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文檔簡(jiǎn)介
1、高考生物全國(guó)通用二輪專題突破課件:專題八現(xiàn)代生物科技專題1.基因工程的誕生基因工程的誕生()。2.基因工程的原理及技術(shù)基因工程的原理及技術(shù)()。3.基因工程的應(yīng)用基因工程的應(yīng)用()。4.蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程()。5.植物的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)()。6.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()。7.細(xì)胞融合與單克隆抗體細(xì)胞融合與單克隆抗體()??季V要求考綱要求基因工程和細(xì)胞工程基因工程和細(xì)胞工程第第 講講1構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)欄目索引欄目索引 考點(diǎn)一考點(diǎn)一基因工程基因工程 考點(diǎn)二考點(diǎn)二細(xì)胞工程細(xì)胞工程考點(diǎn)一考點(diǎn)一基因工程基因工程u重點(diǎn)提煉重點(diǎn)提煉u命題視角命題視角 題組題組對(duì)基因工
2、程的操作工具與操作步驟綜合考查對(duì)基因工程的操作工具與操作步驟綜合考查重點(diǎn)提煉重點(diǎn)提煉1.基因工程的基本工具基因工程的基本工具限制酶限制酶DNA連接酶連接酶載體載體作用作用切割目的基切割目的基因和載體因和載體拼接拼接DNA片段,形片段,形成重組成重組DNA分子分子攜帶目的基因進(jìn)攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞入受體細(xì)胞作用作用部位部位兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵成的磷酸二酯鍵作用特作用特點(diǎn)點(diǎn)(條件條件)(1)識(shí)別特定的識(shí)別特定的核苷酸序列;核苷酸序列;(2)在特定位點(diǎn)在特定位點(diǎn)上切割上切割DNA分分子子(1)EcoliDNA連連接酶只能連接黏接酶只能連接黏性末端
3、;性末端;(2)T4DNA連接酶連接酶能連接黏性末端能連接黏性末端和平末端和平末端(1)能在宿主細(xì)胞能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制;量復(fù)制;(2)有一個(gè)至多個(gè)有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);限制酶切割位點(diǎn);(3)具有特殊的標(biāo)具有特殊的標(biāo)記基因記基因2.基因工程的操作程序基因工程的操作程序(1)目的基因的獲取目的基因的獲取從基因文庫(kù)中獲取。從基因文庫(kù)中獲取。利用利用PCR技術(shù)擴(kuò)增:其實(shí)質(zhì)是在體外對(duì)目的基因進(jìn)行大技術(shù)擴(kuò)增:其實(shí)質(zhì)是在體外對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。量復(fù)制。用化學(xué)方法人工合成用化學(xué)方法人工合成a.對(duì)于核苷酸序列已知的直接人工合成。對(duì)于核苷酸序列已知的直接人工合成。b.可通過(guò)反
4、轉(zhuǎn)錄法獲取,即可通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法獲取,即mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶單鏈單鏈DNADNA聚合酶聚合酶雙鏈雙鏈DNA。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的組成:目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)基因表達(dá)載體的組成:目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因復(fù)制原點(diǎn)。記基因復(fù)制原點(diǎn)?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建方法基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞生物種類生物種類植物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通因槍法、花粉管通道法等道法等顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞法法(Ca2處處理法理法)受體細(xì)胞受
5、體細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵受精卵原核細(xì)胞原核細(xì)胞(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定目的基因的檢測(cè)與鑒定類型類型步驟步驟檢測(cè)內(nèi)容檢測(cè)內(nèi)容方法方法結(jié)果顯示結(jié)果顯示分子分子檢測(cè)檢測(cè)第一步第一步目的基因是否進(jìn)目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞入受體細(xì)胞DNA分子雜交分子雜交(DNA和和DNA之間之間)是否成功顯示是否成功顯示出雜交帶出雜交帶第二步第二步目的基因是否轉(zhuǎn)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出錄出mRNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)(DNA和和mRNA之之間間)是否成功顯示是否成功顯示出雜交帶出雜交帶第三步第三步目的基因是否翻目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)譯出蛋白質(zhì)抗原抗原抗體雜交抗體雜交是否成功顯示是否成功顯示出雜交帶出雜交帶個(gè)體個(gè)體水平
6、水平鑒定鑒定做抗蟲(chóng)或抗病的接種實(shí)驗(yàn),以確定是否有做抗蟲(chóng)或抗病的接種實(shí)驗(yàn),以確定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程產(chǎn)品與天抗性以及抗性的程度;基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較,以確定功能然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較,以確定功能是否相同是否相同1.攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過(guò)分子檢攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過(guò)分子檢測(cè)測(cè)(2014天津,天津,4A)( )2.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定必須通過(guò)分子檢轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定必須通過(guò)分子檢測(cè)測(cè)(2014天津,天津,4C)( )3.一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸
7、序列苷酸序列(2007全國(guó)全國(guó),4A)( )4.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸(2010浙江,浙江,2A)( )錯(cuò)混診斷錯(cuò)混診斷5.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)(2011浙江,浙江,6B)( )6.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整整合到細(xì)菌合到細(xì)菌DNA上,屬于基因工程上,屬于基因工程(2010大綱全國(guó)大綱全國(guó),5D)( )7.轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物,不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物,不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加增加
8、(2010江蘇,江蘇,18B)( )8.重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)橹亟M質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧分子脫氧核糖和磷酸交替連接核糖和磷酸交替連接(2013安徽,安徽,6C)( )9.應(yīng)用應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)目的基因的存在及其完全表達(dá)(2011四川,四川,5D)( )10.動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)(2010江蘇,江蘇,18C)( )命題視角命題視角題組題組對(duì)基因工程的操作工具與操作步驟綜合考查對(duì)基因工程的操作工具與操作步驟綜合考查1.(
9、2014重慶,重慶,4)下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述,正確的是圖。以下相關(guān)敘述,正確的是()A.的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與聚合酶參與B.侵染植物細(xì)胞后,重組侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到質(zhì)粒整合到的染色體上的染色體上C.的染色體上若含抗蟲(chóng)基因,則的染色體上若含抗蟲(chóng)基因,則就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀D.只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異解析解析A項(xiàng),項(xiàng),為重組為重組Ti質(zhì)粒,其構(gòu)建需要限制性核質(zhì)粒,其構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和酸
10、內(nèi)切酶和DNA連接酶。連接酶。B項(xiàng),含重組項(xiàng),含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后,重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細(xì)胞質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細(xì)胞()的染色體上,的染色體上,而并非整個(gè)重組而并非整個(gè)重組Ti質(zhì)粒整合到質(zhì)粒整合到的染色體上。的染色體上。C項(xiàng),目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能進(jìn)行表達(dá),項(xiàng),目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能進(jìn)行表達(dá),所以抗蟲(chóng)基因?qū)胫参锛?xì)胞后,培育成的植株也不一所以抗蟲(chóng)基因?qū)胫参锛?xì)胞后,培育成的植株也不一定具有抗蟲(chóng)性狀。定具有抗蟲(chóng)性狀。D項(xiàng),轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株是否培育成功,可以從個(gè)體水項(xiàng),轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株是否培育成功,可以從個(gè)體水平上進(jìn)行
11、檢測(cè),即觀察植株是否具有抗蟲(chóng)性狀,如果平上進(jìn)行檢測(cè),即觀察植株是否具有抗蟲(chóng)性狀,如果具有抗蟲(chóng)性狀則說(shuō)明發(fā)生了可遺傳變異具有抗蟲(chóng)性狀則說(shuō)明發(fā)生了可遺傳變異(基因重組基因重組)。答案答案D2.(2014海南,海南,31)下面是將某細(xì)菌的基因下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),制備菌內(nèi),制備“工程菌工程菌”的示意圖。的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)獲得獲得A有兩條途徑:一是以有兩條途徑:一是以A的的mRNA為模板,在為模板,在_的催化下,合成互補(bǔ)的單鏈的催化下,合成互補(bǔ)的單鏈DNA,然后,然后在在_作用下合成雙鏈作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所,從而獲得所需基因;二是根據(jù)目標(biāo)蛋白
12、質(zhì)的需基因;二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的_序列,推序列,推測(cè)出相應(yīng)的測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,推測(cè)其推測(cè)其DNA的的_序列,再通過(guò)化學(xué)方法序列,再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。合成所需基因。(2)利用利用PCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí),需要在反應(yīng)體系中添加時(shí),需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有的有機(jī)物質(zhì)有_、_、4種脫氧核苷酸和種脫氧核苷酸和耐熱性的耐熱性的DNA聚合酶,擴(kuò)增過(guò)程可以在聚合酶,擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中擴(kuò)增儀中完成。完成。(3)由由A和載體和載體B拼接形成的拼接形成的C通常稱為通常稱為_(kāi)。(4)在基因工程中,常用在基因工程中,常用Ca
13、2處理處理D,其目的是,其目的是_。解析解析(1)利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過(guò)程是:以利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過(guò)程是:以mRNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA,然后在,然后在DNA聚合酶的作用下,合成雙鏈聚合酶的作用下,合成雙鏈DNA分子;根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過(guò)程是:根據(jù)分子;根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過(guò)程是:根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測(cè)相應(yīng)的目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測(cè)相應(yīng)的mRNA序列,序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,推測(cè)然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,推測(cè)DNA中脫氧核苷酸中脫氧核苷酸的排列順序,通過(guò)化學(xué)方法合成。的排列順序,
14、通過(guò)化學(xué)方法合成。(2)PCR過(guò)程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條過(guò)程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。件。(3)目的基因和載體結(jié)合,形成基因表達(dá)載體。目的基因和載體結(jié)合,形成基因表達(dá)載體。(4)在利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí),需要先用在利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí),需要先用Ca2處理,處理,使之成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于其吸收重組使之成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于其吸收重組DNA分子。分子。答案答案(1)逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶聚合酶氨基酸氨基酸脫氧核苷脫氧核苷酸酸(2)引物引物模板模板(A基因基因)(3)基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體(4)使使其成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于吸收重組其成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于吸
15、收重組DNA分子分子總結(jié)提升總結(jié)提升比較限制酶、比較限制酶、DNA連接酶、連接酶、DNA聚合酶和解旋酶聚合酶和解旋酶項(xiàng)目項(xiàng)目限制酶限制酶DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用作用底物底物DNA分子分子 DNA分子片段分子片段 脫氧核苷酸脫氧核苷酸DNA分子分子作用作用部位部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二磷酸二酯鍵酯鍵堿基對(duì)間堿基對(duì)間的氫鍵的氫鍵作用作用結(jié)果結(jié)果形成黏性末形成黏性末端或平末端端或平末端形成重組形成重組DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子形成單鏈形成單鏈DNA分分子子考點(diǎn)二考點(diǎn)二細(xì)胞工程細(xì)胞工程u重點(diǎn)提煉重點(diǎn)提煉u命題視角命題視角 題組一題組
16、一從植物細(xì)胞工程進(jìn)行命題從植物細(xì)胞工程進(jìn)行命題 題組二題組二從動(dòng)物細(xì)胞工程展開(kāi)命題從動(dòng)物細(xì)胞工程展開(kāi)命題重點(diǎn)提煉重點(diǎn)提煉1.細(xì)胞工程的幾個(gè)流程圖比較細(xì)胞工程的幾個(gè)流程圖比較細(xì)胞工程技術(shù)細(xì)胞工程技術(shù)技術(shù)過(guò)程圖示技術(shù)過(guò)程圖示植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)胞培養(yǎng)植物體細(xì)植物體細(xì)胞雜交胞雜交動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞的融合的融合核移植核移植單克隆單克隆抗體的抗體的制備制備2.容易混淆的三種細(xì)胞容易混淆的三種細(xì)胞雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,兩種細(xì)胞去掉雜種細(xì)胞:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)
17、體出細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞?,F(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。(2)重組細(xì)胞:體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之重組細(xì)胞:體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。(3)雜交細(xì)胞:動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)雜交細(xì)胞:動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。胞。3.從結(jié)果來(lái)分析原理從結(jié)果來(lái)分析原理(1)植物體細(xì)胞雜交:植物體細(xì)胞雜交包含兩個(gè)過(guò)程,植物體細(xì)胞雜交:植物體細(xì)胞雜交包含兩個(gè)過(guò)程,一是植物細(xì)胞融合,二是雜種細(xì)胞的植物組織培養(yǎng)。一是植物細(xì)胞融合,二是雜種細(xì)胞的植物組織培養(yǎng)。其最終結(jié)果是形成
18、雜種植株,產(chǎn)生了一個(gè)生物體,因其最終結(jié)果是形成雜種植株,產(chǎn)生了一個(gè)生物體,因此其原理是:細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。此其原理是:細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合:動(dòng)物細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞,雜交動(dòng)物細(xì)胞融合:動(dòng)物細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞,雜交細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細(xì)胞,但沒(méi)有形細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細(xì)胞,但沒(méi)有形成生物體,因此動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞增殖和細(xì)成生物體,因此動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的流動(dòng)性,不包含細(xì)胞全能性。胞膜的流動(dòng)性,不包含細(xì)胞全能性。4.對(duì)細(xì)胞核移植技術(shù)的分析對(duì)細(xì)胞核移植技術(shù)的分析(1)細(xì)胞核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞并發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體
19、,細(xì)胞核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞并發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體,體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(2)克隆屬于無(wú)性繁殖,產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性克隆屬于無(wú)性繁殖,產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。狀與供核親本一致。(3)核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀不完全相同的核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀不完全相同的原因:原因:克隆動(dòng)物絕大部分克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核,但來(lái)自于供體細(xì)胞核,但其線粒體中的其線粒體中的DNA來(lái)自于去核卵細(xì)胞。來(lái)自于去核卵細(xì)胞。性狀受基因與性狀受基因與環(huán)境共同影響。環(huán)境共同影響。在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中有可能發(fā)生基
20、因突在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中有可能發(fā)生基因突變,產(chǎn)生供核動(dòng)物沒(méi)有的性狀。變,產(chǎn)生供核動(dòng)物沒(méi)有的性狀。1.產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選必抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選必須通過(guò)分子檢測(cè)須通過(guò)分子檢測(cè)(2014天津,天津,4B)( )三體綜合征的診斷必須通過(guò)分子檢測(cè)三體綜合征的診斷必須通過(guò)分子檢測(cè)(2014天津,天津,4D)( )3.培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)(2012廣東,廣東,2A)( )4.去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理胞均需酶處理(2008全國(guó)全國(guó),5B
21、)( )錯(cuò)混診斷錯(cuò)混診斷5.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞細(xì)胞(2010浙江,浙江,4A)( )6.動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性性(2012江蘇,江蘇,22C)( )7.體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體(2011江蘇,江蘇,14B)( )8.單克隆抗體技術(shù)可以用于治療老年癡呆癥單克隆抗體技術(shù)可以用于治療老年癡呆癥(2010江蘇,江蘇,17C)( )命題視角命題視角題組一題組一從植物細(xì)胞工程進(jìn)行命題從植物細(xì)胞工程進(jìn)行命
22、題(1)培育胚狀體利用了培育胚狀體利用了_這一項(xiàng)生物技術(shù),這一項(xiàng)生物技術(shù),胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng),則可培育出完整的植株,這體現(xiàn)了胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng),則可培育出完整的植株,這體現(xiàn)了_。培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)外,還必須。培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)外,還必須含有含有_等植物激素,還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格等植物激素,還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的的_。(2)如果愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,若為了獲得三如果愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物,則只需要培養(yǎng)到七的細(xì)胞產(chǎn)物,則只需要培養(yǎng)到_;若為了獲;若為了獲得三七的人工種子,則需要培養(yǎng)到得三七的人工種子,則需要培養(yǎng)到_。如果愈。如果愈傷組
23、織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,通過(guò)基因工程要獲取抗蟲(chóng)傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,通過(guò)基因工程要獲取抗蟲(chóng)棉,目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是棉,目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是_法。法。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過(guò)程中,必須要從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過(guò)程中,必須要經(jīng)過(guò)經(jīng)過(guò)_。無(wú)絲分裂無(wú)絲分裂有絲分裂有絲分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞融合細(xì)胞融合脫脫分化分化再分化再分化解析解析(1)離體植物細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織,通離體植物細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織,通過(guò)再分化形成具有根和芽的胚狀體,再通過(guò)細(xì)胞分裂、過(guò)再分
24、化形成具有根和芽的胚狀體,再通過(guò)細(xì)胞分裂、分化發(fā)育成一個(gè)完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培分化發(fā)育成一個(gè)完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng),其原理為植物細(xì)胞的全能性。培養(yǎng)基的成分為水、養(yǎng),其原理為植物細(xì)胞的全能性。培養(yǎng)基的成分為水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素?zé)o機(jī)鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長(zhǎng)素和生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等細(xì)胞分裂素等)等;培養(yǎng)基要求進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。等;培養(yǎng)基要求進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。(2)三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,將三七葉肉細(xì)三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,將三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織即可;獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀胞培養(yǎng)到愈傷組織即可;獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體;
25、棉花為雙子葉植物,導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)體;棉花為雙子葉植物,導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法?;?。(3)離體葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體的過(guò)程中必須經(jīng)過(guò)脫分離體葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體的過(guò)程中必須經(jīng)過(guò)脫分化和有絲分裂形成愈傷組織,再分化和有絲分裂形成化和有絲分裂形成愈傷組織,再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。具有根和芽的胚狀體。答案答案(1)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞分細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素裂素、生長(zhǎng)素滅菌滅菌(2)愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化(3)2.下圖是細(xì)胞融合示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:下圖是細(xì)胞融合示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程過(guò)
26、程應(yīng)使用應(yīng)使用_處理細(xì)處理細(xì)胞,以去除植物細(xì)胞壁。胞,以去除植物細(xì)胞壁。(2)如果將已去除細(xì)胞壁的植物細(xì)胞放入等滲溶液中,如果將已去除細(xì)胞壁的植物細(xì)胞放入等滲溶液中,細(xì)胞呈現(xiàn)什么形狀?細(xì)胞呈現(xiàn)什么形狀?_。(3)過(guò)程過(guò)程的誘導(dǎo)方法有的誘導(dǎo)方法有_和和_兩大兩大類。類。(4)過(guò)程過(guò)程是細(xì)胞壁的再生過(guò)程,與此過(guò)程密切相關(guān)的是細(xì)胞壁的再生過(guò)程,與此過(guò)程密切相關(guān)的細(xì)胞器是細(xì)胞器是_。(5)過(guò)程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是過(guò)程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是_,該過(guò)程,該過(guò)程先誘導(dǎo)細(xì)胞分裂形成先誘導(dǎo)細(xì)胞分裂形成_,再由它分化形成雜種植,再由它分化形成雜種植物幼苗。物幼苗。(6)融合的細(xì)胞需要在培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。人工合成
27、的融合的細(xì)胞需要在培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。人工合成的培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機(jī)添加物、無(wú)機(jī)物質(zhì)培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機(jī)添加物、無(wú)機(jī)物質(zhì)外,外,_是植物細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植物幼苗不是植物細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植物幼苗不能缺少的調(diào)節(jié)物質(zhì)。能缺少的調(diào)節(jié)物質(zhì)。解析解析(1)過(guò)程過(guò)程應(yīng)使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞應(yīng)使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。壁獲得原生質(zhì)體。(2)去除細(xì)胞壁的原生質(zhì)體是球形的,在等滲溶液中,去除細(xì)胞壁的原生質(zhì)體是球形的,在等滲溶液中,細(xì)胞形態(tài)不變。細(xì)胞形態(tài)不變。(3)用物理法和化學(xué)法可誘導(dǎo)過(guò)程用物理法和化學(xué)法可誘導(dǎo)過(guò)程完成原生質(zhì)體融合。完成原生質(zhì)體融合。(4)高爾基體與植物細(xì)
28、胞壁的形成有關(guān)。高爾基體與植物細(xì)胞壁的形成有關(guān)。(5)雜種植株形成雜種幼苗的過(guò)程中進(jìn)行的是有絲分裂,雜種植株形成雜種幼苗的過(guò)程中進(jìn)行的是有絲分裂,該過(guò)程先經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織,再由它分化形成該過(guò)程先經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織,再由它分化形成雜種植物幼苗。雜種植物幼苗。(6)植物組織培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機(jī)添加植物組織培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機(jī)添加物、無(wú)機(jī)物質(zhì)外,還需要加入植物激素物、無(wú)機(jī)物質(zhì)外,還需要加入植物激素(或生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物或生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)質(zhì)),誘導(dǎo)愈傷組織完成再分化過(guò)程,形成雜種植物幼,誘導(dǎo)愈傷組織完成再分化過(guò)程,形成雜種植物幼苗。苗。答案答案(1)纖維素酶、果膠酶纖維素酶、果膠
29、酶(2)球形球形(3)物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法(4)高爾基體高爾基體(5)有絲分裂有絲分裂愈傷組織愈傷組織(6)植物激素植物激素(或生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)或生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì))易錯(cuò)警示易錯(cuò)警示1.雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志:新的細(xì)胞壁的生成。雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志:新的細(xì)胞壁的生成。2.雜種植株遺傳物質(zhì)的變化:雜種植株的變異類型屬雜種植株遺傳物質(zhì)的變化:雜種植株的變異類型屬于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)目通常是兩親本于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)目通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體。細(xì)胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體。命題視角命題視角題組二題組二從動(dòng)物細(xì)胞工程展開(kāi)命題從動(dòng)物細(xì)胞工程展開(kāi)命題
30、3.動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)的影響的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)與體細(xì)胞的增殖相比,癌細(xì)胞的細(xì)胞周期與體細(xì)胞的增殖相比,癌細(xì)胞的細(xì)胞周期_(填填“較長(zhǎng)較長(zhǎng)”“”“較短較短”或或“不變不變”)。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是其原因是_。(3)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)
31、行,CO2的作的作用是用是_。(4)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,正常細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),其生長(zhǎng)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,正常細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),其生長(zhǎng)_。藥物實(shí)驗(yàn)需要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,。藥物實(shí)驗(yàn)需要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,癌細(xì)胞比正常細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更癌細(xì)胞比正常細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更_。(5)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的入適量的_。解析解析(1)與體細(xì)胞相比較,癌細(xì)胞分裂速度更快,細(xì)胞周與體細(xì)胞相比較,癌細(xì)胞分裂速度更快,細(xì)胞周期較短。期較短。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常要在培養(yǎng)基中加入血清等物質(zhì),血?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常要在培
32、養(yǎng)基中加入血清等物質(zhì),血清含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其他活性物質(zhì),能促清含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖。進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖。(3)向培養(yǎng)基中通入一定濃度的向培養(yǎng)基中通入一定濃度的CO2以維持培養(yǎng)液的以維持培養(yǎng)液的pH。(4)正常細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,使其生長(zhǎng)正常細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,使其生長(zhǎng)停止;因?yàn)榘┘?xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,能無(wú)限增殖,因停止;因?yàn)榘┘?xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,能無(wú)限增殖,因此傳代次數(shù)更多。此傳代次數(shù)更多。(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)向培養(yǎng)液中加入適量的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素以防止細(xì)胞培
33、養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染。抗生素以防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染。答案答案(1)較短較短(2)血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)的物質(zhì)(3)維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pH(4)停止停止多多(5)抗生抗生素素4.(2014新課標(biāo)新課標(biāo),40)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)分別免疫分別免疫3只同種小鼠只同種小鼠(X、Y和和Z),每只小鼠免疫,每只小鼠免疫5次,每次免次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。,結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取
34、免疫后小鼠的若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為染色體數(shù)目為40條條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠,并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為染色體數(shù)目為60條條)按一定比例加入試管按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞??贵w的雜交瘤細(xì)胞?;卮鹣铝袉?wèn)題:回答下列問(wèn)題:(1)制備融合所需的制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最
35、少需要經(jīng)過(guò)以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這這3只免疫小鼠中,最適合用于制備只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的淋巴細(xì)胞的是是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是類型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是最多是_條。條。(4)未融合的未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是原因是_。解析解析(1)據(jù)圖分析可知,第四次注射后據(jù)圖分析可知,第四次注射后X、Y、Z小小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16000以上,小鼠以上,小鼠Y的的血清抗體效價(jià)最高,最適合用于制備單克隆抗體。血清抗體效價(jià)最高,最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和還有骨髓瘤細(xì)
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