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文檔簡(jiǎn)介
1、中 藥 藥 理 實(shí) 驗(yàn) 指 導(dǎo) 云南中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)院中 藥 藥 理 實(shí) 驗(yàn) 室第一章 作用于消化系統(tǒng)藥理實(shí)驗(yàn)消化系統(tǒng)由消化道和與其相連的許多消化腺組成,消化道通過運(yùn)動(dòng)將消化道內(nèi)容物得到混合并向消化道遠(yuǎn)端推送,消化腺通過分泌消化液消化食物,使食物被分解為小分子物質(zhì)有助于吸收。統(tǒng)消化系統(tǒng)藥物研究主要包括消化器官運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)、消化器官分泌實(shí)驗(yàn)、抗?jié)?、抗肝損傷、利膽等藥理實(shí)驗(yàn)方法。消化器官運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)方法分為離體消化道器官標(biāo)本運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)和在體消化道器官運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)。離體器官標(biāo)本運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn): 一般選用兔、豚鼠和大鼠的胃、腸、膽囊等器官的腸段或肌片,在恒溫及充氧的營養(yǎng)液中通過拉力傳感器與記錄儀連接,將藥物直接加入浴柄槽
2、內(nèi),描記胃腸平滑肌收縮振幅、收縮頻率、收縮張力的變化。在體器官運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn):胃排空,腸推進(jìn),壓敏傳感器測(cè)定囊內(nèi)壓,貼壁傳感器測(cè)定胃、腸壁平滑肌或膽囊舒縮運(yùn)動(dòng),以及生物電研究消化器官電生理變化等方法。消化器官分泌實(shí)驗(yàn)主要通過插管或造瘺等方法收集胃液、腸液、胰液及膽汁,然后對(duì)上述消化液進(jìn)行分析。胃酸測(cè)定可用酸堿滴定法或酸度計(jì)測(cè)定法,胃蛋白酶測(cè)定可用凝乳法、麥特 (Mett)毛細(xì)玻管法、hmon-Mimhy 改良法等, 糜蛋白酶測(cè)定可用分光光度法、合成多肽法等???jié)儗?shí)驗(yàn)是在建立實(shí)驗(yàn)性潰瘍模型的基礎(chǔ)上,觀察藥物對(duì)胃黏膜損傷的保護(hù)作用。引起實(shí)驗(yàn)性潰瘍的方法分為急性潰瘍與慢性潰瘍兩大類。急性潰瘍模型有: 幽
3、門結(jié)扎性潰瘍、應(yīng)激性潰瘍(水浸、寒冷、失血性休克)、藥物誘發(fā)必型潰瘍 ( 非甾體類抗炎藥、組胺、利血平等) 、黏膜壞死物質(zhì)型潰瘍(100%乙醇、0.6N HC、25%NC)等;慢性潰瘍模型有:醋酸燒灼性潰瘍,熱燒灼性潰瘍等,使用動(dòng)物多為大鼠。同時(shí)還可測(cè)定胃組織中相關(guān)活性物質(zhì)的含量,如前列腺素、氨基己糖、 CAMP、5- 羥色膠、組胺、胃黏膜血液量等物質(zhì),可對(duì)藥作用機(jī)制進(jìn)行研究 。引起實(shí)驗(yàn)性肝損傷的方法有:急性中毒性肝炎、肝壞死模型: 四氯化碳肝損傷模型、撲熱息痛肝損傷模型、D-半乳糖胺肝損傷模型等。脂肪肝、肝纖維化、肝硬化模型:乙硫氨酸脂肪肝模型、二甲基亞硝胺肝纖維化模型、四氯化碳反復(fù)給予肝硬
4、化模型等。阻塞性黃疸模型:一茶異硫氨酸醋或膽管結(jié)扎均可致膽汁郁積型黃疸模型。免疫性肝損傷模型:取異種或同種動(dòng)物的肝提取物作為抗原免疫純系小鼠可制備該模型??蓹z測(cè)的指標(biāo)有血清或肝臟AST 、AIT 活性,P-450 活性,肝糖原、血清總蛋白、白蛋白含量,血NH3、膽紅素濃度等。作為抗脂肪肝、肝硬化藥物,還可檢測(cè)肝臟膠原蛋白含量、凝血酶時(shí)間等,同時(shí)可進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。利膽實(shí)驗(yàn)主要有正常大鼠的膽汁流量測(cè)定,離體膽囊肌片舒縮活動(dòng)描記、整體動(dòng)物的膽道內(nèi)壓測(cè)定, 由細(xì)菌造成化膿性膽管炎后對(duì)模型動(dòng)物的膽汁流量、膽汁成分含量、 od 氏括約肌張力等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,對(duì)膽石標(biāo)本進(jìn)行膽固醇、鈣、膽紅素等成分的含量測(cè)
5、定等。涉及消化系統(tǒng)藥理實(shí)驗(yàn)方法研究的常見中藥有理氣藥、溫里藥、補(bǔ)氣健脾藥。第一節(jié) 藥物對(duì)小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的影響一、藥物對(duì)小鼠胃排空的作用【目的】 學(xué)習(xí)小鼠胃排空的實(shí)驗(yàn)方法。觀察胃動(dòng)力藥及健脾行氣藥物對(duì)胃排空功能的影響?!驹怼课概趴帐侵肝竷?nèi)食糜由胃排入十二指腸的過程。 進(jìn)食后近端胃可通過迷走神經(jīng)調(diào)節(jié)而出現(xiàn)受容性舒張,起到暫時(shí)容納與儲(chǔ)存食物的作用,然后通過緩慢持續(xù)地收縮,壓迫其內(nèi)容物向胃竇方向移動(dòng),再依賴胃竇收縮及胃和十二指腸協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)而排空。通過觀察胃動(dòng)力藥嗎丁琳及健脾行氣藥枳術(shù)丸對(duì)小鼠定量灌服營養(yǎng)性半固體糊劑20分鐘后,胃全重和胃凈重之差的胃內(nèi)殘留物重量,計(jì)算胃內(nèi)殘留物占所灌半固體糊的重量百分比為
6、胃內(nèi)殘留率,可了解藥物對(duì)胃排空運(yùn)動(dòng)的影響。【材料】動(dòng)物:小鼠,體重1822g。藥品:lmg/ml嗎丁琳混懸液、1g/ml枳術(shù)丸水煎劑。營養(yǎng)性半固體糊劑: 16g奶粉、8g葡萄糖、8g淀粉,攪拌均勻,加以蒸餾水至300ml攪拌均勻。主要器材:手術(shù)器械、電子天平、小燒杯、小鼠灌胃器?!痉椒ā咳⌒∈?, 禁食不禁水18h 后,稱重, 編號(hào),隨機(jī)分成三組。各組均按0.2 ml/10g體積灌胃給藥,空白對(duì)照組給予等容積蒸餾水,50 min后各組均ig給予營養(yǎng)性半固體糊 0.6 ml/只。20min后脫頸椎處死動(dòng)物,剖開腹腔,結(jié)扎胃賁門和幽門后,取胃,用濾紙拭干后稱全重,然后沿胃大彎剪開胃體,洗去胃內(nèi)容物
7、后拭干,稱凈重。以胃全重和胃凈重的差值為胃內(nèi)殘留物重,胃內(nèi)殘留物重占所灌半固體糊的重量百分比為胃內(nèi)殘留率。胃中殘留率 (%)=胃中殘留物/所灌半固體糊X100%實(shí)驗(yàn)結(jié)束后數(shù)據(jù)作全班統(tǒng)計(jì),計(jì)算各組胃中殘留率的平均數(shù) (X) 和標(biāo)準(zhǔn)差 (s), 以t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)法進(jìn)行組間比較?!窘Y(jié)果】將結(jié)果填入表 7-1-1 中。表 7-1-1 嗎丁啉對(duì)小鼠胃排空的影響組別 劑量 (g/kg) 動(dòng)物數(shù) (n) 胃中殘留率 (%)'空白對(duì)照組 嗎丁琳組枳術(shù)丸組【注意事項(xiàng)】實(shí)驗(yàn)前小鼠必須嚴(yán)格禁食18h, 最好將小鼠置于能漏出糞便的代謝籠內(nèi)。解剖分離胃體的部位應(yīng)盡量仔細(xì), 以胃內(nèi)容物漏出影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如是觀察濃度較
8、大中藥煎劑的作用要注意藥物殘留也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。胃內(nèi)容物的性狀與化學(xué)成分均可影響胃排空和速度。【思考題】嗎丁琳的主要藥理作用有哪些 ? 其促進(jìn)胃排空的作用機(jī)制是什么 ?從藥理學(xué)的角度解釋枳術(shù)丸組為什么常用于功能性消化不良的治療?二、藥物對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影晌【目的】學(xué)習(xí)用炭未推進(jìn)法測(cè)定動(dòng)物小腸運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)方法。觀察M受體阻斷藥阿托品和瀉下藥芒硝對(duì)小腸運(yùn)動(dòng)的影響?!驹怼肯軆?nèi)容物的移動(dòng)速度與胃排出時(shí)間、小腸的運(yùn)動(dòng)及消化管內(nèi)容物的流動(dòng)性有關(guān)。小腸的運(yùn)動(dòng)受腸神經(jīng)及外來神經(jīng)的控制,當(dāng)機(jī)械和化學(xué)的刺激作用于腸壁感受器時(shí),可通過局部的壁內(nèi)反射而引起小腸蠕動(dòng)增加,而副交感神經(jīng)興奮時(shí)可增強(qiáng)小腸運(yùn)動(dòng),交感神經(jīng)興
9、奮則產(chǎn)生抑制作用。利用口服炭末在腸道不被吸收的原理,以炭末作為指示劑,測(cè)定在一定時(shí)間內(nèi)炭末在腸道的推進(jìn)距離,可觀察M受體阻斷藥和瀉下藥對(duì)小腸推進(jìn)的作用?!静牧稀縿?dòng)物 : 小鼠,體重 1822g 。藥品 :用含有2%阿拉伯膠的水溶液制成12%活性炭末混懸液、生理鹽水、鹽酸阿托品、100%芒硝水溶液。主要器材 : 手術(shù)剪、眼科懾、直尺、注射器、灌胃針?!痉椒ā咳〗巢唤?0h 的小鼠, 隨機(jī)分組, 稱重,編號(hào)。各給藥組動(dòng)物分別皮下注射阿托品(10/),灌胃給予200%芒硝水溶液(0.2/10),空白對(duì)照組給予等容積蒸餾水。灌胃體積均為0.2ml/10g,20 min后各組均灌胃給予10%的炭黑混
10、懸液0.6 ml/只。20min后脫頸椎處死動(dòng)物,剖開腹腔,分離腸系膜,剪取上端至幽門 ,下端至回盲部的腸管,輕輕將小腸拉直,準(zhǔn)確量取小鼠幽門至炭黑推進(jìn)前沿的長度以及小鼠小腸總長,按下式計(jì)算推進(jìn)百分率。炭黑推進(jìn)百分率(炭未從幽門部到推進(jìn)前沿的移動(dòng)距離/小鼠小腸總長)×100%實(shí)驗(yàn)結(jié)束后數(shù)據(jù)作全班統(tǒng)計(jì) , 計(jì)算各組炭末推進(jìn)百分率的平均數(shù) (X) 和標(biāo)準(zhǔn)差 (s), 以t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)法進(jìn)行組間比較。【結(jié)果】將結(jié)果填入表 7-2-1 中。表 7-2-l 阿托品、芒硝對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)作用的影響組別 劑量 (g/kg) 動(dòng)物數(shù) (n)碳末移動(dòng)距離() 小腸全長() 碳末推進(jìn)率 (%)空白對(duì)照組鹽酸阿
11、托品組芒硝水溶液組【注意事項(xiàng)】給藥至處死動(dòng)物的間隔以及處死至取出腸管的時(shí)間時(shí)間必須一致。剪取腸系膜、腸管以及拉直腸管時(shí)動(dòng)作輕柔,不可用力牽拉。當(dāng)因禁食不完全腸道內(nèi)可能出現(xiàn)食物殘留或與藥物顏色難于分辨時(shí),可剪破一點(diǎn)腸管, 擠出腸內(nèi)容物,炭末為黑色顆粒狀,食物等殘留則為褐色軟糊狀,可加以區(qū)別?!舅伎碱}】中藥瀉下藥根據(jù)瀉下作用機(jī)制可分為幾類 ? 芒硝屬于哪一類 ?阿托品的藥理作用、臨床運(yùn)用及不良反應(yīng)是什么?三、藥物對(duì)家兔在體胃腸運(yùn)動(dòng)的影響【目的】學(xué)習(xí)在體胃腸運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)方法。觀察膽堿酯酶抑制新斯的明對(duì)家兔胃腸運(yùn)動(dòng)的影響?!驹怼课敢匀鋭?dòng)的形式對(duì)胃內(nèi)食物進(jìn)行機(jī)械性消化,再將食糜排入十二指腸,小腸通過分節(jié)
12、運(yùn)動(dòng)與蠕動(dòng)使腸內(nèi)容物得到充分混合并被推向腸的遠(yuǎn)端。將腸運(yùn)動(dòng)換能器直接縫在胃壁或腸壁上,能把胃腸運(yùn)動(dòng)時(shí)平滑肌張力的變化和運(yùn)動(dòng)的頻度客觀地記錄下來?!静牧稀縿?dòng)物:家兔,體重22.5 kg。藥品:新斯的明。試劑: 烏拉坦溶液、生理鹽水。主要器材:手術(shù)器械、胃腸運(yùn)動(dòng)換能器、生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、家兔手術(shù)固定臺(tái)、注射器、紗布、縫合針線?!痉椒ā咳〗?8 h家兔,隨機(jī)分組, 稱重,編號(hào)。用烏拉坦按500mg/kg耳緣靜脈緩慢注入,麻醉后將兔背位固定于家兔手術(shù)固定臺(tái),在兔右下腹回盲部作一34cm切口,止血后暴露回盲部45cm的回腸段,將胃腸運(yùn)動(dòng)換能器按與環(huán)行腸平行的方向固定于回腸。換能器的信號(hào)輸入端與BL42
13、0E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)相連接。描記回腸收縮的胃腸運(yùn)動(dòng)換能器裝置固定后穩(wěn)定30分鐘,先記錄正?;啬c收縮曲線,然后分別腹腔注射新斯的明(0.1/)和生理鹽水,觀察2小時(shí)內(nèi)回腸收縮曲線的變化。比較收縮頻率和收縮幅度的變化,波動(dòng)次數(shù)為收縮次數(shù),上下波動(dòng)的距離為收縮幅度?!窘Y(jié)果】將結(jié)果填入表 7-2-2 中。表 7-2-2 新斯的明對(duì)家兔在體胃腸運(yùn)動(dòng)的影響 收縮頻率(次/分) 收縮幅度(cm)組 別 劑 量 給藥前 給藥后 給藥前 給藥后生理鹽水組新斯的明組【注意事項(xiàng)】縫合固定胃腸運(yùn)動(dòng)換能器時(shí)不要過度損傷胃腸管。手術(shù)以鈍性分離為主,避免出血過多?!舅伎碱}】 在體實(shí)驗(yàn)與離體實(shí)驗(yàn)各有什么優(yōu)缺點(diǎn)、新斯的明的藥理
14、作用及臨床運(yùn)用。第二節(jié) 藥物抗胃潰瘍作用的影響1、藥物對(duì)大鼠胃黏膜的保護(hù)作用【目的】學(xué)習(xí)造成大鼠急性胃潰瘍的實(shí)驗(yàn)方法。觀察理氣藥木香及調(diào)和肝脾藥痛瀉要方對(duì)胃黏膜的保護(hù)作用?!驹怼恳掖伎赏ㄟ^減少胃黏膜中前列腺素、氨基已糖含量、降低胃黏膜血流量,減少胃黏膜跨膜電位差、破壞主細(xì)胞減少黏液分泌、引起胃黏膜微循環(huán)障礙等,從而破壞了胃黏膜屏障的完整性導(dǎo)致潰瘍。觀察藥物對(duì)乙醇所致急性胃黏膜損傷程度,可了解藥物對(duì)胃黏膜的保護(hù)作用。【材料】動(dòng)物:大鼠 , 體重 200 250go藥品:0.4/木香丙酮提取物(用5倍量丙酮浸泡木香24h, 浸泡期間振搖數(shù)次,過濾,濾液揮盡丙酮后,將剩余物用適量阿拉伯樹膠及蒸鎦水
15、研磨,制成所需濃度的藥液 )、1.2g/ml 的痛瀉要方水煎液 (炒白術(shù)4Og 、炒白茍32 g、炒陳皮 19g 、防風(fēng)29g ,水煎成100ml, 紗布過濾,濾液用適量阿拉伯樹膠混懸 即得)。試劑:無水乙醇、福爾馬林溶液、生理鹽水。主要器材:大鼠固定板、大鼠灌胃器注射器、手術(shù)剪器械、直尺。 【方法】取大鼠,禁食不禁水 24h 后隨機(jī)為三組, 稱重,編號(hào)。分別灌服5%阿拉伯的水溶液及受試藥物,1小時(shí)后每只大鼠灌服無水乙醇(1/100),再過1小時(shí)用CO2處死動(dòng)物,形取胃,結(jié)扎賁門,由幽門注入1%的福爾馬林溶液液10,結(jié)扎幽門, 再將胃浸泡于1%福爾馬林溶液中10分鐘, 以固定胃內(nèi)外層。沿胃大彎
16、剪開胃,用自來水輕輕沖洗去胃內(nèi)容物,將胃平展在玻璃板上,用棉球輕輕拭去附掛于胃黏膜上的血絲, 觀察腺胃部的胃黏膜損傷程度,可見黏膜充血、水腫、縱行深褐色條索狀潰瘍,。將每只大鼠所有損傷長度的總和作為 該大鼠的潰瘍指數(shù)。也可用打分的半定量方式表示潰瘍指數(shù):瘀血點(diǎn)為1分,線狀痕血長度小于lmm 者為2分, 12mm 者為3分 ,34mm 者為4分,大于5mm 者為 5 分,全胃分?jǐn)?shù)的總和為該鼠的潰瘍指數(shù),以下列公式計(jì)算潰瘍抑制百分率和潰瘍發(fā)生百分率。潰瘍抑制百分率(%)潰瘍=對(duì)照組潰瘍指數(shù)-給藥組潰瘍指數(shù)/對(duì)照組潰瘍指數(shù)X100%潰瘍發(fā)生百分率(%)潰瘍 =形成潰瘍動(dòng)物數(shù)/實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)X100%幽門
17、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后作全班數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),計(jì)算各組潰瘍抑制百分率和潰瘍發(fā)生率的平均數(shù) ( X) 和標(biāo)準(zhǔn)差 (s), 以 t 檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)法進(jìn)行組間比較?!窘Y(jié)果】將結(jié)果填入表 7-1-1 中。表 7-1-1 木香、痛瀉要方對(duì)大鼠乙醇型粘膜損傷的影響組別 劑量(g/kg) 動(dòng)物數(shù) (n) 潰瘍指數(shù) 潰瘍抑制率 (%) 潰瘍發(fā)生率 (%)空白對(duì)照組 木香組痛瀉要方組【注意事項(xiàng)】胃黏膜損傷程度與乙醇濃度及灌服時(shí)間有關(guān)。注入胃內(nèi)的福爾馬林溶液量要準(zhǔn)確,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?!舅伎碱}】胃黏膜屏障保護(hù)藥有哪些?結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析木香、痛瀉要方理氣及調(diào)和肝脾的藥理機(jī)制。第二節(jié) 藥物對(duì)大鼠膽汁流量的影晌【目的】學(xué)習(xí)收集麻醉大鼠膽汁的實(shí)驗(yàn)
18、方法。觀察利膽藥物對(duì)大鼠膽汁流量的影響?!驹怼磕懼筛渭?xì)胞持續(xù)分泌,儲(chǔ)存于膽囊,在脂肪的吸收與消化過程中起重要作用,膽汁分泌與排泄障礙可引起消化系統(tǒng)癥狀,高濃度的膽鹽是強(qiáng)烈的致炎物質(zhì),形成早期的化學(xué)性炎癥,為細(xì)菌入侵引起急性感染提供有利條件。大鼠無膽囊,其肝臟分泌的膽汁經(jīng)肝管、膽總管直接進(jìn)入十二指腸。通過觀察利膽藥去氫膽酸及理氣藥青皮對(duì)膽汁流量變化的影響,能客觀地反應(yīng)肝臟分泌膽汁的能力?!静牧稀縿?dòng)物:大鼠,雄性,體重200g以上。藥品 :2%去氫膽酸納溶液、2g/m青皮水煎液。試劑 :10% 烏拉坦溶液、生理鹽水。主要器材:手術(shù)剪、眼科剪、眼科懾、膽汁引流管 ( 直徑1mm塑料管)、帶刻度的
19、小試管、大鼠手術(shù)固定板、注射器、紗布?!痉椒ā咳〗巢唤?2h 的大鼠, 隨機(jī)分組, 稱重,編號(hào)。以烏拉坦 (1g/kg)麻醉,仰位固定,開腹后在右上腹找到胃幽門部,以幽門部為標(biāo)準(zhǔn),翻轉(zhuǎn)十二指腸,即可見到白色的十二指腸乳頭部,從乳頭部追蹤到膽總管,用眼科懾將覆蓋在表面的被膜剝離少許以暴露出膽總管, 結(jié)扎下端。然后在接近十二指腸開口處的膽總管,向肝臟方向剪"V" 形小口,將膽汁引流管插入膽總管,插入引流管后可見淡黃色液體順管流出即是膽汁,結(jié)扎固定,手術(shù)后用止血鉗夾閉腹腔,以生理鹽水濕潤的紗布覆蓋夾閉部位,穩(wěn)定10分鐘后,用帶有刻度的小試管收集膽汁30分鐘作為給藥前的膽汁流量
20、,之后給藥組與空白對(duì)照組由十二指腸分別給予2%去氫膽酸納1m/100g或同容量的生理鹽水,給藥后每 3分鐘收集膽汁1次,共 23 次,記錄膽汁流量,并計(jì)算給藥后膽汁流量增加百分率。膽汁流量增加百分率 (%)= (給藥后膽汁流量 -給藥前膽汁流量)/ 給藥前膽汁流量×100%實(shí)驗(yàn)結(jié)束后作全班數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),計(jì)算各組膽汁流量增加百分率的平均數(shù) ( X ) 和標(biāo)準(zhǔn)差(s), 以 t 檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)法進(jìn)行組間比較。中藥可選 2 g /m的青皮水煎液,灌服量為lm/100g。其他方法同上。 【結(jié)果】將結(jié)果填入表 7-3-1 中。表 7-3-l 去氫膽酸納對(duì)大鼠膽汁流量的影響組別 藥前膽汁流量 (m) 藥后
21、膽汁流量(m) 膽汁流量增加百分率() 30 60 90 30 60 90 空白對(duì)照組 去氫膽酸納組【注意事項(xiàng)】大鼠膽總管直徑僅 0.5mm1.Omm, 應(yīng)選擇合適的插管。由于膽汁流量的差異較大 , 故常用自身前后比較的方法。由于體內(nèi)雌激素水平會(huì)影響膽汁流量及膽汁中成分的比例,最好選用雄性大鼠。巴比妥類藥物可增加膽汁分泌和膽酸等物質(zhì)的含量,故一般不用于該實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物麻醉。膽總管切口應(yīng)接近十二指腸壺腹部,插管頂端應(yīng)接近肝臟。 【思考題】利膽藥的作用方式有哪一些 ? 分別有哪些代表藥物 ?理氣藥治療氣滯、氣逆的藥理學(xué)基礎(chǔ)是什么?第三章 中藥鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)方法 凡能選擇性地緩解或消除疼痛的藥物稱為鎮(zhèn)痛
22、藥(analgesics)。包括麻醉性鎮(zhèn)痛藥和非麻醉性鎮(zhèn)痛藥。 實(shí)驗(yàn)資料證明,許多祛風(fēng)濕藥,祛瘀止痛藥常具有不同程度的鎮(zhèn)痛作用。它們除在中藥復(fù)方中配伍應(yīng)用外,其中延胡索、秦艽、牛膝、徐長卿、防己、蒼耳子、七葉蓮,白屈萊(山黃連)均已制成不同劑型用于頭痛、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、神經(jīng)痛以及胃腸痙攣性疼痛。疼痛作為主觀的感受和體驗(yàn),是一種復(fù)雜的生理心理反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)只能間接借助由于傷害性刺激引起的痛反應(yīng)作為測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)。篩選鎮(zhèn)痛藥的方法按刺激性質(zhì)可分為四大類,即熱刺激法,電刺激法、機(jī)械刺激法和化學(xué)刺激法。初篩常用方法1 熱刺激法 利用一定的溫度刺激動(dòng)物體表的某個(gè)部位,使產(chǎn)生疼痛反應(yīng)。最常用的是小鼠熱板法和大鼠
23、輻射熱甩尾法。熱刺激法用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥較為適宜。 小鼠熱板法 原理 把小鼠放在事先加熱到55C的金屬盤(鐵皮,鋁、銅均可)上以舔后足作為“疼痛反應(yīng)指標(biāo)。觀察給藥前、后痛閾值的變化。 藥品 延胡索提取物 操作方法 小鼠分為3組:(空白、陽性、給藥組),給藥組小鼠灌胃延胡索0.1ml/10g,30min后將恒溫水浴調(diào)節(jié)至55±05C,金屬盤的底部接觸水面,加熱后作為熱刺激,用秒表記錄小鼠自投入熱板至出現(xiàn)舔后足的時(shí)間(s)作為該鼠的痛閩值。給藥前先測(cè)定每只小鼠的痛聞(共測(cè)二次,以平均值不超過30s者為合格)。給藥后每隔121h測(cè)定一次,連續(xù)數(shù)次,如痛閾值超過60s,即停止測(cè)試而按6
24、0s計(jì)(時(shí)間過久,易燙傷足部)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束,按所測(cè)之痛閾平均值計(jì)算痛閾提高百分率。 以時(shí)間為橫座標(biāo),痛閾提高百分率為縱座標(biāo),繪出鎮(zhèn)痛作用時(shí)程曲線,以分析藥物的作用強(qiáng)度、作用開始時(shí)間和持續(xù)時(shí)間。評(píng)價(jià) 本法簡(jiǎn)便易行,痛感指標(biāo)明確易觀察,對(duì)組織損傷最小,動(dòng)物可反復(fù)利用,故為常用的方法之一。但對(duì)作用較弱的鎮(zhèn)痛藥不太敏感。注意點(diǎn) 動(dòng)物體重對(duì)結(jié)果有影響,小鼠以20g左右為宜。 小鼠個(gè)體差異大,應(yīng)挑選痛閾值在530s以內(nèi)者為合格,不到s9或超過30s或喜跳躍者均剔除. 小鼠以雌性為好,雄性因陰囊受熱后易松弛,與“熱板接觸而致反應(yīng)過敏。 室溫對(duì)實(shí)驗(yàn)有影響,過低小鼠反應(yīng)遲鈍,過高則敏感,易引起跳躍。思考題 延胡索
25、的鎮(zhèn)痛機(jī)理及主要成分是什么。第四章 作用于心血管系統(tǒng)藥理實(shí)驗(yàn)心血管系統(tǒng)藥物研究主要包括強(qiáng)心、降壓、抗心律失常、抗心肌缺血等藥理實(shí)驗(yàn)方法。強(qiáng)心實(shí)驗(yàn)方法可分為離體心臟實(shí)驗(yàn)法和在體心臟實(shí)驗(yàn)法。離體心臟實(shí)驗(yàn)法:經(jīng)典方法有斯氏法和八木氏法灌流離體蛙心或蟾蜍心臟、Langendorff法灌流哺乳類動(dòng)物離體心臟,近年來,離體乳頭肌實(shí)驗(yàn)、離體心房肌實(shí)驗(yàn)和體外心肌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法更為常用。在體心臟實(shí)驗(yàn)法:可用蛙、大鼠、兔、貓、犬的在體心臟同步觀察藥物對(duì)心肌收縮力、頻率、節(jié)律、血壓、心電圖等影響。血壓的測(cè)定有直接測(cè)壓法(插管法)和間接測(cè)壓法(大鼠尾動(dòng)脈測(cè)壓法、犬頸動(dòng)脈皮鞘法)。降壓藥的研究常分為三個(gè)步驟:首先觀察藥物
26、對(duì)正常麻醉動(dòng)物的急性降壓作用:將動(dòng)物麻醉后,直接測(cè)量其頸動(dòng)脈或殷動(dòng)脈的血壓。此法簡(jiǎn)單,但由于與臨床實(shí)際有距離,所以僅用于初篩。慢性實(shí)驗(yàn)治療法:用高血壓模型動(dòng)物來觀察藥物的治療作用動(dòng)物的高血壓模型有腎型、神經(jīng)型、內(nèi)分泌型和遺傳性等,血壓測(cè)定常采用間接測(cè)壓法。此法接近臨床實(shí)際情況,主要用于復(fù)試。降壓作用機(jī)制研究:通過上述實(shí)驗(yàn)證明藥物有降壓作用后,近一步通過對(duì)中樞、神經(jīng)節(jié)、遞質(zhì)、受體、血管平精肌、水鹽代謝等方面試驗(yàn)來分析藥物的作用環(huán)節(jié)。引起實(shí)驗(yàn)性心律失常的方法有:藥物:烏頭堿、哇巴因、鈕鹽、鈣鹽、氯仿、腎上腺素等。電刺激法。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈法。藥物用上述模型進(jìn)行初篩后,再進(jìn)一步應(yīng)用電生理方法和心肌培養(yǎng)技
27、術(shù)研究藥物作用的分子機(jī)制??剐募∪毖膶?shí)驗(yàn)方法有:心臟和冠脈血流測(cè)定。心肌氧代謝實(shí)驗(yàn)。藥物誘發(fā)心肌缺血實(shí)驗(yàn):垂體后葉索、麥角堿、異丙腎上腺素或腎上腺素。冠狀動(dòng)脈結(jié)扎弓I起心肌梗死實(shí)驗(yàn)。心臟灌流實(shí)驗(yàn)。涉及心血管系統(tǒng)藥理實(shí)驗(yàn)方法研究的常見中藥有溫里藥、平肝息風(fēng)藥、活血化瘀藥、補(bǔ)益藥和理氣藥。第一節(jié) 藥物對(duì)離體蛙心的作用目的學(xué)習(xí)斯氏(Straub)離體蛙心灌流法。觀察藥物對(duì)離體蛙心收縮強(qiáng)度、節(jié)律和心輸出量的影響。原理強(qiáng)心苷在一定劑量下能直接抑制心肌細(xì)胞膜上Na+-K+-ATP酶的活性,使細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子增多,產(chǎn)生正性肌力、負(fù)性頻率作用。此作用在心力衰竭心臟更明顯。動(dòng)物:蛙。藥品:5洋地黃溶液(或0.
28、1毒毛旋花苷G溶液)、生附子水煎醇沉液lg/ml、制附子水煎醇沉液1g/ml、四逆湯水煎醇沉液1g/ml。試劑:任氏液、低鈣任氏液(其中CaCl2含量為一般任氏液的1/4)。主要器材:手術(shù)器械一套、蛙板、探針、八木氏蛙心插管、蛙心夾、鐵支架、雙凹夾、長柄木夾、小燒杯、滴管、棉線、生物信號(hào)采集系統(tǒng)(或多道生理記錄儀)、張力換能器。方法取蛙或蟾蜍1只,用探針毀腦及脊髓,仰臥位固定于蛙板上。正中間剪開胸部皮膚,然后開胸,剪開心包,暴露心臟。在主動(dòng)脈分叉處下穿一線,打個(gè)松結(jié),備結(jié)扎插管之用。于主動(dòng)脈分叉稍上方的左主動(dòng)脈上剪一“v”形小口,將盛有任氏液的蛙心套管插入主動(dòng)脈,并通過主動(dòng)脈球轉(zhuǎn)入左后方左心室
29、,然后將套管用線應(yīng)結(jié)扎固定在套管小鉤上(離體蛙心制備見圖81一1)。將管內(nèi)帶血的任氏液吸出,以防止血塊堵塞套管。心臟搏動(dòng)時(shí),可見液面隨著在管內(nèi)上下波動(dòng)。剪斷主動(dòng)脈,提起心臟。于靜脈竇下方將其余血管一起結(jié)扎(勿傷及或結(jié)扎靜脈竇)。分離周圍組織使心臟離體,并用任氏液連續(xù)換洗直至無血色。將蛙心套管固定于鐵架臺(tái),用蛙心夾在心舒期夾住心尖部,連接于機(jī)械張力換能器并與生物信號(hào)采集系統(tǒng)相連,待收縮穩(wěn)定后開動(dòng)記錄儀。進(jìn)入“蛙心灌流”界面,選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)參數(shù),即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。記錄正常的心臟活動(dòng)曲線,然后按以下順序加藥或試劑,注意觀察圖形的變化:換入低鈣任氏液。當(dāng)心臟收縮顯著減弱時(shí),向套管內(nèi)加入5洋地黃溶液(或0.
30、1毒毛旋花苷G溶液)0.2ml。中藥可用:生附子水煎醇沉液1g/ml、制附子水煎醇沉液1g/ml、四逆湯水煎醇沉液1g/ml,方法同上。結(jié)果剪貼或復(fù)制心臟的收縮曲線,再將具體分析平均值填人表5-1-1。表5-1-1藥物對(duì)離體蛙心收縮功能的作用心跳次數(shù)(次/min)振幅(mm)圖形比較情況正常低鈣任氏液強(qiáng)心苷溶液注意事項(xiàng)本實(shí)驗(yàn)青蛙重量最好在50g以上。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)保持管套內(nèi)液面高度不變,以保證心臟固定的負(fù)荷。在實(shí)驗(yàn)過程中,基線的位置、放大倍數(shù)、描記速度應(yīng)始終一致為防止血液凝固堵塞蛙心管口,可在任氏液中加入適量抗凝劑肝素。可在1000ml任氏液中加入2ml肝素注射液配制成肝素任氏液。思考題通
31、過本實(shí)驗(yàn)可推測(cè)強(qiáng)心苷具有哪些藥理作用?第五章 溶血試驗(yàn) 原理 某些中草藥注射劑,由于含有皂甙或物理,化學(xué)與生物等方面的原因,在注入血液后可產(chǎn)生溶血作用。也有些注射劑中含有少量鞣質(zhì)等雜質(zhì),注入局部會(huì)引起脹痛,注入血液可產(chǎn)生血球凝聚,引起血液循環(huán)機(jī)能障礙等不良反應(yīng)。因此,尤其是供靜脈注射用的中草藥注射劑,必須作溶血試驗(yàn)。一般說來,肌肉注射劑由于劑量小,肌注后逐漸吸收,逐漸被血液稀釋,影響不大。 操作方法 (1)血球懸浮液的配制:取兔血(或羊,犬血)5lOml,加入潔凈干燥的小燒杯中,并用竹簽或玻棒攪拌除去纖維蛋白元。再加生理鹽水lOml,搖勻,離心、傾去上清液、如此反復(fù)幾次至上清液不呈紅色為止。量
32、取血球,加生理鹽水稀釋成2的混懸液供試驗(yàn)用。 (2)測(cè)試方法,取試管6只,按下列順序加入各種溶液。試管編號(hào)1 2 3 4 5 6檢驗(yàn)柄液(m1)0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0生理鹽水(m1)2.4 2.3 2.2 2.1 2.0 2.52%血球混懸液(ml)2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 第6管為對(duì)照管。將各管溶血輕輕搖勻,置37恒溫箱中(或25270室溫中),觀察并記錄12、1、2、3h的結(jié)果。如溶液變清并染紅色,即表示溶血。必要時(shí),可用顯微鏡觀察紅血球是否破裂。如藥液0.3ml,在半小時(shí)內(nèi)引起溶血者即不宜作注射用。最好是藥液0.3ml在3h內(nèi)不引起溶血。 如有紅
33、細(xì)胞凝聚的現(xiàn)象,可按下法進(jìn)一步判定,即凝聚物在試管振搖后又能均勻分散,或?qū)⒛畚锓旁谳d玻片上,在蓋玻片邊緣滴加2滴生理鹽水,在顯微鏡下觀察,凝聚紅細(xì)胞能被沖散者為假凝聚,其制品可供臨床使用。若凝聚物不被搖散或在玻片上不被沖散者為真凝聚,其制品不宜供臨床使用。第6章 益母草對(duì)大鼠子宮平滑肌的影響益母草苦泄辛散,主入血分,善于活血祛瘀調(diào)經(jīng),為婦科經(jīng)產(chǎn)要藥,又因其具有活血化瘀作用,臨床廣泛應(yīng)用?,F(xiàn)將其藥理作用及臨床應(yīng)用介紹如下。用于治療婦科病益母草為治療婦科病的要藥。婦女產(chǎn)后子宮內(nèi)胎盤或胎膜組織殘留,子宮復(fù)位不全,惡露不盡,子宮炎癥等皆屬于中醫(yī)的血瘀范疇。益母草辛苦微寒能活血祛瘀,是治療婦科因瘀而致
34、病的要藥。益母草的活血祛瘀作用能使子宮興奮并能加強(qiáng)其作用的有效成分是益母草堿。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)益母草對(duì)子宮有明顯的收縮興奮作用,如益母草煎劑作用于動(dòng)物離體子宮,無論有孕無孕,早孕晚孕,或是產(chǎn)后子宮,濃度在1:5001:1000時(shí)皆產(chǎn)生興奮作用,表現(xiàn)為子宮張力增強(qiáng),收縮幅度增大,節(jié)律加快。臨床用益母草單方或復(fù)方治療婦產(chǎn)科諸瘀癥,作用及療效確切,婦女產(chǎn)后必服益母草煎膏已為常規(guī)。 動(dòng)物:健康成年SD雌性大鼠,體重在200-240g之間,試劑與儀器(1)已烯雌酚注射液:廣州明興制藥廠生產(chǎn),批號(hào)920426-2,2mg/支(1ml)(2)BL-420型4道生理記錄儀 藥品 益母草提取液 營養(yǎng)液 方法將健康成
35、年(SD)大鼠實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)皮下注射已烯雌酚0.2mg/100g,人工造成動(dòng)情期以提高子宮平滑肌對(duì)藥物敏感性。實(shí)驗(yàn)時(shí)頸椎脫臼處死大鼠,剖腹取出子宮,立刻置于盛洛氏液的玻璃皿中,輕輕剝離子宮上附著的脂肪組織與結(jié)締組織。剪取約3cm長之子宮,結(jié)扎陰道端并固定于“L”型通氣管小鉤上,置盛有洛氏液的麥?zhǔn)喜蹆?nèi),浴槽內(nèi)溫度保持在37±0.5,連續(xù)通入O2(約80個(gè)氣泡/分),另一端與肌力換通器相連,加予1g負(fù)荷,用生理記錄儀記錄子宮收縮活動(dòng)時(shí)間常數(shù)DC,濾波(Hz)10次方,靈敏度1mv/cm,紙速0.5mm/s,待收縮平穩(wěn)后記錄一段正常收縮曲線(10分鐘),之后分別加入益母草提取液(由小劑量開
36、始),記錄加藥后每10分鐘的平均子宮收縮幅度,頻率及活動(dòng)力(頻率×幅度),進(jìn)行自身前后比較及變化率(給藥后-給藥前)/給藥前×100%的組間比較。結(jié)果 列表比較思考題益母草興奮子宮的成分及機(jī)理是什么?不同劑量對(duì)子宮的作用有何不同?藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器及使用 BL-410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)計(jì)算機(jī)是一種現(xiàn)代化、高科技的自動(dòng)信息分析、處理設(shè)備。利用計(jì)算機(jī)采集、處理生物信息,讓計(jì)算機(jī)進(jìn)入藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室是科學(xué)技術(shù)發(fā)展的必然?,F(xiàn)將對(duì)BL-410微機(jī)信號(hào)采集、處理系統(tǒng)(簡(jiǎn)稱BL-410)作簡(jiǎn)要介紹。一、計(jì)算機(jī)在藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用 (一)計(jì)算機(jī)應(yīng)用的一般過程 通常人們把電子的、機(jī)械的
37、、以及磁性的各種部件所組成的計(jì)算機(jī)實(shí)體稱為“硬件”,如輸入設(shè)備、中央處理器(CPU)、內(nèi)存儲(chǔ)器、外存儲(chǔ)器、輸出設(shè)備等。而把指揮計(jì)算機(jī)工作的各種程序和數(shù)據(jù)稱為“軟件”。在實(shí)際使用時(shí),首先從輸入設(shè)備鍵盤、鼠標(biāo)、磁盤等將程序及數(shù)據(jù)送入內(nèi)存,再輸入讓程序運(yùn)行的命令,這時(shí)中央處理器就按照內(nèi)存中程序的安排,從中取出數(shù)據(jù)到運(yùn)算器內(nèi)進(jìn)行運(yùn)算、處理,并將結(jié)果送回內(nèi)存中保存。同時(shí)將運(yùn)行的結(jié)果按照要求通過輸出設(shè)備顯示、打印出來,也可以送到磁盤上儲(chǔ)存起來。由此可見,計(jì)算機(jī)是按照人們的要求來完成程序規(guī)定的任務(wù)。(二)、計(jì)算機(jī)采集、處理生物信息的基本原理首先將原始的生物機(jī)能信號(hào),包括生物電信號(hào)和通過傳感器引入的非生物電信
38、號(hào)進(jìn)行放大(有些生物電信號(hào)非常微弱,比如減壓神經(jīng)放電,其信號(hào)為微伏級(jí)信號(hào),如果不進(jìn)行信號(hào)的前置放大,根本無法觀察)、濾波(由于在生物信號(hào)中夾雜有眾多聲、光、電等干擾信號(hào),比如電網(wǎng)的50Hz信號(hào),這些干擾信號(hào)的幅度往往比生物電信號(hào)本身的強(qiáng)度還要大,如果不將這些干擾信號(hào)濾除掉,那么可能會(huì)因?yàn)檫^大的干擾信號(hào)致使有用的生物機(jī)能信號(hào)本身無法觀察)等處理,然后對(duì)處理的信號(hào)通過模數(shù)轉(zhuǎn)換進(jìn)行數(shù)字化并將數(shù)字化后的生物機(jī)能信號(hào)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)內(nèi)部,計(jì)算機(jī)則通過專用的生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件接收從生物信號(hào)放大、采集卡傳入的數(shù)字信號(hào),然后對(duì)這些收到的信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)處理,一方面進(jìn)行生物機(jī)能波形的顯示,一方面進(jìn)行生物機(jī)能信號(hào)的存貯
39、,另外,它還要根據(jù)使用者的命令對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行指定的處理和分析,比如平滑濾波,微積分、頻譜分析等。對(duì)于存貯在計(jì)算機(jī)內(nèi)部的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件可以隨時(shí)將其調(diào)出進(jìn)行觀察和分析,還可以將重要的實(shí)驗(yàn)波形和分析數(shù)據(jù)進(jìn)行打印。生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)原理圖二、BL-410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)(一)、BL-410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)的基本構(gòu)成本系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)、BL-410的硬件及軟件組成。BL-410是一種智能化的四通道生物信號(hào)采集、處理顯示系統(tǒng)。它具有記錄儀、示波器、放大器、刺激器、心電圖儀等傳統(tǒng)的生理儀器的全部功能。該系統(tǒng)以中文操作Win95、Win98、Win2000為軟件平臺(tái),實(shí)現(xiàn)全圖形化
40、界面的鼠標(biāo)操作。此外,它具有自動(dòng)分析、參數(shù)預(yù)置、中文顯示等功能。(二)、BL-410微機(jī)型生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)的功能特點(diǎn)(1)采用4通道12位、40KSPS采樣率的A/D轉(zhuǎn)換器;(2)4通道高性能、全程控的生物電信號(hào)采集放大器;(3)程控全導(dǎo)聯(lián)心電選擇;(4)記滴和耳機(jī)監(jiān)聽功能;(5)抗干擾能力強(qiáng),工作穩(wěn)定可靠;(6)低噪聲、高增益范圍(2-50000倍)的生物放大器,適應(yīng)各種強(qiáng)弱不同的生物電信號(hào);生物電放大器的增益、耦合方式(AC/DC)、時(shí)間常數(shù)(高通濾波)、高頻濾波(低通濾波)、回零控制等均由程序控制;(7)最高采樣率達(dá)60kHz,精度遠(yuǎn)大于傳統(tǒng)的機(jī)械式記錄儀;(8)功能完善的高性能、
41、高可靠性的電刺激器,具有電壓輸出(0-35V,最小步長5mV)和電流輸出(0-10mA,最小步長1.0A)兩種模式,使用方便;(9)為幾乎所有的生理及大部分藥理實(shí)驗(yàn)教學(xué)項(xiàng)目預(yù)設(shè)置了包括八大類共計(jì)32個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)K。當(dāng)您選擇一個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)K后,計(jì)算機(jī)會(huì)自動(dòng)設(shè)置其所需參數(shù),并啟動(dòng)數(shù)據(jù)采樣,直接進(jìn)入實(shí)驗(yàn)狀態(tài);(10)強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析功能:可對(duì)所采取的數(shù)據(jù)(積分、微分、頻率直方圖、頻譜分析等)進(jìn)行運(yùn)算,并將運(yùn)算結(jié)果與原始波形一起實(shí)時(shí)、同步地顯示在計(jì)算機(jī)上;(11)強(qiáng)大的數(shù)據(jù)測(cè)量功能:可對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)量、光標(biāo)測(cè)量、選擇區(qū)域測(cè)量、兩點(diǎn)測(cè)量及區(qū)間測(cè)量,可得出生物信號(hào)的多種指標(biāo),如最大值、最小值、平均值信號(hào)頻率等;(
42、12)可獨(dú)立調(diào)節(jié)四個(gè)通道波形的掃描速度;(13)直觀地設(shè)置增益、時(shí)間常數(shù)、濾波及程控刺激等各種參數(shù);(14)可直觀、方便設(shè)置顯示波形、背景標(biāo)尺以及波形背景的顏色等;(15)可對(duì)反演的數(shù)據(jù)進(jìn)行原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出、數(shù)據(jù)剪輯及圖形剪輯。(16)可根據(jù)需要打印出單個(gè)或多個(gè)通道的實(shí)驗(yàn)波形及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。在打印時(shí),還可進(jìn)行圖形比例壓縮,確定打印位置。(三)、使用指南1、主界面和各部位的功能Biolap98生物信號(hào)顯示與處理軟件主界面(1)主界面的主要功能標(biāo)題條 顯示Biolap98軟件的名稱以及實(shí)驗(yàn)標(biāo)題菜單條 顯示所有的頂層菜單項(xiàng),您可以選擇其中的某一菜單項(xiàng)以彈出其子菜單。最底層的菜單項(xiàng)代表一條命令。工具條
43、一些常用命令的圖形表示集合,它們使常用命令的使用變得方便與直觀??刂啤⑿畔^(qū)切換按鈕切換控制區(qū)和信息區(qū)控制區(qū)和信息區(qū)占據(jù)屏幕左邊相同的區(qū)域時(shí)間顯示窗口顯示記錄數(shù)據(jù)的時(shí)間在數(shù)據(jù)記錄和反演時(shí)顯示生物信號(hào)顯示窗口顯示生物信號(hào)的原始波形或數(shù)據(jù)處理后的波形,每一個(gè)顯示窗口對(duì)應(yīng)一個(gè)實(shí)驗(yàn)采樣通道控制區(qū)及信息區(qū)控制區(qū)用于調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)參數(shù),信息區(qū)用于顯示實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)測(cè)量結(jié)果控制區(qū)和信息區(qū)采用分時(shí)復(fù)用技術(shù)使用相同屏幕資源數(shù)據(jù)查找滾動(dòng)條用于實(shí)時(shí)實(shí)驗(yàn)和反演時(shí)快速數(shù)據(jù)查找核定位BL-410新增功能四個(gè)數(shù)據(jù)反演相關(guān)功能按鈕用于反演時(shí)進(jìn)行數(shù)據(jù)剪輯、圖形剪輯以及波形的橫向擴(kuò)展和壓縮BL-410新增功能狀態(tài)條顯示當(dāng)前系統(tǒng)命令的執(zhí)行狀態(tài)
44、或一些提示信息設(shè)置刺激器參數(shù)對(duì)話框設(shè)置刺激器參數(shù)反演時(shí)消失(2)工具條的主要功能 該工具條按鈕代表系統(tǒng)復(fù)位命令。該工具條按鈕代表當(dāng)前通道信號(hào)自動(dòng)回零命令。該命令只對(duì)當(dāng)前通道起作用。該工具條按鈕代表當(dāng)前通道信號(hào)直流平衡增檔命令。該命令只對(duì)當(dāng)前通道起作用。該工具條按鈕代表當(dāng)前通道信號(hào)直流平衡減檔命令。該命令只對(duì)當(dāng)前通道起作用。 該工具條按鈕代表打開上一次實(shí)驗(yàn)設(shè)置命令。 該工具條按鈕代表反演數(shù)據(jù)讀取命令。 該工具條按鈕代表打印當(dāng)前通道圖形命令。 該工具條按鈕代表實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)記錄命令。 該工具條按鈕代表啟動(dòng)波形顯示命令。 該工具條按鈕代表暫停顯示命令(空格鍵也代表暫停顯示命令)。 該工具條按鈕代表停止數(shù)據(jù)
45、顯示與記錄命令。 該工具條按鈕代表波形振幅擴(kuò)大命令。 該工具條按鈕代表波形振幅縮小命令。 該工具條按鈕代表刪除、添加背景標(biāo)尺格線命令。 該工具條按鈕代表啟動(dòng)刺激器命令。 該工具條按鈕代表停止刺激器命令。 該工具條按鈕代表50Hz濾波命令(禁止50Hz波形)。該命令只對(duì)當(dāng)前通道起作用。 該工具條按鈕代表取消50Hz濾波命令(允許50Hz波形通過),該命令只對(duì)當(dāng)前通道起作用。 該工具條按鈕代表添加標(biāo)記命令。 該工具條按鈕代表區(qū)間測(cè)量命令,該命令只對(duì)當(dāng)前通道起作用。 該工具條按鈕代表兩點(diǎn)測(cè)量命令。2、操作步驟(1)開機(jī) (2)圖標(biāo)選擇 當(dāng)進(jìn)入Win98界面后,鼠標(biāo)雙擊Pci410圖標(biāo),出現(xiàn)BL-41
46、0封面,鼠標(biāo)單擊封面任何一部位,顯示器進(jìn)入Pci410軟件主界面。(3)輸入方式:輸入方式1:BL-410軟件的“輸入信號(hào)”菜單中為需要采樣與顯示的通道設(shè)定相應(yīng)的信號(hào)種類(如張力),然后從工具條中選擇“啟動(dòng)波形顯示”命令按鈕或從“編輯”菜單中選擇“啟動(dòng)波形顯示”命令項(xiàng)(如需要多通道輸入主要用這種方式,多通道輸入時(shí)要重復(fù)以上的步驟);輸入方式2:是從“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”菜單中選擇自己需要的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(如循環(huán)系統(tǒng)貓動(dòng)脈血壓的調(diào)節(jié))。(4)參數(shù)調(diào)節(jié) 根據(jù)被觀察信號(hào)大小及波形特點(diǎn),選定要調(diào)節(jié)的通為當(dāng)前通道,調(diào)節(jié)增益或?yàn)V波。具體操作:鼠標(biāo)移動(dòng)到參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)相對(duì)應(yīng)的調(diào)節(jié)旋鈕位置,然后單擊鼠標(biāo)的左鍵使參數(shù)值增中,單擊鼠
47、標(biāo)右鍵使參數(shù)值減小。掃描速度調(diào)節(jié):鼠標(biāo)移動(dòng)到掃描速度調(diào)節(jié)區(qū)所調(diào)節(jié)通道位置。在黃色柱左邊單擊一次,速度減檔一次;在黃色柱右邊單擊一次,速度增加一檔。在一般情況下,不用調(diào)節(jié)這些參數(shù)。(5)記錄 在BL-410軟件的工具條上有一個(gè)“記錄”命令按鈕,其圖形是一個(gè)紅色的實(shí)心圓,這是一個(gè)雙態(tài)命令按鈕,所謂雙態(tài)命令按鈕是指每按下該按鈕一次,其所代表的狀態(tài)就改變一次,這就好像是一盞電燈的開關(guān),這種命令按鈕通過按鈕的按下和彈起表示兩種不同的狀態(tài)。在BL-410軟件中還有一些其它的雙態(tài)命令按鈕,比如“零速采樣”和“格線顯示”命令按鈕等。(6)暫停 如果您想暫停一下波形觀察與記錄,比如,此時(shí)您正在配置新藥,為了減少
48、無效數(shù)據(jù)占據(jù)磁盤空間,您可以暫停實(shí)驗(yàn),只需從BL-410選擇“暫?!泵畎粹o即可。當(dāng)您完成本實(shí)驗(yàn)之后,您可以選擇工具條上的“停止”命令按鈕,這時(shí),BL-410軟件讓您為本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果取一個(gè)名字以便于保存,然后結(jié)束本次實(shí)驗(yàn)。(7)添加實(shí)驗(yàn)標(biāo)記 在實(shí)驗(yàn)過程中,您往往需要在實(shí)驗(yàn)波形有所變化的部分,比如加藥前后添加一個(gè)實(shí)驗(yàn)標(biāo)記,以明確實(shí)驗(yàn)過程中的變化,同時(shí)也為反演數(shù)據(jù)的查找留下依據(jù)。在BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中,有兩種類型的實(shí)驗(yàn)標(biāo)記供您選擇,分別是通用實(shí)驗(yàn)標(biāo)記和特殊實(shí)驗(yàn)標(biāo)記。(8)刺激器的使用 一般情況下,刺激器的參數(shù)調(diào)節(jié)面板以最小化隱藏在主界面的右上方。需要使用刺激時(shí),用鼠標(biāo)單擊“設(shè)備刺激器參數(shù)
49、”條的放大框,這時(shí)刺激器的參數(shù)調(diào)節(jié)面板將展開在主界面的左下方,該調(diào)節(jié)面板復(fù)蓋在掃描速度調(diào)節(jié)區(qū)上。需要移動(dòng)該面板的位置時(shí),用鼠標(biāo)單擊“設(shè)置刺激器參數(shù)”條,該條變藍(lán),鼠標(biāo)放置在藍(lán)條上按住左鍵不放并拖動(dòng)到面板需要放置的地方即可。刺激器各項(xiàng)參數(shù)展現(xiàn)在面板上,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)節(jié)。當(dāng)需要給標(biāo)本刺激時(shí),鼠標(biāo)單擊工具條的“ ”啟動(dòng)刺激按鈕。再單擊時(shí)即停止刺激。(9)結(jié)束實(shí)驗(yàn) 當(dāng)實(shí)驗(yàn)完成結(jié)束時(shí),用鼠標(biāo)單擊工具條的“”停止鍵。如在實(shí)驗(yàn)中啟動(dòng)了記錄,此時(shí)會(huì)彈出一個(gè)存盤對(duì)話框,提示你給剛才記錄存盤的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)輸入方文件名(文件名自定義,最長不得超過八個(gè)字符),否則,計(jì)算機(jī)將以Temp作用為當(dāng)前文件名。中文輸入可用鍵盤組
50、合鍵Ctrl+Shift選擇合適的中文輸入法進(jìn)行中文文件名輸入。(10)反演 反演數(shù)據(jù)的方法也非常簡(jiǎn)單,只需從工具條上選擇“打開文件”命令,然后選擇需要反演的文件名字,按“確定”按鈕即可。對(duì)于反演的數(shù)據(jù),您可以拖動(dòng)顯示窗口下面的滾動(dòng)條來選擇不同時(shí)間段的數(shù)據(jù)進(jìn)行觀察和分析。也可以通過窗口下方的滾動(dòng)條和反演按鈕窗口中的查找命令按鈕查找您所需要的數(shù)據(jù)。(11)圖形剪輯 鼠標(biāo)單擊返演控制調(diào)節(jié)區(qū)右下角的圖形剪按鈕,移動(dòng)鼠標(biāo),選定圖形的左上角為起點(diǎn),按下鼠標(biāo)左鍵不放,向右下方拖動(dòng)鼠標(biāo),此時(shí),屏幕上將出現(xiàn)一矩形虛框,框內(nèi)圖形就是你將要剪輯的圖形。選定圖形后,放開鼠標(biāo)的左鍵,屏幕上將出現(xiàn)一張白色剪輯頁,剛才剪
51、輯的圖形位于左下角,可用鼠標(biāo)移動(dòng)到相應(yīng)的位置,然后,按返回鍵,繼續(xù)剪輯相應(yīng)的圖形。必要時(shí)可加上相應(yīng)文字或?qū)D形進(jìn)行修改。(12)數(shù)據(jù)剪輯 選擇數(shù)據(jù)剪輯按鈕,當(dāng)前通道出現(xiàn)一條垂直線,該線條隨鼠標(biāo)移動(dòng)而左右移動(dòng),當(dāng)線條移動(dòng)到要剪輯數(shù)據(jù)的起始端時(shí),單擊鼠標(biāo)左鍵確定,同時(shí)屏幕又出現(xiàn)另一直線,移動(dòng)鼠標(biāo)到該剪輯數(shù)據(jù)的尾端,再次用鼠標(biāo)左鍵確定,此時(shí),兩線條之間的圖形就是我們所剪輯的數(shù)據(jù),同理可進(jìn)行多次剪輯,當(dāng)停止反演時(shí)可生成以cut為擴(kuò)展名的文件。本文件是多次剪輯的集合。(13)實(shí)驗(yàn)人員及實(shí)驗(yàn)組號(hào)的輸入 實(shí)驗(yàn)完成后,如需要在實(shí)驗(yàn)結(jié)果上打印實(shí)驗(yàn)人員名單及實(shí)驗(yàn)組號(hào)時(shí),則需編輯輸入。方法是用鼠標(biāo)單擊“實(shí)驗(yàn)人員編輯
52、”項(xiàng),出現(xiàn)對(duì)話框,輸入相應(yīng)數(shù)據(jù),按“OK”即可。(14)數(shù)據(jù)處理 區(qū)間測(cè)量 該命令用于測(cè)量當(dāng)前通道圖形的生意一段波形的頻率、最大值、最小值、平均值以及面積等參數(shù)。按工具條上的區(qū)間測(cè)量按鈕,此時(shí)通道內(nèi)出現(xiàn)一條垂直線,線條隨鼠標(biāo)移動(dòng),單擊鼠左鍵確定要測(cè)量的開始端,同時(shí)第二條直線出現(xiàn),相同方法確定終端。在被測(cè)量圖形段內(nèi)出現(xiàn)一條水平線。用鼠標(biāo)上下移動(dòng)該直線,選定頻率計(jì)數(shù)的基線,鼠標(biāo)單確定,所要測(cè)定的參數(shù)自動(dòng)顯示在屏幕下方的信息區(qū)內(nèi),單擊鼠標(biāo)右鍵結(jié)束本次實(shí)驗(yàn)。 兩點(diǎn)間測(cè)量 該命令用于測(cè)量任意通道內(nèi)某個(gè)波形的最大值、最小值、及兩點(diǎn)之間的時(shí)間及信號(hào)的變化率。方法是鼠標(biāo)單擊兩點(diǎn)間測(cè)量按鈕,移動(dòng)鼠標(biāo)將鍵頭指向被
53、測(cè)波形的第一點(diǎn)單擊確定,同樣的道理確定第二點(diǎn),此時(shí)一條隨鼠標(biāo)移動(dòng)的紅線連接在第一點(diǎn)與第二點(diǎn)之間,該信號(hào)線代表被測(cè)信號(hào)的路線軌跡。確定第二點(diǎn)之后,被測(cè)信號(hào)的參數(shù)就被顯示出來。 單點(diǎn)測(cè)量 只要在實(shí)驗(yàn)圖形顯示時(shí),在任何通道內(nèi)的任何位置都可以用此方法來測(cè)量測(cè)定指定點(diǎn)值的大小。測(cè)量時(shí),只需要在測(cè)量點(diǎn)上單擊鼠標(biāo)左鍵,所測(cè)的值則被自動(dòng)顯示在信息區(qū)的“當(dāng)前值”欄目上。微分 如果需了解實(shí)驗(yàn)波形的變化,要對(duì)波形進(jìn)行微分處理時(shí),用鼠標(biāo)單擊菜單條的“數(shù)據(jù)處理”項(xiàng),彈出下拉式菜單,按選定“微分”的選項(xiàng),鼠標(biāo)左鍵單擊確定,此時(shí)將顯示“微分參數(shù)設(shè)置”對(duì)話框。按實(shí)驗(yàn)所需的要求設(shè)定參數(shù),然后按“OK”按鈕,此時(shí)微分波形將開始顯
54、示。如果對(duì)微分波形不滿意,還可重復(fù)以上步驟對(duì)微分參數(shù)再次調(diào)節(jié)。 (15)打印 圖形剪輯打印 當(dāng)我們完成圖形剪輯后,在圖形剪輯頁中,用鼠標(biāo)單擊“打印”按鈕,即可由打印機(jī)打印出一張已剪輯的圖形。數(shù)據(jù)圖形打印 當(dāng)我們?cè)趯?shí)時(shí)實(shí)驗(yàn)或者是反演過程中,如果需要打印圖形,用鼠標(biāo)單擊菜單條的“打印”菜單項(xiàng),彈出下拉式菜單,移動(dòng)鼠標(biāo),首先選定打印比例,鼠標(biāo)左鍵單擊;重復(fù)上步驟,選定打印位置,再重復(fù)上步驟,選定打印通道。如要繼續(xù)打印以后顯示的圖形,則鼠標(biāo)單擊“”啟動(dòng)波形顯示,重復(fù)上述步驟,選定圖形、打印位置和打印通道即可。(16)結(jié)束實(shí)驗(yàn)退出該系統(tǒng) 結(jié)束本次實(shí)驗(yàn)后,您又可以選擇開始其它實(shí)驗(yàn)或者退出BL-410軟件。退出BL-410軟件的方法很簡(jiǎn)單,從“文件”菜單中選擇“退出”命令或者單擊窗口左上角的“關(guān)閉”命令(為一小叉按鈕)均可以退出BL-410軟件。當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,你可以為本次實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)文件取一個(gè)有意義的名字進(jìn)行保存,以便于以后進(jìn)行反演、分析和處理。三、生產(chǎn)廠家BL-410微機(jī)信號(hào)采集、處理系統(tǒng)由成都泰盟科技有限公司研制。 722型光柵分光光度計(jì)一、儀器的工作原理分光光度計(jì)的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射激發(fā)下,產(chǎn)生了對(duì)光吸收的效應(yīng),物質(zhì)對(duì)光的吸收是具有選擇性的。各種不同的物質(zhì)具有其各自的吸收光譜,當(dāng)某單色光通過溶液時(shí),其能量就會(huì)被吸收而減弱
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