課時跟蹤檢測(一)　DNA重組技術的基本工具

1、.課時跟蹤檢測一DNA重組技術的根本工具總分值50分時間25分鐘一、選擇題每題2分，共20分1以下對基因工程的理解，正確的選項是它是一種按照人們的意愿，定向改造生物遺傳特性的工程對基因進展人為改造是體外進展的人為的基因重組主要技術為體外DNA重組技術和轉基因技術在DNA分子程度上進展操作ABC D解析：選B基因工程的目的是按照人的意愿，定向改造生物性狀；技術手段是體外DNA重組技術和轉基因技術；操作程度是DNA分子程度；基因工程只是實現(xiàn)了基因重組，并沒有改造基因。2關于DNA連接酶作用的表達，正確的選項是A將單個核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵B將斷開的兩個DNA片段的骨架連接起來，

2、重新形成磷酸二酯鍵C連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來，而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進展連接解析：選BDNA連接酶和DNA聚合酶都是催化兩個脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，將兩個DNA片段連接成重組DNA分子。DNA聚合酶是將單個核苷酸加到已存在的核酸片段上形成磷酸二酯鍵，合成新的DNA分子。3下表關于基因工程中有關基因操作的名詞及對應的內容，正確的組合是選項供體“手術刀“縫合針載體受體A質粒限制性核酸內切酶DNA連接酶提供目的基因的生物大腸桿菌等B提供目的基因的生物DNA連接酶限制性核酸內切酶質

3、粒大腸桿菌等C提供目的基因的生物限制性核酸內切酶DNA連接酶質粒大腸桿菌等D大腸桿菌等DNA連接酶限制性核酸內切酶提供目的基因的生物質粒解析：選C供體是提供目的基因的生物，受體是承受目的基因的生物；常用的載體是質粒；操作工具中的“手術刀和“縫合針分別是限制酶和DNA連接酶。4如以下圖所示，兩個核酸片段在適宜條件下，經X酶的催化作用發(fā)生下述變化。那么X酶是ADNA連接酶 BRNA聚合酶CDNA聚合酶 D限制酶解析：選A圖中X酶可將兩個具有黏性末端的DNA片段連接在一起，因此該酶為DNA連接酶。5以下關于載體的表達，錯誤的選項是A載體與目的基因結合后，本質上就是一個重組DNA分子B對某種限制酶而言

4、，載體最好只有一個切點，但還要有其他多種酶的切點C目前常用的載體有質粒、噬菌體的衍生物和動植物病毒D載體具有某些標記基因，便于對其進展切割解析：選D標記基因的作用是用于受體細胞的鑒別和挑選。6以下圖表示限制酶切割DNA分子的過程，從圖中可知，該限制酶能識別的堿基序列和切點是ACTTAAG，切點在C和T之間BCTTAAG，切點在G和A之間CGAATTC，切點在G和A之間DGAATTC，切點在C和T之間解析：選C由圖示可知：該限制酶能識別的堿基序列是GAATTC，切點在G和A之間。7據(jù)圖判斷，有關工具酶功能的表達錯誤的選項是A限制性核酸內切酶可以切斷a處BDNA聚合酶可以連接a處C解旋酶可以使b處

5、解開DDNA連接酶可以連接c處解析：選Da處指的是兩個相鄰脫氧核苷酸之間的脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵，而c處指的是同一個脫氧核苷酸內的脫氧核糖和磷酸之間的化學鍵。8以下圖為四種限制酶BamH 、EcoR 、Hind以及Bgl 的辨識序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合？其正確的末端互補序列應該為ABamH 和EcoR ；末端互補序列AATTBBamH和Hind；末端互補序列GATCCEcoR和Hind；末端互補序列AATTDBamH和Bgl；末端互補序列GATC解析：選DA選項中BamH酶切出的末端序列為GATC，EcoR酶切出的

6、末端序列為AATT，兩者不互補；B項Hind酶切出的末端序列為AGCT，與BamH酶切出的末端序列不互補；同理可推知，C項中也不互補，只有D項中才互補。9現(xiàn)有一長度為1 000堿基對bp的DNA分子，用限制性核酸內切酶EcoR酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp，用Kpn單獨酶切得到400 bp和600 bp兩種長度的DNA分子，用EcoR、Kpn同時酶切后得到200 bp和600 bp兩種長度的DNA分子。以下圖中DNA分子的酶切圖譜正確的選項是解析：選D長度為1 000 bp的DNA分子，被EcoR酶切后長度不變，說明該DNA為環(huán)狀。用Kpn單獨酶切得到400 bp和600 bp兩種

7、長度，說明該DNA分子上有兩個Kpn酶的切割位點。用兩種酶同時切割，得到200 bp和600 bp兩種長度的DNA分子，說明EcoR酶的作用位點正好在Kpn酶切割后得到的400 bp的DNA片段的中間位置。10基因工程利用某目的基因以下圖甲和Pl噬菌體載體以下圖乙構建重組DNA。限制性核酸內切酶的酶切位點分別是Bgl 、EcoR 和Sau3A 。以下分析錯誤的選項是A構建重組DNA時，可用Bgl和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體B構建重組DNA時，可用EcoR和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體C圖乙中的Pl噬菌體載體只用EcoR切割后，含有2個游離的磷酸基團D用Ec

8、oR切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產生一種重組DNA解析：選D由題圖可知，Bgl、Sau3A及EcoR三種酶在目的基因和Pl噬菌體上都有切口，故可用Bgl和Sau3A或EcoR和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體；從圖乙知Pl噬菌體載體為環(huán)狀DNA，只用EcoR切割后產生兩條反向雙螺旋鏈狀DNA，有2個游離的磷酸基團；用EcoR切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，產生的重組DNA不止一種。二、非選擇題共30分1110分通過DNA重組技術使原有基因得以改造的動物稱為轉基因動物?？茖W家運用這一技術使羊奶中含有人體蛋白質。以下圖表

9、示這一技術的根本過程，在該工程中所用的基因“剪刀能識別的序列和切點是GGATCC，請答復：1從羊染色體中“剪下羊蛋白質基因的酶是_。人的蛋白質基因“插入后連接在羊體細胞染色體中時需要的酶是_。2請畫出質粒被切割形成黏性末端的過程圖。3人的蛋白質基因之所以能“插入到羊的染色體內，原因是_，“插入時用的工具是_，其種類有_。解析：此題主要考察各種工具在基因工程中的作用，要明確限制酶的作用是切取目的基因，DNA連接酶起“縫合作用，載體能把目的基因導入受體細胞。答案：1限制酶DNA連接酶3基因的構造是一樣的載體質粒、動植物病毒及噬菌體的衍生物1210分基因工程中，需使用限制酶切割目的基因和質粒，便于重

10、組和挑選。限制酶的識別序列和切點是ATCC，限制酶的識別序列和切點是GATC。1根據(jù)條件和以下圖中信息答復：上述質粒用限制酶_切割，目的基因用限制酶_切割。將切下的目的基因片段插入質粒的切口處，還要參加適量的_。請指出質粒上至少要有一個標記基因的理由：_。2不同生物的基因可以拼接的構造根底是_。解析：1兩個DNA片段能否連接關鍵是看所形成的黏性末端是否一樣。用同一種限制性核酸內切酶切割肯定露出一樣的黏性末端。在這里限制性核酸內切酶、雖是兩種不同的限制性核酸內切酶，但是它們切割產生的黏性末端一樣，因此也可以用DNA連接酶將其連接起來。2不同基因拼接成功的根底是DNA的空間構造和根本單位一樣。答案

11、：1DNA連接酶檢測重組質粒或目的基因是否導入受體細胞2DNA構造根本一樣和根本組成單位一樣1310分下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請答復以下問題：1一個圖2所示DNA分子用EcoR 切割獲取目的基因時，有_個磷酸二酯鍵被水解。2假設對圖中質粒進展改造，插入的Sma酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越_。3用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Sma切割，原因是_。4與只使用EcoR相比較，使用BamH和Hind兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止_。5為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并參加_酶。6現(xiàn)

12、使用BamH和Hind兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA，并經拼接獲得的重組質粒進展再次酶切，假設所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖1、2中標示的酶切位點及表所列的識別序列，對以下酶切結果作出判斷。采用BamH和Hind酶切，得到_種DNA片段。采用EcoR和Hind酶切，得到_種DNA片段。解析：1將目的基因切下來需要切斷四個磷酸二酯鍵。2Sma識別的是CCCGGG序列，在C與G之間切割，Sma酶切位點越多，也就是CG堿基對越多，由于C與G之間的氫鍵3個比A與T之間的氫鍵2個數(shù)量多，故其含量越多，質粒的熱穩(wěn)定性越高。3據(jù)圖1可知，Sma切割位點在抗生素抗性基因標記基因中，據(jù)圖2可知，Sma切割位點在目的基因中，因此使用Sma切割會破壞質粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因。4用同一種限制酶處理質粒和外源DNA，再用DNA連接酶連接時，往往會有三種連接形式：目的基因質粒、目的基因目的基因環(huán)化、質粒質粒環(huán)化，后兩種是我們不需要的，因此要進展挑選。用兩種限制酶處理質粒和外源DNA，因形成的末端不同可防止上述情況的發(fā)生。5連接質粒與目的基因的工具酶是DNA連接酶。6由BamH和Hind兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA，并經拼接獲得的重組質粒，這兩種酶的識別序列仍然完好