生物制藥實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要求及規(guī)范

1、.藥品的質(zhì)量控制不僅與其生產(chǎn)過(guò)程密切相關(guān)，同時(shí)也與實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量設(shè)計(jì)和管理緊密相連，特別是無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)將微生物實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌檢查的實(shí)驗(yàn)結(jié)果作為產(chǎn)品放行的重要指標(biāo)，因此藥品微生物質(zhì)量控制顯得尤為重要。藥品微生物檢驗(yàn)的對(duì)象是分布不均勻的活的生物，檢驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性差，為保證微生物檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性和檢驗(yàn)操作人員的安全性，必須按照G(2010年修訂版)和中國(guó)藥典2010版藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則要求對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)計(jì)和管理，有效防止檢驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)因污染和交叉污染而造成的“假陽(yáng)性”和“假陰性”的結(jié)果。1相關(guān)法規(guī)要求中國(guó)藥典2010年版藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則中規(guī)定微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有符合無(wú)菌檢查法(附錄

2、XB)和微生物限度檢查法(附錄xIIIC)要求的、用于具有開(kāi)展無(wú)菌檢查、微生物限度檢查、無(wú)菌采樣等檢測(cè)活動(dòng)的、獨(dú)立設(shè)置的潔凈室(區(qū))或隔離系統(tǒng)，且須配備實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備區(qū)、樣品接收和貯存區(qū)、培養(yǎng)室、污染物處理等區(qū)域并顯示標(biāo)識(shí)。 GMP(2010年修訂版)第六十四條規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)應(yīng)當(dāng)確保其適用于預(yù)定的用途，并能夠避免混淆和交叉污染。2微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)布局現(xiàn)狀及風(fēng)險(xiǎn)陽(yáng)性對(duì)照室用于菌種的處理，因其污染嚴(yán)重藥廠都已單設(shè)更衣室和緩沖間分室進(jìn)行，而無(wú)菌檢查、微生物限度檢查與抗生素微生物檢定的實(shí)驗(yàn)室未嚴(yán)格分開(kāi)(公用更衣室及緩沖間)。在GMP檢查中的2802條項(xiàng)中明確規(guī)定：生物檢定、微生物限度檢定和放射性同位素檢

3、定等應(yīng)分室進(jìn)行，條項(xiàng)解釋中提到“無(wú)菌室和微生物限度室不可公用更衣室及緩沖間，防止污染無(wú)菌室”。公用更衣室及緩沖間勢(shì)必會(huì)污染無(wú)菌室，微生物限度室的樣品是含菌的，污染無(wú)菌室后產(chǎn)品可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果，抗生素具有抑菌性，污染無(wú)菌室后產(chǎn)品可能出現(xiàn)假陰性的結(jié)果，這樣根本無(wú)法保證無(wú)菌檢查結(jié)果的真實(shí)性，也無(wú)法就出現(xiàn)的超標(biāo)結(jié)果進(jìn)行調(diào)查，無(wú)菌檢查也就失去了意義。無(wú)菌檢查室、微生物限度室、抗生素微生物檢定、陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)室因送回風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置不合理無(wú)法調(diào)整壓差，有的藥廠不同實(shí)驗(yàn)室的回風(fēng)共用一道“夾墻”，會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室之間的交叉污染。對(duì)于要求無(wú)菌的環(huán)境(如無(wú)菌檢查室、微生物限度檢查室)應(yīng)該保持相對(duì)正壓，防止有菌區(qū)空氣進(jìn)入發(fā)

4、生污染。對(duì)于污染源(如陽(yáng)性對(duì)照室、抗生素微生物檢定室)應(yīng)該保持相對(duì)負(fù)壓，防止污染物質(zhì)的擴(kuò)散對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和人員安全造成影響。微生物檢驗(yàn)室通常離生產(chǎn)區(qū)較遠(yuǎn)，且可能設(shè)置在樓層上，有的藥廠在微生物檢驗(yàn)室的潔凈區(qū)內(nèi)用飲用水作為清潔用水，用于人員的洗手和房間的清潔，飲用水中含有大量的細(xì)菌和不溶性微粒，會(huì)對(duì)無(wú)菌環(huán)境造成破壞。有的藥廠微生物檢驗(yàn)室采用明管排水。微生物檢驗(yàn)室潔凈區(qū)的內(nèi)表面不平整，如照明燈、壓差計(jì)未采用嵌入式安裝，不易進(jìn)行清潔和El常擦拭消毒。有菌區(qū)和無(wú)菌區(qū)的潔具混用，帶來(lái)交叉污染。無(wú)菌區(qū)的清潔用具沒(méi)有經(jīng)過(guò)滅菌處理，消毒液沒(méi)有經(jīng)過(guò)除菌過(guò)濾，無(wú)菌區(qū)的環(huán)境從而遭到破壞，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要

5、求微生物實(shí)驗(yàn)室的布局、設(shè)計(jì)和建造應(yīng)有利于避免交叉污染、便于清潔及日常維護(hù)，以保證高潔凈度的無(wú)菌實(shí)驗(yàn)環(huán)境；其次，人和物是潔凈區(qū)的主要污染源。因此，必須對(duì)系統(tǒng)的操作人員進(jìn)行培訓(xùn)，讓其充分掌握系統(tǒng)的運(yùn)行要求，使實(shí)驗(yàn)用品、人帶來(lái)的污染得到有效控制。在人、物流的設(shè)計(jì)和管理上，基本原則是不經(jīng)過(guò)凈化處理的人、不經(jīng)消毒滅菌的物品不能進(jìn)入無(wú)菌區(qū)域。31人流根據(jù)GM(2010版修訂版)要求，人、物流分開(kāi)。4個(gè)實(shí)驗(yàn)室擁有獨(dú)立的更衣系統(tǒng)，避免交叉污染。物品集中通過(guò)潔凈互鎖傳遞窗傳遞，對(duì)于大容量注射劑檢品量大的問(wèn)題，防止頻繁開(kāi)啟傳遞窗造成無(wú)菌檢查室環(huán)境的破壞，物料經(jīng)外清緩沖間傳入無(wú)菌檢查室。所有的樣品經(jīng)75酒精在樣品準(zhǔn)

6、備室擦拭后傳入相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室，其他器具均需滅菌后傳入。美國(guó)藥典規(guī)定，用于進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)的設(shè)施與用于制藥的設(shè)施應(yīng)該是一致的，并規(guī)定，用于無(wú)菌檢驗(yàn)的設(shè)施不應(yīng)比無(wú)菌加工生產(chǎn)設(shè)施造成更多的微生物污染幾率。因此，合理的設(shè)計(jì)應(yīng)該包括更衣區(qū)域和通過(guò)氣閘。環(huán)境的監(jiān)測(cè)和著裝應(yīng)該與藥品生產(chǎn)中相一致。根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)管理的原則，對(duì)于要求相對(duì)無(wú)菌環(huán)境的無(wú)菌檢查室(B+A)和微生物限度檢查室(c+A)基本采用嵌套式設(shè)計(jì)。無(wú)菌檢查室和微生物限度室要求檢測(cè)環(huán)境無(wú)菌的，需把操作人員所用潔凈服進(jìn)行包裹以防止污染，無(wú)菌檢查室和微生物限度室內(nèi)操作人員不能超過(guò)2名。無(wú)菌服經(jīng)清洗后裝入呼吸袋內(nèi)在雙扉脈動(dòng)真空滅菌柜進(jìn)行滅菌，在進(jìn)入無(wú)菌區(qū)時(shí)裝有無(wú)菌服的

7、呼吸袋帶入。需制定SOP對(duì)更衣過(guò)程中的每一個(gè)細(xì)節(jié)進(jìn)行規(guī)范，更衣的程序?yàn)椋好撘孪词窒?÷帶手套脫鞋_÷穿無(wú)菌鞋一穿無(wú)菌內(nèi)服脫手套_帶手套穿無(wú)菌外服_÷帶無(wú)菌手套。此外，陽(yáng)性對(duì)照室的潔凈級(jí)別可設(shè)計(jì)為C+A，效價(jià)測(cè)定室的潔凈級(jí)別可設(shè)計(jì)為D級(jí)。32物流進(jìn)入的物流與人流應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有單獨(dú)的傳遞窗傳遞樣品和實(shí)驗(yàn)用具，所有樣品必須用75的酒精在樣品擦拭區(qū)進(jìn)行擦拭，用于無(wú)菌區(qū)的實(shí)驗(yàn)用具必須經(jīng)滅菌后才能傳入，滅菌的效果應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，傳遞窗必須裝有紫外燈進(jìn)行消毒，需定期對(duì)其消毒效果進(jìn)行評(píng)價(jià)以便及時(shí)更換紫外燈管。對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)室可能產(chǎn)生的嚴(yán)重污染物宜通過(guò)專用的傳遞窗傳遞

8、，并做滅活處理。各實(shí)驗(yàn)室的潔具單獨(dú)存放，防止交叉污染。33空調(diào)系統(tǒng)整個(gè)系統(tǒng)可采用1臺(tái)潔凈空調(diào)，因無(wú)菌檢查室和微生物限度室內(nèi)的空氣質(zhì)量較高可經(jīng)回風(fēng)循環(huán)利用。為避免交叉污染，抗生素微生物檢定室、陽(yáng)性對(duì)照室不回風(fēng)，采用全排，并采用“豎井”式回風(fēng)，單閥單控，保證壓差。無(wú)菌檢查室和穿無(wú)菌外衣兩個(gè)房間須達(dá)到B級(jí)要求，因其操作人員僅限于1人，發(fā)塵量較少，可參考ISPE(國(guó)際制藥工程協(xié)會(huì))將換氣次數(shù)設(shè)為4060次h，C級(jí)區(qū)的換氣次數(shù)設(shè)為2040次h，確定層高后便可以確定空調(diào)的額定風(fēng)量，但必須考慮風(fēng)量的損耗。空調(diào)系統(tǒng)必須全天24h開(kāi)啟，以維持正壓防止污染。因故停機(jī)必須驗(yàn)證。34水系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室通常離純化水制水間較遠(yuǎn)

9、，宜購(gòu)買小型純化水機(jī)用于無(wú)菌區(qū)人員洗手、衛(wèi)生清潔、儀器清洗等，純化水即制即用，并經(jīng)除菌過(guò)濾后使用。飲用水含有：大量的細(xì)菌會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境造成破壞。水的輸送管線要有一定的坡度，采用步步低的方式，管道殘留在設(shè)置的最低點(diǎn)進(jìn)行排放。應(yīng)設(shè)夾層放置排水管線。3.5潔凈裝修整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的潔凈裝修施工必須符合GB505912010潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范的要求，其平面布局如附圖所示。4微生物實(shí)驗(yàn)室管理按照中國(guó)藥典2010版藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則要求，微生物實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)具備微生物學(xué)的教育背景，應(yīng)經(jīng)培訓(xùn)并授權(quán)方可上崗。在微生物實(shí)驗(yàn)室的入口應(yīng)設(shè)置門禁裝置，只允許微生物實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入。還應(yīng)定期對(duì)其進(jìn)行無(wú)菌操作后的無(wú)菌服表面進(jìn)行監(jiān)測(cè)，防止人為差錯(cuò)。42環(huán)境監(jiān)測(cè)應(yīng)定期對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以確保環(huán)境處于受控狀態(tài)，包括沉降菌、浮游菌、塵埃粒子、設(shè)備表面監(jiān)測(cè)、高效過(guò)濾器檢漏，請(qǐng)參照相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)定適宜的監(jiān)測(cè)頻率進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。43清潔消毒微生物實(shí)驗(yàn)室中無(wú)菌區(qū)域應(yīng)盡量減少“陰陽(yáng)角”，便于無(wú)菌室日常的擦拭消毒，無(wú)菌區(qū)所用的潔具應(yīng)經(jīng)滅菌處理，所用的水消毒劑應(yīng)經(jīng)除菌過(guò)濾。有菌區(qū)和無(wú)菌區(qū)的潔具不能共用，應(yīng)在潔具顏色上加以區(qū)分。隨著環(huán)境微