條件治病菌之(糞)腸球菌研究觀察

1、條件致病菌腸球菌摘要：腸球菌不像大多數(shù)的乳酸菌一樣，它不被認(rèn)為是“安全可靠”（GRAS）。對于腸球菌的安全評價仍存有爭議。雖然腸球菌被認(rèn)為是“積極“或在奶酪技術(shù)中有用，但它的隔離種群已經(jīng)作為對人類的條件致病菌出現(xiàn)。因此，這些細(xì)菌對發(fā)酵乳制品是否有益處于似是而非的地位，以為它存在有潛在的危險。本篇綜述是概述了腸球菌的積極的和消極的兩種特性，并舉例說明這個菌的具有爭議的特性。根據(jù)食品安全評價準(zhǔn)則，我們提出對于每個潛在的技術(shù)應(yīng)變逐個進行評估，并且建議腸球菌在發(fā)酵食品中使用前進行個別研究。1. 簡介2. 窗體頂端腸球菌最初列為D群鏈球菌，這種分類可以追溯到由蘭斯菲爾德建立的計劃。1984年，腸球菌給予

2、了新的位置被列為腸球菌屬，在經(jīng)過DNA-DNA和DNA-RNA雜交的研究后證明它與鏈球菌屬有較遠(yuǎn)的關(guān)系(Schleifer and Kilpper-Balz, 1984)。到目前為止32種已被提議列入腸球菌屬（ 2005年10月26號)。腸球菌種適宜在6.5氯化鈉，40膽汁鹽且pH值在9.6，并可以在60°C的環(huán)境下生存30分鐘。大多數(shù)品種也可以在10至45之間生長(Moellering,1992;Flahautet al.,1996)。糞腸球菌和屎腸球菌都是人類消化道微生物自然存在的菌種，在胃腸道中因為個體差異其含量差異變化很大（在每克消化系統(tǒng)內(nèi)容物中含有102和108）。腸球菌通

3、常從食品、植物、水和土壤中分離，可能由于它的來源是糞便使得他們的天性在惡劣環(huán)境中比較耐受(Giraffa,2002)。在牛奶和奶酪制品中通常會找到糞腸球菌、屎腸球菌和少量的堅忍腸球菌，偶然也會發(fā)現(xiàn)小腸腸球菌和鉛黃腸球菌。不同于其他乳酸菌，腸球菌不能被認(rèn)為是“一般認(rèn)為安全”（GRAS），并且它在水中檢測是作為糞便污染物的指標(biāo)的(Godfree et al.,1997)。一般認(rèn)為對于腸球菌的安全評價程序是一個模棱兩可的狀況。一方面，腸球菌在作為奶酪技術(shù)中作為發(fā)酵培養(yǎng)物被認(rèn)為是由積極作用的(Giraffa,2003)；另一方面，它們被認(rèn)為是新興的人類病原體(Moellering,1992)。這篇綜述

4、主要是根據(jù)現(xiàn)有知識總結(jié)了腸球菌的積極和消極的性狀，來強調(diào)這種菌屬的爭議性。食品安全準(zhǔn)則著重強調(diào)了對抗生素耐藥性和毒力的因素，這樣使我們建議在發(fā)酵食品中使用腸球菌前應(yīng)對這幾項進行研究。2分類和鑒定由于腸球菌的表型多樣性，這使得腸球菌種的生理測試鑒定一直存在問題(Devriese et al.,1993;Park et al.,1999)。此外，物種鑒定的常規(guī)實驗往往需要很長的培養(yǎng)時間(Facklam et al.,2002)。使用16S和23S rDNA基因的基因型鑒定方法更加的準(zhǔn)確，雖然它們還不能區(qū)分所有腸球菌的物種（例如鶉雞腸球菌和鉛黃腸球菌有99.8%的16S rDNA的同源性）。這種方法

5、已經(jīng)成功的在應(yīng)用：1）rRNA基因間隔區(qū)的特異PCR擴增技術(shù)(Naimi et al.,1997)，ddl和van基因(Satake et al.,1997;Kariyama et al.,2000)，ace 基因(Duh et al.,2001)，sodA 基因(Jackson et al.,2004)，2）轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因Ef0027的擴增(Liu et al.,2005)，3）ddl 基因(Ozawa et al.,2000)，cpn60 基因(Goh et al.,2000)和atpA 基因(Naser et al.,2005)的測序，和4）利用5端引物（GTG）的細(xì)菌基因組重復(fù)序列PCR

6、技術(shù)(Svec et al.,2005)。有許多人試圖區(qū)分從人分離的菌株和從食物分離的菌株,大部分主要關(guān)注的DNA指紋圖譜。這些研究使用了多種分子分型方法，如擴增rDNA限制性分析（ARDRA）(Ulrich and Muller,1998)，脈沖場凝膠電泳（PFGE）的DNA宏觀限制模式(Deschee-maeker et al.,1997;Gambarotto et al.,2001;Vancanneyt et al.,2002)，隨機擴增多態(tài)性DNA（RAPD）- PCR檢測(Cocconcelli et al.,1995;Descheemaeker et al.,1997;Andrig

7、hetto et al.,2001;Cosentino et al.,2004;Martin et al.,2005)和擴增片段長度多態(tài)性（AFLP）技術(shù)(Antonishyn et al.,2000;Willems et al.,2000;Vancanneyt et al.,2002) 。脈沖場凝膠電泳（PFGE）已成功地用于表現(xiàn)臨床和食品株之間的差異，以及從家禽和住院患者分離的菌株的差異(van den Braak et al.,1998;Lemcke and Bulte,2000)。雖然電泳是區(qū)分腸球菌屬菌株的黃金標(biāo)準(zhǔn)方法，但是它比較昂貴且耗時和比較復(fù)雜。最近，有兩種方法被證明比PFGE

8、更有辨識力，一種是基于管家基因的核苷酸序列的多位點序列分型（MLST），另有一種是基于可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列的多位變量分析（MLVA）(Homan et al.,2002, Top et al., 2004, Titze-de-Almeida et al., 2004)。例如，411株屎腸球菌的種群結(jié)構(gòu)（來自于不同大洲和生態(tài)位），通過這種方法分析表明，大多數(shù)源自醫(yī)院的萬古霉素抗藥性腸球菌被叫做C17復(fù)合體都是單一無性系(Willems et al., 2005)。MLSA是屎腸球菌株的流行病學(xué)分析的一種極好的方法，它與MLVA都能很好的替代PFGE。盡管腸球菌的分子分型方法在很大范圍內(nèi)都有效，并

9、且MLST的流行病學(xué)分析方法都是很有效的方法，但它們?nèi)匀浑y以明確區(qū)分食品株系和臨床株系。3. 腸球菌在乳制品中的作用奶酪中腸球菌的使用備受爭議。在南歐國家中腸球菌對于奶酪風(fēng)味的影響是必要的因素（表1），但在北歐大多數(shù)國家中對這持否定的態(tài)度。這些不同的觀點可能僅僅是由于文化差異。一些研究表明，乳品株腸球菌對于傳統(tǒng)奶酪成熟具有積極的作用(Franz et al., 1999; Giraffa, 2003;FoulquieMoreno et al., 2006)。腸球菌污染牛奶要么是直接來自于動物糞便，要么是間接的來自污染的水源，擠奶設(shè)備或者是散裝的儲存罐(Giraffa, 2003)。在地中海式奶

10、酪凝乳中腸球菌的范圍從104到106CFU/g，而在完全成熟的奶酪菌落數(shù)達(dá)到105到107CFU/g(Macedo et al., 1995; Bouton et al., 1998; Centeno et al., 1999)。在牛奶制品中經(jīng)常課分離出糞腸球菌和屎腸球菌(Franz et al., 1999; Gelsomino et al., 2001)。堅忍腸球菌也經(jīng)常在奶制品中分離出來(Suzzi et al., 2000; Andrighetto et al., 2001; Cosentino et al., 2004)，但往往被低估，它過去可能是一種錯誤的鑒別。腸球菌對于奶酪的成熟

11、和香氣的形成都有很大的幫助，例如切達(dá)干酪、羊乳酪、Water-buffalo、 Mozarella、Cebreiro、Venaco和 Hispanico都是由于他們蛋白水解和酯水解和他們通過檸檬酸鹽的新陳代謝產(chǎn)生的雙乙酰產(chǎn)品(Centeno et al.,1999; Tsakalidou et al., 1993; Centeno et al., 1999)。除了他們的工藝性能，許多的腸球菌株（主要是糞腸球菌和屎腸球菌）生產(chǎn)的細(xì)菌素能夠抑制李斯特菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和霍亂弧菌(Giraffa et al., 1994; Maisnier-Patin et al., 199

12、6;Nunez et al., 1997; Simonetta et al., 1997; Ennahar et al., 2001;Laukova and Czikkova, 2001; Sarantinopoulos et al., 2002b;Leroy et al., 2003)。由于他們在奶酪成熟、風(fēng)味形成和細(xì)菌素的生產(chǎn)的作用，表明了這個具有理想的技術(shù)和代謝特點的腸球菌可以用做各種奶酪的發(fā)酵劑培養(yǎng)物(Villani and Coppola, 1994; Giraffa, 1995; Centeno et al., 1999; Sarantinopoulos et al., 2002a

13、)。對于腸球菌在奶酪的消極作用可能是由于它們能夠生產(chǎn)生物胺。在生產(chǎn)奶酪和發(fā)酵香腸時產(chǎn)生的生物胺中一些腸球菌株被定義為有害的(Gardin et al., 2001; Connil et al., 2002;Giraffa, 2002)。鑒于其共生的狀態(tài)，腸球菌也被用來作為人或家畜的益生菌(Tannock and Cook,2002)。益生菌發(fā)酵乳商業(yè)上稱為Gaio，這里面包含有是腸球菌菌株，在丹麥已經(jīng)商業(yè)化(Tamime, 2002)。腸球菌SF68已被用來治療腹瀉，并可以替代抗生素的治療(Bellomo et al., 1980)。另一種腸球菌的益生菌的使用是CausidoR培養(yǎng)，它包括嗜熱

14、鏈球菌和糞腸球菌兩種菌株。然而，作為一種益生菌腸球菌或作為奶酪的起始發(fā)酵的使用仍存在爭議，這是因為它的耐藥性和毒力基因?qū)θ祟惾杂酗L(fēng)險(Franz et al., 2003)。2004年，加拿大禁止了益生菌腸球菌的使用。4. 腸球菌和人類的健康4.1腸球菌為條件致病菌雖然腸球菌已經(jīng)使用了幾個世紀(jì)，并沒有明確地把它作為劇毒的有機體。他們現(xiàn)在已經(jīng)成為全球院內(nèi)感染的重要原因(Murray and Weinstock, 1999)。在美國腸球菌是引起醫(yī)院血液感染的第三大最常見原因(Wisplinghoff et al., 2004)，在歐洲排第四。腸球菌的感染主要是糞腸球菌和屎腸球菌引起的，其中臨床菌株

15、分別高達(dá)80%和20%(Huycke et al., 1998; Reynolds et al., 2004; Coque et al., 2005)。最近的研究表明，屎腸球菌感染的比例有所增加，主要是由于表1 與腸球菌有關(guān)的奶酪產(chǎn)品（表中不太詳盡）對抗生素有抗藥性的腸球菌株越來越多(Bhavnani et al., 2000;Jones et al., 2004; Coque et al., 2005; Treitman et al., 2005)。其他的腸球菌菌種例如堅忍腸球菌、鶉雞腸球菌、鉛黃腸球菌、棉子糖腸球菌被較少的與腸球菌感染有牽連。對于健康個體是無害的，腸球菌臨床菌株主要使重癥監(jiān)

16、護病房患者及嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病的病人或免疫系統(tǒng)受損病人，或者是老人病院的病人致病。腸球菌常與其他病原體的多種微生物腹內(nèi)感染有關(guān)系，因此很難確定它在感染中的作用。但是，腸球菌是泌尿道感染，菌血癥，心內(nèi)膜炎和后發(fā)性白內(nèi)障手術(shù)術(shù)后并發(fā)癥有關(guān)，這點已經(jīng)很明確（Malani et al., 2002）。在歐洲和美國腸球菌導(dǎo)致尿道感染（UTIs）排名第二(Huycke et al., 1998; Bouza et al.,2001a,b)。流行病學(xué)研究往往是研究患者的胃腸道定植前與腸球菌感染的關(guān)系(Weinstein et al., 1996)。腸球菌易位穿過真?zhèn)€腸道粘膜屏障被認(rèn)為會導(dǎo)致菌血癥(Wells et

17、 al., 1990; Jett et al., 1994)。其他可以確認(rèn)的腸球菌菌血癥的來源包括靜脈注射管、膿腫和尿道感染(Jett et al., 1994)。腸球菌菌血癥的死亡率的危險因素包括疾病的嚴(yán)重程度，年齡，廣譜抗生素的使用，如第三代頭孢菌素或甲硝唑(Soodet al., 1998)。然而，關(guān)于萬古霉素耐藥性和高濃度慶大霉素耐藥性對于死亡率的影響的相關(guān)數(shù)據(jù)仍存有爭議(Huycke et al., 1991,Edmond et al., 1996; Caballero-Granado et al., 1998; Edmond et al., 1996; Pelz et al., 2

18、002)。腸球菌菌血癥可導(dǎo)致心內(nèi)膜炎，這對于治療腸球菌感染血液來說是最大的挑戰(zhàn)，并且它一直與死亡率的增加有關(guān)。在鏈球菌和金黃色葡萄球菌之后，腸球菌（主要是糞腸球菌）是引起心內(nèi)膜炎的第三大原因，它要對5-20%的心內(nèi)膜炎癥負(fù)責(zé)(Megran, 1992; McDonaldet al., 2005)。雖然對于腸球菌感染的主要危險因素仍有爭論，但對于未能采取衛(wèi)生保護措施，預(yù)先的抗生素治療，長時間的住院以及腸球菌出現(xiàn)在泌尿系統(tǒng)或血管導(dǎo)管中，這是公認(rèn)的導(dǎo)致腸球菌感染的危險因素。雖然各個醫(yī)院病房對于死亡率的研究各不相同，但其平均死亡率大約是20%到30%(Lucas et al.,1998; Caball

19、ero-Granado et al., 2001; Lavigne et al., 2005)。腸球菌感染是一個重要的健康問題，由于醫(yī)院病原體他們必須通過延長住院治療，并要求提供額外的治療，這對于醫(yī)院來說有直接和重大的經(jīng)濟影響(Wenzel and Edmond,2001)。4.2抗生素耐藥性糞腸球菌和屎腸球菌抗生素耐藥性的趨勢得到了廣泛的審查(Huycke et al., 1998; Cetinkaya et al., 2000; Bonten et al., 2001; Franz et al., 2003; Klare et al.,2003)。大部分是研究臨床腸球菌株和人腸球菌株，因為

20、他們有很高的臨床影響。腸球菌的硬度特性賦予它一個特性，使它對于幾類低濃度的抗生素的能夠有異常高的固有的耐藥性，這幾類抗生素包括氨基糖苷類、-內(nèi)酰胺類（第三代頭孢菌素類）和喹諾酮類。特別是屎腸球菌臨床分離株能夠耐受高濃度的青霉素。除了其國有的耐受性/抵抗水平，腸球菌已獲得了遺傳因素使其能抵抗多種類的抗生素，特別是糖肽類抗生素（萬古霉素和替考拉寧），以及對-內(nèi)酰胺類和氨基糖苷類抗生素的協(xié)同作用(Endtz et al., 1999)。特別是，萬古霉素抗藥性腸球菌（VRE）構(gòu)成人體臨床治療感染的一個主要原因(Cetinkaya et al., 2000)，因為這種藥物是作為最后手段來治療對多種抗生素

21、具有抗藥性的腸球菌(Huycke et al., 1998)。萬古霉素的抗藥性有的是先天固有的(vanC)，有的是后天獲得的(vanA, vanB, vanD, vanE, vanG) (Leclercq et al., 1989, 1992;Perichon et al., 1997; Fines et al., 1999)。最常見的轉(zhuǎn)移萬古霉素耐藥表型是vanA，它是一個高層次的誘導(dǎo)抗性和替考拉寧交互抗性相關(guān)的萬古霉素，另一種表型是vanB，它通常只對萬古霉素顯示誘導(dǎo)抗性參差不齊(Cetinkaya et al., 2000)。 在美國醫(yī)院抗萬古霉素腸道球菌（VRE）是廣泛存在的。在美國V

22、RE的血液感染的發(fā)病率從1989年得0.4升至1999年的25.2，隨之而來的是是腸球菌株中的VRE的快速增長（60%屎腸球菌比2%的糞腸球菌）(Wisplinghoff et al., 2004)。人們普遍認(rèn)為，在美國VRE的出現(xiàn)是由于在醫(yī)院使用抗生素的結(jié)果(Menichetti, 2005)。在歐洲各國之間VRE的患病率差異很大，似乎在意大利和英國的最高(Menichetti, 2005)。在歐洲不同的國家，來自于各種動物源的VRE的分離菌株已經(jīng)收回(Klare et al., 1995)。這個儲藏已鏈接到在動物中使用的阿伏霉素(Aarestrup, 1995;Bager et al.,

23、1997; Wegener et al., 1999)，并且在動物和人類之間發(fā)生基因轉(zhuǎn)移（通過食物鏈污染）。這種聯(lián)系進一步支持了在從人類和非人類中分離的VRE菌株中難分辨的vanA基因簇中基因型的存在，且在歐盟取締了阿伏霉素的使用之后VRE的定植率在不斷下降(Quednau et al., 1998; Klare et al., 1999;Kuhn et al., 2005; van den Bogaard and Stobberingh, 1999)。臨床分離腸球菌菌株對于臨床利益的其他抗菌化合物的抵抗也是一個重大的關(guān)切，特別是對抗生素有抗藥性的糞腸球菌比率的增加(Treitman et a

24、l., 2005)。一些研究試圖去比較根據(jù)人類，動物或食物來源不同的腸球菌的耐藥譜(Klare and Witte, 1997; Drahovska et al., 2004)。對抗生素有抗藥性的腸球菌是從食物中分離出來的，只有少數(shù)的對于臨床上的重要抗生素（包括有氨芐青霉素，青霉素，慶大霉素，萬古霉素）有抗藥性。至于其他抗菌化合物，其中乳制品中的抗生素耐藥性菌株稍微的有點研究，往往都是因地區(qū)的不同而又很大的變化，或是不同的分離方法。牛奶中的重要的糞腸球菌對于氯霉素，四環(huán)素，紅霉素的抗藥性分別是64，45和32。耐抗生素腸球菌的頻繁檢出可能與抗性基因的高效傳遞有關(guān)，這種傳遞則依靠結(jié)合質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座子

25、的傳遞達(dá)成。例如，在食物中分離的腸球菌菌株四環(huán)素抗性（Tetr）是最常見的抗生素耐藥性的形式之一。2004年Huys研究表明在食物腸球菌中的四環(huán)素抗性主要是由同一類型四環(huán)素基因賦予的tetM，tetL和tetS，這與以前在獸醫(yī)學(xué)和臨床分離的腸球菌菌株的發(fā)現(xiàn)是一樣的。他們還發(fā)現(xiàn)四環(huán)素抗性菌株所表現(xiàn)出的重要的部分是共同抵抗紅霉素和氯霉素，這表明四環(huán)素抗性基因的選擇可以為進一步的多抗的選擇提供一個合適的分子基礎(chǔ)。這可能是因為四環(huán)素抗性基因與帶有多個抗生素耐藥性的轉(zhuǎn)座子有聯(lián)系的原因。在過去幾年中，一些研究報告說，在不同共軛模型中正在使用抗生素抗性基因轉(zhuǎn)移：i）在實驗室條件，在臨床，共生，食品和益生菌株

26、之間；ii）在食物基質(zhì)；iii）在無菌小鼠中。最近，Mater利用宿主小鼠模型的研究顯示第一次在消化道腸球菌株植入到人的微生物菌群中發(fā)生了vanA基因簇的轉(zhuǎn)移。另一個嚴(yán)重問題是抗病基因轉(zhuǎn)移到更致病物種。Noble已經(jīng)證明了在小鼠皮膚模型中糞腸球菌可轉(zhuǎn)移到金黃色葡萄球菌，并且在體外轉(zhuǎn)移到李斯特菌種也已經(jīng)報道。最近這種轉(zhuǎn)移與抗萬古霉素和抗青霉素的金黃色葡萄球菌的出現(xiàn)有關(guān)系。由于這種病原菌的主要威脅，這種新的抗性類型必須仔細(xì)的檢測。作為一種潛在的抗生素耐藥性基因在腸球菌和其他菌種之間交流，這種普遍存在的抗生素耐藥性提高了奶酪的生態(tài)系統(tǒng)問題。4.3致病因子大約有十幾個致病因素已經(jīng)在各種動物模型中通過毒

27、力分析被報道（表2）。他們附著在宿主細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(AS,Esp, EfaA)，在對抗巨噬細(xì)胞（AS,HypR），在細(xì)胞核組織損傷中(Cyl, GelE,SprE)和在逃避免疫系統(tǒng)時。表2 糞腸球菌毒性相關(guān)基因和其假定的功能基因編碼因子假定的作用粘附素aggefaA（心內(nèi)膜炎抗原A）esp（表面蛋白）ace（膠原結(jié)合蛋白）蛋白酶gelEsprE分泌的因素cylA-Mgls24胞外多糖cpsA-Kepa轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)bcylR1-R2fsrA-CetaRShypRperR聚集物質(zhì)糞腸球菌抗原A腸球菌表面蛋白糞腸球菌膠原蛋白眀膠酶絲氨酸蛋白酶細(xì)胞溶素/血溶素葡萄糖饑餓誘導(dǎo)蛋白莢膜多糖莢膜多糖二肽系

28、統(tǒng)組件地帶樣的監(jiān)管制度OmpR類2組分體系過氧化氫穩(wěn)壓器過氧化調(diào)節(jié)附著和定植抗宿主防御和定植附著和定植粘附到細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）組織損傷組織損傷組織損傷在宿主的持久性抗宿主防御ndacylA-M的管理gelE和sprE的管理nd抗宿主防御nda 未確定的b作為調(diào)節(jié)器，他們可能會有多效性這些致病因素被編碼通過接合質(zhì)?；?AS和Cyl)或染色體區(qū)域重新排列。i）fsr位點 (GelE, SprE和Fsr)，ii）被描述為致病島大的染色體區(qū)域(Esp, Cyl, AS 和Gls24-like,，iii）cps位點。質(zhì)粒編碼的毒力因素被證明是通過基因轉(zhuǎn)移機制而具有的傳染性(Chow et al.,

29、1993; Wirth, 1994)。最近，從糞腸球菌V583的基因組序列和在應(yīng)變MMH594中的致病島中鑒別出一組與糞腸球菌毒力有關(guān)的基因(Shankar et al., 2002; Paulsen et al.,2003)。他們假定的粘附素和侵襲素、胞外酶、蛋白酶和表面細(xì)胞外的蛋白質(zhì)。在這個具有多重抗生素耐藥性的臨床菌株的基因組中很大一部分轉(zhuǎn)座因子可以通過同水平轉(zhuǎn)移的基因組進化來影響它的高容量。數(shù)據(jù)集由多種將會提供新的研究糞腸球菌毒性因子和隔離組間基因組多變性的方法的基因序列和組成，而這一方法將會是全球通用。至于屎腸球菌，只有兩個假定的致病基因已被確定，它們編碼腸球菌表面蛋白（espefm

30、）和一個假定的透明質(zhì)酸酶（hyl）(Willems et al.,2001; Rice et al., 2003)。然而，屎腸球菌基因組( Serror, personal communication)。據(jù)我們所知，還沒有在其他腸球菌種中發(fā)現(xiàn)毒力因子。人們已經(jīng)對由不同資源分離出來的糞腸球菌之間的的毒力因子的分布做了大量的研究，分離資源包括臨床，共生體，食品和環(huán)境。根據(jù)早期的綜述(Gilmore et al., 2002; Tendolkar et al., 2003)，各種研究之間的毒力因子發(fā)生率的多變性，經(jīng)常導(dǎo)致矛盾的結(jié)論。例如腸球菌聚合物質(zhì)，有文獻(xiàn)報道(Huycke and Gilmore

31、, 1995; Archimbaud et al., 2002)其相似地分布于糞便和臨床分離中，但是另有文獻(xiàn)(Coque et al., 1995;Waar et al., 2002)卻認(rèn)為其在臨床分離中更頻繁。雖然糞腸球菌和屎腸球菌假定的致病因素在臨床菌株中發(fā)生率較高，但是它們也被發(fā)現(xiàn)在食品相關(guān)菌株中(Eaton and Gasson, 2001;Franz et al., 2001; Mannu et al., 2003; Semedo et al., 2003; Creti et al., 2004; Lepage et al., 2006)。在乳制品和臨床的堅忍腸球菌和小腸腸球菌分離的Esp,AS和GelE編碼基因的檢測結(jié)果都表明在腸球菌種屬里，我們所已知的糞腸球菌毒力是決定因素且是普遍存在的(Semedo et al., 2003)。到目前為止，上述致病因素都沒有被發(fā)現(xiàn)在臨床菌株中普遍存在，因此盡管這些因素可能并不是糞腸球菌致病性必不可少的，但是它們?nèi)稳豢赡苡绊懠膊〉膰?yán)重程度，同樣建議對致病突變體進行動物模型研究(Dupont et al., 1998; Nakayama et al., 2002; Roberts et al., 2004)。在決定這些因素所扮演的角色所遇到的困難是由于所依賴的動物模型不同而不同的