生產(chǎn)運輸存儲質量管理

1、生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心管理手冊文件編號（規(guī)）-1001頁 號第 1頁 共 2 頁版 次第一版 第1次修改標題血液及生物組織質量標準管理規(guī)范批 準 人胡麗娜頒布日期2017年11月10日血液及生物組織質量標準管理規(guī)范一、用于細胞制劑生產(chǎn)的羊膜及臍帶所對應的臍帶血、骨髓及胚胎對應的外周血必須由醫(yī)院出具合格的檢測報告。 血液檢測項目至少包括表一所列檢測項目。表一 血液全檢標準項目外周血臍帶血血型ABO血型需明確需明確RH血型需明確需明確乙肝2對半乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）應為陰性應為陰性乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）需明確需明確乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）應為陰性應為陰性乙

2、型肝炎病毒e抗體（HBeAb）應為陰性應為陰性乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）應為陰性應為陰性丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）應為陰性應為陰性梅毒螺旋體抗體（TP-Ab）(1)應為陰性應為陰性人類免疫缺陷病毒抗體（HIV-Ab）應為陰性應為陰性巨細胞病毒抗體IgM (CMV-IgM)應為陰性EB病毒衣殼抗原IgM抗體（EBV-CA IgM）應為陰性EB病毒早期抗原IgM抗體（EBV-EA IgM）應為陰性二、羊膜組織評估及運輸1）評估：無菌采集的羊膜組織，使用一次性無菌無熱原的塑料管盛放。盛放羊膜組織所用的塑料管必須管蓋旋緊、包裝完整，無破損，無液體泄漏；羊膜組織應為透明或半透明狀態(tài)，略呈白

3、色或粉紅色，應無胎糞污染、顏色變化等異常情況。2）運輸：膜組織采集后選擇合適的保溫箱,放冰袋，冷藏運輸，盡快與質量部進行交接，時間控制在5小時之內。3）初檢不合格的樣品按不合格品的標準管理規(guī)程管理。4.）血液檢測報告、羊膜合格后方可用于生產(chǎn)。質量部負責統(tǒng)計檢驗結果及整理報告，如遇結果不合格按不合格品的標準管理規(guī)程管理，及時通知相關部門。生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心管理手冊文件編號（規(guī)）-1002頁 號第 1頁 共 4 頁版 次第一版 第1次修改標題羊膜上皮細胞采集管理規(guī)范批 準 人胡麗娜頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細胞采集管理規(guī)范為規(guī)范羊膜上皮細胞采集技術的臨床應用，保證醫(yī)療質量

4、和醫(yī)療安全，制定本規(guī)范。本規(guī)范適用于羊膜上皮細胞的采集、培養(yǎng)、存儲、運輸。羊膜上皮細胞的采集（一）醫(yī)療機構基本要求： 采集羊膜上皮細胞的醫(yī)療機構應當保證羊膜上皮細胞來源合法，須為三級甲等醫(yī)院產(chǎn)科（二）采集環(huán)境：1）剖腹產(chǎn)手術室：有固定的羊膜采集工作區(qū)；有配備相應的羊膜上皮采集器械及耗材。2）應急處理區(qū)：有相應的搶救設備，能夠進行急癥處理。3）有資料保存與傳輸設備。（三）人員基本要求：負責羊膜上皮細胞采集工作的醫(yī)師有副主任醫(yī)師以上專業(yè)技術職務任職資格，有醫(yī)院內2名以上符合羊膜采集技術人員要求的護士，并有滿足工作需要的其他相關專業(yè)技術人員。（四）羊膜組織的要求：1）羊膜供體的要求：產(chǎn)婦需為健康剖腹

5、產(chǎn)者，如有傳染病史（乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病等）則不予采集。2）羊膜的質量標準：要求提供與羊膜組織相對應的臍帶血檢驗報告，報告內容及標準包括：ABO血型、Rh血型需明確。乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）應為陰性乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）需明確乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）應為陰性乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）應為陰性乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）應為陰性丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）應為陰性人類免疫缺陷病毒抗體（HIV-Ab）應為陰性梅毒血清抗體檢測（TP-Ab）應為陰性EB病毒抗原IgM抗體應為陰性巨細胞病毒抗體IgM (CMV-IgM)應為陰性（五）技術基本要求1）采集

6、臍血：以肝素抗凝管采集臍血（5ml/支采集2支，或10ml/支采集1支），用于血型及傳染病學檢測。2）采集羊膜戴上無菌手套，整個胎盤放置在無菌的區(qū)域。將整個胎盤的粗糙面朝下附有臍帶的光滑面朝上，使羊膜攤放在胎盤的表面上，剪去臍帶，在胎盤表面切一個十字形切口，但不能損及胎盤組織。從最貼近胎盤組織的底層絨毛層處，由十字形切口中央（胎盤中部）開始剝離羊膜，將羊膜從胎盤上剝離開來。將已剝離的羊膜放入包含羊膜組織存儲液的無菌50ml離心管中，密封保存。采集單位對羊膜組織來源信息進行記錄。3）羊膜的存儲及運輸羊膜儲存實行專人管理，其他人員非經(jīng)許可不得打開專用存儲箱，且箱內不得存放無關的雜物。采集好的羊膜時

7、應及時存儲在2-8的專用箱中。箱內應當安放溫度計，測量溫度范圍需符合要求。羊膜液采集后到進入生產(chǎn)工序前應當保持全程冷鏈（2-8）。羊膜運回制備中心后，交接時應當檢查羊膜運輸箱溫度是否符合要求，儲存羊膜的離心管是否破損、標簽是否完好，并填寫相應記錄。（六）其他管理要求1）羊膜上皮細胞來源合法，建立捐獻者來源登記制度，保證羊膜上皮細胞來源可追溯。不得通過羊膜上皮細胞采集謀取不正當利益，不得泄漏羊膜上皮細胞捐獻者資料。2）采集羊膜上皮細胞前履行告知程序，由捐獻者簽署知情同意書。3）羊膜上皮細胞采集不應當因捐獻羊膜上皮細胞而損害捐贈者相應的正常生理功能。4）采集羊膜上皮細胞前對捐贈者進行必要的檢查，防

8、止患者因羊膜上皮細胞移植感染其它疾病。艾滋病病毒感染者或者艾滋病患者、肝炎病毒攜帶者、梅毒患者等患有經(jīng)血液傳播疾病者和惡性腫瘤、遺傳性血液疾病患者等的羊膜上皮細胞不得用于羊膜上皮細胞移植。5）有完善的質量保障體系。生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心管理手冊文件編號（規(guī)）-1003頁 號第 1頁 共 2 頁版 次第一版 第1次修改標題羊膜上皮細胞存儲管理規(guī)范批 準 人胡麗娜頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細胞存儲管理規(guī)范羊膜上皮細胞的存儲（一）羊膜上皮細胞的存儲要求1）用于保存羊膜上皮細胞標本、羊膜上皮細胞和試劑的冰箱及冷凍箱不能用于其它用途。保存羊膜上皮細胞的設備必須放在安全的地方，存放地

9、點由專人負責。2）液氮庫應設置在通風良好的環(huán)境中，并有保證工作人員的安全防護措施。液氮庫應有防止和處理液氮泄漏措施。3）在拿取羊膜上皮細胞時，必須盡量減少溫度的變化。4） 發(fā)生意外事故導致羊膜上皮細胞轉移和變更存放地點時，必須有書面記載。（二）監(jiān)控和報警系統(tǒng)1）在氣相中保存羊膜上皮細胞的容器必須有溫度連續(xù)監(jiān)控系統(tǒng)，并且至少每24小時記錄一次溫度。2）液氮罐必須有保證液氮水平面的系統(tǒng)。標準操作規(guī)程中必須有明確規(guī)定。3）羊膜上皮細胞保存設備必須有連續(xù)報警系統(tǒng)。4）報警系統(tǒng)應以聲光電方式及時通知到相關管理人員。5）報警參數(shù)的設定必須能使工作人員有足夠的時間處理羊膜上皮細胞。6）必須定期檢查報警系統(tǒng)的

10、功能。檢查記錄必須保存，并應便于檢查。生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心管理手冊文件編號（規(guī)）-1004頁 號第 1頁 共 2 頁版 次第一版 第1次修改標題羊膜上皮細胞培養(yǎng)管理規(guī)范批 準 人胡麗娜頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細胞培養(yǎng)管理規(guī)范羊膜上皮細胞的分離、培養(yǎng)及凍存（一）羊膜細胞的分離1）將羊膜組織以生理鹽水反復清洗，去除殘留血液及粘液。2）將羊膜置于胰酶中，37溫浴后震蕩，使羊膜細胞從組織上脫落。3)去除羊膜組織，收集羊膜細胞，經(jīng)過濾、清洗，將細胞重懸于培養(yǎng)基中。取樣計數(shù)，按照一定細胞密度接種于培養(yǎng)瓶，放入37，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二)羊膜細胞的培養(yǎng)及傳代1）根據(jù)P0代細

11、胞貼壁及增殖狀態(tài)，每2-3天予以換液。2）當細胞增殖貼壁擴增基本完成時，細胞需傳代或凍存。傳代細胞經(jīng)過生理鹽水清洗及胰酶消化、培養(yǎng)基終止消化后，計數(shù)，再按照一定密度接種到新的培養(yǎng)瓶中，放入37，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（三）羊膜細胞的凍存：1）細胞經(jīng)清洗、消化及終止消化后，計數(shù)，離心去上清。2）采用冷凍保護液，按照一定的細胞密度將細胞重懸后轉入凍存管中，經(jīng)程序降溫后轉入液氮長期保存。3）羊膜上皮細胞必須使用符合標準的程控降溫儀或-80冰箱進行冷凍降溫。4）冷凍的羊膜上皮細胞必須在專門的冷凍管中密封存儲，并保存于專門的液氮罐內。以上所有操作均需操作者記錄相應的信息，經(jīng)復核后將記錄歸檔保存。生殖發(fā)

12、育與干細胞治療工程技術中心管理手冊文件編號（規(guī)）-1005頁 號第 1頁 共 3 頁版 次第一版 第1次修改標題羊膜上皮細胞運輸管理規(guī)范批 準 人胡麗娜頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細胞運輸管理規(guī)范羊膜上皮細胞的運輸（一）冷凍羊膜上皮細胞的運輸：1）同一羊膜上皮細胞庫內的運輸：在同一羊膜上皮細胞庫內轉運或使用冷凍的羊膜上皮細胞時，必須有安全轉運規(guī)程以保證羊膜上皮細胞的完整性和運送人的安全。2）羊膜上皮細胞庫與其他機構間的運輸在運輸冷凍羊膜上皮細胞的過程中，必須有安全運輸規(guī)程以保證羊膜上皮細胞的完整性和運送人的安全。必須盡量縮短羊膜上皮細胞在羊膜上皮細胞庫與其他機構間的運輸時間。必須具有

13、備用運輸計劃，以防止羊膜上皮細胞運輸中發(fā)生的緊急或意外情況。保存在-135以下的低溫羊膜上皮細胞的運輸必須使用裝有液氮的容器，容器內必須裝有足量的液氮。保證即使超過預定到達時間48小時，容器內溫度仍能保持在-135以下。運輸方式必須符合與運輸此類物品相關的法規(guī)。運輸容器的標記必須符合與所使用的低溫材料和運輸生物物質有關的法規(guī)。應對運輸信息進行記錄，并歸檔保存。羊膜上皮細胞離開羊膜上皮細胞庫后，該份羊膜上皮細胞的有關資料應在系統(tǒng)中消除。(二)羊膜細胞制劑的運輸：1）制劑運輸時所需設備及儀器運輸箱：采用經(jīng)過驗證證明保溫性良好的運輸箱。無線監(jiān)控器（溫濕度、行蹤）。2）胞制劑運輸要求細胞制劑長途運輸需

14、低溫保存，短途可常溫保存。運輸箱內溫度不得低于2，高于30。每次運輸過程的溫度需保持相對穩(wěn)定。須對細胞制劑運輸過程的溫濕度及運行路線進行全程監(jiān)控。3）無線監(jiān)控器全程由電腦進行監(jiān)控，由專人負責。若溫度出現(xiàn)異常監(jiān)控人員需立即通知運輸人員采取緊急處理措施。4）運輸結束細胞制劑交接前，運輸人員需先確認運輸過程溫度是否在230允許范圍。確認無誤后方可進行細胞交接。5）運輸過程溫度監(jiān)控記錄，由專人定期歸檔保存。 6）若出現(xiàn)溫度偏差，及時處理，并形成溫度偏差記錄，及時上報。7）無線監(jiān)控器應定期校驗。生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心管理手冊文件編號（規(guī)）-1006頁 號第 1頁 共 2 頁版 次第一版 第1次

15、修改標題羊膜上皮細胞制劑使用管理規(guī)范批 準 人胡麗娜頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細胞制劑使用管理規(guī)范羊膜上皮細胞制劑屬于生物組織制品類，為保障使用安全及患者利益，在臨床使用過程中需嚴格遵守本規(guī)范。1、每份羊膜上皮細胞制劑都應附帶血液指標檢測結果（具體見表一），如果未附帶有血液指標檢測結果則視為不合格產(chǎn)品，不能使用。2、患者在使用羊膜上皮細胞制劑前，均需完善相關血液指標檢測，內容同表一。3、羊膜上皮細胞制劑應用于患者前應詳細告知患者可能的風險和獲益。4、羊膜上皮細胞制劑應用于患者前需對雙人核對患者信息、醫(yī)囑等資料，嚴格執(zhí)行三查七對。5、羊膜上皮細胞制劑應用于患者前需對提供的小樣進行血液

16、指標檢測，結果無異常后方可使用。6、羊膜上皮細胞制劑應用完畢后，應再次對殘留羊膜上皮細胞制劑進行血液指標檢測并保存裝羊膜上皮細胞制劑的袋子。表一 血液指標檢測項目項目血型ABO血型RH血型乙肝2對半乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）梅毒螺旋體抗體（TP-Ab）(1)人類免疫缺陷病毒抗體（HIV-Ab）巨細胞病毒抗體IgM (CMV-IgM)EB病毒衣殼抗原IgM抗體（EBV-CA IgM）EB病毒早期抗原IgM抗體（EBV-EA I

17、gM）申請單位申請人患者姓名性別年齡科室及病區(qū)住院號ID號用途輔助治療 臨床研究申請日期組織來源臍帶 骨髓 胚胎 羊膜細胞類型UC-MSCs BMSCs hRPC hRPE hAECs制劑規(guī)格50ml/袋 5ml/支 1ml/支 500l/支細胞數(shù)量_X107，共_袋 _X106，共_支使用途徑靜脈滴注 局部注射 血管介入治療 其他備注治療時間轉換中心聯(lián)系人重醫(yī)附二醫(yī)院生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心細胞制劑申請單聯(lián)系電話醫(yī)附二醫(yī)院生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心品名：iCELLTM人羊膜上皮細胞（hAECs）制劑規(guī) 格：ml/劑姓名：性別：年齡：送達醫(yī)院及科室：訂單編號：批號：出庫時間：送達時間：出庫溫度：送達溫度：醫(yī)院接收人員制劑運送人員：細胞制劑交接單重醫(yī)附二醫(yī)院生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心細胞制劑交接單品名：iCELLTM臍帶間充質干細胞（UC-MSCs）制劑規(guī) 格：ml/劑姓名：性別：年齡：送達醫(yī)院及科室：訂單編號：批號：出庫時間：送達時間：出庫溫度：送達溫度：醫(yī)院接收人員制劑運送人員：重醫(yī)附二醫(yī)院生殖發(fā)育與干細胞治療工程技術中心細胞制劑交接單品名：iCELLTM骨髓間充質干細胞（BMSCs）制劑規(guī) 格：ml/劑姓名：性別：年齡：送達醫(yī)院及科室