醫(yī)學(xué)白血病患者血清VEGF和sfas水平及其監(jiān)測(cè)價(jià)值

1、醫(yī)學(xué)白血病患者血清VEGF和sfas水平及其監(jiān)測(cè)價(jià)值    【摘要】目的 觀察與分析白血病患者血清VEGF和sFas水平及其監(jiān)督價(jià)值。方法 對(duì)72例白血病患者血清VEGF和sFas水平運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）進(jìn)行同步檢測(cè)，并對(duì)其水平變化的相關(guān)性進(jìn)行比較。其中VEGF水平以VEGF/PLT的較正值表示。結(jié)果 初發(fā)組和難治/復(fù)發(fā)組VEGF和sFas水平明顯高于正常對(duì)照組和緩解組(P<0.01)，難治/復(fù)發(fā)組高于初發(fā)組(P<0.05)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。緩解搭配對(duì)照組無明顯差異(P>0.05)?？梢?/p>

2、VEGF與sFas與乳酸脫氫酶（LDH）存在肯定相關(guān)性。結(jié)論 對(duì)血清VEGF和sFas水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)有利于評(píng)價(jià)白血病的病理狀態(tài)及轉(zhuǎn)歸，具有肯定的臨床監(jiān)測(cè)價(jià)值。 【關(guān)鍵詞】白血病  血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子  可溶性Fas         血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）通過旁分泌方式作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促使血管新生，并以自分泌方式作用于腫瘤細(xì)胞表面的VEGF受體，促使腫瘤細(xì)胞增殖，阻止其凋亡的同時(shí)也增強(qiáng)了對(duì)化療藥物的抵擋作用，可見VEGF與血液系統(tǒng)惡性腫瘤之間存在的肯定的關(guān)

3、系。Fas/FasL是一對(duì)在腫瘤細(xì)胞凋亡中起著重要作用的膜蛋白分子，sFas是缺乏跨膜區(qū)的可溶性Fas分子，通過與膜Fas結(jié)合Fasl而阻斷由Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。影響白血病化療失利的主要原因是白血病細(xì)胞多藥耐藥（MDR）。通過大量研究表明：白血病的發(fā)病與VEGF、sFas有著密切關(guān)系，由于當(dāng)今醫(yī)學(xué)界對(duì)二者聯(lián)合研究較少，所以研究VEGF、sFas兩者之間的相關(guān)性對(duì)進(jìn)一步了解白血病發(fā)病機(jī)制和MDR機(jī)制有著很大幫助。本文通過對(duì)白血病患者血清VEGF和sFas水平采用ELISA法進(jìn)行同步測(cè)定，并對(duì)兩者相關(guān)性進(jìn)行分析。        

4、; 一  材料與方法         1 觀察對(duì)象：72例白血病患者的血清標(biāo)本均經(jīng)臨床表現(xiàn)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞組化染色確診，并排除了其糖尿病、免疫系統(tǒng)疾病或其他惡性腫瘤性疾病的可能。其中男性38例，女性34例，年齡1680歲。初發(fā)26例，難治/復(fù)發(fā)18例，完全緩解/部分緩解28例。正常對(duì)照組中64例健康體檢合格，男性30例，女性34例，年齡2267歲。         2 血清標(biāo)本采集：患

5、者均在清晨空腹情況下進(jìn)行血清采集，5ml不抗凝靜脈血，以2000轉(zhuǎn)/min運(yùn)行2小時(shí)，20min后離心，將所得標(biāo)本分開存放在-20溫度下，避免其反復(fù)融凍。         3 血清VEGF、sFas水平測(cè)定：通過雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對(duì)血清VEGF及sFas水平進(jìn)行檢測(cè)，并嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行。通過標(biāo)化VEGF測(cè)定值（pg/ml）和血小板計(jì)數(shù)，并取標(biāo)化值VEGF/PLT(pg/106)為最終指標(biāo)來減小因血小板數(shù)差異造成的系統(tǒng)誤差。      

6、   4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以  S表示，采用F方差分析進(jìn)行組間比較；采用相關(guān)系數(shù)的顯著性檢驗(yàn)其變量間的關(guān)系。         二  結(jié)果         1 血清VEGF和sFas在白血病的表達(dá)(其中VEGF水平以VEGF/PLT標(biāo)化值表示) ，詳見表1。     

7、;    表1各組研究對(duì)象血清VEGF及sFas水平的測(cè)定                  注:與正常對(duì)照組比較,*P<0.01;與初發(fā)組比較,P<0.01。         1.1 VEGF水平：初發(fā)組和難治/復(fù)發(fā)組明顯高于對(duì)照組，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01

8、)；難治/復(fù)發(fā)組明顯高于初發(fā)組(P<0.01)；緩解組與對(duì)照組兩者無顯著差異(P>0.05)。         1.2 sFas水平：初發(fā)搭配難治/復(fù)發(fā)組明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；難治/復(fù)發(fā)組明顯高于初發(fā)組(P<0.05)；緩解組與對(duì)照組兩者無顯著差異(P>0.05)。         2 VEGF、sFas與LDH之間的關(guān)系     

9、60;   根據(jù)LDH中位置（188u/L）將白血病患者分為A、B兩組，并對(duì)其血清VEGF和sFas水平進(jìn)行比較，A組(LDH188 u/L)，B組(LDH>188 u/L)，得出結(jié)論：A組VEGF和sFas值均明顯低于B組，且兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01)，詳見表2。         表2白血病A、B兩組血清VEGF和sFas之間的比較         

10、;         三  討論         近年來，雖然不斷出現(xiàn)白血病的化療藥物，但其多藥耐藥性一直阻礙其正常治療，使很多患者因?yàn)榧?xì)胞耐藥導(dǎo)致化療失利。究其原因還是因?yàn)榘籽〖?xì)胞抵擋化療藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡而造成。         目前所知，最強(qiáng)的正性血管生成調(diào)節(jié)因子是血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF），由于其不僅影響著白血病的

11、發(fā)生發(fā)展，還與腫瘤細(xì)胞耐藥有關(guān)，所以它與血液系統(tǒng)惡性腫瘤的關(guān)系已逐漸被人們所重視。在凝血過程中，由于血小板釋放的VEGF在肯定程度上對(duì)血小板造成影響，所以血小板數(shù)目會(huì)明顯影響血清VEGF的水平。多數(shù)急性白血病患者外周血中血小板水平較低，所以應(yīng)考慮因血小板數(shù)過低導(dǎo)致凝血過程中血小板釋放的VEGF減少對(duì)血清總VEGF水平造成的誤差。故本實(shí)驗(yàn)將血清VEGF濃度和外周血小板計(jì)數(shù)的商值作為標(biāo)化值來反應(yīng)白血病患者血清VEGF的實(shí)際水平。另有報(bào)道稱：VEGF會(huì)對(duì)CP-16、阿霉素等藥物殺傷白細(xì)胞產(chǎn)生抵擋作用。這些研究分析都可以表明抑制VEGF對(duì)提高白血病細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性有肯定的幫助，具有臨床意義。 &

12、#160;       Fas是一種屬于腫瘤壞死因子的跨膜糖蛋白。Caspase酶原會(huì)由于Fas與配體或抗Fas的結(jié)合導(dǎo)致其激活，使得敏感Fas陽性細(xì)胞凋亡。Fas在轉(zhuǎn)基因過程中產(chǎn)生的Fas蛋白從細(xì)胞膜中脫落形成sFas，與Fas結(jié)合后生成FasL，從而抵擋Fas介入的細(xì)胞凋亡。實(shí)驗(yàn)表明：難治/復(fù)發(fā)組的血清sFas水平明顯高于正常對(duì)照組，經(jīng)過化療后的緩解組患者血清sFas水平明顯得到改善，但與正常組比較無明顯差異。可見，作為凋亡抑制因子的sFas會(huì)影響到白血病細(xì)胞MDR，它的降低變化，會(huì)給細(xì)胞凋亡機(jī)制帶來影響，不利于化療，以

13、至引起細(xì)胞耐藥。 研究發(fā)現(xiàn)：一些原癌基因的激活、抑癌基因的失活或某些細(xì)胞因子的改變是可能導(dǎo)致VEGF過高的原因。實(shí)驗(yàn)表明VEGF可通過對(duì)抗凋亡基因MCL1的誘導(dǎo)而抑制caspase3酶的活性，從而抵擋化療藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，最終導(dǎo)致MDR的產(chǎn)生。所以，加強(qiáng)對(duì)VEGF促白血病細(xì)胞增殖及抗凋亡的機(jī)制以及與其他抗凋亡因子之間關(guān)系的研究力度，會(huì)對(duì)研制新的白血病治療方案產(chǎn)生積極作用。         綜上所述，VEGF，sFas與白血病的MDR在不同程度上存在有相關(guān)性，但如今對(duì)兩者詳細(xì)聯(lián)系的研究開展并不多，通過本文研究可

14、以發(fā)現(xiàn)，白血病患者VEGF和sFas在表達(dá)上存在明顯正相關(guān)性，可見兩者在抗凋亡方面或許存在一些關(guān)系，但畢竟是不是這樣，還要通過以后的研究分析才能明白。乳酸脫氫酶（LDH）作為反應(yīng)腫瘤負(fù)荷的一個(gè)指標(biāo)，其顯示降低，則說明白血病的預(yù)后不良。我們?cè)谏厦娴膶?shí)驗(yàn)中將白血病患者按照LDH的中位值分為兩組進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)LDH中位值以上組的患者sFas和VEGF水平明顯高于中位值以下組患者的水平，則可以說明sFas和VEGF與白血病腫瘤負(fù)荷之間可能存在肯定的關(guān)聯(lián)，若將其作為監(jiān)測(cè)病情、判斷預(yù)后情況的標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)白血病的治療與診斷將產(chǎn)生積極意義。通過上述實(shí)驗(yàn)，可以很好的對(duì)腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制進(jìn)行了解，并對(duì)利用誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來抵擋腫瘤細(xì)胞耐藥這一點(diǎn)上面提供肯定的臨床依據(jù)。但由于患者體內(nèi)環(huán)境復(fù)雜多變，加上條件器械有限等原因，對(duì)是否能通過在體內(nèi)誘導(dǎo)凋亡來逆轉(zhuǎn)腫瘤MDR進(jìn)行治療，還需更多的工夫，更多的研究來證明。 參