紫外分光光度法測定維生素C片含量結(jié)果的不確定度評(píng)定

1、紫外分光光度法測定維生素C片含量結(jié)果的不確定度評(píng)定    【摘要】  目的 建立維生素C片含量測定結(jié)果的不確定度評(píng)定。方法 分析了維生素C片含量測定過程中樣品幾種因素對維生素C片含量測定不確定度的影響，其中包括：含量重復(fù)性測量，樣品的取樣量，樣品的稀釋體積和紫外分光光度法的測量等因素。結(jié)果 擴(kuò)展不確定度U95為0.49,覆蓋因子k=2結(jié)論 本法可靠。 【關(guān)鍵詞】  維生素C片 含量測定 不確定度     Abstract：Objective To establish amethod for the eva

2、luation of the uncertainty of the contentdetermination of vitamin C in vitamin C tablets by UV.Methods The sources of the uncertainty in the content determination of vitamin C tablets were analyzed.The influencing factors on the uncertainty in the procedure of the content determination were evaluate

3、d,including repeatability of results of measurements,the weight of sample,the dilated volume of sample,the measurement by ultraviolet visible absorption spectroscopy.Results The expanded uncertainty U95 was 0.49%,the coverage factor was 2.Conclusion The evaluation is reliable.     Key

4、 words：vitamin C;content determination;uncertainty of measurement      不確定度的測量是判定測量結(jié)果可信度的依據(jù)，在藥物質(zhì)量分析運(yùn)用不確定度測量中有助于分析各種不確定來源對試驗(yàn)結(jié)果的影響，對藥物分析檢測具有重要意義。根據(jù)測量不確定度評(píng)定與表示1，并參考化學(xué)分析中不確定度的評(píng)估指南2，對紫外分光光度法測定維生素C片含量的方法進(jìn)行測量不確定度的分析與評(píng)定，以控制測量結(jié)果的有效性與適宜性。     1  材料與方法    

5、 1.1  儀器與試藥     UV-1102型紫外分光光度儀(天美公司)；AE240電子天平(雙量程瑞士梅特勒-托利多儀器公司，實(shí)際標(biāo)尺分度值(d)：0.1mg)。維生素C片均為市售品(A廠：批號(hào)060404，B廠：批號(hào)060415，C廠：批號(hào)060421)，硫酸為分析純，水為純化水。     1.2  主要方法     1.2.1  對照品溶液制備  取維生素C對照品25 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加0.005 mol/L硫酸液適量使溶解并稀釋至刻度

6、，搖勻，即得。     1.2.2  供試品溶液制備  取維生素C片20片精密稱定，測得平均片重=0.1430 g研細(xì)，精密稱取本品0.071 2 g(約相當(dāng)于維生素C 0.05 g)，置100 mL量瓶中，加0.005 mol/L硫酸液適量,振搖使維生素C溶解，再加0.005 mol/L硫酸液至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液；精密量取續(xù)濾液5 mL置100 mL量瓶中，用0.005 mol/L硫酸液稀釋至刻度，搖勻，即得。取供試品溶液置1 cm吸收池內(nèi)，在200300 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。結(jié)果顯示，在243.6 nm波長處有最大吸收，故選擇

7、244 nm作為測定波長，以1%cm=560計(jì)算，測得吸收度A=0.5421。由含量公式計(jì)算得維生素C標(biāo)示量=96.80%     2  結(jié)果     2.1  建立數(shù)學(xué)模型X=Ax×V×V100×V×m×cm×P%    式中：X：維生素C片中C為標(biāo)示量的百分含量：%；Ax：吸收度：A；V100：貯備試液體積：mL；m：測試溶液體積：mL；：平均片重：g；V5：制備測試溶液吸取貯備試液的體積：mL；m：樣品稱取量：g；P：標(biāo)

8、示量：0.1 mg     2.2  方差運(yùn)算     方差:u2(x)=C2(Ax)·u2(Ax)+C2(V100)·u2(V100)+C2(V100)·u2(V100)+C2()·u2()+C2(V5)·u2(V5)+C2(m)·u2(m)     2.3  分析各不確定度分量     2.3.1  樣品稱量m帶入的不確定度     2.3.1.1

9、60; 天平的示值重復(fù)性  根據(jù)試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，使用萬分之一天平，稱量在2030 g左右時(shí)，示值重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.070 mg，屬B類不確定度，故u1(m)=0.070 mg     2.3.1.2  天平示值誤差  由于采用加量法稱取，且兩次所稱質(zhì)量相差僅0.2 g左右，根據(jù)JJF1059-1999公式(25)3，故示值誤差帶入的不確定度分量u2(m)=0 mg     2.3.1.3  天平稱量的誤差  根據(jù)檢定證書，最大允許誤差MPE=±0.1mg，按均勻分布計(jì)算：u3

10、(m)=0.1/31/2=0.058 mg     由于是加量法稱樣，應(yīng)計(jì)算兩次，所以：u(m)=2(0.0702+0.05782)1/2=0.129 mg     靈敏系數(shù)：C(m)x×V100×V100××m×E×P%0.5421×100×100×0.14305×0.0712×560×0.1%=546×10-3 mg-1.%    故標(biāo)準(zhǔn)不確定度為C(m)·u(m

11、)=546×10-3×0.129=0.070%     2.3.2  平均片重帶入的不確定度     靈敏系數(shù)：C()=×V×V100V×m×E×P%=0.5421×100×1005×0.0712×560×0.1%272×10-3 mg-1.%    u()與§2.3.1u(m)相同評(píng)定為u()=0.129 mg，每片維生素C片稱量帶入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度為C（）

12、·u（）=1/20×0.129 mg,故u(=20(1/20×0.129)21/2=0.029 mg，故標(biāo)準(zhǔn)不確定度為C（）·u（)=272×0.029×10-3=0.008%     2.3.3  試液制備、稀釋體積測量帶入的不確定度     2.3.3.1  貯備試液體積V100測量帶入的不確定度     2.3.3.1.1  校正  實(shí)驗(yàn)使用100 mLA級(jí)量瓶，依據(jù)JJG196-90計(jì)量檢定規(guī)程，容

13、量允差為±0.10 mL，按均勻分布計(jì)算，：u1(V100)=0.10/31/2=0.058 mL     2.3.3.1.2  溫度  實(shí)驗(yàn)時(shí)環(huán)境溫度為25，故與量瓶校正時(shí)20的差異引入的不確定度，按均勻分布計(jì)算屬，B類不確定度：u2(V100)=(25-20)×2.1×10-4×100/31/2=0.061 mL     2.3.3.1.3  重復(fù)性  體積示值的重復(fù)性,根據(jù)試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)：u3(V100)=0.015 mL   &#

14、160; 所以u(píng)(V100)=(0.0582+0.0612+0.0152)1/2=0.085mL     靈敏系數(shù)：C（100)=Ax×V100×V×m×Ecm×P%0.5421×100×0.14305×0.0712×560×0.1%=0.388 mL-1%    故標(biāo)準(zhǔn)不確定度為C(V100)·u(V100)=0.388×0.085=0.033%    2.3.3.2

15、0; 測試溶液體積V100測量帶入的不確定度     同§2.3.3.1節(jié)相同評(píng)定計(jì)算：C(V100)·u(V100)=0.388×0.085=0.033%     2.3.3.3  制備測試溶液所取貯備試液體積V5測量帶入的不確定度     2.3.3.3.1  校正  實(shí)驗(yàn)使用5mLA級(jí)單標(biāo)線吸管，依據(jù)JJG-196-90計(jì)量檢定規(guī)程，容量允差為±0.015mL，按均勻分布計(jì)算，屬于B類不確定度：    

16、; u1(V5)=0.015/31/2=0.0087 mL     2.3.3.3.2  溫度  實(shí)驗(yàn)時(shí)環(huán)境溫度為25，按均勻分布計(jì)算：     u2(V5)=(25-20)×2.1×10-4×5/31/2=0.0030 mL     2.3.3.3.3  重復(fù)性  體積示值的重復(fù)性，根據(jù)試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)：     u3(V5)=0.0080 mL     所以u(píng)(V5)=(0.0

17、0872+0.00302+0.00802)1/2=0.012 mL     靈敏系數(shù)：C（5)=Ax×V100×V100× V×m×Ecm×P%0.5421×100×100×0.143025×0.0712×560×0.1%=7.76 mL-1%    故標(biāo)準(zhǔn)不確定度為C(V5)·u(V5)=7.76×0.012=0.093%，由此，試液制備和稀釋的體積測量帶入的總不確定度為：（0.0332+0.0

18、332+0.0932）1/20.104%     2.3.4  使用紫外分光光度儀帶入的不確定度u儀器     檢定證書給出的定量測量重現(xiàn)性為0.3%，按均勻分布，屬B類不確定度,u儀器=0.3%/31/2=0.173     2.3.5  供試液測定重復(fù)性帶入的不確定度u(AX)     稱取2份供試品配成供試液，在紫外分光光度儀上每份測定9次，得到18個(gè)吸收度數(shù)據(jù)，為隨機(jī)測量，按正態(tài)分布，屬A類不確定度。第1份供試液的吸收度：0.542 4、0.540

19、 7、0.541 8、0.542 9、0.541 7、0.542 5、0.543 2、0.541 9、0.541 4，標(biāo)準(zhǔn)差s=7.76×10-4；第2份供試液的吸收度：0.523 1、0.524 6、0.524 8、0.524 5、0.526 3、0.524 0、0.523 9、0.525 5、0.525 2，標(biāo)準(zhǔn)差s=9.48×10-4。則u(AX)=(7.76×10-4)2+(9.48×10-4)21/2=0.123     2.4  不確定度各分量及分析一覽表     表1&#

20、160; 不確定度一覽表     Tab1  Uncertainty Table     SourcetypeStandard uncertainty(%)weight of sampleB0.070average weight of tabletB0.008Sample preparation and measuement of dilated volumeB0.104UVB0.173repeatedly measurement of Vitamin CA0.123     2.5  合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度     u(x)=(0.0702+0.0082+0.1042+0.1732)1/2=0.214%     uc(x)=(0.2142+0.1232)1/2=0.247%