乳與乳制品非常規(guī)理化指標(biāo)檢驗(yàn)山梨酸苯甲酸糖精鈉的檢測(cè)

1、乳與乳制品非常規(guī)理化指標(biāo)檢驗(yàn)山梨酸苯甲酸糖精鈉的檢測(cè)YLNB1. 原理樣品沉淀脂肪和蛋白質(zhì)，調(diào)pH至近中性，過濾后進(jìn)高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離后，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積 進(jìn)行定性和定量。2. 試劑方法中所用試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純?cè)噭?，?為蒸餾水或同等純度水，溶液為水溶液。2.1 甲醇：經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。2.2 稀氨水(1 + 1):氨水加水等體積混合。2.3 乙酸銨溶液(0.02mol/L):稱取1.54g乙酸銨，加水至 1000mL,溶解，經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。2.4糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取 0.0851g經(jīng)120 C烘干 4h后的糖精鈉，加水溶解定容至100

2、ml糖精鈉含量 1.0mg/ml，作為儲(chǔ)備溶液。2.5 碳酸氫鈉溶液(20g/L):稱取2g碳酸氫鈉(優(yōu)級(jí)純), 加水至100mL,振搖溶解。2.6 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取0.1000g苯甲酸，加碳酸氫鈉溶液(20g/L)5mL ,加熱溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL,苯甲酸含量為1mg/mL,作為儲(chǔ)備溶液。2.7 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取 O.IOOOg山梨酸，加 碳酸氫鈉溶液（20g/L）5mL ，加熱溶解，移入100mL容量瓶中， 加水定容至100mL，山梨酸含量為1mg/mL，作為儲(chǔ)備溶液。2.8 苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)混合使用溶液：取苯甲酸、山梨酸、糖

3、精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液各1.0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸、糖精鈉各 10ug/mL。經(jīng)濾膜（0.45卩m）過濾2.9草酸鉀一磷酸氫二鈉溶液：取草酸鉀3g,磷酸氫二鈉7g ,溶解于100mL水中。2.10乙酸鉛溶液：c （ PbAQ）為200g/L。取20g乙酸鉛，溶 解與100 ml水中。3. 儀器高效液相色譜儀（帶紫外檢測(cè)器）。4. 方法4.1 樣品處理4.1.1 汽水：稱取5.0010.0g樣品，放入小燒杯中，微溫?cái)嚢璩ザ趸迹冒彼? + 1）調(diào)pH約7。加水定容至1020mL,經(jīng)濾膜（0.45卩m）過濾。4.1.2 果汁類：稱取 5.0010.0g

4、樣品，用氨水（1 + 1）調(diào) pH約7,加水定容至適當(dāng)體積，離心沉淀，上清液經(jīng)濾膜（0.45 卩m）過濾。4.1.3 配制酒類：稱取 10.0g樣品，放入小燒杯中，水浴 加熱除去乙醇，用氨水(1 + 1)調(diào)pH約7,加水定容至適當(dāng)體積，經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。4.1.4 發(fā)酵酸奶：稱取大約15g酸奶，放入小燒杯中，用15ml水洗入50ml容量瓶中，加乙酸鉛和草酸鉀磷酸氫二鈉 各4ml，每次加入試劑時(shí)都要徐徐加入，并搖動(dòng)容量瓶，用 水稀釋至刻度。靜止數(shù)分鐘，用干燥濾紙過濾，濾液用氨水 (1 + 1)調(diào)pH約7,經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾，備用。4.2 高效液相色譜參考條件4.2.1 色譜柱：YWG C18 4.6mm X 250mm不銹鋼柱或同等 性能的柱子。4.2.2 流動(dòng)相：甲醇：乙酸銨溶液(0.02mol/L)(5: 95)(根據(jù)情況可以調(diào)整)。4.2.3 流速:一1mL/min。4.2.4 進(jìn)樣量：20卩L。4.2.5 檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)230nmt根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法定量。5. 結(jié)果計(jì)算式中：X樣品的含量，mg/kg ;C 標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度，ug/ml ;V1樣品稀釋液總體積，m