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1、中華蘆薈多糖對(duì)小鼠急性肝損傷保護(hù)作用 【摘要】 目的 研究中華蘆薈多糖(AP)對(duì)急性肝損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。方法 選用昆明種小鼠,179,358,717mg/(kg·bw)3種劑量中華蘆薈多糖分別灌胃給藥,用四氯化碳(CCl4)造成急性肝損傷,測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、肝臟組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。結(jié)果 3種劑量的中
2、華蘆薈多糖均能顯著地降低小鼠血清ALT和AST活性,提高小鼠肝臟SOD活性,降低肝臟MDA含量。結(jié)論 中華蘆薈多糖能夠?qū)τ伤穆然?CCl4)所造成的急性肝臟損傷起保護(hù)作用,其機(jī)制與提高小鼠的抗氧化能力有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】 中華蘆薈多糖中華蘆薈多糖(AP)是中華蘆薈中重要的生物活性成分,具有免疫調(diào)節(jié)功能、促進(jìn)血細(xì)胞生成、抗癌、抗真菌、抗病毒和抗輻射損傷等作用。但目前總體上對(duì)蘆薈多糖的研究無(wú)論在化學(xué)結(jié)構(gòu)還是藥理活性方面均較少1。四氯化碳(CCl4)作為一種趨肝毒物,經(jīng)代謝產(chǎn)生CCl4自由基,作用于肝細(xì)胞并和膜上的不飽和脂質(zhì)共價(jià)結(jié)合,使脂質(zhì)過(guò)氧化,引起肝細(xì)胞壞死,導(dǎo)致肝臟的急性損傷。本文利用CCl4
3、小鼠急性肝損傷模型,研究中華蘆薈多糖對(duì)急性肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。1 材料與方法11 材料 提取中華蘆薈多糖2(批號(hào):20040711,經(jīng)測(cè)定含量達(dá)9932);四氯化碳(CCl4)(進(jìn)口分裝,湖北大學(xué)化工廠);昆明種小鼠(廣州九佛實(shí)驗(yàn)動(dòng)物廠);丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒(上海申能生物技術(shù)有限公司,批號(hào)為050408)。天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒(上海申能生物技術(shù)有限公司,批號(hào)為050814)。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒(南京? ( 中華蘆薈多糖對(duì)小鼠急性肝損傷保護(hù)作用 ) 繕錒萄芯克?。12 方法 取昆明種小鼠72只,雌雄各半,稱重,隨機(jī)分為正常對(duì)照
4、組、模型(CCl4)對(duì)照組、聯(lián)苯雙酯陽(yáng)性對(duì)照組;另按179,358,717mg/(kg·bw)的給藥劑量設(shè)AP高、中、低劑量組,每組小鼠12只。第15d,聯(lián)苯雙酯陽(yáng)性對(duì)照組、中華蘆薈多糖高、中、低劑量組每日灌胃給藥1次,正常對(duì)照組與模型對(duì)照組灌胃給予等體積的飲用水。第5d給藥后1h,除正常對(duì)照組皮下注射等體積生理鹽水外,其他各組皮下注射05 CCl4花生油,10ml/(kg·bw)皮下注射CCl4后禁食24h,再給藥或飲用水1次;1h后斷頭取血,離心,測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活力。采血后,立即取出肝臟,用濾紙吸干,稱重,然后制備1
5、0的勻漿液,5000r/min離心25min(04),取上清液,在14的冰箱保存,以測(cè)SOD活性及MDA含量。13 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS100軟件進(jìn)行顯著性t檢驗(yàn)。2 結(jié)果21 對(duì)血清轉(zhuǎn)氨酶的影響 中華蘆薈多糖對(duì)CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清中ALT、AST的影響,見(jiàn)表1。表1 AP對(duì)CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷血清中ALT和AST的影響(略)注:與模型對(duì)照組比較,* P<005,* P<001;n=12小鼠皮下注射CCl4誘導(dǎo)后24h,模型對(duì)照組小鼠血清中ALT和AST水平明顯高于正常對(duì)照組。中華蘆薈多糖各劑量組與聯(lián)苯雙酯陽(yáng)性對(duì)照組血清中ALT和AST活力明顯低于模型對(duì)照組,
6、中華蘆薈多糖可明顯對(duì)抗CCl4誘導(dǎo)ALT和AST的升高,并呈現(xiàn)較好的量效關(guān)系。22 對(duì)肝臟SOD和MDA的影響 中華蘆薈多糖對(duì)CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠肝臟中SOD和MDA的影響。小鼠皮下注射CCl4誘導(dǎo)后24h,模型對(duì)照組小鼠肝臟中SOD活性明顯低于正常對(duì)照組,MDA含量明顯高于正常對(duì)照組水平。中華蘆薈多糖各劑量組與聯(lián)苯雙酯陽(yáng)性對(duì)照組可明顯升高SOD活性,并使肝臟中MDA水平明顯低于模型對(duì)照組,見(jiàn)表2。表2 AP對(duì)CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷肝臟SOD和MDA的影響(略)注:與模型對(duì)照組比較,* P<005,* P<001;gww表示每克肝組織濕重;n=123 討論蘆薈含有多種
7、有效成分,蘆薈水溶液在體外能夠清除超氧陰離子,阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng),具有與SOD相同的效果3。蘆薈多糖作為蘆薈的主要有效成分之一,具有抗炎、抗菌、抗腫瘤等作用。庫(kù)拉索蘆薈多糖的體外研究表明,蘆薈多糖具有較高的清除超氧陰離子自由基和H2O2的能力4,并且能夠降低大鼠內(nèi)毒素所誘導(dǎo)的高脂質(zhì)過(guò)氧化水平,且作用效果相當(dāng)于公認(rèn)的氧自由基清除劑維生素E5。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,中華蘆薈多糖對(duì)CCl4所致的小鼠血清ALT、AST活性升高有明顯的降低作用,并能使肝臟的SOD活性顯著升高,脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量顯著降低,量效關(guān)系明顯。提示中華蘆薈多糖能夠通過(guò)提高抗氧化酶活性,清除自由基,進(jìn)而抑制細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化、穩(wěn)定肝細(xì)
8、胞膜的結(jié)構(gòu),達(dá)到對(duì)CCl4所誘發(fā)的急性肝損傷的保護(hù)作用。? ) 靜慰嘉南住?/STRONG>1 孔祥榮,王宗偉.蘆薈多糖化學(xué)結(jié)構(gòu)與生物活性J.國(guó)外醫(yī)藥:植物藥分冊(cè),2003,18(1):7-12.2 楊安平,王宗偉,江國(guó)森.中華蘆薈多糖提取和測(cè)定方法研究J.九江醫(yī)學(xué),2002,17(4):190-191.3 任岱,王一凡,姚銀秀,等.蘆薈對(duì)超氧陰離子自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的影響J.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,1999,(9)6:22-24.4 吳廣楓,湯堅(jiān).蘆薈多糖的純化與體外抗氧化活性的研究J.鄭州工程學(xué)院學(xué)報(bào),2002,2(32):75-78.5 王莉,包旭,岑小波,等.巴巴多斯蘆薈多糖對(duì)內(nèi)毒素化大鼠和正常高齡大鼠血清及肝組織過(guò)氧化脂質(zhì)的影響J.華西藥學(xué)雜志,2002,17(1
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