微生物知識(shí)點(diǎn)

1、緒論 微生物與人類(lèi)1.微生物：形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的低等生物。2.微生物包括：原核類(lèi)：藍(lán)細(xì)菌、細(xì)菌（真細(xì)菌、古細(xì)菌）、放線菌、支原體、衣原體、立克次氏體等 真核類(lèi)：真菌（酵母菌單細(xì)胞、霉菌絲狀菌、蕈菌大型子實(shí)體）、原生動(dòng)物、顯微藻類(lèi) 非細(xì)胞類(lèi)：病毒（蛋白質(zhì)和核酸）、亞病毒（蛋白質(zhì)或核酸、包括類(lèi)病毒、朊病毒、擬病毒）3.微生物學(xué)發(fā)展史及代表人物：分期史前期初創(chuàng)期奠基期發(fā)展期成熟期時(shí)間約8000年前1676十七世紀(jì)下半葉十九世紀(jì)中葉十九世紀(jì)下半葉二十世紀(jì)初二十世紀(jì)中葉二十世紀(jì)五十年代至今代表人物勞動(dòng)人民列文虎克巴斯德、科赫E.BüchnerJ.WatsonF.Crick實(shí)質(zhì)朦朧階段形態(tài)描述

2、階段生理水平研究階段生化水平研究階段分子生物學(xué)水平研究階段4.微生物的五大共性：體積小，比表面積大 吸收多，轉(zhuǎn)化快（單細(xì)胞蛋白的應(yīng)用） 生長(zhǎng)旺，繁殖快（營(yíng)養(yǎng)、空間和代謝產(chǎn)物等條件的限制，不可能無(wú)限生長(zhǎng)和繁殖） 適應(yīng)強(qiáng)，異變異（高溫高酸高鹽高輻射高壓低溫髙堿或高毒&通常是單倍體，加上繁殖快，數(shù)量多，與外界環(huán)境直接接觸等） 分布廣，種類(lèi)多3. 微生物學(xué)：是一門(mén)在分子、細(xì)胞或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類(lèi)進(jìn)化等生命活動(dòng)基本規(guī)律，并將其應(yīng)用于工業(yè)，、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程、和環(huán)境保護(hù)等實(shí)踐領(lǐng)域的科學(xué)，其根本任務(wù)是發(fā)崛、利用、改善和保護(hù)有益微生物，控制、消滅或改造

3、有害微生物，為人類(lèi)社會(huì)的進(jìn)步服務(wù)。4. 微生物在人類(lèi)生活中的作用：食品、醫(yī)藥衛(wèi)生、化學(xué)工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、環(huán)保、現(xiàn)代生物工程研究的重要工具等&疾病來(lái)源、其他污染等第1章 原核生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能第1節(jié) 細(xì)菌1. 細(xì)菌：結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、種類(lèi)繁多、主要以二分裂繁殖、水生性較強(qiáng)的單細(xì)胞原核微生物2. 細(xì)菌的形態(tài)：基本上只有球狀、桿狀、螺旋狀三大類(lèi)，僅少數(shù)為其他形狀，絲狀、三角形、方形、圓盤(pán)形等球菌：根據(jù)其細(xì)胞分裂時(shí)形成不同的空間排列方式分為：?jiǎn)吻蚓?、雙球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、鏈球菌和葡萄球菌等 桿菌最為常見(jiàn)，球菌次之，螺旋狀的最少螺旋菌：螺旋不足一環(huán)者為弧菌，滿26環(huán)的小型、堅(jiān)硬的螺旋狀細(xì)菌為螺菌3

4、. 細(xì)菌大小單位：微米m 球菌（直徑）、桿菌（長(zhǎng)×寬）、螺旋菌（彎曲程度）4. 測(cè)量細(xì)菌大小的方法：顯微鏡測(cè)微尺直接算、顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進(jìn)行測(cè)算5. 細(xì)菌個(gè)體小、透明 需要染色 6. 革蘭氏染色步驟：涂片固定 結(jié)晶紫初染-1分鐘，水洗烘干 碘液媒染-1分鐘，水洗烘干 95%酒精脫色-30秒45秒，水洗烘干 蕃紅復(fù)染-1分鐘，水洗烘干 鏡檢-紫色陽(yáng)（有芽孢的菌） 紅色陰7. 大腸桿菌 陰 E.coli 枯草芽孢桿菌 陽(yáng) B.subtilis 金黃色葡萄球菌 陽(yáng) S.aureus8. 細(xì)菌構(gòu)造：一般構(gòu)造：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核區(qū)等 特殊構(gòu)造：鞭毛、菌毛、性菌毛、糖被（包括莢膜和

5、黏液層）和芽孢等一般構(gòu)造9. 細(xì)胞壁：主要成分肽聚糖（肽（四肽尾和肽橋兩種）和聚糖（N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸兩種單糖相互間隔連接成的長(zhǎng)鏈）10. G+細(xì)胞壁的特點(diǎn)：肽聚糖多厚（60%95%），特有磷壁酸（10%30%） G-細(xì)胞壁的特點(diǎn)：肽聚糖少薄，特有外壁層（脂外層） 古生菌（又稱(chēng)古細(xì)菌，包括產(chǎn)甲烷菌及大多數(shù)嗜極菌）細(xì)胞壁：不含真正的肽聚糖，有些含假肽聚糖或多糖、糖蛋白、蛋白質(zhì)缺壁細(xì)菌：自發(fā)缺壁突變：L型細(xì)菌（實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺損菌株） 人工方法去壁：徹底除盡的稱(chēng)原生質(zhì)體（G+最易形成） 部分去除的稱(chēng)球狀體 支原體（自然界長(zhǎng)期進(jìn)化中形成）11. 抗

6、生素對(duì)細(xì)菌的影響：青霉素：作用于肽橋（連接兩個(gè)肽尾）溶菌酶：作用于-1,4糖苷鍵（連接兩個(gè)雙糖單位） 它們都抑制或殺死細(xì)菌，對(duì)G+作用明顯12. 革蘭氏染色機(jī)理：G+和G-細(xì)菌主要由于其細(xì)胞壁化學(xué)成分的差異而引起了物理特性（脫色能力）的不同，正是由于這一物理特性的不同才決定了最終染色反應(yīng)的不同。通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)菌的細(xì)胞壁以內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+細(xì)胞壁厚、肽聚糖致密，不含類(lèi)脂，脫色劑乙醇處理后，失水而使網(wǎng)孔縮小，將復(fù)合物牢牢鎖在壁內(nèi)，使其保持紫色 G-細(xì)胞壁薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖疏松，脫色劑乙醇處理，復(fù)合物溶出，細(xì)胞無(wú)色，蕃紅復(fù)染呈現(xiàn)紅色13. 細(xì)胞膜：

7、一層緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)，包圍著細(xì)胞質(zhì)的柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜，厚78納米，由磷脂（20%30%）和蛋白質(zhì)組成(50%70%)與細(xì)胞膜相關(guān)的結(jié)構(gòu)：間體：一種由細(xì)胞膜內(nèi)褶而形成的囊狀結(jié)構(gòu)，其內(nèi)充滿著層狀或管狀的泡囊。多見(jiàn)于G+14. 細(xì)胞質(zhì)：被細(xì)胞膜包圍的除核區(qū)以外的一切半透明、膠體狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱(chēng)。與真核相比，原核細(xì)胞質(zhì)不流動(dòng)。15. 核區(qū)：原核生物所特有的無(wú)核膜包裹、無(wú)固定形態(tài)的原始細(xì)胞核。富爾根染色法可見(jiàn)到呈紫色形態(tài)不定的核區(qū)特殊構(gòu)造16. 糖被：包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的富含水分的透明膠狀物質(zhì)。 層次厚：（大）莢膜17. 在壁上有固定層次 包裹在單個(gè)細(xì)胞上 層次?。?/p>

8、微莢膜 松散，未固定在壁上：黏液層糖被 包裹在細(xì)胞群上：菌膠團(tuán)18.莢膜含水量很高，炭黑墨水對(duì)產(chǎn)莢膜細(xì)菌進(jìn)行負(fù)染色（背景染色），光鏡下可見(jiàn)，黏液層無(wú)此特性 19.糖被的一般成分是多糖，少數(shù)是蛋白質(zhì)或多肽，也有多糖與多肽復(fù)合型的 作用：保護(hù)/貯藏養(yǎng)料/作為透性屏障和離子交換系統(tǒng)/表面附著作用 科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用一，菌種鑒定二，用作藥物和生化試劑，代血漿三，工業(yè)原料,黃原膠四，污水的生物處理 20.鞭毛：蛋白質(zhì)附屬物，運(yùn)動(dòng)器官 判斷鞭毛的有無(wú)：電子顯微鏡直接觀察 光學(xué)顯微鏡鞭毛染色 半固體穿刺培養(yǎng)法21.菌毛：黏附作用，與鞭毛相比，細(xì)、短、數(shù)量多22.芽孢（不被染色）：某些細(xì)菌在生長(zhǎng)發(fā)育后

9、期，細(xì)胞內(nèi)形成的一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量低、抗逆性強(qiáng)（抗高溫）的休眠構(gòu)造。芽孢無(wú)繁殖功能。芽孢的有無(wú)、形態(tài)、大小和著生位置是細(xì)菌分類(lèi)和鑒定的重要指標(biāo)。 罐頭食品以殺死肉毒梭狀芽胞桿菌為標(biāo)準(zhǔn) 121 2070min 濕熱滅菌以殺死嗜熱脂肪芽孢桿菌為標(biāo)準(zhǔn) 121 1530min 芽孢可能的耐熱機(jī)制：含水量極低，結(jié)合水比例高 特殊成分：吡啶2，6二羧酸鈣（DPACa） 耐熱酶22. 伴孢晶體：蘇云金芽孢桿菌（簡(jiǎn)稱(chēng)t ） 生物農(nóng)藥，害蟲(chóng)吞食伴胞晶體后，腸內(nèi)溶解釋放毒素，細(xì)胞膨脹死亡細(xì)菌的繁殖 1. 裂殖：二分裂 三分裂 復(fù)分裂 芽殖：芽生細(xì)菌細(xì)菌的群體形態(tài)1. 菌落：在固體培養(yǎng)基上以母細(xì)胞為中心

10、的一堆肉眼可見(jiàn)的，有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)。2. 菌苔：把大量分散的純種細(xì)胞密集的接種在固體培養(yǎng)基的較大表面積上，結(jié)果長(zhǎng)出的大量菌落相互連成一片，就是菌苔3. 共同特征：濕潤(rùn)、黏稠、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落各部位顏色一致，臭味2. 大腸桿菌和枯草芽孢桿菌區(qū)分：顯微觀察，大腸無(wú)芽孢3. 在液體培養(yǎng)基上的群體形態(tài)：多數(shù)混濁生長(zhǎng)，部分沉淀，表面生長(zhǎng)第2節(jié) 放線菌1. 放線菌：一類(lèi)主要呈菌絲狀生長(zhǎng)和以孢子繁殖的陸生性較強(qiáng)的原核生物 G+ 鏈霉菌屬于放線菌 大量的種類(lèi)繁多的抗生素90%由鏈霉菌產(chǎn)生 放線菌是許多酶、維生素等的產(chǎn)生菌 并且在甾體轉(zhuǎn)化、石油脫蠟和污水處理中有重要應(yīng)用，絕大多數(shù)屬有益

11、菌2. 根據(jù)功能和形態(tài)分類(lèi)，菌絲分為基內(nèi)菌絲體（營(yíng)養(yǎng)菌絲）、氣生菌絲、孢子絲3.4.5.6. 自然條件下，多數(shù)放線菌借助各種孢子繁殖 分生孢子：最常見(jiàn) 借孢子 孢囊孢子 無(wú)鞭毛放線菌繁殖方式 有鞭毛 基內(nèi)菌絲斷裂 借菌絲 任何菌絲斷裂 4.在固體培養(yǎng)基上：多、干燥、致密、皺、小而不蔓延、不挑起、表面有放射狀溝紋 泥腥味 典型（鏈霉菌、諾卡氏菌）第3節(jié) 藍(lán)細(xì)菌1. 藍(lán)細(xì)菌：一類(lèi)進(jìn)化歷史悠久，G-，無(wú)鞭毛，含葉綠素a，進(jìn)行光合作用的原核生物，分布廣，“先鋒生物”，形態(tài)多樣，光趨避運(yùn)動(dòng)，細(xì)胞質(zhì)有氣泡，導(dǎo)致漂浮2. 無(wú)性繁殖，作用：食用（螺旋菌），固氮，導(dǎo)致水體富營(yíng)養(yǎng)化，海洋赤潮和湖泊水華 第四節(jié) 支

12、原體、立克次氏體和衣原體1. 支原體、立克次氏體和衣原體是三類(lèi)同屬G-的代謝能力差、主要營(yíng)細(xì)胞內(nèi)寄生的小型原核生物。寄生性逐步增強(qiáng)，是介于細(xì)菌與病毒間的一類(lèi)原核生物2. 支原體：一類(lèi)天然無(wú)細(xì)胞壁，介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生生活間的最小型原核生物 固體培養(yǎng)基上呈油煎蛋狀 對(duì)抑制蛋白質(zhì)生物合成的抗生素(四環(huán)素，紅霉素)和破壞含甾體的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的抗生素(兩性霉素，制霉菌素）敏感3. 立克次氏體：一類(lèi)專(zhuān)性寄生于真核細(xì)胞內(nèi)的G-原核生物 與支原體區(qū)別：有細(xì)胞壁，不能獨(dú)立生活 與衣原體的區(qū)別在于其細(xì)胞較大、無(wú)濾過(guò)性和存在產(chǎn)能代謝系統(tǒng) 對(duì)四環(huán)素，青霉素敏感4. 衣原體：一類(lèi)在真核細(xì)胞內(nèi)營(yíng)專(zhuān)性能量寄生的小型G-

13、原核生物具有感染力的細(xì)胞稱(chēng)為原體 無(wú)感染力的細(xì)胞稱(chēng)為實(shí)體對(duì)紅霉素，氯霉素，四環(huán)素敏感第2章 真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能第一節(jié) 真核微生物概述1. 真核生物：一大類(lèi)進(jìn)化程度高，細(xì)胞核具有核膜、能進(jìn)行有絲分裂、細(xì)胞質(zhì)中存在線粒體和多種細(xì)胞器的生物。 主要包括植物界的微藻，動(dòng)物界的原生動(dòng)物，菌物界的真菌2. 真菌是最重要的真核微生物： 其特點(diǎn)：無(wú)葉綠素，不能進(jìn)行光合作用 一般具有發(fā)達(dá)的菌絲體 細(xì)胞壁多數(shù)含幾丁質(zhì)（殼多糖） 營(yíng)養(yǎng)方式為異養(yǎng)吸收型 以產(chǎn)生大量無(wú)性和（或）有性孢子的方式進(jìn)行繁殖 陸生性較強(qiáng)第2節(jié) 酵母菌1. 酵母菌：通俗名稱(chēng)，泛指能發(fā)酵糖類(lèi)的各種單細(xì)胞真菌 特點(diǎn)：個(gè)體一般以單細(xì)胞非菌絲狀

14、態(tài)存在 多數(shù)芽殖 發(fā)酵糖類(lèi)產(chǎn)能 細(xì)胞壁常含甘露聚糖和葡聚糖 生活在含糖量較高、酸度較大的水生環(huán)境中 2. 酵母菌分布很廣，主要偏酸含糖環(huán)境中，水果蔬菜蜜餞果園土壤 第一種家養(yǎng)微生物，發(fā)酵，石油及油品的脫蠟，單細(xì)胞蛋白，生化藥物，基因工程“工程菌”，少數(shù)引起人和動(dòng)物的疾病3. 酵母菌的細(xì)胞直徑約為細(xì)菌的10倍，是典型的真核微生物，形態(tài)有球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀和香腸狀等，釀酒酵母S.cerevisiae4. 細(xì)胞壁呈“三明治”狀，外層為甘露聚糖，內(nèi)層為葡聚糖，葡聚糖是賦予細(xì)胞壁以機(jī)械強(qiáng)度的主要成分5. 只進(jìn)行無(wú)性繁殖的酵母稱(chēng)為“假酵母”，具有有性生殖的酵母稱(chēng)為“真酵母”6. 無(wú)性繁殖 一，芽殖

15、 最常見(jiàn)的一種繁殖方式 長(zhǎng)大的子細(xì)胞與母細(xì)胞不分離，這種藕節(jié)狀的細(xì)胞串稱(chēng)為假菌絲 如果細(xì)胞相連，且其間相連的面積和細(xì)胞直徑一致，這種竹節(jié)狀的細(xì)胞串稱(chēng)為真菌絲 成熟后，兩者分離，母細(xì)胞上留下一個(gè)芽痕，子細(xì)胞相應(yīng)的留下蒂痕，任何細(xì)胞蒂痕僅一個(gè)，芽痕有一至數(shù)十個(gè)（最多21），可以測(cè)細(xì)胞年齡二，裂殖 少數(shù)酵母，如裂殖酵母屬，具有與細(xì)菌相似的二分裂繁殖方式 三，產(chǎn)生無(wú)性孢子 7. 有性繁殖 酵母菌是以形成子囊和子囊孢子的方式進(jìn)行有性生殖的8. 酵母菌的生活史（生活周期）：一.營(yíng)養(yǎng)體既能以單倍體存在也能以二倍體形式存在 釀酒酵母 二.營(yíng)養(yǎng)體只能以單倍體形式存在 八孢裂殖酵母 三.營(yíng)養(yǎng)體只能以二倍體形式存在

16、 路德類(lèi)酵母9. 酵母菌的菌落：大而厚，圓形光滑濕潤(rùn)，黏稠，顏色單調(diào)，常見(jiàn)灰白色乳白色土黃色紅色 酒香味10. 單細(xì)胞蛋白SCP：又稱(chēng)微生物菌體蛋白，利用發(fā)酵法培養(yǎng)微生物而獲得的菌體蛋白，生產(chǎn)蛋白的生物大多數(shù)是單細(xì)胞或絲狀微生物個(gè)體，而不是多細(xì)胞復(fù)雜的生物。 SCP要求：食用前先去除大量的核酸，在最后的產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中，所有的介質(zhì)和原料都必須是安全無(wú)毒的；必須可口，易消化吸收；必須有高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，成本低廉用微生物生產(chǎn)scp的優(yōu)點(diǎn)：在最佳條件下，微生物能以驚人的速率生長(zhǎng)，一些微生物的生產(chǎn)量每隔0.51小時(shí)能加倍微生物個(gè)體比動(dòng)物和植物更容易進(jìn)行遺傳操作，更宜于大規(guī)模篩選高生長(zhǎng)率的個(gè)體微生物有相當(dāng)高的蛋

17、白含量，蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高能在相對(duì)小的發(fā)酵反應(yīng)器中大量培養(yǎng)，不依賴氣候微生物的培養(yǎng)基來(lái)源很廣泛低廉，特別是利用廢料作原料11.菌落特點(diǎn)細(xì)菌酵母菌相同濕潤(rùn)黏稠易挑取不同小、顏色各樣、臭味大、顏色單調(diào)、酒香 第三節(jié) 絲狀真菌霉菌1. 霉菌的單位，菌絲 由許多菌絲相互交織而成的一個(gè)菌絲基團(tuán)稱(chēng)菌絲體，分營(yíng)養(yǎng)菌絲體和氣生菌絲體兩類(lèi)，這兩類(lèi)菌絲在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中，因其自身的生理功能和對(duì)不同環(huán)境的高度適應(yīng)，已發(fā)展出各種特化的構(gòu)造(假根、匍匐菌絲)2.無(wú)隔膜菌絲：毛霉mucor、根霉rhizopus 有隔膜菌絲：青霉penicillium、曲霉aspergillus青霉、曲霉、毛霉、根霉簡(jiǎn)圖（略）3. 氣生菌

18、絲體主要特化成各種形態(tài)的子實(shí)體。青霉和曲霉的氣生菌絲特化為分生孢子頭，毛霉和根霉特化為孢子囊4. 真菌在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行通氣攪拌或振蕩培養(yǎng)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生菌絲球5. 真菌的繁殖能力極強(qiáng)，主要通過(guò)產(chǎn)生大量無(wú)性孢子或有性孢子來(lái)完成6. 無(wú)性孢子：孢囊孢子（根霉和毛霉）、分生孢子（最常見(jiàn) 曲霉和青霉）、節(jié)孢子、厚垣孢子 有性孢子：卵孢子、接合孢子（根霉毛霉）、子囊孢子、擔(dān)孢子7. 霉菌菌落形態(tài)較大、質(zhì)地疏松、外觀干燥、不透明、呈現(xiàn)或松或緊的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀、棉絮狀；菌落與培養(yǎng)基間的連接緊密或不緊密，不易挑取，孢子和菌絲易被沾起，菌落正面與反面的顏色、構(gòu)造以及邊緣與中心的顏色、構(gòu)造常不一致8. 菌絲狀微生物：

19、菌落放線菌霉菌同干燥不透明菌落正反面顏色一般不同異小而緊密與培養(yǎng)基牢固結(jié)合泥腥味大而疏松或大而致密、與培養(yǎng)基結(jié)合松（少部分緊）霉味第4節(jié) 產(chǎn)大型子實(shí)體的真菌蕈菌1. 冬蟲(chóng)夏草：是麥角菌科真菌冬蟲(chóng)夏草寄生在蝙蝠蛾科昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)上的子座及幼蟲(chóng)尸體的復(fù)合體，是一種傳統(tǒng)的名貴滋補(bǔ)中藥材，有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能、抗腫瘤、抗疲勞等多種功效。第3章 病毒和亞病毒因子第1節(jié) 病毒1. 病毒：形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、具有超級(jí)寄生性、只含一種核酸、必須在電子顯微鏡下才能觀察到的一類(lèi)非細(xì)胞形態(tài)的微生物 對(duì)干擾素敏感2. 成熟、具侵染力位于細(xì)胞外環(huán)境中的單個(gè)病毒顆粒稱(chēng)為毒?；虿《玖Ｗ?基本成分是蛋白質(zhì)和核酸3. 核衣殼是任何病毒

20、都具有的基本結(jié)構(gòu)，核衣殼外被一層含蛋白質(zhì)或糖蛋白的類(lèi)脂雙層膜覆蓋著，這層膜叫包膜，有的包膜上長(zhǎng)有刺突等附屬物，致病力更強(qiáng)4. 衣殼粒：電鏡下可見(jiàn)最小單位，若干個(gè)衣殼粒組成衣殼，衣殼和核酸組成核衣殼5. 病毒的對(duì)稱(chēng)體制有兩種：螺旋對(duì)稱(chēng)、二十面體對(duì)稱(chēng)、復(fù)合對(duì)稱(chēng)。形狀：動(dòng)物病毒球狀、植物病毒桿狀（TMV）、噬菌體（在細(xì)菌體內(nèi)）蝌蚪狀6. 噬菌斑在菌苔表面7. 原核生物的病毒：噬菌體，其繁殖分為五個(gè)階段：吸附、侵入、增殖、成熟、裂解吸附：尾絲吸附，基板固定侵入：注射式進(jìn)入，溶菌酶水解細(xì)胞壁肽聚糖，核酸進(jìn)入增殖：核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成成熟：頭頸尾裂解：原因：溶菌酶、胞內(nèi)機(jī)械壓力增大導(dǎo)致宿主裂解。另

21、一種表面上與此相似的現(xiàn)象：自外裂解：是指大量噬菌體吸附在同一宿主細(xì)胞表面并釋放眾多的溶菌酶，最終因外在的原因?qū)е录?xì)胞裂解。上述增殖的全過(guò)程是很快的，例如：E.coli T系噬菌體在合適溫度等條件下僅為1525 min，平均每一宿主細(xì)胞裂解后產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)稱(chēng)作裂解量，不同的噬菌體有所不同。T2為150左右，T4約為1008. 一步生長(zhǎng)曲線：定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。分為潛伏期、裂解期、平穩(wěn)期?？煞从趁糠N噬菌體的3個(gè)最重要的特征參數(shù)：潛伏期和裂解期的長(zhǎng)短以及裂解量的大小9. 烈性噬菌體：大部分噬菌體侵入寄主細(xì)胞后，引起寄主細(xì)胞的代謝改變，在寄主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制其核酸、蛋白質(zhì)，裝配成新的噬

22、菌體，最終使寄主細(xì)胞破裂而釋放大量子代噬菌體，這類(lèi)噬菌體稱(chēng)為烈性噬菌體溫和噬菌體：其基因組能與宿主菌基因組整合，并隨細(xì)胞分裂傳至子代細(xì)菌的基因組中，侵染后不立即引起細(xì)菌裂解的噬菌體。含有溫和噬菌體核酸的細(xì)菌叫溶源性細(xì)菌。溶源性：溫和噬菌體感染細(xì)胞后不能完成復(fù)制循環(huán)，噬菌體基因組長(zhǎng)期存在于宿主細(xì)胞內(nèi)，沒(méi)有成熟噬菌體產(chǎn)生這一現(xiàn)象稱(chēng)作溶源性現(xiàn)象10. 人類(lèi)和脊椎動(dòng)物病毒：已知與人類(lèi)健康有關(guān)的病毒超過(guò)300種，與其他脊椎動(dòng)物有關(guān)的病毒超過(guò)900種，目前，人類(lèi)的傳染病有70%80%是由病毒引起的。11. 新顯病毒：那些以往局部低水平感染的病毒或具有種間屏障的病毒將其寄主范圍擴(kuò)大到了別的物種，引起了大范圍

23、的人類(lèi)傳染性疾?。ò２├?、拉沙、艾滋、SARS、禽流感）12. 防治方法：接種疫苗、生物制劑、中藥防治、干擾素第2節(jié) 亞病毒因子1. 亞病毒：包括類(lèi)病毒、擬病毒、朊病毒2. 類(lèi)病毒：一類(lèi)只含RNA，單鏈RNA，在馬鈴薯紡錘形塊莖病中發(fā)現(xiàn)3. 擬病毒：不能獨(dú)立侵染，與其“共生”的真病毒又稱(chēng)輔助病毒，擬病毒是它的“衛(wèi)星”4. 朊病毒：只含蛋白質(zhì)無(wú)核酸，又稱(chēng)蛋白質(zhì)侵染子，瘋牛病第3節(jié) 病毒與實(shí)踐1. 噬菌體與發(fā)酵產(chǎn)業(yè)：造成倒罐昆蟲(chóng)病毒用于生物防治病毒在基因工程中的應(yīng)用第四章 微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第1節(jié) 微生物的六類(lèi)營(yíng)養(yǎng)要素1.細(xì)胞重量（濕重）：水75%-90% 干物質(zhì)10%-25% 無(wú)機(jī)鹽10% 碳

24、水化合物 有機(jī)物90% 蛋白質(zhì) 脂肪 DNA或RNA等2. 微生物六類(lèi)營(yíng)養(yǎng)素：碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、水3. 營(yíng)養(yǎng)體的游離水：結(jié)合水=4:14. 碳源：滿足微生物生長(zhǎng)所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)源異養(yǎng)微生物：必須利用有機(jī)碳源的微生物，為數(shù)眾多自養(yǎng)微生物：以無(wú)機(jī)碳源作唯一或主要碳源的微生物，種類(lèi)較少有機(jī)碳源：糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、脂肪、有機(jī)酸無(wú)機(jī)碳源：二氧化碳、碳酸根離子良好碳源：葡萄糖、果糖、麥芽糖、淀粉生產(chǎn)中廉價(jià)碳源：玉米粉、麩皮、米糠、酒糟對(duì)一切異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，碳源同時(shí)又兼作能源廢水處理：諾卡氏菌降解含氰的廢水5. 氮源：為微生物生長(zhǎng)提供氮來(lái)源的物質(zhì)有機(jī)氮源：蛋白質(zhì)、蛋白胨、氨基酸無(wú)機(jī)氮源：銨鹽、

25、硝酸鹽、空氣中氮?dú)鈱?shí)驗(yàn)室常用：牛肉膏、蛋白胨生產(chǎn)常用：魚(yú)粉、蠶蛹粉、黃豆餅粉、尿素、玉米漿、花生餅粉6. 氨基酸自養(yǎng)型生物：能把尿素銨鹽硝酸鹽甚至氮?dú)獾群?jiǎn)單氮源自行合成所需要的一切氨基酸氨基酸異養(yǎng)型生物：需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作氮源的微生物7. 速效氮源：有利于機(jī)體生長(zhǎng)遲效氮源：有利于代謝產(chǎn)物的生成8. 能源：為微生物生命活動(dòng)提供最初能量來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或輻射能 化能營(yíng)養(yǎng)型 有機(jī)物：化能異養(yǎng)微生物的能源（同碳源）能源譜 無(wú)機(jī)物：化能自養(yǎng)微生物的能源（不同于碳源） 光能營(yíng)養(yǎng)型：光能自養(yǎng)和光能異養(yǎng)微生物的能源9. 化能自養(yǎng)微生物的能源：還原態(tài)的無(wú)機(jī)物質(zhì)，如NH4+、NO2-、S、H2、H2S、F

26、e2+等，一般是原核生物，包括亞硝酸細(xì)菌、硝酸細(xì)菌、硫化細(xì)菌、硫細(xì)菌、氫細(xì)菌、鐵細(xì)菌光輻射能是單功能營(yíng)養(yǎng)物（能源），還原態(tài)的無(wú)機(jī)物NH4+是雙功能營(yíng)養(yǎng)物（能源、氮源），氨基酸類(lèi)是三功能營(yíng)養(yǎng)物（碳源、氮源、能源）10. 生長(zhǎng)因子：生物體必需，不能用簡(jiǎn)單的碳氮源自行合成的微量有機(jī)物廣義的生長(zhǎng)因子：維生素、堿基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺類(lèi)、C4C6的分支或直鏈脂肪酸狹義的生長(zhǎng)因子：維生素（Vc、Vk）11. 生長(zhǎng)因子自養(yǎng)型微生物:不需要從外界吸收生長(zhǎng)因子異養(yǎng)型微生物：需要從外界吸收多種生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子含量豐富的天然物質(zhì)：酵母膏、玉米漿、肝浸液12. 無(wú)機(jī)鹽:主要可為微生物提供除碳、氮源以外的各種重要

27、元素大量元素：濃度10-310-4 mol/l 如P、S、K、Mg、Na、Ca、Fe微量元素：濃度10-610-8 mol/l 如Cu、Zn、Mn、Mo、Co等生理作用：細(xì)胞結(jié)構(gòu)組分、生理調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)移能量、酶的激活劑或輔酶因子一般所需無(wú)機(jī)鹽：硫酸鹽、磷酸鹽、氯化物以及含鈉、鉀、鎂、鐵等金屬元素的化合物13. 水：微生物細(xì)胞含水量很高，細(xì)菌酵母菌和霉菌的營(yíng)養(yǎng)體分別含80%、75%、85%左右，霉菌孢子約含39%的水，細(xì)菌芽孢核心部分含水量低于30%第2節(jié) 微生物的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型1. 分類(lèi)依據(jù)：能源和碳源不同。光能自養(yǎng)型：藍(lán)細(xì)菌、光合細(xì)菌、藻類(lèi)光能異養(yǎng)型：紅螺細(xì)菌（產(chǎn)單細(xì)胞蛋白） 可做碳源的有機(jī)物：甲酸、

28、甲醇、乙酸、丁酸、異丙醇、丙酮酸和乳酸等化能自養(yǎng)型：只存在于微生物中，可在完全無(wú)機(jī)及無(wú)光的環(huán)境中生長(zhǎng)，以二氧化碳為唯一碳源，如氫細(xì)菌、硫化細(xì)菌、硝化細(xì)菌、鐵細(xì)菌等化能異養(yǎng)型（最常見(jiàn)普遍）：能源和碳源同為有機(jī)物，絕大多數(shù)原核生物、全部真菌2. 兼養(yǎng)型微生物第3節(jié) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式1. 細(xì)胞膜：半透性薄膜 選擇吸收作用2. 影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的因素：營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)本身的性質(zhì)，如相對(duì)分子質(zhì)量、溶解性、電負(fù)性、極性等都影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的難易程度微生物所處的環(huán)境，如溫度、PH、離子強(qiáng)度等微生物細(xì)胞的通透屏障，主要是黏液層、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜等結(jié)構(gòu)3. 細(xì)胞膜運(yùn)送營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有四種方式：?jiǎn)渭償U(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、

29、主動(dòng)運(yùn)送、基團(tuán)移位4. 單純擴(kuò)散：濃度由高到低 不需能量 不需載體蛋白主要運(yùn)輸氧氣、二氧化碳、乙醇、甘油和某些氨基酸分子5. 促進(jìn)擴(kuò)散：濃度由高到低 不需能量 需載體蛋白載體蛋白可稱(chēng)作滲透酶、移位酶或移位蛋白，通過(guò)誘導(dǎo)產(chǎn)生，專(zhuān)一性 如釀酒酵母對(duì)糖類(lèi)、氨基酸、維生素的吸收 大腸桿菌、芽孢桿菌屬對(duì)甘油的吸收6. 主動(dòng)運(yùn)送（最常見(jiàn)最主要）：濃度由低到高 需能量 需載體蛋白氨基酸、某些糖（乳糖、麥芽糖、葡萄糖、蜜二糖等）、鈉離子、鉀離子、有機(jī)離子等7. 基團(tuán)移位：濃度由高到低 被運(yùn)送物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變 需能量 需載體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中受到化學(xué)修飾后進(jìn)入細(xì)胞的一種運(yùn)輸方式化學(xué)修飾的實(shí)質(zhì)就是磷酸化（PEP

30、介導(dǎo)），主要存在于厭氧菌和兼性厭氧菌 運(yùn)輸葡萄糖、甘露糖、果糖、乳糖、糖衍生物、堿基、脂肪酸等第4節(jié) 培養(yǎng)基1. 培養(yǎng)基：人工配制的、適合不同微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的混合營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 絕大多數(shù)腐生性微生物和部分共生或寄生性微生物都可在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，只有少數(shù)稱(chēng)作難養(yǎng)菌的寄生或共生微生物（類(lèi)支原體）在人工培養(yǎng)基上難于生長(zhǎng)。培養(yǎng)基條件：合適的營(yíng)養(yǎng)素種類(lèi)，合適的營(yíng)養(yǎng)素比例2. 選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)，遵循的四個(gè)原則：目的明確，營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)，理化適宜，經(jīng)濟(jì)節(jié)約目的明確：自養(yǎng)菌還是異養(yǎng)菌，科研還是生產(chǎn)（實(shí)驗(yàn)室不過(guò)多計(jì)算成本），生產(chǎn)上考慮種子培養(yǎng)基還是發(fā)酵培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)：微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比

31、例，化能異養(yǎng)型，水分、C+能源、N源、大量元素、生長(zhǎng)因子大體上存在著10倍序列的遞減趨勢(shì)碳氮比：微生物培養(yǎng)基中碳源的碳原子摩爾數(shù)與氮源中氮原子摩爾數(shù)之比 C素N葷 碳氮比升高，氮源缺乏，菌體生長(zhǎng)不好，有些菌產(chǎn)酸過(guò)快生長(zhǎng)受抑制 碳氮比降低，氮源豐富，菌體生長(zhǎng)旺盛，過(guò)早衰老，菌體自溶 真菌需碳氮比較高，細(xì)菌尤其是動(dòng)物病原菌需碳氮比較低的培養(yǎng)基 種子培養(yǎng)基，碳氮比低，種子營(yíng)養(yǎng)豐富氮高，發(fā)酵培養(yǎng)基碳氮比高理化適宜：指培養(yǎng)基的PH、滲透壓、水活度和氧化還原電勢(shì)等物理化學(xué)條件較為適宜PH：放線菌（強(qiáng)） 細(xì)菌 堿性酵母菌 霉菌 酸性剛配出來(lái)的培養(yǎng)基偏酸性，NaOH調(diào)PHPH內(nèi)源調(diào)節(jié)：磷酸緩沖液調(diào)節(jié) 碳酸鈣作

32、“備用堿”調(diào)節(jié)3. 選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)，遵循的四種方法：生態(tài)模擬，借鑒文獻(xiàn)，精心設(shè)計(jì)，試驗(yàn)比較4. 按對(duì)培養(yǎng)基的成分了解作分類(lèi)：天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基（馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基)5. 按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)作分類(lèi)：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、脫水培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基：凝固劑（瓊脂、明膠、硅膠)1%2%瓊脂或5%12%明膠 瓊脂是最優(yōu)良的凝固劑，成分為多縮半乳糖，絕大多數(shù)微生物不能利用，融化溫度96攝氏度，凝固溫度40攝氏度，對(duì)微生物無(wú)毒明膠可做氮源利用，融化溫度25攝氏度，低6. 按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能做分類(lèi)：選擇性培養(yǎng)基，鑒別性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基：抗生素（鏈霉菌、氯霉素）抑制細(xì)菌

33、放線菌，篩選真菌/苯酚，抑制細(xì)菌霉菌選放線菌/制霉菌素，抑制真菌，選細(xì)菌放線菌/結(jié)晶紫，牛膽酸鹽，抑制G+鑒別性培養(yǎng)基：伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基（EMB），鑒別大腸菌群，大腸桿菌深紫色 G+受抑制，G-，能發(fā)酵乳酸產(chǎn)酸產(chǎn)氣，產(chǎn)酸能力強(qiáng)的，菌落在透射光下呈紫色，反射光下呈綠色金屬，產(chǎn)酸能力弱，菌落棕色/不發(fā)酵乳糖不產(chǎn)酸，菌落無(wú)色透明7. 配制培養(yǎng)基步驟：計(jì)算稱(chēng)量-加水溶解-調(diào)節(jié)PH定容（真菌不調(diào)）-過(guò)濾分裝（有些不需要）-加塞包扎-加壓滅菌第六章 微生物的生長(zhǎng)及其控制第一節(jié) 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法1.測(cè)生長(zhǎng)量（細(xì)胞量）適合于所有的微生物直接：測(cè)菌絲長(zhǎng)度-絲狀真菌 稱(chēng)干重（離心法或過(guò)濾法）間接：比濁法：用光

34、密度OD值表示菌懸液的濃度-不適合絲狀菌 生理指標(biāo)法：測(cè)含氮量、含碳量、其他2. 測(cè)繁殖數(shù)（細(xì)胞數(shù)）適合于單細(xì)胞微生物直接：比例計(jì)數(shù)法 血球計(jì)數(shù)板法：全菌計(jì)數(shù)法既包括活菌又包括死菌間接：液體稀釋法（MPN法） 平板菌落計(jì)數(shù)法：（涂布法、澆注法）活菌計(jì)數(shù)法 醬油1ml-十的負(fù)六次方3. 涂布法步驟: 10ml左右培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，在平板表面加0.1ml菌樣，用滅過(guò)菌的涂布棒涂抹均勻，倒置培養(yǎng)4. 澆注法（常用）步驟：培養(yǎng)皿加1ml樣品，再加入冷卻到45攝氏度的10ml培養(yǎng)基，倒置培養(yǎng)菌落個(gè)數(shù)在30300間稀釋度最好5.倒置培養(yǎng)原因：防止雜菌污染/防止冷凝水影響菌落形態(tài)觀察5. 血球板計(jì)數(shù)法：酵

35、母菌、霉菌孢子，顯微鏡觀察，規(guī)格25×16 操作簡(jiǎn)便，計(jì)數(shù)直觀，不能區(qū)分死菌活菌，對(duì)高濃度不適合，不適合運(yùn)動(dòng)細(xì)菌第2節(jié) 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律1. 單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線：將少量單細(xì)胞純菌接種到一定量液體培養(yǎng)基內(nèi)，在適宜的溫度下培養(yǎng)，并定時(shí)取樣測(cè)定活菌的數(shù)目和重量的變化，以活菌個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)或活菌重量為縱坐標(biāo)，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)作圖所的曲線（酵母菌細(xì)菌等單細(xì)胞微生物）2. 根據(jù)微生物的速率生長(zhǎng)常數(shù)，即每小時(shí)分裂次數(shù)的不同，一般可把典型曲線粗分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期等四個(gè)時(shí)期。3. 延滯期（停滯期、調(diào)整期、適應(yīng)期）特點(diǎn)：生長(zhǎng)速率常數(shù)為零、細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng)、細(xì)胞內(nèi)RNA含量增高、合

36、成代謝十分活躍，易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶、對(duì)外界不良條件敏感。影響延滯期長(zhǎng)短的因素：（除菌種自身外）接種齡：對(duì)數(shù)期種子延滯期短接種量：接種量大，延滯期短培養(yǎng)基成分4. 指數(shù)期（對(duì)數(shù)期）特點(diǎn)：生長(zhǎng)速率常數(shù)R最大，世代時(shí)短、細(xì)胞成分平衡發(fā)展、群體生理特性相一致，代謝旺盛對(duì)數(shù)期是用作代謝、生理和酶學(xué)等研究的良好材料，是增殖噬菌體的最適宿主，也是發(fā)酵工業(yè)中用做種子的最佳材料，G+染色采用目標(biāo)計(jì)算題：繁殖代數(shù)、生長(zhǎng)速率常數(shù)、代時(shí)（略）5. 穩(wěn)定期（收獲期）：生長(zhǎng)速率常數(shù)等于零，合成次生代謝產(chǎn)物，菌體產(chǎn)量達(dá)到最高點(diǎn)，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)儲(chǔ)藏物質(zhì)穩(wěn)定期實(shí)踐意義：發(fā)酵中以菌體為終產(chǎn)品的最佳收獲期，某些代謝產(chǎn)物特別是次生代謝產(chǎn)物

37、發(fā)生在此階段，某些細(xì)菌的芽孢也發(fā)生，放線菌的抗生素在此階段大量合成，導(dǎo)致了連續(xù)培養(yǎng)原理的提出和工藝技術(shù)的改進(jìn)。6. 衰亡期：生長(zhǎng)速率常數(shù)為負(fù)，細(xì)胞異形態(tài)，細(xì)胞畸變，菌體自溶原因：外界環(huán)境對(duì)繼續(xù)生長(zhǎng)越來(lái)越不利，細(xì)胞內(nèi)的分解代謝明顯超過(guò)合成代謝，導(dǎo)致大量菌體死亡7. 微生物的連續(xù)培養(yǎng)：在恒定容積的流動(dòng)系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，一方面以一定速率不斷地加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物（菌體和代謝產(chǎn)物），以使培養(yǎng)基中的細(xì)胞數(shù)量和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)保持恒定分批培養(yǎng)：將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)生長(zhǎng)，最后一次收獲的培養(yǎng)方式。8. 絲狀菌的生長(zhǎng)：菌絲的生長(zhǎng)繁殖菌絲生長(zhǎng)與營(yíng)養(yǎng)有關(guān)，營(yíng)養(yǎng)豐富，分支多而密

38、，營(yíng)養(yǎng)缺乏，分支少而稀菌絲的生長(zhǎng)是頂端生長(zhǎng)，位于前端的為幼齡菌絲，位于后端的為老齡菌菌絲在固體培養(yǎng)基或在液體培養(yǎng)基中靜止培養(yǎng)是形成菌落，液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)時(shí)形成菌絲球9. 連續(xù)培養(yǎng)器按控制方式分：恒濁器（生產(chǎn)）、恒化器（實(shí)驗(yàn)室）第三節(jié) 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素1.影響微生物生長(zhǎng)的外界因素很多，除營(yíng)養(yǎng)條件外，還有物理因素，最主要的是溫度、PH、氧氣2.溫度：存在最低、最適、最高生長(zhǎng)溫度嗜冷型微生物：細(xì)胞內(nèi)酶耐低溫，不飽和脂肪酸含量高，用于菌種保藏和食品冷藏嗜溫型微生物：分為體溫性和室溫性嗜熱型微生物：用途高溫殺菌最適生長(zhǎng)溫度：某菌分裂代時(shí)最短或生長(zhǎng)速率最高時(shí)的培養(yǎng)溫度。最是溫度并不等于生長(zhǎng)速率

39、最高時(shí)的培養(yǎng)溫度，也不等于發(fā)酵速率或累積代謝產(chǎn)物最高時(shí)的培養(yǎng)溫度，更不等于積累某一代謝產(chǎn)物最高時(shí)的培養(yǎng)溫度。3. 氧氣：按照微生物與氧的關(guān)系粗分為好氧菌和厭氧菌好氧菌又可細(xì)分為專(zhuān)性好氧菌，兼性好氧菌，微好氧菌厭氧菌又可細(xì)分為耐氧菌和專(zhuān)性厭氧菌專(zhuān)性好氧菌：較高濃度分子氧（20.2kPa）條件，有完整的呼吸鏈，以分子氧作為最終氫受體，具有超氧化物歧化酶SOD，絕大多數(shù)真菌和多數(shù)細(xì)菌、放線菌都是專(zhuān)性好氧菌兼性厭氧菌：以在有氧條件下生長(zhǎng)為主也可在兼在厭氧條件下生長(zhǎng)微好氧菌：霍亂弧菌、單胞菌屬耐氧菌（耐氧性厭氧菌）：生長(zhǎng)不需要任何氧，但分子氧對(duì)其無(wú)害。乳酸菌多數(shù)是耐氧菌。專(zhuān)性厭氧菌：分子氧對(duì)他們有毒，即

40、使短期接觸也會(huì)抑制甚至致死，在深層無(wú)氧處或在低氧化還原電勢(shì)的環(huán)境下才生長(zhǎng)。培養(yǎng)基加還原劑4. 專(zhuān)性厭氧菌有氧致死原因：在生物體內(nèi)，超氧陰離子自由基普遍存在，它既有分子性質(zhì)又有離子性質(zhì)，性質(zhì)極不穩(wěn)定，在細(xì)胞內(nèi)可破壞各種生物大分子和膜結(jié)構(gòu)，對(duì)生物體極其有害，因SOD的存在，劇毒的超氧陰離子自由基就被歧化成毒性稍低的過(guò)氧化氫，在過(guò)氧化氫酶作用下，過(guò)氧化氫進(jìn)一步變成無(wú)毒的水，專(zhuān)性厭氧菌體內(nèi)沒(méi)有SOD，所以有氧條件下不能生存。5. PH（類(lèi)似于溫度）：一般生長(zhǎng)繁殖的最是PH與合成某代謝產(chǎn)物的PH通常不一樣。黑曲霉發(fā)酵蔗糖產(chǎn)檸檬酸，最適PH236. 滲透壓：高滲條件，保存食品7. 水分活度：微生物能利用的

41、自由水。濕生型大于0.9，絕大多數(shù)細(xì)菌。中生型0.80.9酵母菌。干生型小于0.8大多數(shù)霉菌。干燥保持食品最好方法。第四節(jié) 微生物接種和培養(yǎng)法概論1.接種：將微生物移接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程。工具：接種環(huán)用的最多，接種針、接種鏟，液體接種：吸管、移液管方法：劃線接種最常用、三點(diǎn)接種、穿刺接種、澆注接種、涂布接種、液體接種、注射接種、活體接種2. 自然界的菌混雜在一起，所以提出微生物的純生長(zhǎng)培養(yǎng)，篩選目的菌。3. 純培養(yǎng)：微生物學(xué)中將在實(shí)驗(yàn)條件下從一個(gè)細(xì)胞或一種細(xì)胞群，繁殖得到后代稱(chēng)為純培養(yǎng)。4. 純培養(yǎng)培養(yǎng)基選擇：細(xì)菌牛肉膏蛋白胨，真菌馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基PH偏酸，放線

42、菌高氏一號(hào)培養(yǎng)基PH中性偏堿純培養(yǎng)方法：稀釋倒平板法（操作如澆注法） 涂布平板法（操作如涂布法） 單細(xì)胞挑取法 平板劃線分離法 平板接種環(huán)沾取樣品（土壤加無(wú)菌水稀釋?zhuān)﹣?lái)回劃線 菌體菌落形態(tài)完全抑制就是純種培養(yǎng)平板（簡(jiǎn)稱(chēng)平板）：熔化的固體培養(yǎng)基倒入無(wú)菌平皿，冷卻凝固后，盛固體培養(yǎng)基的平皿。無(wú)菌操作：在培養(yǎng)、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時(shí)防止其被其他微生物污染的技術(shù)，它是保證微生物學(xué)研究正常進(jìn)行的關(guān)鍵。土壤采樣：土壤的肥瘦，避免下雨天，春秋最適宜，土層520cm左右土樣，隔10m左右采三個(gè)樣。試管培養(yǎng)基斜面要低溫干燥隔絕空氣。 第五節(jié) 有害微生物的控制 1. 滅菌徹底殺滅一切微生物 殺菌 殺滅法 溶菌控制有害菌的措施 消毒部分殺滅，僅殺滅病原體 防腐抑制霉腐微生物 抑制法 化療抑制宿主體內(nèi)的病原菌2. 殺菌：采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。分為殺菌和溶菌兩