2020年生物科技行業(yè)CLSI臨床微生物試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)解讀

1、（生物科技行業(yè)）CLSI臨床微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)解讀20XX年XX月多年的企業(yè)咨詢豉問經(jīng)驗(yàn).經(jīng)過實(shí)戰(zhàn)驗(yàn)證可以落地機(jī)行的卓越管理方案，值得您下載擁有CLSI臨床微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)解讀CLSI2010更新CLSI臨床微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)解讀第三輯2010年CLSI藥敏試驗(yàn)的更新中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院楊啟文王輝美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI）是壹個(gè)國(guó)際性、跨學(xué)科、非營(yíng)利的、致力于發(fā)展操作標(biāo)準(zhǔn)的教育組織。其抗菌藥物敏感性試驗(yàn)小組委員會(huì)（SubcommitteeonAntimicrobialSusceptibili

2、tytesting）每年組織該領(lǐng)域?qū)＜液退帍S代表等對(duì)藥敏相關(guān)文件M100進(jìn)行壹次修訂。目前我國(guó)的臨床微生物實(shí)驗(yàn)室均以CLSI文件作為藥敏指導(dǎo)文件進(jìn)行試驗(yàn)操作和報(bào)告，本文將CLSIM100-S20（2010年）的主要更新點(diǎn)總結(jié)如下：壹、主要格式的更新：下表顯示了壹些在M100-S19（2009年）中位于最后的附錄在M100-S20（2010年）文件中新的命名、編號(hào)和位置。表1.M100-S20的格式更新二、表1和表2介紹內(nèi)容中的更新M100-S19中的名稱M100-S20名稱/位置附錄A（ESBLs的篩選和確證試驗(yàn)）補(bǔ)充性表格2A-S1/表2A的最后附錄G（碳富酶烯酶的篩選和確證試驗(yàn)）補(bǔ)充性表格

3、2A-S2/表2A的最后附錄B（金黃色葡萄球菌的篩選試驗(yàn)）補(bǔ)充性表格2C-S3/表2c的最后附錄C（凝固酶陰性葡萄球菌的篩選試驗(yàn)）補(bǔ)充性表格2C-S4/表2c的最后附錄D（腸球菌的篩選試驗(yàn)）補(bǔ)充性表格2D-S5/表2D的最后附錄E（M敏結(jié)果的確證建議）附錄A/M100-S20的最后，術(shù)語表前附錄F（藥敏試驗(yàn)的質(zhì)控菌株）附錄B/M100-S20的最后，術(shù)語表前（1）修訂了“非敏感”的定義：M100-S20中對(duì)“非敏感”的定義是由于耐藥菌株缺失或稀少因而僅確立了敏感性解釋標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)藥物對(duì)菌株的MIC高于或抑菌圈直徑低于此折點(diǎn)時(shí)需報(bào)告為非敏感。非敏感且不意味著菌株攜帶某種耐藥機(jī)制。有可能MIC高于敏感

4、折點(diǎn)的菌株缺乏耐藥機(jī)制且且屬于野生菌株，只不過其出現(xiàn)于敏感性折點(diǎn)確立后。對(duì)于“非敏感”的菌株，菌株鑒定和藥敏結(jié)果需被再次確認(rèn)。（2）對(duì)“使用頭抱曝吩的折點(diǎn)僅用于預(yù)測(cè)對(duì)其他頭胞菌素的敏感性”增加注釋：在M100-S20中，頭抱曝吩的折點(diǎn)僅可用于預(yù)測(cè)菌株對(duì)口服藥物，包括抱羥氨節(jié)，頭抱泊腸，頭抱氨節(jié)和氯碳頭胞的敏感性。舊的數(shù)據(jù)認(rèn)為頭抱曝吩的結(jié)果能夠預(yù)測(cè)某些其他頭抱菌素的敏感性可能仍然正確，但目前的數(shù)據(jù)尚不能支持此論點(diǎn)。在M100-S20的第26頁增加第VII部分來描述篩選試驗(yàn)且總結(jié)他們的局限性以及對(duì)應(yīng)的確證試驗(yàn)。該部分總結(jié)了腸桿菌科菌、金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌和肺炎鏈球菌的耐藥表型

5、初篩試驗(yàn)和對(duì)應(yīng)的確證試驗(yàn)。（4）在表1和1A的警告框內(nèi)，M100-S20將頭霉素類藥物加入腦脊液分離菌株中不能常規(guī)報(bào)告的抗菌藥物列表中。在M100-S19中，口服抗菌藥物、第壹代和第二代頭胞菌素（除外靜脈用頭抱吠辛）、克林霉素、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類和氟唾諾酮類被列為腦脊液分離菌株中不能常規(guī)報(bào)告的抗菌藥物，因?yàn)檫@些藥物不是腦脊髓感染的選擇藥物，在M100-S20中，頭霉素類藥物（如頭抱西丁、頭抱美嘎和頭抱替坦）也被納入此類藥物。三、腸桿菌科菌相關(guān)的更新（1）修訂了頭抱睡咻、頭抱曝腸、頭抱他咤、頭抱睡肢、頭抱曲松和氨曲南的折點(diǎn)，且在折點(diǎn)后增加了對(duì)應(yīng)的用藥方案。I修訂折點(diǎn)的原因在CLSI文件M100

6、-S20的第17頁有壹個(gè)關(guān)于折點(diǎn)如何建立的簡(jiǎn)短注釋。本段話參考的是CLSI關(guān)于折點(diǎn)發(fā)展的指南性文件：M23-體外藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制參數(shù)的發(fā)展。簡(jiǎn)單地說，修改折點(diǎn)涉及微生物學(xué)、藥理學(xué)和臨床數(shù)據(jù)的系統(tǒng)性回顧。公認(rèn)的專家，制藥業(yè)贊助商和監(jiān)管機(jī)構(gòu)參和這壹過程，其中包括CLSI藥敏試驗(yàn)小組委員會(huì)每年倆次的在公開會(huì)議討論。若為新的藥物建立原始折點(diǎn)，對(duì)照的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)是必需的。然而在修改折點(diǎn)時(shí)，雖然對(duì)照臨床試驗(yàn)是可取的，但在處理快速變化的細(xì)菌耐藥機(jī)制和“老”的藥物時(shí)這些試驗(yàn)往往且不可行。因此，小組委員會(huì)必須依賴于由發(fā)表的文獻(xiàn)資料、專家意見和共識(shí)所支持的最佳實(shí)踐。流行病學(xué)、臨床實(shí)踐以及任何折點(diǎn)修訂的監(jiān)管影

7、響必須予以考慮。折點(diǎn)需要修訂是由于不斷變化的耐藥機(jī)制和細(xì)菌菌群分布，不斷進(jìn)步的科學(xué)增進(jìn)了人們對(duì)臨床反應(yīng)藥理學(xué)因素的認(rèn)識(shí)以及“最佳治療”被臨床醫(yī)生所接受。在臨床實(shí)踐中常規(guī)使用的許多藥物折點(diǎn)源于25年前的臨床操作，而這些操作以今天的監(jiān)管和質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)來見是不可接受的。不論在美國(guó)和歐洲，不斷評(píng)估和更新折點(diǎn)已得到了微生物學(xué)家、臨床醫(yī)生和監(jiān)管機(jī)構(gòu)的普遍認(rèn)同。例如，2007年通過的美國(guó)食品和藥物管理法修正案（FDAAA）規(guī)定FDA更新折點(diǎn)，且且美國(guó)FDA已經(jīng)在2009年作出回應(yīng)，為行業(yè)印發(fā)指導(dǎo)文件，以在系統(tǒng)性抗菌藥物產(chǎn)品和藥敏試驗(yàn)設(shè)備中更新藥敏試驗(yàn)信息標(biāo)記。M100-S20修訂后的折點(diǎn)能更好地反映抗菌藥物

8、在以目前推薦方案治療由菌株引起的感染時(shí)的真實(shí)療效。對(duì)產(chǎn)ESBL菌株的研究結(jié)果發(fā)揮了重大作用。最初CLSI推薦進(jìn)行ESBLs篩選及確證測(cè)試，且規(guī)定對(duì)于產(chǎn)ESBL的菌株，將青霉素，頭抱菌素和氨曲南的藥敏結(jié)果由敏感改為耐藥，這條規(guī)定基于以下幾點(diǎn)：1）研究觀察到某些產(chǎn)ESBL菌株，之上藥物的MIC有升高但仍然在敏感區(qū)間（使用舊的折點(diǎn)）；2）有限的臨床觀察發(fā)現(xiàn)，對(duì)于產(chǎn)ESBL菌株引起的感染，病人預(yù)后較差。ESBL試驗(yàn)建議是處理壹個(gè)新型耐藥機(jī)制的短期解決方案。隨后，更多的耐藥機(jī)制被發(fā)現(xiàn)（例如，新型的ESBLs和AmpC酶），且且越來越多的菌株被發(fā)現(xiàn)產(chǎn)多種酶導(dǎo)致ESBL的檢測(cè)更加復(fù)雜。之上事實(shí)以及人們對(duì)頭抱

9、菌素類和單環(huán)B內(nèi)酰胺類的PK-PD因素對(duì)治療效果決定作用的認(rèn)識(shí)導(dǎo)致折點(diǎn)的變更。折點(diǎn)修訂后，ESBLs篩選和確證試驗(yàn)將不再是決定治療策略所必需。當(dāng)菌株產(chǎn)多種酶時(shí)（如當(dāng)菌株同時(shí)產(chǎn)ESBLs和AmpC酶時(shí)將導(dǎo)致假陰性的結(jié)果）ESBL表型檢測(cè)和確證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性將降低，而在當(dāng)前，產(chǎn)多種酶的菌株已非常普遍。菌株的MIC和臨床預(yù)后的相關(guān)性強(qiáng)于菌株攜帶的耐藥機(jī)制。CLSI認(rèn)為，新的折點(diǎn)將為病人治療提供更合理的信息且降低臨床實(shí)驗(yàn)室工作的不確定度和工作量。n新折點(diǎn)和舊折點(diǎn)的比較對(duì)于腸桿菌科菌，頭胞菌素和氨曲南的折點(diǎn)修訂如下（作為比較，也列出舊的折點(diǎn)）:表2.M100-S20MIC折點(diǎn)更新（ug/ml）:抗菌藥物舊

10、(M100-S19)新(M100-S20)敏感中介耐藥敏感中介耐藥頭抱睡咻<816>32<12>4頭抱曝腸<816-32>64<12>4頭抱嘎曲<816-32>64<12>4頭抱曲松<816-32>64<12>4頭抱他呢<816>32<48>16氨曲南<816>32<48>16表3.M100-S20紙片擴(kuò)散法折點(diǎn)更新（mm）:抗菌藥物舊(M100-S19)新(M100-S20)敏感中介耐藥敏感中介耐藥頭抱睡咻>1815-17V14NANANA頭抱

11、曝腸>2315-224>1623-25V22頭抱嘎曲>2015-19<14>2522-24V21頭抱曲松>2114-20V13>2320-22V19頭抱他呢>1815-17V14>2118-20V17氨曲南>2216-21V15>2118-20V17NA=未確定和頭抱睡咻修訂后MIC折點(diǎn)相關(guān)的抑菌圈直徑折點(diǎn)尚未確立。初步的研究且沒有確立明確的抑菌圈直徑折點(diǎn)，且且頭抱嘎咻的紙片擴(kuò)散法試驗(yàn)可能需要使用壹種改變含藥劑量的新型紙片。另外，以下藥物對(duì)腸桿菌科菌的折點(diǎn)也被重新評(píng)估但沒有被修改（這些藥物的紙片擴(kuò)散法折點(diǎn)也沒有被修改）:表4,M

12、100-S20MIC折點(diǎn)（ug/ml）頭抱西丁折點(diǎn)不修改是因?yàn)楫?dāng)前數(shù)據(jù)支持現(xiàn)有的折點(diǎn)。PK-PD評(píng)估表明，推薦的藥物劑量在目標(biāo)范圍內(nèi)。頭抗菌藥物舊(M100-S19)新(M100-S20)敏感中介耐藥敏感中介耐藥頭抱吠辛（腸外）<816>32<816>32頭抱叱腸<816>32<816>32頭抱替坦V1632>64V1632>64頭抱西丁<816>32<816>32抱替坦的折點(diǎn)未改變是因?yàn)闆]有足夠的數(shù)據(jù)支持。頭霉素類不被ESBLs水解且且頭霉素的敏感結(jié)果不會(huì)由于ESBLs的確證試驗(yàn)陽性而改為耐藥。頭抱叱曲折點(diǎn)沒

13、有修改是基于臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)和PK-PD評(píng)估。臨床試驗(yàn)證實(shí)了對(duì)于產(chǎn)ESBL但頭抱叱曲敏感（MIC&8gg/ml）的菌株感染的病人，頭抱叱曲是有療效的。PK-PD評(píng)價(jià)結(jié)果表明，頭抱口的肘日劑量超過3克（即每8小時(shí)1克或每12小時(shí)2克）能夠使頭抱叱腸的藥物濃度達(dá)到評(píng)估折點(diǎn)時(shí)所使用的目的暴露標(biāo)準(zhǔn)。數(shù)據(jù)回顧顯示，沒有必要修訂現(xiàn)行的頭抱吠辛（注射）折點(diǎn)，但需注意現(xiàn)行折點(diǎn)只適用于每8小時(shí)1.5克或更高的給藥劑量。對(duì)于壹般不在美國(guó)使用或銷售的頭抱菌素，如頭抱孟多，頭抱尼西，頭抱哌酮和拉氧頭抱，其折點(diǎn)沒有重新評(píng)估。因此，當(dāng)測(cè)試這些藥物對(duì)大腸桿菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌的抗菌活性時(shí)，需要進(jìn)行ESBLs篩選

14、和確證試驗(yàn)。X于ESBL確證試驗(yàn)陽性的菌株，這些藥物的敏感結(jié)果均需報(bào)告為耐藥。注射用頭抱曝吩不再在美國(guó)使用。由于和腸桿菌科相關(guān)，口服頭抱曝吩主要用于尿路感染的治療。頭抱曝吩的敏感性結(jié)果可代表其他幾種FDA批準(zhǔn)用于治療尿路感染的口服藥物的活性，包括頭抱羥氨節(jié)，頭抱泊腸，頭抱氨節(jié)和氯碳頭抱。故M100-S20將頭抱曝吩由檢測(cè)/報(bào)告A組轉(zhuǎn)至U組。W使用新折點(diǎn)的報(bào)告原則：當(dāng)使用經(jīng)修訂的折點(diǎn)則沒有必要進(jìn)行ESBL初篩和確證試驗(yàn)來報(bào)告結(jié)果以指導(dǎo)病人治療。決定是否為感染控制或流行病學(xué)目的進(jìn)行ESBLs確證試驗(yàn)應(yīng)和傳染病醫(yī)生，藥劑師以及感染控制委員會(huì)的醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行討論決定。新的折點(diǎn)應(yīng)和各單位的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告相關(guān)人

15、員共同討論。傳染病醫(yī)生，藥劑師和其他了解抗菌藥物治療的醫(yī)務(wù)人員應(yīng)教導(dǎo)其他醫(yī)生關(guān)于折點(diǎn)修訂的情況以及如何用新折點(diǎn)指導(dǎo)藥物使用。重要的是，那些使用藥敏結(jié)果指導(dǎo)治療決策的醫(yī)生須知道，新的折點(diǎn)適用于美國(guó)FDA批準(zhǔn)的給藥方案（如M100-S20表2A所列）。這些反映了來自制藥X公司處方信息或產(chǎn)品標(biāo)簽的成人標(biāo)準(zhǔn)治療劑量。各醫(yī)療機(jī)構(gòu)的藥物劑量和藥物調(diào)整政策需重新評(píng)估以保證和CLSI推薦折點(diǎn)相壹致，因?yàn)榕R床醫(yī)生不太可能要求實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)報(bào)告上注明給藥方案。W修訂后折點(diǎn)和ESBL的關(guān)系不是所有的產(chǎn)ESBLs菌株使用新修訂的折點(diǎn)均檢測(cè)為耐藥。修訂后的頭抱菌素和氨曲南折點(diǎn)都關(guān)注于MIC和藥代動(dòng)力學(xué)而不是耐藥機(jī)制。正如

16、前所示，某些ESBL水解某些頭抱菌素的能力強(qiáng)于其他藥物，從而導(dǎo)致某些藥物（如頭抱曝腸）對(duì)產(chǎn)酶菌株的MIC明顯高于其他藥物（如頭抱他咤）。另外，不同菌株的產(chǎn)酶量是有差異的，因此當(dāng)產(chǎn)酶量多時(shí)MIC會(huì)升高。當(dāng)使用經(jīng)修訂的折點(diǎn)則沒有必要進(jìn)行ESBL初篩和確證試驗(yàn)來報(bào)告結(jié)果以指導(dǎo)病人治療。某種耐藥機(jī)制能夠?qū)е虏煌瑥?qiáng)度的耐藥性，如ESBL對(duì)頭抱菌素和氨曲南。這些差異能夠?qū)е虏煌腗IC。例如，壹些產(chǎn)ESBL菌株用修訂后折點(diǎn)對(duì)頭抱他呢敏感但對(duì)頭抱曲松耐藥。同樣，另壹個(gè)產(chǎn)ESBLs菌株可能對(duì)頭抱曲松敏感而對(duì)頭抱他呢耐藥。目前建議，這些頭胞菌素的敏感結(jié)果在報(bào)告時(shí)不改為耐藥，因?yàn)檠芯勘砻?，MIC是產(chǎn)酶菌株感染治療

17、預(yù)后的最佳指標(biāo)。V修訂后折點(diǎn)和AmpC的關(guān)系和產(chǎn)ESBLs菌株壹樣，且非所有產(chǎn)AmpC酶菌株用修訂后折點(diǎn)將測(cè)試為耐藥。這是因?yàn)槌丝死撞鷮俸鸵夹┐竽c桿菌外，大多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌均低水平產(chǎn)染色體AmpCB-內(nèi)酰胺酶，頭抱菌素的MIC較低且處于敏感范圍（使用新折點(diǎn)）。然而，最常見的AmpC酶介導(dǎo)的耐藥是因?yàn)楫a(chǎn)高水平AmpC酶突變株的選擇（“去阻遏突變體”）從而滅活頭抱菌素類繼而導(dǎo)致耐藥。壹個(gè)例外是頭抱叱曲，其不容易被AmpC酶滅活。在所有情況下，建議將檢測(cè)結(jié)果和報(bào)告結(jié)果壹致。如果菌株高產(chǎn)AmpC酶合且孔通道缺失，也可能對(duì)碳青霉烯類、青霉素類和頭胞菌素類均耐藥。目前CLSI不推薦任何檢測(cè)腸桿菌科菌中

18、AmpC酶的試驗(yàn)。壹些AmpC酶的表型檢測(cè)試驗(yàn)已公布但目前這些實(shí)驗(yàn)仍未充分評(píng)估，因此尚未被CLSI推薦。正如ESBLs檢測(cè)試驗(yàn)，CLSI不推薦AmpC酶檢測(cè)試驗(yàn)以進(jìn)行治療決策。決定是否為感染控制或流行病學(xué)目的進(jìn)行AmpC檢測(cè)應(yīng)和傳染病醫(yī)生，藥劑師以及感染控制委員會(huì)的醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行討論決定。由于沒有檢測(cè)產(chǎn)AmpC酶表型的標(biāo)準(zhǔn)化方法，這些方法的局限性，必須傳達(dá)給那些使用這些結(jié)果的人員。VI修訂后折點(diǎn)在商品化藥敏系統(tǒng)中的應(yīng)用若滿足以下條件則可在商品化藥敏系統(tǒng)中使用修訂后折點(diǎn)：1）藥敏系統(tǒng)的最低藥物測(cè)試濃度需能容納修訂的折點(diǎn)濃度；2）有壹套體系可使用修訂的折點(diǎn)來解釋MIC結(jié)果（例如，能夠修改軟件系統(tǒng)中的

19、折點(diǎn)或手工解釋藥敏結(jié)果）和3）需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證。此策略也在CLSI的M100-S20第18頁指出：“通過和傳染病醫(yī)生和藥房部門以及治療和藥劑業(yè)及感染控制委員會(huì)的醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行討論，臨床實(shí)驗(yàn)室可推行修訂的折點(diǎn)”。對(duì)于紙片擴(kuò)散法，壹旦CLSI在M100文件中公布了其新的折點(diǎn)，臨床實(shí)驗(yàn)室即可采用。如果藥敏系統(tǒng)包含的抗菌藥物濃度足以使用CLSI折點(diǎn)解釋藥物敏感性，那么，實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過適當(dāng)?shù)尿?yàn)證后即可使用CLSI折點(diǎn)解釋和報(bào)告藥敏結(jié)果。表5.M100-S20中新增的藥敏質(zhì)控范圍四、葡萄球菌屬相關(guān)的更新（1）澄清對(duì)苯隆西林耐藥金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的結(jié)果報(bào)告原則：在M100-S20中，對(duì)于苯隆西林

20、耐藥金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌（MRS）,6內(nèi)酰胺類藥物，如青霉素類、6內(nèi)酰胺/網(wǎng)酰胺酶抑制劑復(fù)合藥物、頭抱類（除外新型的有抗MRSA活性的頭抱菌素，如ceftaroline和ceftobiprole）和碳青霉烯類體外可能敏感但臨床無效，因此除了有抗MRSA活性的新型頭抱菌素外，其他B內(nèi)酰胺類藥物的結(jié)果均需報(bào)告為耐藥或不報(bào)告。（2）修改將金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌寄送至參考實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的建議：建議將萬古霉素MIC>8ng/m的金黃色葡萄球菌和MIC>32（1g/m的凝固酶陰性葡萄球菌寄送至參考實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)。（3）MRSA菌株的擴(kuò)展定義：MRSA指表達(dá)mecA或其他甲氧西林耐藥機(jī)

21、制（如青霉素結(jié)合蛋白對(duì)苯嘎西林親和力改變，修飾的金葡菌，MOD-SA）的金黃色葡萄球菌。（4）對(duì)于對(duì)青霉素敏感可是可能產(chǎn)6內(nèi)酰胺酶的葡萄球菌，6內(nèi)酰胺酶測(cè)試試驗(yàn)的局限性進(jìn)行了擴(kuò)展討論：對(duì)于青霉素MICV0.12ug/m£抑菌圈直徑。29mm葡萄球菌需進(jìn)行誘導(dǎo)性B內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)。然而，青霉素敏感的金葡菌很少，對(duì)青霉素敏感的菌株仍多產(chǎn)誘導(dǎo)性6內(nèi)酰胺酶。因此對(duì)于嚴(yán)重感染，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)首先進(jìn)行青霉素的MIC檢測(cè)，而后再進(jìn)行誘導(dǎo)性6內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)。（5）澄清了當(dāng)頭抱西丁和苯嘎西林同時(shí)被用于測(cè)試金葡菌或路登葡萄球菌，當(dāng)其中壹個(gè)試驗(yàn)?zāi)退帟r(shí)的報(bào)告建議：當(dāng)頭抱西丁和苯嘎西林同時(shí)被用于測(cè)試金葡菌或路登葡萄球菌時(shí)

22、，只要其中壹個(gè)耐藥，即可報(bào)告“苯嘎西林耐藥”(6)增加利奈嘎胺紙片擴(kuò)散法和MIC法的“耐藥”解釋標(biāo)準(zhǔn)：在M100-S20中，30u利奈嘎胺紙片的紙片擴(kuò)散法耐藥折點(diǎn)為v20mmMIC法的耐藥折點(diǎn)則為。8ug/ml。(7)進(jìn)壹步討論耐酶青霉素類的交叉敏感性：假如檢測(cè)青霉素酶穩(wěn)定的青霉素類藥物，苯嘎西林是優(yōu)先選擇的抗菌藥物，其結(jié)果能夠用于預(yù)測(cè)其他青霉素酶穩(wěn)定的青霉素類藥物，鄰氯西林，雙氯西林，氟氯西林，甲氧西林和奈夫西林。(8)強(qiáng)調(diào)了對(duì)于苯隆西林MIC在0.5-2gg/ml的非表皮葡萄球菌的其他凝固酶陰性葡萄球菌中進(jìn)行附加試驗(yàn)的建議：苯嘎西林折點(diǎn)可能會(huì)高估了壹些凝固酶陰性葡萄球菌的耐藥性，因?yàn)橐夹┓?/p>

23、表皮的凝固酶陰性葡萄球菌在苯嘎西林MIC為0.5-2ug/ml時(shí)且不攜帶mecA基因(苯嘎西林耐藥折點(diǎn)為。0.5g/ml)。因此，對(duì)于WMlC梅0.5-2gg/ml的非表皮葡萄球菌的其他凝固酶陰性葡萄球菌引起的嚴(yán)重感染，推薦檢測(cè)mecA或PBP2a或采用頭抱西丁紙片擴(kuò)散法。五、其他菌種相關(guān)的更新對(duì)于銅綠假單胞菌，M100-S20刪除壹條建議：“在治療銅綠假單胞菌感染時(shí)推薦聯(lián)用另壹種抗菌藥物(如氟唾諾酮類藥物或氨基糖昔類藥物)”。對(duì)于不動(dòng)桿菌屬：將黏菌素和多粘菌素從實(shí)驗(yàn)報(bào)告C組中刪除。對(duì)于腸球菌，修改進(jìn)行6內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)的建議：由產(chǎn)6內(nèi)酰胺酶導(dǎo)致的腸球菌耐青霉素和氨節(jié)西林非常罕見，因此腸球菌的6內(nèi)

24、酰胺酶不必常規(guī)檢測(cè)。對(duì)于6溶血鏈球菌，修改有關(guān)青霉素和其他6內(nèi)酰胺類藥物的交叉敏感性的評(píng)論：對(duì)于A、B、C、G群6溶血鏈球菌，若青霉素敏感，可認(rèn)為菌株對(duì)氨節(jié)西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉維酸、氨節(jié)西林-舒巴坦、頭抱嘎咻、頭抱叱腸、頭抱拉定、頭抱曝吩、頭抱曝腸、頭抱曲松、頭抱嘎腸、亞胺培南、厄他培南和美羅培南敏感。另外對(duì)于A群鏈球菌，青霉素敏感可認(rèn)為對(duì)頭抱克羅、頭抱地尼、頭抱丙烯、頭抱布坦、頭抱吠辛、頭抱泊腸和頭抱匹林敏感。對(duì)于草綠色鏈球菌，刪除以下建議：“若菌株對(duì)青霉素敏感則可認(rèn)為對(duì)其他6內(nèi)酰胺類藥物敏感”。且澄清表2H-2中所涵蓋的菌株：草綠色鏈球菌包括以下5個(gè)菌群，每個(gè)菌群包含幾個(gè)菌屬：可

25、變鏈球菌群、唾液鏈球菌群、牛鏈球菌群、咽峽炎鏈球菌群(以往的米勒鏈球菌群)和mitis鏈球菌群。咽峽炎鏈球菌群包括小菌落A、C、F、G群B溶血鏈球菌。對(duì)于腦膜炎奈瑟氏菌，在頭抱曝腸和頭抱曲松間加“or”。六、關(guān)于藥敏質(zhì)控的更新M100-S20中新增的藥敏質(zhì)控總結(jié)如表5:七、關(guān)于藥敏試驗(yàn)操作的更新(1)在進(jìn)行稀釋法藥敏試驗(yàn)時(shí)，操作人員需要了解制備抗生素母液所需的溶解液和稀釋液，M100-S20文件中增加了對(duì)三種抗菌藥物母液制備所需溶解液和稀釋液的注釋：Besifloxacin的溶解液為甲醇，稀釋液為水；Fidaxomicin的溶解液為二甲基亞碉，稀釋液為水；Razupenem的溶解液和稀釋液均為pH7.2,0.01mol/L磷酸鹽緩沖液。M100-S20在表5B中總結(jié)了復(fù)合藥物藥敏試驗(yàn)的母液配置原則：對(duì)于阿莫西林-克拉維酸，母液中阿莫西林和克拉維酸的濃度比應(yīng)為2:1;對(duì)于氨節(jié)西林-舒巴坦，母液中氨