油脂中磷脂的測定

1、油脂中磷脂的測定。GB 553785本標準適用于商品植物油脂中磷脂的測定。油脂中磷脂即由甘油、脂肪酸、磷酸和氨基醇等所組成的復雜的化合物。1鉬藍比色法1.1儀器和用具1.1.1瓷坩堝或石英坩堝；1.1.2分光光度計或帶塞的50 ml比色管；1.1.3移液管：5、10 ml；1.1.4電爐、高溫爐；1.1.5容量瓶：100、500、1000 ml；1.1.6表面皿、燒杯、量筒；1.1.7恒溫水浴鍋；1.1.8漏斗、坩堝鉗、試劑瓶等。1.2試劑1.2.150氫氧化鉀溶液；1.2.2鹽酸、硫酸、氧化鋅、濾紙；1.2.30.015硫酸聯(lián)氨溶液；1.2.42.5鉬酸鈉稀硫酸溶液：量取140 ml硫酸注入

2、300 ml水中，搖勻，冷卻至室溫，加入 12.5 g鉬酸鈉，溶解后加水至500 ml，搖勻，靜置24 h備用。1.2.5磷標準溶液：稱取無水的磷酸二氫鉀0.4391 g溶于1000 ml水中，作為1號液，含磷0.1 mg/ml，吸取1號液10 ml，加水稀釋至100 ml，含磷0.01 mg/ml，作為2號液，比色用。1.3操作方法1.3.1繪制標準曲線：取5只50 ml比色管，編成1，2，4，6，8五個號碼，按號碼順序分別注入磷標準2號液1，2，4，6，8 ml，再按順序分別加水9，8，6，4，2 ml。接著向5只管內(nèi)各加0.015硫酸聯(lián)氨溶液8.0ml；各加鉬酸鈉稀硫酸溶液2.0 ml，

3、加塞、搖勻。去塞，將5只管置于正在沸騰的水浴中加熱10 min，取出冷卻至室溫，用水稀釋至50 ml，充分搖勻，經(jīng)10 min后，用分光光度計在波長650 nm 下，用3 cm液槽，用水調(diào)整零點，分別測定消化值。以消化值為縱坐標，以磷量（0.01、0.02、0.04、 0.06、0.08 mg）為橫坐標繪制標準曲線。1.3.2制備被測液：用坩堝稱取試樣約10 g（準確至0.001 g），加氧化鋅0.5 g，先在電爐上加熱炭化，然后送入550600的高溫爐中灼燒至灰化（白色），灼燒時間約2 h，取出坩堝冷卻至室溫，用熱鹽酸（11）10 ml溶解灰分，并加熱微沸5 min，將溶解液過濾注入100

4、ml容量瓶中，用熱水沖洗坩堝和濾紙，待濾液冷卻至室溫后，用50氫氧化鉀溶液中和至出現(xiàn)混濁，緩慢滴加鹽酸使氧化鋅沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀釋至刻度，搖勻。1.3.3比色：用移液管吸取被測液10 ml注入50 ml比色管中，加入0.015硫酸聯(lián)氨8.0 ml，加2.0 ml鉬酸鈉稀硫酸溶液，加塞，搖勻。去塞，將比色管置于正在沸騰的水浴中加熱10 min，取出冷卻至室溫，用水稀釋至50 ml，充分搖勻，經(jīng)10 min后，用分光光度計在波長650 nm下，用3 cm液槽，用水調(diào)整零點，測定消光值。1.4結果計算根據(jù)被測液的消光值，從標準曲線查得磷量（P），按公式（1）計算磷脂含量：（1）式中

5、：P標準曲線查得的磷量，mg；V2樣品灰化后稀釋的體積，ml；V1比色時所取的被測液體積，ml；每毫克磷相當于磷脂的毫克數(shù)；W試樣重量，g。雙試驗結果允許差不超過0.04，求其平均數(shù)，即為測定結果。測定結果取小數(shù)點后第二位。2重量法2.1儀器和用具2.1.1玻璃漏斗、漏斗架；2.1.2燒杯：100 ml；2.1.3錐形瓶、濾紙等。2.2試劑丙酮。2.3操作方法取混勻的樣品約100 ml，加熱約90時進行過濾。用燒杯稱取試樣25 g，加熱至80，加水22.5ml，充分攪拌使之水化，在室溫下靜置過夜，或進行離心沉淀，傾出上層清液，用已知恒重的濾紙（或用抽氣裝置抽濾）進行過濾，待濾液全部濾出后，用冷的丙酮把杯內(nèi)殘留的沉淀沖洗入濾紙中，繼續(xù)用丙酮洗滌濾紙和沉淀，洗至無油跡為止。待濾紙和沉淀上的丙酮揮盡后，送入105烘箱中烘至恒重。2.4結果計算重量