研究型組培室的設(shè)計(jì)規(guī)劃

1、研究型組培室的設(shè)計(jì)規(guī)劃第三組在建設(shè)組培實(shí)驗(yàn)室時(shí),首先應(yīng)選擇安靜、清潔、遠(yuǎn)離污染，位于上風(fēng)口的的場(chǎng)所；然后根據(jù)要求的實(shí)驗(yàn)室的性質(zhì)、規(guī)模來設(shè)計(jì)，但實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的基本要求總是科學(xué)、高效、經(jīng)濟(jì)和實(shí)用；此外，組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室必須能滿足三個(gè)需要：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、無菌操作、控制培養(yǎng)。同時(shí)，我們還要注意組織培養(yǎng)程序，避免某些環(huán)節(jié)倒排，引起日后工作混亂。實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)篇實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則：保證無菌操作，達(dá)到工作方便，無污染。一、實(shí)驗(yàn)室組成：1）準(zhǔn)備室（化學(xué)實(shí)驗(yàn)室）。面積：20m2左右。用途：器皿洗滌、培養(yǎng)基配置、分裝、高壓滅菌，植物材料的預(yù)處理，重蒸餾水的制備以及進(jìn)行生理、生化因素的分析，試管苗出瓶，清洗及整理工作。要求：明亮、

2、通風(fēng)。設(shè)備：工作臺(tái)，櫥柜，水池，儀器，藥品等?！景ㄏ礈焓?、滅菌室】2）緩沖室。面積：約3-5m2左右。用途：進(jìn)入無菌室前需在緩沖室里換上經(jīng)過滅菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。設(shè)備：1盞紫外燈，1個(gè)配電板，石英電力時(shí)控器等。3）無菌操作室（無菌室，接種室）。面積：10-20m2。用途：材料的滅菌接種，無菌材料的繼代，叢生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是關(guān)鍵的部分，關(guān)系到培養(yǎng)物的污染率、接種工作效率等重要指標(biāo)。要求：干爽安靜、清潔明亮、墻壁光滑平整不易積染灰塵，地面平坦無縫便于清洗和滅菌。門窗要密閉，一般用移動(dòng)門窗。設(shè)備：超凈工作臺(tái)、空調(diào)機(jī)，醫(yī)用小平車，操作臺(tái)、擱架等。4）培養(yǎng)室。面積：視培養(yǎng)架多

3、少及培養(yǎng)物數(shù)量而定。用途：將接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物材料進(jìn)行培養(yǎng)的場(chǎng)所。設(shè)備：（1）培養(yǎng)架與燈光。培養(yǎng)架數(shù)目多少視生產(chǎn)規(guī)模而定，年產(chǎn)4萬-10萬苗需4-6個(gè)培養(yǎng)架；年產(chǎn)10萬-20萬苗約需810個(gè)培養(yǎng)架。每個(gè)培養(yǎng)架一般6層，總高度2m，每0.3m為一層,最下一層距離地面0.2m架寬以0.6m為好，架長(zhǎng)以40W日光燈的長(zhǎng)度來決定，即約1.26m。每層架子安裝2盞日光燈。（2）通風(fēng)設(shè)備。在稍高處設(shè)置進(jìn)風(fēng)氣窗，在其對(duì)側(cè)近天花板處設(shè)置排風(fēng)窗。（3）邊臺(tái)、空調(diào)機(jī)、加濕器（除濕器）、各類顯微鏡、溫濕度計(jì)。5）馴化室。面積：視生產(chǎn)規(guī)模而定。用途：組培苗（試管苗）移栽前進(jìn)行煉苗。要求：清潔無菌。設(shè)備：空調(diào)機(jī)

4、、加濕器、恒溫恒濕控制儀、噴霧器。6）溫室。面積：視生產(chǎn)規(guī)模而定。用途：保證試管苗不分季節(jié)地常年生產(chǎn)。設(shè)備：溫度控制裝置、通風(fēng)口、噴霧裝置、光照調(diào)節(jié)裝置、殺菌殺蟲工具及相應(yīng)藥物。二、輔助實(shí)驗(yàn)室 根據(jù)研究或生產(chǎn)的需要而配套設(shè)置的專門實(shí)驗(yàn)室，主要用于細(xì)胞學(xué)觀察和生理生化分析等。 1、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室 功能：用于對(duì)培養(yǎng)物的觀察分析與培養(yǎng)物的計(jì)數(shù)，對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究，由制片室和顯微觀察室組成。制片是獲取顯微觀察數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)，配備有切片機(jī)、磨刀機(jī)、溫箱及樣品處理和切片染色的設(shè)備。應(yīng)有通風(fēng)櫥和廢液處理設(shè)施。顯微觀察室主要是顯微鏡和圖像拍攝、處理設(shè)備。要求：明亮、清潔、干燥、防止潮濕和灰塵污染。 設(shè)備

5、：雙筒實(shí)體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。2、生化分析實(shí)驗(yàn)室 功能：培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，隨時(shí)對(duì)培養(yǎng)物成分進(jìn)行取樣檢查。大型次生代謝物生產(chǎn)，還需有效分離實(shí)驗(yàn)室。 實(shí)驗(yàn)室藥品配置篇在植物組織培養(yǎng)中，所使用的化學(xué)藥劑通常為化學(xué)試劑，根據(jù)它們的純度化學(xué)試劑可以分為優(yōu)級(jí)純（GR.）、分析純（AR.）、化學(xué)純（CP.）等規(guī)格。在研究型的組織培養(yǎng)中，我們一般可以采用分析純或優(yōu)極純的藥劑。以MS培養(yǎng)基為例，其使用的常用化學(xué)藥劑如下：(1)硝酸銨：亦稱硝銨?；瘜W(xué)式為NH4NO3，式量為80.048，其純品為無色透明菱形結(jié)晶，比重1.73，易溶于水，并吸收大量的熱，在空氣中容

6、易潮解。水溶液呈中性反應(yīng)。由于硝酸銨是一種易燃、易爆物，因此在使用中應(yīng)該貯存在陰冷之處。已經(jīng)結(jié)塊的硝酸銨切忌敲打、撞擊，可用水進(jìn)行溶解。(2)硝酸鉀：亦稱火硝。化學(xué)式為KNO3，式量為101.104，其純品為無色透明的棱柱結(jié)晶，比重2.10，易溶于水，幾乎不溶于無水乙醇。(3)氯化鈣：亦稱無水氯化鈣。化學(xué)式為CaCl2，式量為110.99，其純品為白色結(jié)晶，比重2.15，在空氣中具強(qiáng)吸濕性，易溶于水同時(shí)放出大量的熱。(4)硫酸鎂：亦稱瀉鹽?；瘜W(xué)式為MgSO47H2O，式量為246.50，其純品為透明菱形結(jié)晶，比重1.68，具苦味，易溶于水，不溶于乙醇，在空氣中稍風(fēng)化。(5)磷酸二氫鉀：亦稱磷酸

7、鉀復(fù)合肥?；瘜W(xué)式為KH2PO4，式量為136.09，其純品為正方形無色結(jié)晶，比重2.33，有較強(qiáng)的酸味，易溶于水，不溶于乙醇。溶液呈微酸性反應(yīng)。磷酸二氫鉀在96時(shí)會(huì)溶化成透明的液體，這樣就會(huì)轉(zhuǎn)化為偏磷酸鉀，因此在使用時(shí)注意不要使它經(jīng)受高溫環(huán)境。(6)碘化鉀：化學(xué)式為KI，式量為166.02，其純品為透明的小塊結(jié)晶，比重3.115，在干燥的空氣中穩(wěn)定，易溶于水，其水溶液在遇光后因析出游離碘而逐漸變黃。(7)硼酸：亦稱正硼酸?；瘜W(xué)式為H3BO3，式量為61.84，其純品為六角形白色鱗片狀結(jié)晶，具珠光，比重1.46，溶于水，易溶于乙醇，當(dāng)加熱至107時(shí)會(huì)失去部分的水，而轉(zhuǎn)變?yōu)槠鹚?。水溶液呈酸性反?yīng)

8、。 (8)硫酸錳：化學(xué)式為MnSO45H2O，式量為241.07，其純品為紅色結(jié)晶，比重2.1，具金屬味，易溶于水，不溶于乙醇。在制備過程中，如果溶液在-46間結(jié)晶時(shí)，可制成七水硫酸錳（MnSO47H2O）；在2040間時(shí)，可獲得四水硫酸錳（MnSO47H2O）；在280時(shí)加熱，帶有結(jié)晶水的硫酸錳直至恒重，則可獲得無水硫酸錳（MnSO4）。(9)硫酸鋅：亦稱鋅礬?；瘜W(xué)式為ZnSO47H2O，式量為287.55，其純品為無色菱形結(jié)晶，比重1.96，在干燥的空氣中會(huì)風(fēng)化，易溶于水，當(dāng)39時(shí)溶于所含結(jié)晶水，并轉(zhuǎn)變?yōu)閆nSO46H2O。(10)鉬酸鈉：化學(xué)式為Na2MoO4，式量為241.98，其純品

9、為無色結(jié)晶，溶于水。(11)硫酸銅：亦稱膽礬。化學(xué)式為CuSO45H2O，式量為249.71，其純品為深藍(lán)色結(jié)晶，比重2.29，具強(qiáng)烈的金屬味，易溶于水，在干燥的空氣中容易風(fēng)化，而變成白色粉末，即無水硫酸銅。水溶液呈弱酸性反應(yīng)。(12)氯化鈷：亦稱氯化亞鈷?；瘜W(xué)式為CoCl26H2O，式量為372.26，其純品為紅色單斜結(jié)晶，比重1.84，在室溫下穩(wěn)定，極易溶于水，可溶于乙醇。在4552時(shí)加熱，會(huì)逐漸變?yōu)镃oCl24H2O。(13)乙二胺四乙酸二鈉：化學(xué)式為Na2EDTA2H2O，式量為372.26，其純品為白色結(jié)晶狀粉末，無味、無毒、可溶于水，容易和金屬離子形成絡(luò)合物。(14)硫酸亞鐵：亦稱

10、黑礬、鐵礬。化學(xué)式為FeSO47H2O，式量為278.02，其純品為淡綠色結(jié)晶，比重1.89，易溶于水，不溶于乙醇，在干燥空氣中風(fēng)化而變?yōu)榘咨勰?15)甘氨酸：亦稱氨基醋酸、氨基乙酸?；瘜W(xué)式為C2H5NO2，式量為75.07。純品為白色結(jié)晶性粉末。味甜，能溶于水，微溶于醇，幾乎不溶于醚。233開始分解。密封閉光保存。(16)肌醇：亦稱環(huán)已六醇?；瘜W(xué)式為C6H12O6，式量為180.16。為構(gòu)建細(xì)胞壁的材料。它在離子平衡、磷脂代謝、碳水化合物合成等過程中起著重要的作用。（17）煙酸：亦稱維生素B5。化學(xué)式為C6H5NO2，式量為123.11。純品為無色針狀結(jié)晶。無氣味，在空氣中穩(wěn)定，能溶于水

11、、乙醇、不溶于醚、酯類溶劑。熔點(diǎn)236。密封閉光保存。(18)鹽酸吡哆醇：亦稱維生素B6、鹽酸吡哆素?；瘜W(xué)式為C8H12ClNO3，式量為205.64。純品為白色結(jié)晶。無氣味，在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。205212分解。密封閉光保存。(19)鹽酸硫胺素：亦稱維生素B1?；瘜W(xué)式為C12H17ClN4OSHCl，式量為337.28。純品為白色結(jié)晶。在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。密封閉光保存。(20)6-芐基腺嘌呤：縮寫為BA，亦稱6-BA、普魯馬林。是一種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，化學(xué)式為C12H11N5，式量為225.26。純品為白色結(jié)晶，熔點(diǎn)235，難溶于水，易溶于丙酮、乙醇等有

12、機(jī)溶劑，在酸性介質(zhì)中較為穩(wěn)定。其主要的生理作用為能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，誘導(dǎo)芽分化，延緩葉衰老，促進(jìn)細(xì)胞分裂。(21)萘乙酸：縮寫為NAA，亦稱-萘乙酸、生長(zhǎng)素、1-萘乙酸。是一種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，化學(xué)式為C12H10O2，式量為186.20。純品為白色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)133135，沸點(diǎn)285（分解）。在冷水中微溶，在熱水中易溶，易溶于冰醋酸、丙酮、乙醚等有機(jī)溶劑中。在空氣潮解，見光會(huì)變色。它有和兩種類型，通常所說的萘乙酸指的是型。其主要生理作用為能夠誘導(dǎo)根分化，防止器官脫落，誘導(dǎo)無籽果實(shí)，促使種子萌發(fā)等。(22)腺嘌呤：縮寫為AD，化學(xué)式為C5H5N53H2O，式量為189.13。純品為白色結(jié)晶性

13、粉末。在空氣中穩(wěn)定，微溶于水。它是合成細(xì)胞分裂素的前體，主要的生理功能為促進(jìn)細(xì)胞分裂。(23)赤霉酸：縮寫為CA3，亦稱激動(dòng)素，濫長(zhǎng)素、九二零等。是一種植物激素，純品為八面體雙錐形白色結(jié)晶，熔點(diǎn)233-235 (分解)，難熔于水，其鉀鹽、鈉鹽易溶于水，易熔于丙酮、甲醇、乙醇。赤霉素的化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，但應(yīng)該在低溫環(huán)境下進(jìn)行貯藏，其水溶液不穩(wěn)定。其主要的生理作用為促進(jìn)細(xì)胞的伸長(zhǎng)，防止離層形成，能夠解除休眠。(24)蔗糖：化學(xué)式為C12H22O11，式量為342.30。純品為無色單斜型結(jié)晶、白色顆?；蚓w粉未。味甜，在空氣中穩(wěn)定，易溶于水，能溶于乙醇，可被稀酸水解為果糖、葡萄糖。在160-180間

14、分解。密封保存。(25)瓊脂：亦稱洋菜。是從石花菜等海藻中所提取的白色粘膠狀物質(zhì)，在熱水中能溶解，其溶液遇冷凝固，可用于配制培養(yǎng)基，作為外植體的支撐物。(26)肌醇：化學(xué)式為C6H12O6，式時(shí)為180.16。純品為白色結(jié)晶粉末，有甜味，在空氣中不潮解。溶于水，微溶于醇，熔點(diǎn)225-227。密封保存。實(shí)驗(yàn)室設(shè)備添置篇在研究型的組織培養(yǎng)操作中，往往對(duì)器材、設(shè)施的要求較高，只有從降低投入、提高工效、節(jié)約勞力等諸方面加以考慮，才能降低培養(yǎng)成本、提高培養(yǎng)效率。（1）通用器械燒杯：用來盛放、溶解化學(xué)藥劑等。常用的規(guī)格有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml。烘箱：用來烘干器械。恒溫水

15、?。河脕砣芙猸傊任镔|(zhì)。玻璃攪拌棒：用來配制培養(yǎng)基。洗耳球：用來輔助吸取、轉(zhuǎn)移少量液體。冰箱：用來貯存化學(xué)藥劑、植物材料等。牛角勺：用來轉(zhuǎn)移化學(xué)藥劑。玻璃漏斗：用來過濾溶液。剪刀：用來修剪外植體或剪切嫩莖。器械架：在無菌操作期間用來放置滅菌的器械。（2）各種盛具搪瓷淺盤：用來承載各種器械容器。塑料盆：用于清洗培養(yǎng)容器。鐵絲筐：用來盛放滅菌容器等物品。純水水桶：用來存放去離子水或蒸餾水。常用的規(guī)格有10L、20L。塑料桶：用來存放洗滌溶液、廢棄溶液。各種規(guī)格的磨砂玻璃瓶：用來盛放培養(yǎng)母液，以及各種植物生長(zhǎng)物質(zhì)。（3）計(jì)量器械量筒：用來量取一定體積的液體。常用的規(guī)格有25ml、50ml、100ml

16、、500ml、1000ml。容量瓶：用來配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。常用的規(guī)格有50ml、100ml、500ml、1000ml。大肚移液管：用來吸取定量溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml?？潭纫埔汗埽河脕砦《恐参锷L(zhǎng)物質(zhì)溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml。移液管架：用來放置、固定移液管。酸度計(jì)：用來檢測(cè)培養(yǎng)基的pH。藥物天平：用來稱取配制培養(yǎng)基的藥品。分析天平：用來稱取少量有化學(xué)試劑，進(jìn)行化學(xué)分析。（4）滅菌器械磨砂口玻璃瓶：用來對(duì)植物材料進(jìn)行表面滅菌。酒精燈：用來進(jìn)行接種器材的表面滅菌。細(xì)菌過濾器：用來過濾不能進(jìn)行高溫滅菌的試劑溶液。無菌濾紙：用來汲取器材、植物材料表面的水分。無菌脫脂棉：用來進(jìn)行器械、植物材料表面的滅菌處理。真空泵：用來吸濾滅菌。高壓滅菌鍋：對(duì)培養(yǎng)基、接種器材進(jìn)行滅菌處理?？烧{(diào)試電爐：用來加熱高壓滅菌鍋。皮下注射器：用來對(duì)溶液進(jìn)行過濾、除菌。紫外線滅菌燈：用來對(duì)接種室、培養(yǎng)室、操作室等工作環(huán)境進(jìn)行滅菌處理。（5）接種器械超凈工作臺(tái)：用來過濾通過接種工作臺(tái)面的空氣，以便進(jìn)行無菌操作。小型噴霧器：裝載滅菌藥液，來給超凈工作臺(tái)等處噴霧滅菌。鈍頭鑷子：在接種操作、繼代培養(yǎng)時(shí)移取植物材料。尖頭鑷子：用來分離植物材料。解剖刀：用來切割植物材料。打孔器：用來切取大小一致的圓柱形植物材料。雙目顯微鏡：在解剖較小的外植體時(shí)，用來觀測(cè)材料