超聲提取夏枯草中總?cè)祁惓煞值难芯?一)

1、超聲提取夏枯草中總?cè)祁惓煞值难芯?一)    作者：呂杏放 朱文斌 楊倬榮 周楊 黃春瑜 彭新生【摘要】 目的：探討夏枯草中總?cè)祁惓煞值奶崛」に嚒?方法：采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案優(yōu)化夏枯草中總?cè)祁惓煞值某曁崛」に?。結(jié)果：最佳提取工藝為提取溫度65，85乙醇，超聲30min，10倍溶劑用量，超聲提取3次。結(jié)論：超聲提取既簡便又高產(chǎn)，節(jié)能且環(huán)保。 【關(guān)鍵詞】 超聲提取 總?cè)祁?夏枯草 熊果酸夏枯草是唇形科植物夏枯草Prunella vulgaris Linn的干燥果穗或全草，別名夏至草、夏枯頭。在我國主產(chǎn)于江蘇、浙江、安徽和濟(jì)南等地，主要化學(xué)成分為三萜

2、類、甾體類、黃酮類、香豆素類、糖類和揮發(fā)油類等1，具有清肝、明目、散結(jié)、消腫、止痛之功效，臨床用于治療甲狀腺腫大、淋巴結(jié)核、乳腺增生、高血壓、肺結(jié)核、急性黃疸型傳染性肝炎等疾病2。夏枯草屬植物中含有多種三萜類成分, 主要為齊墩果烷型、烏蘇烷型和羽扇豆烷型三萜。其藥理活性成分熊果酸（UA）、齊墩果酸（OA）等三萜類化合物具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗高血壓、抗糖尿病、抗?jié)?、降低血糖等多種生物學(xué)效應(yīng)3。近年來研究發(fā)現(xiàn)，三萜類中的熊果酸（UA）具有抗致癌、抗促癌、誘導(dǎo)F9畸胎瘤細(xì)胞分化和抗血管生成作用，極有可能成為低毒高效的新型抗癌藥物4；齊墩果酸（OA）具有保肝、免疫作用5。本實(shí)驗(yàn)采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以

3、夏枯草中總?cè)祁惓煞值暮繛樵u價指標(biāo)，考察乙醇為溶劑用超聲提取的最佳工藝條件。1 儀器與試藥KQ 5200 DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV-1800紫外-可見分光光度儀（上海美譜達(dá)儀器廠）；TGL-18G高速臺式離心機(jī)（湖南星科科學(xué)儀器公司）；WK-1000A高速藥物粉碎機(jī)（山東青州市精誠機(jī)械有限公司）。夏枯草（干燥花序、果穗）購于廣東東莞國藥集團(tuán)有限公司，經(jīng)茍占平副教授鑒定為夏枯草屬植物夏枯草(Prunella vulgaris Linn)。熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品購于中國藥品生物制品檢定所?；钚蕴浚–.P），其余試劑均為A.R。2 實(shí)驗(yàn)方法2.1 夏枯草超聲提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案

4、表1 因素水平表（略）2.2 測量方法的研究2.3 方法學(xué)考察6，7及含量測定2.4 結(jié)果表2 穩(wěn)定性考察表（略）表3 重現(xiàn)性考察表（略）表4 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析（略）表5 正交試驗(yàn)結(jié)果的方差分析（略）注：* P0.05。由表5分析可知，夏枯草中總?cè)祁惓煞肿罴烟崛」に嚍椋篈3B3C2D3。對夏枯草中總?cè)祁愇镔|(zhì)含量影響因素主次順序?yàn)椋築>A>C>D，即超聲溫度 65，85乙醇，超聲30min，10倍溶劑用量。表6 夏枯草總?cè)祁愇镔|(zhì)含量測定（略）表7 回收率試驗(yàn)（略）3 討論在預(yù)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，提取3次總?cè)祁惓煞趾繛?5.71g，提取2次總?cè)祁惓煞趾繛?9.67g。提取3次的含量遠(yuǎn)高于提取2次的含量，故選定工藝提取次數(shù)為3次。冰醋酸-香草醛、高氯酸比色法是測定三萜類化合物常用方法，本法測定的機(jī)制可能是三萜酸本身在可見光區(qū)無吸收，經(jīng)過三萜酸中羥基與香草醛結(jié)構(gòu)中的醛基進(jìn)行縮合反應(yīng)，生成紫紅色的縮合物，通過測定縮合物的量，從而計(jì)算出總?cè)祁愇镔|(zhì)的量。在0.30ml 5香草醛-冰醋酸溶液，1.00ml高氯酸，60水浴10min的條件下顯色，從實(shí)驗(yàn)中知在顯色后3060min內(nèi)穩(wěn)定，有一個較準(zhǔn)確的測定值。若在實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格控制反應(yīng)條件，其結(jié)果穩(wěn)定且重現(xiàn)性好，可用于質(zhì)量控制8。通過回收率試驗(yàn)驗(yàn)證，最佳提取工藝對