人教版本生物選修三專題1（基因工程）單元測試

1、(時間：90分鐘，滿分：100分)一、選擇題(本題包括25小題，每小題2分，共50分)1.基因工程是在分子水平上進(jìn)行的操作，該過程中科學(xué)家所用的“手術(shù)刀”、“縫合針”和常采用的“運(yùn)輸車”分別是()A限制酶、DNA連接酶、質(zhì)粒B限制酶、DNA聚合酶、噬菌體CDNA連接酶、限制酶、動植物病毒DDNA連接酶、限制酶、質(zhì)粒解析：選A。本題考查DNA重組技術(shù)的基本工具，基因工程中，“手術(shù)刀”是限制酶，“縫合針”是DNA連接酶，常用的載體是質(zhì)粒。2.將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是()A每個大腸桿菌細(xì)胞至少含一個重組質(zhì)粒B每個重組質(zhì)粒至少

2、含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)C每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)至少插入一個adaD每個插入的ada至少表達(dá)一個腺苷酸脫氨酶分子解析：選C。將ada通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)，則每個大腸桿菌細(xì)胞中至少含有一個重組質(zhì)粒，且每個質(zhì)粒(重組質(zhì)粒)至少含有一個限制酶識別位點(diǎn)，但每個限制酶識別位點(diǎn)只能插入一個ada，插入的ada成功表達(dá)，說明每個插入的ada至少表達(dá)一個腺苷酸脫氨酶分子。故C錯誤。3.下圖表示一項(xiàng)重要的生物技術(shù)，對圖中物質(zhì)a、b、c、d的描述，正確的是()A通常情況下，a與d需要用同一種限制酶進(jìn)行切割Bb能識別特定的核苷酸序列，并將A與T之間的氫鍵切開Cc連接雙鏈間的A和T，

3、使黏性末端處堿基互補(bǔ)配對Db代表的是限制性核酸內(nèi)切酶，c代表的是RNA聚合酶解析：選A。b是限制性核酸內(nèi)切酶，能識別特定的核苷酸序列并使DNA分子的每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，而不是使氫鍵斷開；c是DNA連接酶，能連接兩個DNA片段。4.現(xiàn)有一長度為1000個堿基對的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR酶切后得到的DNA分子仍是1000個堿基對，用Kpm單獨(dú)酶切得到400堿基對和600堿基對兩種長度的DNA分子，用EcoR、Kpn同時酶切后得到200堿基對和600堿基對兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是()解析：選D。從圖譜中可發(fā)現(xiàn)有鏈狀DNA、環(huán)狀

4、DNA，用EcoR酶切割后DNA的長度不變，此DNA應(yīng)該為環(huán)狀，用EcoR酶和Kpn酶切割后得到200堿基對和600堿基對兩種長度的DNA分子，因此DNA上應(yīng)該存在兩個Kpn酶的切割位點(diǎn)。5.在已知某小片段基因堿基序列的情況下，獲得該基因的最佳方法是()A用mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNAB以4種脫氧核苷酸為原料人工合成C將供體DNA片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，再進(jìn)一步篩選D先建立基因文庫，再從中篩選解析：選B。對于比較小，核苷酸序列已知的目的基因，其最佳方法是直接通過DNA合成儀用化學(xué)方法人工合成。6.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述30多次循環(huán)：95

5、下使模板DNA變性、解鏈55 下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)72 下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是()A變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵，也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)B復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成C延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸DPCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需酶的最適溫度較高解析：選C。本題考查PCR擴(kuò)增過程。解題的關(guān)鍵是要全面理解PCR擴(kuò)增過程。DNA分子被破壞是指DNA分子被解旋成兩條長鏈，破壞的部位是連接兩條長鏈之間的氫鍵，方法有多種，用解旋酶、高溫等都可使DNA解旋。B項(xiàng)中引物有兩種，

6、分別與模板DNA鏈3端的互補(bǔ)序列互補(bǔ)配對。C項(xiàng)中的原料不正確，合成DNA的原料是四種脫氧核苷酸。PCR技術(shù)中DNA合成過程中的溫度在7075 。7.在基因工程的操作過程中，獲得重組質(zhì)粒不需要()DNA連接酶同一種限制酶RNA聚合酶具有標(biāo)記基因的質(zhì)粒目的基因4種脫氧核苷酸ABC D解析：選A。在基因工程的操作過程中，需要用同一種限制酶切割目的基因與載體，并用DNA連接酶將兩者的黏性末端(或平末端)連接起來，所選擇的質(zhì)粒必須具有標(biāo)記基因，以便進(jìn)行目的基因的檢測。8.在基因表達(dá)載體的構(gòu)建中，下列說法不正確的是()一個基因表達(dá)載體的組成只包括目的基因、啟動子、終止子有了啟動子才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

7、終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止所有基因表達(dá)載體的構(gòu)建是完全相同的A BC D解析：選B?；虮磉_(dá)載體應(yīng)包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；不同基因表達(dá)載體構(gòu)建時所用的限制酶是不同的，但操作過程基本相同。9.下列關(guān)于基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)敘述，不正確的是()A需要限制酶和DNA連接酶B必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行C抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因D啟動子位于目的基因的首端解析：選B?；虮磉_(dá)載體構(gòu)建是目的基因與載體結(jié)合，在此過程中需用同一種限制酶切割目的基因與載體，用DNA連接酶將相同的末端連接起來；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是在細(xì)胞外進(jìn)行的；基因表達(dá)載體包括啟動子(位于基因首端使轉(zhuǎn)錄開始)、終止子、目的

8、基因和標(biāo)記基因(鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，如抗生素抗性基因)。.下圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌D細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生“工程菌”的示意圖。所用的基因載體為質(zhì)粒A。若已知細(xì)菌D細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)人細(xì)菌后能正常表達(dá)。能表明目的基因已與載體結(jié)合，并被導(dǎo)入受體細(xì)胞的結(jié)果是()A在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上均能生長繁殖的細(xì)菌B在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上都不能生長繁殖的細(xì)菌C在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長繁殖，但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長繁殖的細(xì)菌D在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長繁殖，但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長繁殖的細(xì)菌解析：選C。由題圖可知

9、，導(dǎo)入基因的結(jié)合點(diǎn)恰巧在質(zhì)粒四環(huán)素抗性基因的位置，使得重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因被破壞，則此抗性基因不能表達(dá)。因此，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，只能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長繁殖，而不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長繁殖。若某種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列是CCTAGG，它在A和G之間切斷DNA。下圖表示用該酶處理某基因后產(chǎn)生的片段。下列有關(guān)敘述正確的是()A該正?；蛑杏?個CCTAGG序列B產(chǎn)生的DNA片段可用核糖核酸連接酶連接起來C用該酶處理得到圖示基因片段要水解3個磷酸二酯鍵D若該基因某處有一個CCTAGC突變?yōu)镃CTAGG，用該酶處理后將產(chǎn)生5個片段解析：選D。該正?；虮磺袨?個片段，有3

10、個切點(diǎn)，應(yīng)有3個CCTAGG序列；產(chǎn)生的DNA片段不能用核糖核酸連接，只能用DNA連接酶連接；用該酶處理得到圖示基因片段要水解6個磷酸二酯鍵；若該基因某處有一個CCTAGC突變?yōu)镃CTAGG，則有4個切點(diǎn)，用該酶處理后將產(chǎn)生5個片段。.珠蛋白是動物血紅蛋白的重要組成成分，采用具有四環(huán)素抗性基因的質(zhì)粒作為運(yùn)載體，能使大腸桿菌生產(chǎn)出人的珠蛋白。下列敘述正確的是()A可從人的成熟的紅細(xì)胞中提取DNA，直接分離目的基因B用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶處理獲得重組質(zhì)粒C用CaCl2處理大腸桿菌，有利于重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌D可根據(jù)受體細(xì)胞是否具有四環(huán)素抗性來檢測目的基因是否表達(dá)解析：選C。人的成熟紅細(xì)胞

11、中無細(xì)胞核和其他細(xì)胞器，因而無DNA分子供提取；用限制性核酸內(nèi)切酶切割質(zhì)粒使其露出黏性末端，用DNA連接酶連接目的基因可獲得重組質(zhì)粒；根據(jù)受體細(xì)胞是否具有四環(huán)素抗性判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，而導(dǎo)入的目的基因是否表達(dá)需通過檢測是否有珠蛋白產(chǎn)生。.下列哪一種方法不能用于檢測目的基因是否成功導(dǎo)入或表達(dá)()A將目的基因直接打上放射性標(biāo)記，導(dǎo)入受體細(xì)胞后用檢測儀跟蹤B在含某種抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌C利用相應(yīng)的DNA探針與受體細(xì)胞DNA分子進(jìn)行雜交D提取受體細(xì)胞蛋白質(zhì)，利用抗原抗體特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測解析：選A。目的基因是已經(jīng)合成的一段有效DNA片段，不能再加入任何物質(zhì)或成分，因而

12、不能打上放射性標(biāo)記，需要用質(zhì)粒上的特殊基因作標(biāo)記基因，來檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。.北極比目魚有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)解析：選B。將多個抗凍基因編碼區(qū)相連成能表達(dá)的新基因，合成的蛋白質(zhì)為新的蛋白質(zhì)，不能

13、得到抗凍蛋白，故選項(xiàng)B正確；過程是利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，由于沒有非編碼區(qū)和編碼區(qū)中的內(nèi)含子，不能用于比目魚基因組測序；用作運(yùn)載體的質(zhì)粒，必須具有標(biāo)記基因才能便于檢測和篩選；應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄中目的基因的存在和轉(zhuǎn)錄，但不能檢測是否成功表達(dá)，故選項(xiàng)A、C、D錯誤。.(2012·江蘇百校聯(lián)考)下圖表示細(xì)胞膜上乙酰膽堿(一種神經(jīng)遞質(zhì))受體基因的克隆技術(shù)操作過程，下列相關(guān)分析中錯誤的是(多選)()A獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B構(gòu)建基因表達(dá)載體最可能使用的載體是大腸桿菌C完成過程必不可少的酶分別是逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶D探針篩選的目的是淘汰被感染的細(xì)菌，獲得未被感

14、染的細(xì)菌解析：選ABD。該受體基因在神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá)，獲得該mRNA的最佳材料是神經(jīng)細(xì)胞。構(gòu)建基因表達(dá)載體最可能使用的載體是質(zhì)粒。探針篩選的目的是檢測是否存在cDNA。.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述，正確的是()A轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳入環(huán)境中B轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物，不會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加C動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)D如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題解析：選A。若轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因存在于油菜的染色體上，則可能通過花粉傳入環(huán)境中；轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物，對昆蟲進(jìn)行了定向選擇，會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加；因生物體共用一套遺傳密碼，動物的生長激

15、素基因轉(zhuǎn)入植物后可表達(dá)；如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，可能打破原有的基因結(jié)構(gòu)，或通過轉(zhuǎn)基因植物散播，具有不確定性，存在一定的安全性問題。.某研究小組為了研制預(yù)防禽流感病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A步驟所代表的過程是逆轉(zhuǎn)錄B步驟需使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶C步驟可用CaCl2處理大腸桿菌，使其從感受態(tài)恢復(fù)到常態(tài)D檢驗(yàn)Q蛋白的免疫反應(yīng)特性，可用Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原抗體特異性反應(yīng)試驗(yàn)解析：選C。由圖可知，步驟所代表的過程是逆轉(zhuǎn)錄；步驟需使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；步驟可用CaCl2處理大腸桿菌，使其從常態(tài)轉(zhuǎn)

16、化為感受態(tài)細(xì)胞；檢驗(yàn)Q蛋白的免疫反應(yīng)特性，可用Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。.基因剔除技術(shù)能使生物個體所有細(xì)胞內(nèi)的某個基因不表達(dá)或失去活性。此技術(shù)可實(shí)現(xiàn)()A特異性刪除基因組中某個DNA片段B產(chǎn)生新的等位基因，從而產(chǎn)生新的基因型C剔除小鼠的胰島素基因，研究糖尿病的有效治療手段及藥物D剔除小鼠的原癌基因，防止細(xì)胞發(fā)生癌變解析：選C。本題考查有關(guān)基因的技術(shù)，屬于考綱規(guī)定的獲取信息等能力層次。剔除技術(shù)只是讓某個基因不表達(dá)或失活，而不是刪除；此技術(shù)與產(chǎn)生新的等位基因以及基因型沒有關(guān)系；剔除胰島素基因，細(xì)胞不能合成胰島素，為研究糖尿病的治療手段和藥物創(chuàng)造了基礎(chǔ)，故C項(xiàng)正確。上

17、海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛。他們還研究出一種可大大提高基因表達(dá)水平的新方法，使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍，標(biāo)志著我國轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。以下與此有關(guān)的敘述中，正確的是()A人白蛋白基因開始轉(zhuǎn)錄時，在DNA聚合酶的作用下以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAB所謂“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人白蛋白基因C人們只能在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白，是因?yàn)槿税椎鞍谆蛑辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中是純合的，在其他細(xì)胞中則是雜合的D如果人白蛋白基因的序列是已知的，可以用化學(xué)方法合成該目的基因解析：選D。人白蛋白基

18、因開始轉(zhuǎn)錄時，在RNA聚合酶的作用下以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA；所謂“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中的人白蛋白基因更多地進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯，產(chǎn)生更多的人白蛋白；人們只能在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白，是因?yàn)槿税椎鞍谆蛑辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。.科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a，通過基因工程的方法，將a轉(zhuǎn)入馬鈴薯中，經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在。這一過程涉及()A目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，隨著馬鈴薯的DNA分子的復(fù)制而復(fù)制并傳給子代細(xì)胞B基因a導(dǎo)入成功后，將抑制細(xì)胞原有的新陳代謝，開辟新的代謝途徑C目的基因不需要整合到馬鈴薯的DNA分子中D目的基

19、因來自細(xì)菌，可以不需要載體直接導(dǎo)入受體細(xì)胞解析：選A。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，應(yīng)隨受體的DNA分子復(fù)制而復(fù)制，并傳給子代細(xì)胞，故A正確；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，不能改變受體細(xì)胞原有的代謝，故B錯誤；目的基因若不整合到受體細(xì)胞的DNA中，是無法進(jìn)行復(fù)制并傳遞給后代的，故C錯誤；沒有載體，目的基因無法導(dǎo)入受體細(xì)胞并穩(wěn)定保存下來，故D錯誤。.下列關(guān)于用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植供體的研究的敘述，不正確的是()A器官短缺和免疫排斥是目前制約人體器官移植的兩大難題B豬的內(nèi)臟構(gòu)造、大小和血管分布與人的極為相似C靈長目動物體內(nèi)隱藏的、可導(dǎo)致人類疾病的病毒少于豬D無論以哪種動物作為供體，都需要在其基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)

20、因子以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因解析：選C。豬體內(nèi)隱藏的、可導(dǎo)致人類疾病的病毒遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于靈長目動物，是目前人體最理想的器官供體。為解決免疫排斥問題，必須除去抗原決定基因，或在其基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抵制抗原決定基因的表達(dá)。.關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法，正確的是()A蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作B蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子C對蛋白質(zhì)的改造是通過直接改造相應(yīng)的mRNA來實(shí)現(xiàn)的D蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程是相同的解析：選B。本題考查對蛋白質(zhì)工程的理解。所謂蛋白質(zhì)工程，就是利用基因工程手段，包括基因的定點(diǎn)突變和基因表達(dá)對蛋白質(zhì)

21、進(jìn)行改造，以期獲得性質(zhì)和功能更加完善的蛋白質(zhì)分子。能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子。.下列哪項(xiàng)不是蛋白質(zhì)工程的研究內(nèi)容()A分析蛋白質(zhì)分子的精細(xì)結(jié)構(gòu)B對蛋白質(zhì)進(jìn)行有目的的改造C分析氨基酸的化學(xué)組成D按照人的意愿將天然蛋白質(zhì)改造成新的蛋白質(zhì)解析：選C。本題考查蛋白質(zhì)工程的原理。蛋白質(zhì)工程就是根據(jù)蛋白質(zhì)的精細(xì)結(jié)構(gòu)和生物活性之間的關(guān)系，按照人的意愿改造蛋白質(zhì)分子，形成自然界中不存在的蛋白質(zhì)分子。為了改造某種蛋白質(zhì)分子，必須對其精細(xì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，但不包括組成蛋白質(zhì)的氨基酸的化學(xué)成分分析。.下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是()A基因治療就是把缺陷基因誘變成正常基因B基因診斷的基本原理是DN

22、A分子雜交C一種基因探針能檢測水體中的各種病毒D利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗時，目的基因存在于人體B淋巴細(xì)胞的DNA中答案：B.關(guān)于基因工程和蛋白質(zhì)工程的說法正確的是()A都是分子水平上的操作B基因工程就是改造基因的分子結(jié)構(gòu)C蛋白質(zhì)工程就是改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)D基因工程能產(chǎn)生自然界根本不存在的基因，蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界根本不存在的蛋白質(zhì)解析：選A?；蚬こ痰牟僮鲗ο笫腔颍瑢儆诜肿铀?；蛋白質(zhì)工程的操作對象是蛋白質(zhì)分子，二者都屬于分子水平的操作。二、非選擇題(本題包括4小題，共50分).(10分)為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分

23、離，計(jì)算相對大??；然后再用另一種酶對單酶水解片段進(jìn)行降解，分析片段大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。已知一線性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對)第一步水解產(chǎn)物(單位bp)第二步水解產(chǎn)物(單位bp)A酶切割2100將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用B酶切割1900200140080060010001000500500B酶切割2500將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用A酶切割1900600130080050012001000200經(jīng)A酶和B酶同時切割19001000800600500200(1)該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要體現(xiàn)了_原則。(2)由實(shí)驗(yàn)可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為_個和_個。(

24、3)根據(jù)表中數(shù)據(jù)，請?jiān)谙聢D中標(biāo)出相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn)并注明相關(guān)片段的大小。_解析：(1)分析表格中實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過程，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)體現(xiàn)了單一變量的原則(對照原則)。(2)經(jīng)A酶切割，可形成4個片段(2100、1400、1000、500 bp)，即A酶的識別序列有3個；經(jīng)B酶切割，可形成3個片段(2500、1300、1200 bp)，即B酶的識別序列有2個。(3)經(jīng)A、B酶同時切割，可形成6個片段，即有5個識別序列，又結(jié)合計(jì)算推導(dǎo)，可得出：答案：(1)對照(單一變量)(2)32(3).(14分)在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價值。右圖所示是獲得轉(zhuǎn)基因萵苣的技術(shù)

25、流程，請據(jù)圖回答下列問題：(1)獲取目的基因的主要途徑包括從自然界已有的物種中分離和_。(2)過程需要的酶有_、_。(3)重組質(zhì)粒除了帶有抗凍蛋白基因afp以外，還必須含有啟動子、終止子和_，這樣才能構(gòu)成一個完整的基因表達(dá)載體。(4)如果受體細(xì)胞C1是土壤農(nóng)桿菌，則將目的基因?qū)胨哪康氖抢棉r(nóng)桿菌的_，使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞C2，并將其插入到受體細(xì)胞C2中_上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)，形成轉(zhuǎn)基因萵苣。經(jīng)過程獲得的轉(zhuǎn)基因萵苣中的目的基因是否表達(dá)，在分子水平上可用_法進(jìn)行檢測，如果出現(xiàn)雜交帶，說明目的基因已經(jīng)表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)品，轉(zhuǎn)基因萵苣培育成功。解析：(1)獲取目的基因的主要途徑有

26、從自然界已有的物種中分離和人工合成。(2)過程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要用到限制酶和DNA連接酶。(3)一個完整的基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因。(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的是農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，進(jìn)而使目的基因能夠穩(wěn)定遺傳和表達(dá)。檢測目的基因是否成功表達(dá)可采用抗原抗體雜交法。答案：(1)(用逆轉(zhuǎn)錄等方法進(jìn)行)人工合成(2)限制酶DNA連接酶(3)標(biāo)記基因(4)轉(zhuǎn)化作用染色體DNA抗原抗體雜交.(14分)蘇云金芽孢桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，據(jù)圖回

27、答下列問題。(1)將圖中的DNA用Hind、BamH完全酶切后，反應(yīng)管中有_種DNA片段。(2)圖中表示Hind與BamH酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得_種重組質(zhì)粒；如果換用Bst與BamH酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得_種重組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的_。(4)圖中的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的TDNA導(dǎo)入植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中_對TDNA的降解。(5)已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只與某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞_。(6)生產(chǎn)上常將上

28、述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的_基因頻率的增長速率。解析：本題考查基因工程的相關(guān)知識。(1)若假設(shè)DNA可表示為，則由于上述兩種酶形成的黏性末端不一樣，所以被兩種不同的限制酶切割之后所形成的片段有四種，即a、b、c、d。(2)同時被兩種限制酶切割有兩種不同的目的基因，即AB和BA，所以重組質(zhì)粒有兩種。Bst與BamH 酶切割的末端一樣，同時用這兩種限制酶切割只能形成一種目的基因，所以只能形成一種重組質(zhì)粒。(3)質(zhì)粒要進(jìn)行復(fù)制才能表達(dá)出更多的產(chǎn)物，所以重組之后要能復(fù)制。(4)酶具有專一性，對TDNA的降解酶為DNA水解酶。(5)生物細(xì)胞表面的受體具有特異性，人類腸上皮細(xì)胞沒有昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的