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1、酸性蛋白酶和堿性蛋白酶的酸性蛋白酶和堿性蛋白酶的來(lái)源和性質(zhì)比較來(lái)源和性質(zhì)比較目錄目錄酸性蛋白酶的來(lái)源與性質(zhì)酸性蛋白酶的來(lái)源與性質(zhì)堿性蛋白酶的來(lái)源與性質(zhì)堿性蛋白酶的來(lái)源與性質(zhì)3蛋白酶的定義、分類(lèi)與來(lái)源蛋白酶的定義、分類(lèi)與來(lái)源12兩類(lèi)蛋白酶的性質(zhì)比較兩類(lèi)蛋白酶的性質(zhì)比較41 1 蛋白酶蛋白酶(1)定義: 蛋白酶是水解蛋白質(zhì)肽鏈的一類(lèi)酶的總稱。(2 2)蛋白酶分類(lèi))蛋白酶分類(lèi)按其水解多肽的方式分為:內(nèi)肽酶和外肽酶按其活性中心和最適pH值分為:絲氨酸蛋白酶、巰基蛋白酶、金屬蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶按其反應(yīng)的最適pH值分為:酸性蛋白酶、中性蛋白酶和堿性蛋白酶(3 3)蛋白酶的來(lái)源)蛋白酶的來(lái)源 蛋白酶廣泛
2、存在于動(dòng)物內(nèi)臟、植物莖葉、果實(shí)和微生物中。 微生物蛋白酶,主要由霉菌、細(xì)菌,其次由酵母、放線菌生產(chǎn)。2 2 酸性蛋白酶酸性蛋白酶(1)定義:是一類(lèi)適合在酸性條件(pH15)下水解蛋白質(zhì)的酶類(lèi)。 酸性蛋白酶是指蛋白酶具有較低的最適pH,而不是指酸性基團(tuán)存在于酶的活性部位,酸性蛋白酶的最適PH從1到5。從酶的活力-PH曲線分析,在酶的活性部位中含有一個(gè)或更多的羧基。這一類(lèi)蛋白酶中研究最徹底的是胃蛋白酶。酸性蛋白酶來(lái)源酸性蛋白酶來(lái)源 酸性蛋白酶主要來(lái)源于動(dòng)物的臟器 ( 胃蛋白酶等) 和微生物分泌物。 產(chǎn)酸性蛋白酶的微生物菌種有很多,如米曲霉、 黑曲霉、 芽孢桿菌、根酶、青霉、微小毛霉等酸性蛋白酶性質(zhì)
3、酸性蛋白酶性質(zhì) 酸性蛋白酶是一類(lèi)具有復(fù)雜理化性質(zhì)的化合物,不同微生物菌種分泌的酸性蛋白酶雖具有一些共同的性質(zhì),但在底物特異性、抑制劑、激活劑等方面均存在一定的差異,在最適pH、最適溫度、pH耐受性以及耐溫上各不相同。不同金屬離子及其濃度對(duì)酸性蛋白酶的影響也不同。(1)酸性蛋白酶的pH適應(yīng)性 酸性蛋白酶的最適 pH 為 2.5 5.0, 但不同微生物的酶稍有差異(2)酸性蛋白酶的溫度適應(yīng)性 酸性蛋白酶的適宜溫度 為 30 50 , 最適作用溫度為40 左右。 在溫度較低時(shí),酶活性隨溫度的上升而增大,在溫度達(dá)到酶的最適溫度后,酶活力隨溫度升高而急劇下降,失活很快。一般50 以下可保持穩(wěn)定,但隨產(chǎn)酶
4、微生物菌種不同而有所差異。酸性蛋白酶性質(zhì)酸性蛋白酶性質(zhì)酸性蛋白酶性質(zhì)酸性蛋白酶性質(zhì)(3)酸性蛋白酶的抑制劑 酸性蛋白酶活性中心含有2個(gè)天冬氨酸殘基,因此大多數(shù)抑制劑可通過(guò)酯化作用而迅速使之鈍化,使酸性蛋白酶失活。 酸性蛋白酶一般對(duì)重氮化合物、十二烷基硫酸鈉(SDS)以及1,2-環(huán)-3-對(duì)硝基苯氧基丙烷(EPNP)敏感,而對(duì)異丙氟磷酸(DFP)、對(duì)氯汞苯甲酸(CMB)及乙二胺四乙酸(EDTA)不敏感。(4)金屬離子對(duì)酸性蛋白酶的影響 Ag+對(duì)酸性蛋白酶有輕度抑制作用,而Cu2+、Mn2+對(duì)其有激活作用3 3 堿性蛋白酶堿性蛋白酶(1)定義:是一類(lèi)最適pH在9-11范圍內(nèi)的蛋白酶,因他們的活性中心
5、大多含有絲氨酸,所以又稱絲氨酸蛋白酶。 堿性蛋白酶廣泛應(yīng)用于洗滌劑、食品、醫(yī)療、釀造、絲綢、制革等行業(yè)。(2 2)堿性蛋白酶的來(lái)源)堿性蛋白酶的來(lái)源堿性蛋白酶主要存在于細(xì)菌、放線菌和真菌中。微生物(菌種)地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、嗜堿性芽孢桿菌、灰色鏈霉菌、費(fèi)氏鏈霉菌等堿性蛋白酶性質(zhì)堿性蛋白酶性質(zhì)大多數(shù)微生物堿性蛋白酶作用于肽鏈的中間,生成二個(gè)肽。除酶本身的氨基酸殘基外,不具有特定的活性基團(tuán),酶發(fā)揮作用是不需要特定的激活劑,而需要金屬離子激活,如除去金屬離子就不能作用,必須的金屬離子有Mn2+、Mg2+、Zn2+、Co2+、Fe2+等 。酶的活性中心有絲氨酸,故又稱絲氨酸蛋白酶。因此,這類(lèi)蛋
6、白酶遇到作用于絲氨酸的試劑二異丙基氟磷酸(DFP)便失活,這是堿性蛋白酶的一個(gè)重要特征。但是堿性蛋白酶對(duì)金屬螯合劑EDTA、重金屬和巰基試劑卻不敏感。鈣離子對(duì)此酶有一定的穩(wěn)定作用。堿性蛋白酶有較大的耐熱性,55下放置30min能保留大部分活力。堿性蛋白酶作用位點(diǎn)要求在水解點(diǎn)羧基側(cè)具有芳香族或疏水性氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸等),它比中性蛋白酶有更大的水解能力。此外,堿性蛋白酶還具有酯酶的活力。酸性蛋白酶和堿性蛋白酶的性質(zhì)比較酸性蛋白酶和堿性蛋白酶的性質(zhì)比較酸性蛋白酶酸性蛋白酶堿性蛋白酶堿性蛋白酶活性中心天冬氨酸殘基絲氨酸殘基最適pH2.5-5.09-11(大多數(shù))最適溫度30-50分布范圍較廣對(duì)二異丙基氟磷酸(DFP)不敏感失活(
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