無菌生產(chǎn)工藝驗證管理方案

1、無菌生產(chǎn)工藝驗證管理方案內(nèi)容內(nèi)容1.前言前言 - 藥品的風險藥品的風險2.無菌生產(chǎn)工藝驗證原則與申報資料要求無菌生產(chǎn)工藝驗證原則與申報資料要求3.無菌生產(chǎn)工藝驗證的內(nèi)容與方法無菌生產(chǎn)工藝驗證的內(nèi)容與方法4.無菌生產(chǎn)工藝的再驗證無菌生產(chǎn)工藝的再驗證5.小結(jié)小結(jié)注射劑的風險注射劑的風險風險風險1 - 微生物污染微生物污染 風險風險2 - 熱原的污染熱原的污染風險風險3 - 不溶性微粒不溶性微粒風險風險4 - 純度純度 其他風險：其他風險：安全性（組織的刺激性，毒性發(fā)應）安全性（組織的刺激性，毒性發(fā)應）滲透壓滲透壓pH注射劑風險控制手段注射劑風險控制手段微生物污染風險微生物污染風險 注射劑必須是無菌

2、注射劑必須是無菌熱原污染熱原污染 控制限度控制限度不溶性微粒不溶性微粒 控制限度控制限度純度純度 原料工藝原料工藝其他風險控制手段：其他風險控制手段：安全性臨床實驗安全性臨床實驗等滲，等張，等滲，等張，pH調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)無菌藥品的制造工藝類別無菌藥品的制造工藝類別最終滅菌工藝最終滅菌工藝先將藥品的各個部件（產(chǎn)品，容器和密封件）在符合先將藥品的各個部件（產(chǎn)品，容器和密封件）在符合要求的環(huán)境下組成最終的包裝形式，最后讓產(chǎn)品在其要求的環(huán)境下組成最終的包裝形式，最后讓產(chǎn)品在其最終容器中進行滅菌處理（通常使用熱力學滅菌或輻最終容器中進行滅菌處理（通常使用熱力學滅菌或輻射滅菌）。射滅菌）。無菌生產(chǎn)工藝無菌生產(chǎn)工

3、藝藥品的各個部件（產(chǎn)品，容器和密封件）分別經(jīng)過滅菌處理藥品的各個部件（產(chǎn)品，容器和密封件）分別經(jīng)過滅菌處理，再在高潔凈度的環(huán)境中組裝最終產(chǎn)品，但產(chǎn)品裝入其最終，再在高潔凈度的環(huán)境中組裝最終產(chǎn)品，但產(chǎn)品裝入其最終容器后不再進行滅菌處理。容器后不再進行滅菌處理。二、二、無菌生產(chǎn)工藝驗證原則與無菌生產(chǎn)工藝驗證原則與申報資料要求申報資料要求無菌生產(chǎn)工藝驗證原則無菌生產(chǎn)工藝驗證原則以無菌保證為核心，在充分評估工藝各步驟微生物污染以無菌保證為核心，在充分評估工藝各步驟微生物污染風險的基礎(chǔ)上，利用現(xiàn)有的科學技術(shù)，對風險控制手段風險的基礎(chǔ)上，利用現(xiàn)有的科學技術(shù)，對風險控制手段的有效性進行確認。的有效性進行確認

4、。無菌凍干粉針劑生產(chǎn)工藝流程無菌凍干粉針劑生產(chǎn)工藝流程配料配料原料，輔料，配料器具，環(huán)境，人員操作容器，WFI，配液器具，環(huán)境，操作膠塞，過濾器，灌裝部件，清潔工具，滅菌釜，清潔及滅菌過程西林瓶，WFI，洗瓶機，干熱滅菌設備氣體，容器管道過濾器及安裝操作，過濾前溶液含菌量環(huán)境，人員操作，轉(zhuǎn)移凍干機密閉性壓蓋前儲存時間，轉(zhuǎn)移，膠塞密閉性，壓蓋后的密閉性無菌工藝無菌性的保證因素無菌工藝無菌性的保證因素水水原料藥原料藥輔料輔料氣體氣體容器容器/密封件密封件設施設施容器、設備的清洗滅菌容器、設備的清洗滅菌配料、配液、過濾、配料、配液、過濾、灌裝全過程灌裝全過程人員人員環(huán)境及培養(yǎng)基灌裝環(huán)境及培養(yǎng)基灌裝無

5、菌試驗無菌試驗無菌包裝無菌包裝產(chǎn)品產(chǎn)品 生產(chǎn)過程生產(chǎn)過程原材料原材料美國美國FDA要求的新藥申報資料要求的新藥申報資料1.適應癥適應癥2.藥學和毒理學研究藥學和毒理學研究3.化合物研究化合物研究4.生產(chǎn)工藝生產(chǎn)工藝5.標準和控制標準和控制6.微生物學研究微生物學研究7.現(xiàn)場檢查現(xiàn)場檢查8.樣品測試樣品測試9.動物試驗動物試驗10.臨床研究臨床研究11.生物利用生物利用FDAFDA新藥申報資料對新藥申報資料對無菌藥品工藝無菌藥品工藝驗證的要求驗證的要求原則：只有當藥品的檢驗方法、生產(chǎn)設施、工藝流程、包裝等原則：只有當藥品的檢驗方法、生產(chǎn)設施、工藝流程、包裝等能確保藥品的性質(zhì)、含量、質(zhì)量和純度時，

6、新藥申請才會被批能確保藥品的性質(zhì)、含量、質(zhì)量和純度時，新藥申請才會被批準準資料要求：無菌藥品的工藝驗證必須包含在申報資料中資料要求：無菌藥品的工藝驗證必須包含在申報資料中兩級責任制：兩級責任制：CDER負責資料的審核負責資料的審核地方藥監(jiān)負責現(xiàn)場核查地方藥監(jiān)負責現(xiàn)場核查目的目的1：申報資料的真實性：申報資料的真實性目的目的2：GMP符合性檢查符合性檢查 FDAFDA新藥申報資料對新藥申報資料對無菌藥品工藝無菌藥品工藝驗證具體內(nèi)容要求（驗證具體內(nèi)容要求（1）A. 廠房和設施廠房和設施布局圖，包括潔區(qū)劃分布局圖，包括潔區(qū)劃分設備分布圖設備分布圖B. 總體生產(chǎn)流程介紹總體生產(chǎn)流程介紹產(chǎn)品過濾產(chǎn)品過濾

7、溶液儲存時間溶液儲存時間關(guān)鍵操作關(guān)鍵操作C. 容器、密封部件、設備和器具的滅菌去熱原過程容器、密封部件、設備和器具的滅菌去熱原過程分別滅菌溶液的工藝過程分別滅菌溶液的工藝過程完整的批生產(chǎn)記錄完整的批生產(chǎn)記錄FDAFDA新藥申報資料對新藥申報資料對無菌藥品工藝無菌藥品工藝驗證具體內(nèi)容要求（驗證具體內(nèi)容要求（2）C. 培養(yǎng)基灌裝的程序和標準培養(yǎng)基灌裝的程序和標準灌裝房間灌裝房間密封系統(tǒng)類型和尺寸密封系統(tǒng)類型和尺寸每個容器灌裝體積每個容器灌裝體積培養(yǎng)基類型培養(yǎng)基類型灌裝數(shù)量灌裝數(shù)量培養(yǎng)數(shù)量培養(yǎng)數(shù)量陽性數(shù)量陽性數(shù)量培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件灌裝日期灌裝日期挑戰(zhàn)條件敘述挑戰(zhàn)條件敘述環(huán)境監(jiān)測環(huán)境監(jiān)測產(chǎn)品正常工藝和培

8、養(yǎng)基灌裝工藝的工藝參數(shù)產(chǎn)品正常工藝和培養(yǎng)基灌裝工藝的工藝參數(shù)FDAFDA新藥申報資料對新藥申報資料對無菌藥品工藝無菌藥品工藝驗證具體內(nèi)容要求（驗證具體內(nèi)容要求（3）E. 培養(yǎng)基灌裝失敗時的措施培養(yǎng)基灌裝失敗時的措施F. 環(huán)境監(jiān)測環(huán)境監(jiān)測應用的微生物方法應用的微生物方法監(jiān)測酵母菌、霉菌和厭氧菌的方法和頻率監(jiān)測酵母菌、霉菌和厭氧菌的方法和頻率超標時的措施超標時的措施G. 密封系統(tǒng)完整性密封系統(tǒng)完整性H. 無菌檢查方法和放行標準無菌檢查方法和放行標準I. 內(nèi)毒素檢查方法內(nèi)毒素檢查方法J.有關(guān)上述所有內(nèi)容的文件列表有關(guān)上述所有內(nèi)容的文件列表3.1 原輔料的控制原輔料的控制無菌原料藥無菌原料藥其本身的生

9、產(chǎn)工藝應按無菌生產(chǎn)工藝驗證原則進行其本身的生產(chǎn)工藝應按無菌生產(chǎn)工藝驗證原則進行包裝和運輸應是考察重點包裝和運輸應是考察重點非無菌原料或輔料非無菌原料或輔料盡可能降低微生物負荷盡可能降低微生物負荷- 50CFU/g生產(chǎn)的潔凈環(huán)境生產(chǎn)的潔凈環(huán)境設備與其他物料及人員設備與其他物料及人員生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水非無菌原料或輔料關(guān)鍵控制點非無菌原料或輔料關(guān)鍵控制點精烘包階段環(huán)境至少十萬級以上精烘包階段環(huán)境至少十萬級以上人員著裝、人流物流控制，環(huán)境清潔規(guī)程人員著裝、人流物流控制，環(huán)境清潔規(guī)程設備清潔規(guī)程，設定內(nèi)控限度設備清潔規(guī)程，設定內(nèi)控限度預先采取高溫或過濾是降低微生物污染的有效預先采取高溫或過濾是降低微生物污

10、染的有效方法方法生產(chǎn)用水需要達到純化水要求，并控制內(nèi)毒素生產(chǎn)用水需要達到純化水要求，并控制內(nèi)毒素對除菌、滅菌或去內(nèi)毒素步驟需評估對產(chǎn)品理對除菌、滅菌或去內(nèi)毒素步驟需評估對產(chǎn)品理化性能的影響化性能的影響3.2 生產(chǎn)環(huán)境驗證和控制生產(chǎn)環(huán)境驗證和控制范圍包含所有工藝步驟范圍包含所有工藝步驟遵守相關(guān)的遵守相關(guān)的GMP規(guī)范規(guī)范驗證時考察靜態(tài)和動態(tài)時的環(huán)境質(zhì)量驗證時考察靜態(tài)和動態(tài)時的環(huán)境質(zhì)量生產(chǎn)時實行動態(tài)監(jiān)測生產(chǎn)時實行動態(tài)監(jiān)測環(huán)境驗證的范圍環(huán)境驗證的范圍空氣凈化系統(tǒng)的驗證（溫濕度，壓差，空氣流空氣凈化系統(tǒng)的驗證（溫濕度，壓差，空氣流向，風速，高效過濾器泄漏測試）向，風速，高效過濾器泄漏測試）環(huán)境性能測試（

11、靜態(tài)動態(tài)）環(huán)境性能測試（靜態(tài)動態(tài)）懸浮粒子和懸浮粒子和恢復速率測試恢復速率測試 微生物測試：空氣浮游菌，沉降菌，表面微生物微生物測試：空氣浮游菌，沉降菌，表面微生物日常監(jiān)控日常監(jiān)控為什么環(huán)境監(jiān)測是必不可少的？為什么環(huán)境監(jiān)測是必不可少的？ 在無菌工藝中，產(chǎn)品、容器和密封件分別經(jīng)過在無菌工藝中，產(chǎn)品、容器和密封件分別經(jīng)過滅菌后再進行灌封。由于產(chǎn)品裝入最終容器后滅菌后再進行灌封。由于產(chǎn)品裝入最終容器后不再作進一步滅菌處理，容器在極高潔凈環(huán)境不再作進一步滅菌處理，容器在極高潔凈環(huán)境下進行灌封是至關(guān)重要的。下進行灌封是至關(guān)重要的。 FDA無菌生產(chǎn)工藝指南第五頁無菌生產(chǎn)工藝指南第五頁無菌灌裝區(qū)環(huán)境監(jiān)控頻率

12、無菌灌裝區(qū)環(huán)境監(jiān)控頻率潔凈室潔凈室測試項目測試項目監(jiān)測頻率監(jiān)測頻率無菌灌裝間無菌灌裝間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移間滅菌釜卸載間滅菌釜卸載間更衣間更衣間空氣懸浮粒子空氣懸浮粒子空氣浮游菌空氣浮游菌表面微生物表面微生物沉降菌沉降菌操作人員操作人員每批一次每批一次或無生產(chǎn)時每周或無生產(chǎn)時每周一次一次產(chǎn)品轉(zhuǎn)移間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移間清潔間清潔間物流緩沖間物流緩沖間更衣間更衣間 空氣懸浮粒子空氣懸浮粒子空氣浮游菌空氣浮游菌表面微生物表面微生物每周一次每周一次物料準備區(qū)環(huán)境監(jiān)控頻率物料準備區(qū)環(huán)境監(jiān)控頻率潔凈室潔凈室測試項目測試項目監(jiān)測頻率監(jiān)測頻率配液間配液間壓蓋間壓蓋間空氣懸浮粒子空氣懸浮粒子*空氣浮游菌空氣浮游菌表面微生物

13、表面微生物沉降菌沉降菌每周一次每周一次（* 每月一次）每月一次）更衣間更衣間清潔清潔/滅菌間滅菌間空氣懸浮粒子空氣懸浮粒子*空氣浮游菌空氣浮游菌表面微生物表面微生物每周一次每周一次（* 每月一次）每月一次）其他其他C級區(qū)房間級區(qū)房間空氣懸浮粒子空氣懸浮粒子空氣浮游菌空氣浮游菌表面微生物表面微生物每月一次每月一次輔助區(qū)環(huán)境監(jiān)測頻率輔助區(qū)環(huán)境監(jiān)測頻率潔凈室潔凈室測試項目測試項目監(jiān)測頻率監(jiān)測頻率輔助區(qū)所有房間輔助區(qū)所有房間 空氣懸浮粒子空氣懸浮粒子空氣浮游菌空氣浮游菌表面微生物表面微生物每三個月一次每三個月一次微生物檢測方法的特點微生物檢測方法的特點空氣浮游菌空氣浮游菌定量、準確、取樣量大，但易干擾

14、氣流定量、準確、取樣量大，但易干擾氣流沉降菌沉降菌取樣時間長，不干擾氣流，但非定量、檢出率低取樣時間長，不干擾氣流，但非定量、檢出率低接觸碟接觸碟光滑表面，方便，但需特殊的培養(yǎng)碟光滑表面，方便，但需特殊的培養(yǎng)碟棉簽法棉簽法不規(guī)則表面，操作稍復雜不規(guī)則表面，操作稍復雜監(jiān)測的實施監(jiān)測的實施 在生產(chǎn)過程中，無菌灌裝線上沉降碟的放置應在所有操作開在生產(chǎn)過程中，無菌灌裝線上沉降碟的放置應在所有操作開始前完成始前完成空氣浮游菌的測試應根據(jù)生產(chǎn)情況開空氣取樣儀空氣浮游菌的測試應根據(jù)生產(chǎn)情況開空氣取樣儀灌裝線上的表面微生物測試應在灌裝結(jié)束后進行灌裝線上的表面微生物測試應在灌裝結(jié)束后進行監(jiān)測人員根據(jù)生產(chǎn)和人員操

15、作的情況，可隨時要求進行操作監(jiān)測人員根據(jù)生產(chǎn)和人員操作的情況，可隨時要求進行操作人員手套的微生物測試，操作人員在測試前不應噴灑無菌酒人員手套的微生物測試，操作人員在測試前不應噴灑無菌酒精，在測試后應更換手套。對于無菌服的微生物測試一般在精，在測試后應更換手套。對于無菌服的微生物測試一般在操作人員退出操作人員退出B B級區(qū)之前進行。級區(qū)之前進行。 所有的樣品在測試后都應裝入滅菌袋中適當包裹，以避免樣所有的樣品在測試后都應裝入滅菌袋中適當包裹，以避免樣品在轉(zhuǎn)移途中受到污染。品在轉(zhuǎn)移途中受到污染。 人員控制人員控制無菌服、頭套、眼罩、人員操作行為無菌服、頭套、眼罩、人員操作行為無菌灌裝人數(shù)控制無菌灌

16、裝人數(shù)控制人員資格認定人員資格認定體檢，操作培訓，著裝培訓，著裝測試體檢，操作培訓，著裝培訓，著裝測試著裝測試方法著裝測試方法年度資格再確認制度年度資格再確認制度環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的分析環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的分析ISP Room17 Environmental TrendingISP Room17 Environmental Trending2004.04-2005.032004.04-2005.030123456789103-4-044-23-046-12-048-1-049-20-0411-9-0412-29-042-17-054-8-055-28-05CFU/mCFU/m3 3 or CFU/25cm

17、or CFU/25cm2 2 Airborne MicrobeWallFloor細菌鑒定細菌鑒定確定污染源，為制訂整改措施提供幫助確定污染源，為制訂整改措施提供幫助提供放行提供放行/報廢依據(jù)報廢依據(jù)用于培養(yǎng)基灌裝用于培養(yǎng)基灌裝用于消毒劑的效率測試用于消毒劑的效率測試B/A grade Bacteria ID Results01020304050607080Aer.hydrophila gr.1 嗜水氣單胞菌 Bacillus mycoides 蕈狀芽孢桿菌 Bacillus cereus 蠟狀芽孢桿菌 Bacillus firmus，堅硬芽孢桿菌屬 Bacillus pumilus 短小芽孢桿

18、菌 Bacillus sphaericus 球形芽孢桿菌 Burkhol.cepacia 洋蔥假單胞菌 Chryseomonas luteola淺金黃色單胞菌 G+桿菌 非芽孢桿菌 Micrococcus spp. 微球菌屬的某些種 Ochrobac.anthropi 人蒼白桿菌 Past.pneumo./haemol 溶血巴斯德氏菌 Prov.alcal./rustig.產(chǎn)堿/拉氏普羅威斯登菌 3.3 過濾系統(tǒng)的驗證過濾系統(tǒng)的驗證無菌過濾是截留微生物無菌過濾是截留微生物具有一定的風險具有一定的風險制造過程中的不均一性制造過程中的不均一性對過濾介質(zhì)的化學腐蝕對過濾介質(zhì)的化學腐蝕機械缺陷機械缺陷

19、過高的壓力過高的壓力過濾器驗證過濾器驗證項目項目 生物性能生物性能微生物截留微生物截留客戶定制客戶定制 流速流速產(chǎn)量產(chǎn)量 操作溫度操作溫度壓力壓力 系統(tǒng)尺寸大小系統(tǒng)尺寸大小 物理性能物理性能完整性完整性產(chǎn)品水起泡點產(chǎn)品水起泡點擴散流擴散流吸附吸附4000350030002500200015001000W avenum ber cm -1FTI R Ref er ence Spect r um ofPol ycar bonat e 化學性能化學性能兼容性兼容性析出物析出物驗證必須是以產(chǎn)品為介質(zhì)，在最差的條件下進行過濾器的選擇過濾器的選擇工藝特性工藝特性所要求的流量所要求的流量所要求的壓差所要求的

20、壓差可使用的滅菌方法可使用的滅菌方法過濾介質(zhì)的壽命過濾介質(zhì)的壽命過濾器結(jié)構(gòu)過濾器結(jié)構(gòu)筒式，平板式筒式，平板式過濾器的選擇過濾器的選擇化學相容性化學相容性證明過濾介質(zhì)不會把外來物質(zhì)帶進產(chǎn)品證明過濾介質(zhì)不會把外來物質(zhì)帶進產(chǎn)品證明無菌過濾介質(zhì)不受產(chǎn)品的影響，削弱它的強度證明無菌過濾介質(zhì)不受產(chǎn)品的影響，削弱它的強度和完整性和完整性測試包括測試包括：可氧化物質(zhì)可氧化物質(zhì)溶劑系統(tǒng)中的重量變動溶劑系統(tǒng)中的重量變動析出物分析，吸附分析析出物分析，吸附分析完整性試驗完整性試驗流量變化流量變化外觀物理變化外觀物理變化生物截留能力生物截留能力過濾器的完整性試驗過濾器的完整性試驗目的是確定過濾系統(tǒng)不存在使液體不經(jīng)過過

21、濾目的是確定過濾系統(tǒng)不存在使液體不經(jīng)過過濾介質(zhì)到達過濾器下游的通道介質(zhì)到達過濾器下游的通道起泡點試驗起泡點試驗前向流試驗（擴散流）前向流試驗（擴散流）壓力表壓力表濾芯流量計三個需要特別關(guān)注的關(guān)鍵點三個需要特別關(guān)注的關(guān)鍵點起泡點標準的建立與截留率的相關(guān)性起泡點標準的建立與截留率的相關(guān)性過濾器的微生物截留驗證必須在藥液中進行過濾器的微生物截留驗證必須在藥液中進行在實際的生產(chǎn)參數(shù)下進行驗證，如壓力最高值在實際的生產(chǎn)參數(shù)下進行驗證，如壓力最高值過濾系統(tǒng)驗證小結(jié)過濾系統(tǒng)驗證小結(jié)過濾器的選擇應符合工藝和產(chǎn)品的特性過濾器的選擇應符合工藝和產(chǎn)品的特性過濾器的驗證是一個技術(shù)復雜的過程過濾器的驗證是一個技術(shù)復雜的

22、過程國外一般委托過濾器生產(chǎn)廠家進行選擇和驗證國外一般委托過濾器生產(chǎn)廠家進行選擇和驗證3.4 培養(yǎng)基灌裝試驗培養(yǎng)基灌裝試驗采用正常的生產(chǎn)工藝，用培養(yǎng)基代替產(chǎn)品進行灌裝，以考察生產(chǎn)過程、設備采用正常的生產(chǎn)工藝，用培養(yǎng)基代替產(chǎn)品進行灌裝，以考察生產(chǎn)過程、設備和包裝形式、人員操作等整個體系能始終如一地生產(chǎn)出符合要求的無菌產(chǎn)品和包裝形式、人員操作等整個體系能始終如一地生產(chǎn)出符合要求的無菌產(chǎn)品使用范圍使用范圍初次驗證初次驗證 對象：新的無菌生產(chǎn)工藝對象：新的無菌生產(chǎn)工藝連續(xù)連續(xù)3次合格的無菌工藝模擬次合格的無菌工藝模擬 有足夠的時間模擬實際生產(chǎn)時的操作有足夠的時間模擬實際生產(chǎn)時的操作 最差狀況模擬最差狀況

23、模擬年度再驗證年度再驗證對象：現(xiàn)行工藝對象：現(xiàn)行工藝 每年進行兩次再驗證每年進行兩次再驗證 有足夠的時間模擬實際生產(chǎn)時的操作有足夠的時間模擬實際生產(chǎn)時的操作 最差狀況模擬最差狀況模擬培養(yǎng)基灌裝流程培養(yǎng)基灌裝流程確認設施設備和各滅菌工藝驗證的完成確認設施設備和各滅菌工藝驗證的完成確認培養(yǎng)基灌裝的范圍確認培養(yǎng)基灌裝的范圍制訂培養(yǎng)基灌裝方案制訂培養(yǎng)基灌裝方案培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選擇灌裝數(shù)量和灌裝總時間灌裝數(shù)量和灌裝總時間各步驟間的間隔時間各步驟間的間隔時間挑戰(zhàn)試驗的最差條件設計挑戰(zhàn)試驗的最差條件設計人員環(huán)境監(jiān)測計劃人員環(huán)境監(jiān)測計劃培養(yǎng)條件、時間和設備培養(yǎng)條件、時間和設備培養(yǎng)基靈敏度試驗培養(yǎng)基靈敏度試驗總

24、結(jié)和失敗原因調(diào)查總結(jié)和失敗原因調(diào)查使用范圍使用范圍計劃外的驗證計劃外的驗證 ： 如工藝重大改變，設施設備改造等如工藝重大改變，設施設備改造等偏差原因：偏差原因：無菌實驗失敗，根據(jù)偏差調(diào)查結(jié)果的要求無菌實驗失敗，根據(jù)偏差調(diào)查結(jié)果的要求 環(huán)境監(jiān)測結(jié)果明顯反常，根據(jù)偏差調(diào)查結(jié)果環(huán)境監(jiān)測結(jié)果明顯反常，根據(jù)偏差調(diào)查結(jié)果的要求的要求 某個區(qū)域的空調(diào)關(guān)閉時間超過驗證的時間段某個區(qū)域的空調(diào)關(guān)閉時間超過驗證的時間段培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的選擇適應廣譜微生物生長適應廣譜微生物生長較好的澄明度，較小的粘度較好的澄明度，較小的粘度可除菌過濾可除菌過濾常用培養(yǎng)基：常用培養(yǎng)基：3大豆胰蛋白肉湯（大豆胰蛋白肉湯（TSB）粉針劑

25、：粉針劑：聚乙二醇，乳糖和聚乙二醇，乳糖和/或肉湯或肉湯粘稠的乳膏劑：粘稠的乳膏劑：混于肉湯中的瓊脂和羧甲基纖維素混于肉湯中的瓊脂和羧甲基纖維素 培養(yǎng)基促生長能力培養(yǎng)基促生長能力靈敏度試驗靈敏度試驗 取灌裝前、中、后各階段的培養(yǎng)基樣品取灌裝前、中、后各階段的培養(yǎng)基樣品枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠球菌枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠球菌、綠膿桿菌、黑曲霉菌、環(huán)境菌、綠膿桿菌、黑曲霉菌、環(huán)境菌每個菌種接種每個菌種接種2支，計數(shù)支，計數(shù)100cfu/瓶瓶20-25C/30-35 C 培養(yǎng)培養(yǎng)5天內(nèi)生長天內(nèi)生長灌裝數(shù)量灌裝數(shù)量批次量足夠大批次量足夠大灌裝量一般灌裝量一般50001000

26、0瓶瓶批量小的批量小的(低于低于5000瓶瓶)以全批數(shù)量灌裝以全批數(shù)量灌裝環(huán)境監(jiān)測環(huán)境監(jiān)測全面、全過程檢測全面、全過程檢測對無菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境的評估對無菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境的評估對人員資格的確認對人員資格的確認(所有無菌區(qū)工作人員）所有無菌區(qū)工作人員）環(huán)境的清潔：灌裝結(jié)束環(huán)境的清潔：灌裝結(jié)束4小時內(nèi)小時內(nèi)收集和培養(yǎng)收集和培養(yǎng)按灌裝的先后順序軋蓋按灌裝的先后順序軋蓋翻轉(zhuǎn)接觸所有表面翻轉(zhuǎn)接觸所有表面培養(yǎng)：培養(yǎng)：20-25度度7天，天，30-35度度7天天 在中間轉(zhuǎn)換溫度和培養(yǎng)結(jié)束時在中間轉(zhuǎn)換溫度和培養(yǎng)結(jié)束時100燈檢燈檢記錄污染瓶數(shù)記錄污染瓶數(shù)記錄丟棄的數(shù)量和原因，不得隨意丟棄記錄丟棄的數(shù)量和原因，不得隨意丟

27、棄最差條件挑戰(zhàn)最差條件挑戰(zhàn)儲存時間：儲存時間： 灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置的最長時間實際灌裝前能夠放置的最長時間例例1: 用需要再滅菌前的灌裝設備、灌裝部件、用需要再滅菌前的灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝例例2:無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基到實際無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基到實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝最差條件挑戰(zhàn)最差條件挑戰(zhàn)人員人員培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)無菌區(qū)工作人員至少

28、每年參與一次培養(yǎng)基灌裝無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝操作干擾操作干擾正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）境監(jiān)測） 非正常的（設備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸非正常的（設備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的替換破損的部件）部件）干擾的次數(shù)應該不少于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)干擾的次數(shù)應該不少于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)工藝氣體工藝氣體使用氮氣的，因考慮其不利于微生物生長，以壓縮空氣代替使用氮氣的，因考慮其不利于微生物生長，以壓縮空氣代替培養(yǎng)基灌裝失敗后的調(diào)查培養(yǎng)基灌裝失敗后的調(diào)查不管批次量有多大不管批

29、次量有多大,只要培養(yǎng)基灌裝中存在污染只要培養(yǎng)基灌裝中存在污染就意味著無菌保證有問題就意味著無菌保證有問題設計合理、操作適當?shù)臒o菌灌裝污染水平應為設計合理、操作適當?shù)臒o菌灌裝污染水平應為零零灌裝瓶數(shù)灌裝瓶數(shù)結(jié)果判斷結(jié)果判斷10000如有如有1瓶污染，進行調(diào)查瓶污染，進行調(diào)查如有如有2瓶污染，調(diào)查并考慮再驗證瓶污染，調(diào)查并考慮再驗證培養(yǎng)基灌裝失敗后的調(diào)查培養(yǎng)基灌裝失敗后的調(diào)查環(huán)境和人員監(jiān)測數(shù)據(jù)環(huán)境和人員監(jiān)測數(shù)據(jù)滅菌記錄和設備校驗記錄滅菌記錄和設備校驗記錄灌裝區(qū)域清潔消毒記錄灌裝區(qū)域清潔消毒記錄人員培訓記錄人員培訓記錄高效過濾器完整性測試記錄高效過濾器完整性測試記錄壓差記錄壓差記錄溶液除菌過濾器完整性測試記錄溶液除菌過濾器完整性測試記錄污染菌來源污染菌來源丟棄的培養(yǎng)基灌裝瓶丟棄的培養(yǎng)基灌裝瓶灌裝時的干擾活動灌裝時的干擾活動其他偏差和干擾活動其他偏差和干擾活動3.5 容器密封性驗證容