介入化療對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡和增殖的影響

1、    介入化療對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡和增殖的影響        摘要目的：觀察介入化療對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡(APO)和細(xì)胞增殖的影響，并評(píng)價(jià)其療效。方法：對(duì)10例鼻咽癌患者經(jīng)顳淺動(dòng)脈逆行頸外動(dòng)脈插管，選擇腫瘤供血血管灌注化療藥物5-氟脲嘧啶、順鉑、平陽(yáng)霉素及煙酰胺。分別于化療前、化療后7 d取腫瘤組織，檢測(cè)凋亡細(xì)胞和增殖細(xì)胞抗原（PCNA）。結(jié)果：介入化療后臨床緩解率為63%?；熀? d細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）1.24%，高于治療前的0.52%。細(xì)胞增殖指數(shù)化療前為42.4%，化療后7

2、 d為 51.2%。呈增高趨勢(shì)。結(jié)論：鼻咽癌介入化療可改善局部癥狀，這是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而完成的。關(guān)鍵詞鼻咽癌介入化療細(xì)胞凋亡 Timing changes of apoptosis and proliferating cells nuclear antigen after intra-arteiral infusion chemotherapy for nasopharyngeal carcinomaMENG Zhao-weiHE En-haiMENG Zhao-lianLu Shi-junGUO Mei-hong（The Affiliated Hospital of Weifang Med

3、ical College ，Weifang 261031）（Institute of Pharmacon Test of Weifang）（Department of Pathology,Weifang Medical College）AbstractObjective:To investigate the timing changes of apoptosis （APO） and PCNA after intra-arterial infusion chemotherapy for nasopharyngeal carcinoma.Method:Ten patients were subje

4、cted to percutaneous superficial temporal artery catheterization and infusion of anticancer drugs:5-Fu,DDp,BLM, nicotinamide.The biopsy of nasopharyngeal tumor tissues was performed before chemotherapy and 7 days after chemotherapy. Apoptotic cells were examined by TOT-mediated DUTP-fluorescein and

5、labeling. The expression of proliferating cells nuclear antigen (PCNA) was detected with immunohistochemical staining. Result:AI of nasopharyngeal cancer cells before chemotherapy and 7 days after chemotherapy was 0.52% and 1.42%,PI was 42.4% and 51.2%.Conclusion:Intra-arterial infusion chemotherapy

6、 not only induced apoptosis effectively, but also inhibited temporarily tumor cells proliferation in patients. The curative surgical treatment should be performed as soon as possible after chemotherapy.Key wordsNasopharyngeal carcinomaInfusion chemotherapyApoptosis介入化療已逐漸在臨床開展。但化療對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用尚需作進(jìn)一步探討。新近

7、，我們對(duì)10例、期鼻咽癌患者經(jīng)雙側(cè)顳淺動(dòng)脈逆行插管化療，分別檢測(cè)化療前、后鼻咽癌細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)和增殖細(xì)胞指數(shù)(PI)，并進(jìn)行對(duì)比，借以觀察介入化療對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡的作用和影響。1資料與方法1.1臨床資料擇經(jīng)病理證實(shí)的、期鼻咽癌10例，男7例，女3例；平均年齡56歲。原發(fā)癌及頸部轉(zhuǎn)移灶均限于頸外動(dòng)脈支配區(qū),身體狀況尚好。均經(jīng)介入治療后常規(guī)放射治療。1.22)、順鉑(20 mg/m2)，平陽(yáng)霉素(7 mg/m2)和煙酰胺(300 mg/m21檢測(cè)凋亡細(xì)胞(細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑購(gòu)自北京醫(yī)科大學(xué)分子病理系，為美國(guó)Promega公司產(chǎn)品。細(xì)胞核染色黃色為陽(yáng)性細(xì)胞)。40倍高倍鏡下，計(jì)數(shù)1 000個(gè)細(xì)胞

8、中陽(yáng)性細(xì)胞，以百分?jǐn)?shù)表示，計(jì)數(shù)結(jié)果作為凋亡指數(shù)（AI）。細(xì)胞增殖核抗原（PCNA）的檢測(cè)：采用免疫組化的方法，PCNA的染色結(jié)果的計(jì)數(shù)方法同上，增殖細(xì)胞指數(shù)（PI）即（PCNA 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/癌細(xì)胞數(shù)）×100%。多組資料在方差分析的基礎(chǔ)上作兩兩比較，進(jìn)行q檢驗(yàn)。2結(jié)果介入化療后，10例鼻咽癌患者中5例癥狀好轉(zhuǎn)，但均有不同程度的食欲降低、乏力。肝腎功能正常，白細(xì)胞有輕度下降，與化療前相比無(wú)顯著性差異（P0.05)。介入化療后，腫瘤凋亡細(xì)胞的主要形態(tài)改變?yōu)榧?xì)胞皺縮，胞漿濃集，核固縮，胞膜突起或縊斷，形成凋亡小體。治療前鼻咽癌AI為（0.52±0.13)%，明顯低于正常組織的（2

9、.13±0.28)%(P0.01)。化療7 d，AI為（1.24±0.18)%，高于治療前?；熐癙I為（42.41±11.22)%，化療后為（51.28±10.77)%,化療后明顯高于化療前,差異有顯著性意義（P0.01)。3討論介入化療是通過(guò)腫瘤的主要供血血管一次性或多次性給予較高濃度的化療藥物，更好抑制或殺傷細(xì)胞2。同時(shí)藥物可通過(guò)血流循環(huán)至全身血液或組織起到作用。體外實(shí)驗(yàn)證明，化療藥物是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)消滅腫瘤細(xì)胞的3。我們采用末端轉(zhuǎn)移酶（TDT）介導(dǎo)脫氧核苷酸末端標(biāo)記法，檢測(cè)介入化療前后癌組織中凋亡細(xì)胞的變化，了解介入治療在人體內(nèi)對(duì)細(xì)胞凋亡的影

10、響。該方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：原位檢測(cè)可了解到凋亡細(xì)胞的分布特點(diǎn)；標(biāo)本經(jīng)甲醛固定后石蠟包埋，細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；可標(biāo)記出凋亡細(xì)胞；HE染色可除外壞死細(xì)胞，有較高的特異性1。細(xì)胞凋亡是機(jī)體主動(dòng)清除多余細(xì)胞的正常生理現(xiàn)象，凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞核皺縮，失去細(xì)胞間的連接，細(xì)胞漿濃集，胞核固縮，胞膜突起縊斷形成凋亡小體，并迅速被周圍的上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞所吞噬。細(xì)胞突變形成腫瘤后，細(xì)胞凋亡率明顯降低。本文資料表明，癌組織細(xì)胞凋亡率低于正常組織，癌組織細(xì)胞凋亡數(shù)量減少是癌腫不斷增大的主要原因。我們通過(guò)介入化療使癌組織中細(xì)胞凋亡數(shù)量增加，就會(huì)有效地控制癌癥的發(fā)展。目前研究證明，5-氟脲嘧啶、順鉑、平陽(yáng)霉素能使轉(zhuǎn)移灶退變

11、，是通過(guò)細(xì)胞凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的。它們也是通過(guò)誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡來(lái)治療癌腫的，是治療鼻咽癌的首選藥物。在鼻咽癌放療前應(yīng)用這三種藥物，觀察對(duì)APO的影響，主要是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡使腫瘤縮小或退變。腫瘤的生長(zhǎng)除與腫瘤細(xì)胞的凋亡有關(guān)外，與腫瘤細(xì)胞增殖率也有重要關(guān)系。我們通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原，發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞核抗原明顯高于正常組織。介入治療后，增殖細(xì)胞核抗原高于化療前。表明介入化療可使腫瘤組織增殖性受到抑制。通過(guò)以上機(jī)制介入化療可達(dá)到治療腫瘤的目的。 孟兆瑋（濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科山東濰坊，261031）何恩海（濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科山東濰坊，261031）孟兆蓮（濰坊市藥檢所）呂世軍（濰坊醫(yī)學(xué)院病理教研室）郭美紅（濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科山東濰坊，261031）參考文獻(xiàn)1，Wijsmal J H，Jonker R R，Kejzer R，et al. A new method to detect apoptosis in paraffin section in situ end-label