野生毛葡萄籽原花青素抗氧化活性的研究

1、野生毛葡萄籽原花青素抗氧化活性的研究鄭燕升,莫倩 (廣西工學(xué)院輕化系,廣西柳州545006)摘要 目的為進(jìn)一步開發(fā)利用野生毛葡萄籽原花青素提供依據(jù)。方法選擇清除超氧陰離子自由基(O2-)和羥基自由基(OH)2個(gè)方面,對野生毛葡萄籽原花青素的抗氧化活性進(jìn)行測定。結(jié)果野生毛葡萄籽原花青素對O2和OH均具有較強(qiáng)的清除能力,對O2、OH野生毛葡萄籽原花青素的IC50分別為0.37、0.33mg/ml。結(jié)論野生毛葡萄籽原花青素具有較強(qiáng)的抗氧化活性。關(guān)鍵詞 野生毛葡萄;原花青素;抗氧化活性中圖分類號(hào) S58 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2008)18-07512-02-在自然界中,多酚類

2、物質(zhì)廣泛存在,并作為天然的抗氧化劑而廣泛應(yīng)用。對于葡萄籽原花青素抗氧化性的研究報(bào)道很多1-4公式計(jì)算。清除率(%)=A空白-A樣品×100A空白(1),既包括動(dòng)物體內(nèi)抗氧化試驗(yàn),又包括體外細(xì)胞培養(yǎng)及用化學(xué)方法測定。研究表明,葡萄籽原花青素是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的最有效的自由基清除劑之一,特別是低聚花青素可以清除體內(nèi)的自由基和活性氧,能預(yù)防因人體血液中低密度脂蛋白氧化而引起的動(dòng)脈硬化5清除率(%)=2 結(jié)果與分析野生毛葡萄原花青素在鄰苯三酚自氧化體系和Fe2+/H2O2氧化體系中清除超氧陰離子自由基(O2-)和羥基自由基(OH)的試驗(yàn)結(jié)果分別見圖1、2。A樣品-A損傷×100A空白

3、-A損傷(2)。許多研究表明,原花青素抗氧化、清除自由基的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于VE和Vc,能防治80多種因自由基引起的疾病,包括心臟病、關(guān)節(jié)炎等,還具有改善人體微循環(huán)的功能6-7。筆者研究了自制的野生毛葡萄籽原花青素產(chǎn)品在2種體系中清除自由基的活性,為進(jìn)一步開發(fā)利用野生毛葡萄原花青素提供一定的科學(xué)依據(jù)。1 材料與方法1.1 主要儀器與試劑 AL104電子分析天平(梅特勒托利多儀器有限公司);WFZUV-2000紫外/可見分光光度計(jì)(尤尼柯儀器有限公司);PHS-25型精密酸度計(jì)(上海偉業(yè)儀器廠);ZFD5250全自動(dòng)新型鼓風(fēng)干燥箱(上海智城分析儀器制造有限公司);2003型恒溫磁力加熱攪拌器(上海閔行

4、虹浦儀器廠)。三羥甲基氨基甲烷(Tris)、鄰二氮菲、鄰苯三酚、Fe-SO4、H2O2、乙醇、丙酮等為國產(chǎn)分析純試劑。1.2 試驗(yàn)材料 供試材料為野生毛葡萄籽原花青素,自制8(>95.0%)。1.3 試驗(yàn)方法基金項(xiàng)目 廣西教育廳資助項(xiàng)目(200708LX198);廣西工學(xué)院基金項(xiàng)目(院科自0704104)。作者簡介 鄭燕升(1964-),男,廣西貴港人,碩士,副教授,從事天然有機(jī)化學(xué)方面的研究。收稿日期 2008-04-16圖1 野生毛葡萄原花青素對O2的清除效果Fig.1 ScavengingeffectofproanthocyandinsfromwildVitisquin-quang

5、ularisonO2-由圖1可知,鄰苯三酚自氧化體系中,隨著原花青素濃度的升高,清除率也隨之升高。將上述數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸,得到回歸方程:y=11.636x3-151.66x2+227.4x-13.46(R2=0.9644)(3)根據(jù)回歸方程可求得在該試驗(yàn)條件下野生毛葡萄籽原36卷18期 鄭燕升等 野生毛葡萄籽原花青素抗氧化活性的研究7513花青素的IC50為0.37mg/ml。當(dāng)原花青素質(zhì)量濃度達(dá)1.0mg/ml時(shí),對超氧陰離子自由基(O2-)的清除率達(dá)76.1%。 由圖2可知,在Fe2+/H2O2氧化體系中,隨著原花青素濃度的升高,清除率也隨之升高。將上述數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸,得到回歸方程:y=43.9

6、01x3-186.68x2+235.83x-10.247(R2=0.9755)(4)根據(jù)回歸方程可求得在該試驗(yàn)條件下野生毛葡萄籽原花青素的IC50為0.33mg/ml。當(dāng)原花青素質(zhì)量濃度達(dá)到1.0mg/ml時(shí),對羥基自由基(OH)的清除率達(dá)到83.8%。毛葡萄原花青素對超氧陰離子自由基(O2-)和羥基自由基(OH)具有較強(qiáng)的清除作用,而且存在量效關(guān)系,質(zhì)量濃度越高,抗氧化活性越強(qiáng)。當(dāng)原花青素質(zhì)量濃度達(dá)到1.0mg/ml時(shí),對超氧陰離子自由基(O2-)、羥基自由基(OH)清除率分別達(dá)到76.1%和83.8%,說明野生毛葡萄籽原花青素為抗自由基的有效活性成分。但由于自制的野生毛葡萄原花青素沒有經(jīng)過

7、精細(xì)分離,低聚體含量尚未測定,低聚體提純不夠,存在聚合度較高的成分,對超氧陰離子自由基(O2-)、羥基自由基(OH)清除率的優(yōu)勢還沒得到充分體現(xiàn)。參考文獻(xiàn)1鄭光耀.葡萄籽原花青素提取物的生理活性、藥理作用及其應(yīng)用J.林產(chǎn)化工通訊,2000,34(1):28-33.2孟潔,杭瑚.訶子對食用油脂抗氧化作用的研究J.食品科技,2000(2):36-38.3趙萬洲,陸茵,閻新琦,等.葡萄籽原花青素抗促癌作用實(shí)驗(yàn)研究J.中草藥,2000,31(12):917-920.4王洪新.葡萄籽中抗氧化劑的精制及抗氧化性的測定J.中國油脂,1995(6):9-14.5BAOSHANSUNG,PEDROBELCHIO

8、RJM,RICARDODASILVA,etal.Iso-lationandpurificationofdimericandtrimericproanthocyanidinsfromgrapeseedsJ.JournalofChromatography,1999,841(1):115-121.6FULEKIT,RICARDODASILVA,JM.CatechinandprocyanidincompositionofseedsfromgapecultivarsgrowninOntarioJ.JournalofAgriculturalandFoodChemistry(USA),1997,45(4):

9、1156-1160.7BAGCHID,BAGCHIM,STOHSSJ,etal.Freeradicalsandgrapeseedproan-thocyanidinextractimportanceinhumanhealthanddiseasepreventionJ.Toxi-cology,2000,148(2/3):187-197.8鄭燕升,莫倩,雷莉.野生毛葡萄籽中原花青素提取工藝研究J.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(2):408-409.9劉慧燕,趙謀明.江蘺低分子量多糖的提取以及抗氧化活性研究J.食品工業(yè)科技,2005,25(3):67-69.2+2+10金鳴,蔡亞欣.鄰二氮菲-Fe氧化

10、法檢測Fe/H2O2產(chǎn)生的羥自由基J.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,1996,23(6):553-555.圖2 野生毛葡萄原花青素對OH的清除效果Fig.2 ScavengingeffectofproanthocyandinsfromwildVitisquin-quangularisonOH3 結(jié)論在鄰苯三酚自氧化體系和Fe2+/H2O2氧化體系中,野生(上接第7511頁)表7 續(xù)隨子油的成分Table7ComponentofEuphorbialathyrisL.seedoil化合物Compound豆蔻酸甲酯十五烷酸甲酯棕櫚油酸甲酯棕櫚酸甲酯棕櫚二烯酸甲酯十七烷酸甲酯硬脂酸甲酯油酸甲酯亞油酸甲酯-亞麻酸甲酯花生酸花生烯酸保留時(shí)間minRetentiontime種子甲酯油甲酯Seedmethylester11.97Oilmethylester12.48種子甲酯Seedmethylester 0.408相對含量%Relativecontent油甲酯Oilmethylester0.399參考文獻(xiàn)社,1999:3582.2張衛(wèi)明,史勁松,顧龔平.生物質(zhì)能的利用和能源植物的開發(fā)J.南京師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2007,30(3):68-74.3婁在祥,王洪新.蘋果籽油提取工藝研究J.糧油食品科技,2006,14(6):36-38.4祝紅,祝玲,葉曼紅.番木瓜種子油提取方法及成分的