液對脂質(zhì)水平異常的動(dòng)物個(gè)體在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抗脂質(zhì)過氧化損傷及血液流變等方面的影響。1 材料與方法1.1 主要試劑和儀器 TC 、

10、TG 試劑盒由美國波音特提供;HDL-C 試劑盒由上海波亞提供;MDA 、SOD 及GSH -PX 試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供;二磷酸腺苷(ADP系S ig m a 公司產(chǎn)品;AEROSET 09D05-01全自動(dòng)生化分析儀(美國,756型紫外分光光度計(jì)(上海分析儀器總廠,TL-16G 型高速冷凍離心機(jī)(上海實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn),全自動(dòng)血液流變快速分析儀(重慶大學(xué)維多生物工程研究所產(chǎn)品。1.2 藥品 生脈散由黨參、麥冬、五味子組成,所有藥物均來自湖北民族學(xué)院附屬醫(yī)院中藥房,并由醫(yī)學(xué)中藥制劑室按傳統(tǒng)方法煎制成含生藥2g /mL 的水煎液備用。1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 W istar 大鼠45只,雄性

11、,離乳2周齡,體重3040g ,由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.4 大鼠高脂血癥模型3 平衡喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為對照組、模型組、生脈散組。對照組喂以標(biāo)準(zhǔn)飼料(由湖北省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供,模型組、生脈散組均喂以在標(biāo)準(zhǔn)飼料中添加1.5%膽固醇、10%豬油、5%蛋黃和0.5%膽酸鈉的高脂飼料,其中對照組、模型組飲用自來水,生脈散組飲用20%生脈散水,實(shí)驗(yàn)室溫度為(202#。按上述要求持續(xù)喂養(yǎng)15周后,取血進(jìn)行檢測并鏡下尸檢觀察主動(dòng)脈粥樣變化。1.5 測定指標(biāo)和方法 (1血脂:TC采用膽固醇脂酶比色法測定,TG采用脂肪酶比色法測定,HDL-C 采用PEG6000沉淀法測定,LDL-C則由公式法

12、推出(LDL-C=TC-H DL-C-14/5TG。(2氧自由基:采用硫代巴比妥酸顯色法檢測MDA含量,黃嘌呤氧化酶法測定SOD,二硫代二硝基苯甲酸法測定GS H-PX。(3血液流變學(xué)指標(biāo)檢測:取紅細(xì)胞聚集指數(shù)(EA I,紅細(xì)胞變行指數(shù)(ER I,纖維蛋白原(FI B,全血黏度(b 取高切值200s-1、低切值3s-1,血漿黏度(p ,在血液高速離心后高切變率下檢測值做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。血小板聚集功能(PAG采用枸椽酸鈉抗凝血?jiǎng)┤「缓“逖獫{(PRP和貧血血漿(PPP,以ADP為誘聚劑按比濁法測定。1.6 數(shù)據(jù)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS FOR W I N DOW S 10.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)處

13、理。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1 生脈散對模型大鼠體重的影響 15周飼養(yǎng)后,動(dòng)物體重的變化主要表現(xiàn)在第10周以后,組間差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。模型組和生脈散組大鼠體重與對照組比較均明顯升高(P<0.01,而生脈散組大鼠體重又明顯低于模型組且組間差異顯著(P<0.01,見表1。表1 生脈散對模型大鼠體重的影響( xs,n=15組別1周(g9周(g11周(g15(g正常組393221112411330913模型組41425213*26914*34416*生脈散組43324212*24811*31914注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比較,P<0.01。2.2 生脈散對高脂血癥

14、模型大鼠TG TC H DL-C及LDL-C的影響 15周飼養(yǎng)后,與對照組比較,模型組大鼠TC、TG和LDL-C明顯升高(P<0.01;與模型組比較,生脈散組大鼠TC、TG、LDL-C的水平明顯降低(P<0.05,HDL-C明顯升高(P<0.01。見表2。表2生脈散對高脂血癥模型大鼠TG TCHDL-C及LDL-C的影響(mmo l/L, xs,n=15組別TC T G HDL-C LDL-C模型組6.100.56*1.320.26*1.120.171.830.30*生脈散組5.050.300.930.141.390.171.520.27注:與對照組比較,*P<0.01

15、;與模型組比較,P<0.05,P<0.01。2.3 生脈散對模型大鼠SOD MDA及GS H-PX的影響 經(jīng)過15周喂養(yǎng)后,與對照組比較,模型組MDA含量顯著升高,SOD、GSH-PX活性明顯降低(P< 0.01;與模型組比較,生脈散組MDA含量明顯減少, SOD、GSH-PX活力明顯增強(qiáng)(P<0.05。見表3。表3 生脈散對模型大鼠SOD M DA及GSH-PX的影響(n=15, xs模型組6.460.69*204.8033.68*62.6611.78*生脈散組5.510.48267.7032.0168.1011.91注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比

16、較,P<0.05,P<0.01。2.4 生脈散對高脂血癥模型大鼠血液流變學(xué)的影響 模型組大鼠的全血黏度、血漿黏度、PAG、EA I、纖維蛋白原升高,ERI降低,與對照組比較組間差異顯著;與模型組動(dòng)物組比較,生脈散組均能不同程度恢復(fù)血液流變學(xué)的各項(xiàng)指標(biāo),且生脈散組和對照組組間比較沒有顯著差異性。見表4。表4 生脈散對模型大鼠血液流變學(xué)的影響( xs,n=15組別b(map!sH b L bp(mp a!sPAG(%FIB(g/LERI EA I正常組5.530.4311.081.38 1.870.4935.935.64 3.810.560.760.154.190.22模型組6.981

17、.16*14.281.83* 2.760.52*51.337.53* 4.670.89*0.530.21*5.060.65*生脈散組5.820.5611.422.07 2.120.3442.274.47 4.070.580.680.154.350.36 注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比較,P<0.01,P<0.05。3 討 論對高脂血癥動(dòng)物模型組各項(xiàng)指標(biāo)的測定表明,血TC、TG和LDL-C水平顯著高于對照組,鏡下觀動(dòng)脈粥樣化(AS形成,說明動(dòng)物模型的建立成功,用含高膽固醇高脂飼料飼養(yǎng)動(dòng)物,已經(jīng)造成了大鼠心血管系統(tǒng)組織細(xì)胞的損傷或代謝紊亂。生脈散組結(jié)果顯示,藥物降低

18、高脂飲食動(dòng)物TC、TG及LDL-C,而使HDL -C升高。由于TC、TG的升高是形成高脂血癥的重要因素5-6,血脂升高、血液流速緩慢,可引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和灶狀脫落,血管壁通透性升高,血漿脂蛋白得以進(jìn)入內(nèi)膜,引起巨噬細(xì)胞的清除反應(yīng)和血管平滑肌細(xì)胞(S MC增生,導(dǎo)致AS形成,血流循環(huán)不暢,供血供養(yǎng)不足,直接造成心血管系統(tǒng)損傷7。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,高脂血癥模型組的血清和心肌組織中MDA明顯升高, SOD、GS H-PX明顯降低,這說明氧自由基在高脂血癥中直接參與了對心血管系統(tǒng)損傷,生脈散能明顯抑制因高脂血癥導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧化,減少M(fèi)DA含量,增強(qiáng)SOD 和GS H-PX活力,表現(xiàn)出強(qiáng)抗氧化能力。血液流變學(xué)異常導(dǎo)致正常血液循環(huán)紊亂,使血管內(nèi)皮細(xì)胞與血液有形成分之間的相互作用方式發(fā)生了改變,尤其是在血液高黏度狀態(tài)下,血小板、白細(xì)胞的黏附及聚集功能增強(qiáng),血管壁受到的變力增強(qiáng),內(nèi)皮細(xì)胞易于損傷。生脈散能夠降低高脂血癥大鼠血黏度,對大鼠血液中紅細(xì)胞、血小板的聚集有明顯的抑制作用,表明生脈散能改善血液流變性,維持血細(xì)胞正常功能,增強(qiáng)血流速度,改善血液循環(huán)和微循環(huán)。綜上所述,古方生脈散有其獨(dú)特的藥理和生理活性,能夠調(diào)節(jié)血脂代謝,改善血液循環(huán)和微循環(huán),提高機(jī)體缺氧耐力,對治療高脂血癥和心血管疾病有良好作用,為臨床上利用中西醫(yī)結(jié)