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1、預(yù)吸氧對大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元損傷的影響 08-10-17 10:01:00 作者:趙宏,祖劍宇,高光潔編輯:studa20【摘要】 觀察不同濃度預(yù)吸氧、缺氧和復(fù)氧對大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元損傷的影響。方法:只成年雄性大鼠隨機分為、 組,每組又分為個亞組。(預(yù)吸氧)亞組分別吸入、和氧;(預(yù)吸氧缺氧)亞組按組方法處理后再吸入氧;(預(yù)吸氧缺氧復(fù)氧)亞組按組方法處理后,再吸入氧。取各組大鼠大腦皮質(zhì),測定乳酸()、丙二醛()、氧自由基()、總抗氧化能力()、總超氧化物歧化酶()、過氧化氫酶()、谷胱甘肽過氧化物酶()和氨基酸的含量或活力。用免疫組化法檢測誘導(dǎo)型一氧化氮合酶()。在光鏡下觀察神經(jīng)元形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果:、
2、亞組神經(jīng)元無明顯改變,、亞組神經(jīng)元輕度腫脹。組神經(jīng)元腫脹明顯,以、亞組較為嚴重。組神經(jīng)元胞核固縮,核仁縮小、消失,其中以亞組最輕,、亞組最重,甚至可見核裂解、消失、只殘余細胞輪廓的鬼影細胞。與亞組相比,亞組、和增加(.),提示這三種損傷因子參與了腦損傷;增加(.),可能是由于損傷因子引起了某些抗氧化因子的反饋性增加;降低(.),可能與其消耗增加有關(guān)。亞組的和、亞組的以及、亞組的高于組中各對應(yīng)亞組(.),提示復(fù)氧性腦損傷可能與這三種因子的增加有關(guān)。結(jié)論:以上濃度預(yù)吸氧可引起大鼠輕微腦損傷,并使隨后發(fā)生的缺氧復(fù)氧性腦損傷加重。濃度預(yù)吸氧不引起大鼠腦損傷,并可使隨后發(fā)生的缺氧復(fù)氧性腦損傷減輕。 【關(guān)
3、鍵詞】 氧吸入療法;腦缺氧;腦損傷;神經(jīng)元;大腦皮質(zhì):,:(),()(),(,),(),(),(),()(),(),()(),()():,:; 急性腦缺氧是圍術(shù)期死亡及中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥的主要原因。預(yù)防缺氧的主要方法之一是吸氧(簡稱預(yù)吸氧)。然而,預(yù)吸氧時腦細胞形態(tài)學(xué)和內(nèi)源性損傷或保護因子發(fā)生何種變化以及這種變化對隨后發(fā)生的缺氧復(fù)氧性腦損傷有何影響少有研究。本研究擬觀察不同濃度預(yù)吸氧、缺氧及復(fù)氧對大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元損傷的影響。 材料和方法. 實驗方法成年雄性大鼠只(中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物部提供),體重,隨機分為預(yù)吸氧()、預(yù)吸氧缺氧()和預(yù)吸氧缺氧復(fù)氧()組(),每組再隨機分為個亞組()。將各組大
4、鼠置于含有新鮮空氣、經(jīng)過標定、內(nèi)放鈉石灰的氧艙中。亞組(對照組)艙口開放,不吸氧;亞組吹入純氧,使艙內(nèi)氧濃度分別維持衡定在、和,計時(預(yù)吸氧實驗);然后向、組大鼠艙內(nèi)通入氮氣,使氧氣濃度降到,計時(缺氧實驗);再將組大鼠移入蓋有雙通氣管橡皮塞的廣口瓶中,吹入純氧,使氧濃度達到以上,計時(復(fù)氧實驗)。氧濃度監(jiān)測采用氣體監(jiān)測儀(芬蘭)。實驗結(jié)束后,腹腔注入水合氯醛,開顱取大腦皮質(zhì)待檢。. 檢測方法()將標本超聲粉碎,制成勻漿,用臺式高速離心機離心,取出上清液,保存待測。用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定乳酸()、丙二醛()和氧自由基()含量、總抗氧化能力()以及總超氧化物歧化酶()、過氧化氫酶()和谷胱甘肽過氧化物酶()活力;用反相高效液相色譜()法測定谷氨酸()和天門冬氨酸()兩種興奮性氨基酸以及苯丙氨酸()、?;撬幔ǎ⒈彼幔ǎ┖桶被∷幔ǎ┑纫种菩园被岷?。()將腦組織修材后常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片(厚約),用免疫組織化學(xué)法檢測誘導(dǎo)型一氧化氮合酶();行染色、封片,在倍光鏡下觀察神經(jīng)元形態(tài)學(xué)改變。神經(jīng)元腫脹和形狀改變?yōu)檩p度損傷;胞核固縮、核
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