同型半胱氨酸測(cè)定檢測(cè)操作程序(共4頁(yè))

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上概述血清同型半胱氨酸(Hcy)是人體內(nèi)含硫氨基酸的一個(gè)重要的代謝中間產(chǎn)物，可能是動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病發(fā)病的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因子。Hcy水平升高被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病獨(dú)立的漸進(jìn)性致病因素，血漿中同型半胱氨酸含量與遺傳因素、營(yíng)養(yǎng)因素、雌激素水平、年齡因素等有關(guān)，同型半胱氨酸又稱(chēng)為高半胱氨酸，Hcy的正常參考值隨測(cè)定方法和種族人群的不同而有所不同，一般正?？崭寡獫{總Hcy水平為5-15mol/L。研究表明：Hcy每升高5umol/L腦卒中風(fēng)險(xiǎn)升高59%，缺血性心臟病風(fēng)險(xiǎn)升高32%；Hcy每降低5umol/L腦卒中風(fēng)險(xiǎn)降低24%，缺血性心臟病風(fēng)險(xiǎn)降低16%.Hcy水平與心

2、血管事件風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)。1 目的規(guī)范血清同型半胱氨酸檢測(cè)測(cè)試，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和重復(fù)性。2 檢測(cè)方法和原理2.1檢測(cè)方法：速率法2.2檢測(cè)原理：本產(chǎn)品基于一種新型酶法，樣本中的氧化型Hcy被轉(zhuǎn)化為游離型Hcy后，進(jìn)行一系列循環(huán)反應(yīng)，這種基于共價(jià) 底物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的酶循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)大大提高了檢測(cè)的靈敏度，主要是利用S-腺苷同型半胱氣酸(SAH)水解酶反應(yīng)原理， 在該反應(yīng)中SAH被水解酶水解成腺苷和Hcy,腺苷立即水 解成氨和次黃嘌呤，氨在谷氨酸脫氫酶的作用下，NADH 轉(zhuǎn)化為NAD,樣本中Hcy濃度與NADH轉(zhuǎn)化速率成正比。3 標(biāo)本采集與保護(hù)新鮮無(wú)溶血血清或EDTA、肝素抗凝血漿遵守以下推薦的血清標(biāo)本

3、處理，運(yùn)行和儲(chǔ)存步驟3.1用真空采樣管采集血液標(biāo)本時(shí)須遵守常規(guī)注意事項(xiàng)3.2離心前使標(biāo)本完全自然形成凝塊3.3全程保證樣品管的密閉狀態(tài)3.4盡快分離血清，并及時(shí)測(cè)定3.5如果標(biāo)本不能在24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)或運(yùn)送標(biāo)本時(shí)，將標(biāo)本保存在4或更低溫度的環(huán)境中：3.6冷藏標(biāo)本室溫放置20分鐘后再測(cè)定；3.7冷凍標(biāo)本室溫解溶后放置20分鐘后再測(cè)定3.8不符合標(biāo)本處理3.8.1溶血和乳糜血標(biāo)本在報(bào)告單的備注欄注明3.8.2標(biāo)本量過(guò)少的標(biāo)本，嚴(yán)重溶血和乳糜血標(biāo)本與臨床溝通并將標(biāo)本退回，填寫(xiě)不合格標(biāo)本拒接登記。4 試劑和設(shè)備4.1試劑采用深圳奧薩制藥有限公司試劑4.1.1試劑組成試劑1 S-腺苷甲硫氨酸（SAM) 0

4、. 1 mM煙酸胺腺嘌呤二核苷酸（NADH) 0. 3 mM三（2-羧乙基）膦氯化氫（TCEP) 0. 5 mM酮戊二酸（Oxoglutarate) 5. 0 mMHcy甲基轉(zhuǎn)移酶（HMTase) 5.0 KU/L試劑2 谷氨酸脫氫酶（GLDH） 10.0 KU/L S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶（SAHase） 3.0 KU/L腺苷脫氨酶（ADA） 5.0 KU/L4.1.2試劑準(zhǔn)備;恢復(fù)室溫后使用4.1.3試劑保存試劑28避光保存，并于有效期為12個(gè)月4.2質(zhì)控品質(zhì)控品為與試劑配套的臨床化學(xué)質(zhì)控品4.3警告和注意事項(xiàng)4.3.1只可用于體外診斷；4.3.2試劑中含有防腐劑和穩(wěn)定劑，可能

5、存在一定刺激作用和毒性，請(qǐng)勿直接接觸皮膚和眼睛，請(qǐng)勿吞服；4.3.3試劑盒的測(cè)定結(jié)果僅作為臨床各種疾病的輔助診斷依據(jù)4.4儀器便攜式同型半胱氨酸監(jiān)測(cè)儀5 操作程序5.1檢測(cè)過(guò)程流程簽收樣品離心上機(jī)檢測(cè)審核報(bào)告簽發(fā)報(bào)告標(biāo)本保存5.2樣本簽收嚴(yán)格按標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本5.3標(biāo)本處理以3000r/min，離心610min，分離血清上機(jī)測(cè)定，若標(biāo)本不能及時(shí)檢測(cè)，將分離血清冷藏于28的冰箱內(nèi)5.4標(biāo)本檢測(cè)5.4.1從冰箱中取出試劑1 (R1)和試劑2 (R2),使試劑恢復(fù)至室溫；5.4.2按照便攜式同型半胱氨酸檢測(cè)儀操作方法，插卡，輸入樣本信息，確認(rèn)；5.4.3按照儀器提示，精密量取8 u 1樣本加入試

6、劑1的比色管中；5.4.4啟動(dòng)反應(yīng)，等到儀器發(fā)出提示音后，按照儀器操作步驟，精密量取40 u 1試劑2加入比色管中；5.4.5儀器啟動(dòng)檢測(cè)；5.4.6自動(dòng)檢測(cè)完成后，讀取檢測(cè)結(jié)果或打印報(bào)告5.5檢驗(yàn)后標(biāo)本保存保存在標(biāo)本冰箱內(nèi)，保存期為7d6 校準(zhǔn)程序6.1校準(zhǔn)品的準(zhǔn)備和儲(chǔ)存直接使用，28保存。6.2校準(zhǔn)條件在室內(nèi)質(zhì)控失控，或更換儀器主要配件，或進(jìn)行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)。無(wú)特殊情況校準(zhǔn)周期為21d6.3校準(zhǔn)程序本儀器校準(zhǔn)由廠家工程師負(fù)責(zé)校準(zhǔn)。7 質(zhì)量控制程序7.1控制品的準(zhǔn)備和儲(chǔ)存試劑28避光保存7.2控制品水平和分析批長(zhǎng)度每24h至少進(jìn)行1批。7.3質(zhì)控操作程序參見(jiàn)生化組的質(zhì)量控制操作程序。8 性

7、能參數(shù)8.1準(zhǔn)確性 線性偏差不超過(guò)10%8.2精密度 CV108.3線性范圍 348umol/L9 生物參考區(qū)間015umol/L10異常結(jié)果的處理結(jié)果與診斷不符或兩次結(jié)果差異較大時(shí)，應(yīng)及時(shí)與臨床溝通。11 臨床意義10%的冠心病患者與同型半胱氨酸升高有關(guān)，輕、中度同型半胱氨酸水平升高可使心血管疾病死亡危險(xiǎn)性增加4-6倍，血漿總Hcy水平每升高5mol/L則冠心病危險(xiǎn)性男性增加60%，女性增加80%，相對(duì)危險(xiǎn)性男性為1.6，女性為1.8，相當(dāng)于總膽固醇每升高20mg/dL的危險(xiǎn)性，因此成為冠心病的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素。血漿同型半胱氨酸水平與冠狀動(dòng)脈病變血管的支數(shù)有一定關(guān)系，有人研究結(jié)果表明，單支、

8、雙支、多支血管病變的患者血漿Hcy水平呈逐級(jí)上升趨勢(shì)。并且與血管病變的嚴(yán)重程度有關(guān)，研究表明，冠狀動(dòng)脈狹窄99%的患者血漿Hcy水平明顯高于狹窄75%的患者。血漿同型半胱氨酸水平還與冠心病患者的遠(yuǎn)期預(yù)后、生存率、病死率有關(guān)。12 干擾因素抗壞血酸0.5g/L對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響。膽紅素855mol/L對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響。血紅蛋白5.0g/L對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響。乳糜2.0%對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響。13 安全防護(hù)措施13.1血液標(biāo)本運(yùn)輸必須保證運(yùn)輸過(guò)程的生物安全，防止溢出。血液標(biāo)本溢出后，應(yīng)立即對(duì)污染環(huán)境和設(shè)備進(jìn)行消毒處理；13.2對(duì)標(biāo)明有污染性疾病的血液標(biāo)本應(yīng)特別的防護(hù)，以不污染環(huán)境和保證工作安全為前提；13

9、.3在進(jìn)行血液分析的一切操作過(guò)程中應(yīng)按照檢驗(yàn)科生物安全管理程序進(jìn)行；13.4與血液標(biāo)本接觸的一切器皿。儀器組裝/拆卸組合零件都應(yīng)視為污染源，因此操作人員不小心接觸到了這種污染源時(shí)，應(yīng)立即用清水清洗被污染區(qū)域并進(jìn)行消毒；13.5如果操作人員皮膚或衣服上污染（沾到）了血液或廢液應(yīng)立即沖洗并進(jìn)行消毒處理。如果眼睛被濺入了血液或廢液應(yīng)立即用大量清水沖洗并進(jìn)行必要的醫(yī)療措施。13.6血液標(biāo)本離心的過(guò)程中所有標(biāo)本都應(yīng)該加蓋，離心后，開(kāi)啟試管時(shí)應(yīng)注意防止氣溶（霧）膠污染環(huán)境；13.7所有檢測(cè)過(guò)的血液標(biāo)本及有關(guān)廢物，都會(huì)給您帶來(lái)潛在的危險(xiǎn)及生物污染。所有廢棄樣本及廢物的處理方法同血液標(biāo)本的處理程序。14 參考文獻(xiàn)14.1深圳奧薩制藥有限公司試劑盒說(shuō)明書(shū)14.2臨床實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程編