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文檔簡介
1、乳與乳制品非常規(guī)理化指標(biāo)檢驗(yàn)山梨酸苯甲酸糖精鈉的檢測YLNB1. 原理樣品沉淀脂肪和蛋白質(zhì),調(diào)pH至近中性,過濾后進(jìn)高效液相色譜儀,經(jīng)反相色譜分離后,根據(jù)保留時間和峰面積 進(jìn)行定性和定量。2. 試劑方法中所用試劑,除另有規(guī)定外,均為分析純試劑,水 為蒸餾水或同等純度水,溶液為水溶液。2.1 甲醇:經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。2.2 稀氨水(1 + 1):氨水加水等體積混合。2.3 乙酸銨溶液(0.02mol/L):稱取1.54g乙酸銨,加水至 1000mL,溶解,經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。2.4糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取 0.0851g經(jīng)120 C烘干 4h后的糖精鈉,加水溶解定容至100
2、ml糖精鈉含量 1.0mg/ml,作為儲備溶液。2.5 碳酸氫鈉溶液(20g/L):稱取2g碳酸氫鈉(優(yōu)級純), 加水至100mL,振搖溶解。2.6 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取0.1000g苯甲酸,加碳酸氫鈉溶液(20g/L)5mL ,加熱溶解,移入100mL容量瓶中,加水定容至100mL,苯甲酸含量為1mg/mL,作為儲備溶液。2.7 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取 O.IOOOg山梨酸,加 碳酸氫鈉溶液(20g/L)5mL ,加熱溶解,移入100mL容量瓶中, 加水定容至100mL,山梨酸含量為1mg/mL,作為儲備溶液。2.8 苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)混合使用溶液:取苯甲酸、山梨酸、糖
3、精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液各1.0mL,放入100mL容量瓶中,加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸、糖精鈉各 10ug/mL。經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾2.9草酸鉀一磷酸氫二鈉溶液:取草酸鉀3g,磷酸氫二鈉7g ,溶解于100mL水中。2.10乙酸鉛溶液:c ( PbAQ)為200g/L。取20g乙酸鉛,溶 解與100 ml水中。3. 儀器高效液相色譜儀(帶紫外檢測器)。4. 方法4.1 樣品處理4.1.1 汽水:稱取5.0010.0g樣品,放入小燒杯中,微溫?cái)嚢璩ザ趸?,用氨水? + 1)調(diào)pH約7。加水定容至1020mL,經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。4.1.2 果汁類:稱取 5.0010.0g
4、樣品,用氨水(1 + 1)調(diào) pH約7,加水定容至適當(dāng)體積,離心沉淀,上清液經(jīng)濾膜(0.45 卩m)過濾。4.1.3 配制酒類:稱取 10.0g樣品,放入小燒杯中,水浴 加熱除去乙醇,用氨水(1 + 1)調(diào)pH約7,加水定容至適當(dāng)體積,經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾。4.1.4 發(fā)酵酸奶:稱取大約15g酸奶,放入小燒杯中,用15ml水洗入50ml容量瓶中,加乙酸鉛和草酸鉀磷酸氫二鈉 各4ml,每次加入試劑時都要徐徐加入,并搖動容量瓶,用 水稀釋至刻度。靜止數(shù)分鐘,用干燥濾紙過濾,濾液用氨水 (1 + 1)調(diào)pH約7,經(jīng)濾膜(0.45卩m)過濾,備用。4.2 高效液相色譜參考條件4.2.1 色譜柱:YWG C18 4.6mm X 250mm不銹鋼柱或同等 性能的柱子。4.2.2 流動相:甲醇:乙酸銨溶液(0.02mol/L)(5: 95)(根據(jù)情況可以調(diào)整)。4.2.3 流速:一1mL/min。4.2.4 進(jìn)樣量:20卩L。4.2.5 檢測器:紫外檢測器,波長230nmt根據(jù)保留時間定性,外標(biāo)峰面積法定量。5. 結(jié)果計(jì)算式中:X樣品的含量,mg/kg ;C 標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度,ug/ml ;V1樣品稀釋液總體積,m
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