臨床檢驗(yàn)技師微生物檢驗(yàn)講義分枝桿菌屬及檢驗(yàn)

1、第十九章分枝桿菌屬及檢驗(yàn)本章內(nèi)容一、結(jié)核分枝桿菌二、非典型（非結(jié)核）分枝桿菌三、麻風(fēng)分枝桿菌關(guān)聯(lián)記憶圖像記憶對(duì)比記憶分枝桿菌屬·細(xì)長(zhǎng)或略帶彎曲、呈分枝狀生長(zhǎng)的需氧桿菌。·主要特點(diǎn)是細(xì)胞壁含有大量脂類，與其染色性、抵抗力、致病性等密切相關(guān)。·耐酸和抗酒精，一般不易著色；能抵抗3%鹽酸酒精的脫色作用，故又稱抗酸桿菌。·通常無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞和莢膜。·引起的疾病均為慢性，有肉芽腫病變的炎癥特點(diǎn)。·無(wú)內(nèi)外毒素，其致病性與菌體某些成分如索狀因子、蠟質(zhì)D及分枝菌酸有關(guān)。結(jié)核分枝桿菌生物學(xué)特性·形態(tài)與結(jié)構(gòu)形態(tài)：細(xì)長(zhǎng)或略帶彎曲；培養(yǎng)基中可呈球狀

2、或絲狀；陳舊培養(yǎng)物或干酪化的淋巴結(jié)中可見(jiàn)到分枝狀排列。顯微鏡下常堆積成團(tuán)、成束，排列無(wú)序，也有呈鏈狀、索狀。染色：G+?？顾崛旧t色。金胺“O”染色菌體可發(fā)熒光。特殊結(jié)構(gòu)：無(wú)鞭毛和芽胞，近年發(fā)現(xiàn)有莢膜。·培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求：較高。氣體環(huán)境：專性需氧。溫度環(huán)境：3540，最適3537；pH6.56.8。特殊：還需適當(dāng)?shù)臐穸取＜嫘园麅?nèi)寄生菌。少量鐵質(zhì)可使細(xì)菌產(chǎn)生分枝桿菌生長(zhǎng)素，促進(jìn)生長(zhǎng)。菌落特點(diǎn)：生長(zhǎng)緩慢，最快的分裂速度為18h一代。固體培養(yǎng)基（羅氏培養(yǎng)基）：需26周才能長(zhǎng)出菌落。菌落呈干燥顆粒狀，不透明，乳白色或米黃色，表面呈皺紋狀，形似菜花。液體培養(yǎng)基：生長(zhǎng)較快，形成菌膜。有毒力菌株在

3、液體培養(yǎng)基中可呈索狀生長(zhǎng)。選擇培養(yǎng)基：常用選擇劑有結(jié)晶紫、孔雀綠、青霉素、萘啶酸、林可霉素、多黏菌素B等。結(jié)核分枝桿菌微生物檢驗(yàn)及鑒定·標(biāo)本采集：應(yīng)停藥12d后再采集標(biāo)本。采取能抑制污染菌的方法。若作分離培養(yǎng)，必須使用滅菌容器。·形態(tài)學(xué)檢查：1）直接涂片：萋-尼（熱染法）或Kinyoun（冷染法）抗酸染色，找抗酸菌。2）集菌涂片：主要方法有沉淀集菌法和漂浮集菌法。3）熒光顯微鏡檢查法：金胺“O”染色，在熒光顯微鏡下分枝桿菌可發(fā)出熒光。·分離培養(yǎng)：人工、半自動(dòng)、自動(dòng)；噬菌體法。生化試驗(yàn)（鑒定）糖類發(fā)酵試驗(yàn)觸酶試驗(yàn)?zāi)蜔嵊|酶試驗(yàn)聚山梨酯-80水解試驗(yàn)?zāi)蜔崃姿崦冈囼?yàn)?zāi)蛩厮?/p>

4、解試驗(yàn)中性試驗(yàn)煙酸試驗(yàn)硝酸鹽還原試驗(yàn)煙酰胺酶試驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌-+-+人型結(jié)核分枝桿菌+·基因快速診斷：PCR反向膜探針雜交，DNA探針，16srRNA基因序列測(cè)定，高效液相色譜。·耐藥性：利福平耐藥、鏈霉素、異煙肼。結(jié)核分枝桿菌致病性及臨床意義·致病物質(zhì)：莢膜、索狀因子、蠟質(zhì)D及分枝菌酸。不產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素。·所致疾?。阂鸲喾N組織器官的結(jié)核病，其中以通過(guò)呼吸道引起的肺結(jié)核最多見(jiàn)。肺外感染可發(fā)生在腦、腎、腸及腹膜等處。Koch現(xiàn)象：結(jié)核的特異性免疫是通過(guò)結(jié)核分枝桿菌感染后所產(chǎn)生，稱為Koch現(xiàn)象。麻風(fēng)分枝桿菌生物學(xué)特性·形態(tài)與結(jié)構(gòu)形態(tài)：較結(jié)核

5、桿菌短而粗，用藥后斷裂為顆粒狀、鏈狀。排列：束狀或團(tuán)狀排列。染色：G+?？顾崛旧鶆?。用藥后著色不均勻，稱為不完整染色菌。特殊結(jié)構(gòu)：無(wú)動(dòng)力、無(wú)莢膜和芽胞。·培養(yǎng)特性尚未人工培養(yǎng)成功，已用犰狳建立良好的動(dòng)物模型。特殊：典型的胞內(nèi)寄生菌，該菌所在細(xì)胞胞質(zhì)呈泡沫狀，稱麻風(fēng)細(xì)胞。麻風(fēng)分枝桿菌致病性及臨床意義·所致疾?。郝轱L(fēng)病：一種慢性傳染病，早期主要損害皮膚、黏膜和神經(jīng)末梢，晚期可侵犯深部組織和器官。人類是麻風(fēng)分枝桿菌的唯一宿主，也是唯一傳染源。麻風(fēng)病根據(jù)機(jī)體的免疫、病理變化和臨床表現(xiàn)可將多數(shù)患者分為瘤型、結(jié)核樣型和界限類綜合征。非典型（非結(jié)核）分枝桿菌·除結(jié)核桿菌和

6、麻風(fēng)桿菌以外的分枝桿菌均稱為非結(jié)核分枝桿菌或非典型分枝桿菌。·染色性同樣具有抗酸性亦稱非結(jié)核抗酸菌。·有1417個(gè)非典型菌種能使人致病，以第群鳥-胞內(nèi)分枝桿菌和第群偶發(fā)分枝桿菌及龜分枝桿菌為多。近年發(fā)病增多。·可侵犯全身臟器和組織，以肺最常見(jiàn)，其臨床癥狀、X線所見(jiàn)很難與肺結(jié)核病區(qū)別，而大多數(shù)非典型菌對(duì)主要抗結(jié)核藥耐藥。經(jīng)典例題分枝桿菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中含量最多的固體成分是A.糖類B.脂類C.蛋白質(zhì)D.水E.固醇類  正確答案B答案解析分枝桿菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中含量最多的固體成分是脂類。不屬于分枝桿菌屬特點(diǎn)的是A.有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)B.胞壁有大量脂質(zhì)C.一般不易

7、著色D.革蘭染色呈陰性E.能抵抗酸性酒精脫色  正確答案D答案解析分枝桿菌屬一般不易著色，革蘭染色陽(yáng)性。分枝桿菌屬細(xì)菌的特征不包括A.形態(tài)細(xì)長(zhǎng)或略帶彎曲，呈分枝狀生長(zhǎng)的需氧桿菌B.細(xì)胞壁含有很大量脂質(zhì)C.具有抗酸性D.通常無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞、無(wú)莢膜E.引起急性疾病  正確答案E答案解析分枝桿菌屬細(xì)菌多引起慢性疾病。結(jié)核分枝桿菌在適宜條件下分裂一次所需時(shí)間A.20分鐘B.2小時(shí)C.5小時(shí)D.10小時(shí)E.18小時(shí)  正確答案E答案解析結(jié)核分枝桿菌在適宜條件下分裂一次需18小時(shí)。專性需氧的革蘭陽(yáng)性菌是A.霍亂弧菌B.結(jié)核分枝桿菌C.布魯菌D.白

8、喉棒狀桿菌E.鏈球菌  正確答案B答案解析結(jié)核分枝桿菌為專性需氧的革蘭陽(yáng)性菌。下列哪種細(xì)菌需要26周培養(yǎng)才能長(zhǎng)出可見(jiàn)菌落A.結(jié)核分枝桿菌B.葡萄球菌C.白喉棒狀桿菌D.大腸埃希菌E.破傷風(fēng)梭菌  正確答案A答案解析結(jié)核分枝桿菌需要26周培養(yǎng)才能長(zhǎng)出可見(jiàn)菌落。關(guān)于結(jié)核分枝桿菌，敘述錯(cuò)誤的是A.少量鐵質(zhì)可促進(jìn)結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)，鐵質(zhì)可使其產(chǎn)生結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)素B.在結(jié)核分枝桿菌選擇培養(yǎng)基中，一般要加入抗菌藥物，抑制雜菌生長(zhǎng)C.結(jié)核分枝桿菌為桿菌D.觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性E.耐熱觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性  正確答案E答案解析結(jié)核分枝桿菌耐熱觸酶試驗(yàn)陰性。屬胞內(nèi)寄生

9、菌的是A.大腸埃希菌B.痢疾志賀菌C.麻風(fēng)分枝桿菌D.破傷風(fēng)梭菌E.霍亂弧菌  正確答案C答案解析麻風(fēng)分枝桿菌屬胞內(nèi)寄生菌。關(guān)于麻風(fēng)分枝桿菌，敘述錯(cuò)誤的是A.具有抗酸性B.其菌體較結(jié)核分枝桿菌短而粗C.為胞內(nèi)寄生菌D.體外培養(yǎng)不易生長(zhǎng)E.無(wú)氧較有氧條件下生長(zhǎng)好  正確答案E答案解析麻風(fēng)分枝桿菌為胞內(nèi)寄生菌，在有氧條件下生長(zhǎng)好。關(guān)于非典型分枝桿菌，敘述錯(cuò)誤的是A.具有抗酸性，故也可被稱為非結(jié)核抗酸菌B.可侵犯全身臟器和組織，以肺最多見(jiàn)C.感染后出現(xiàn)的臨床表現(xiàn)與肺結(jié)核病完全不同D.X線檢查結(jié)果與肺結(jié)核病相似E.近年在我國(guó)的發(fā)病率增高  正

10、確答案C答案解析非典型分枝桿菌感染后出現(xiàn)的臨床表現(xiàn)與肺結(jié)核病相似。A.肺B.腦C.腎D.腹膜E.皮膚1.結(jié)核分枝桿菌引起感染的部位最多見(jiàn)于  正確答案A答案解析結(jié)核分枝桿菌引起感染的部位最多見(jiàn)于肺。2.麻風(fēng)分枝桿菌早期主要損害的部位為  正確答案E答案解析麻風(fēng)分枝桿菌早期主要損害的部位為皮膚?；颊吣?，18歲?？人浴⒖忍?個(gè)月，痰中帶血，低熱，胸片有可疑陰影，患者消瘦并感疲乏無(wú)力。1.痰標(biāo)本中重點(diǎn)檢查的微生物是A.百日咳鮑特菌B.白喉棒狀桿菌C.結(jié)核分枝桿菌D.霍亂弧菌E.放線菌  正確答案C答案解析此患者疑為結(jié)核分枝桿菌感染的肺結(jié)核。2.痰標(biāo)本集菌涂片后，應(yīng)選用的染色方法是A.熒光染色法B.墨汁染