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1、整理課件DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定整理課件整理課件整理課件整理課件整理課件1、動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞的破碎較易,例如,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水 ,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過(guò)濾后收集濾液即可整理課件討論:加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?答:洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解整理課件討論:如果研磨不充分,會(huì)對(duì)討論:如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響?實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響?答:研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等為了純化提取的
2、為了純化提取的DNADNA,需,需要將濾液作進(jìn)一步處理要將濾液作進(jìn)一步處理討論:此步驟獲得的濾液中討論:此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分?可能含有哪些細(xì)胞成分?整理課件答:用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過(guò)反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)?整理課件答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi);方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離討論:方案二與方案三的原理有什么不同?整理課件DNA的析出用的是與濾液體積相等的冷卻
3、的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95 ) ,靜置23min,溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水整理課件鑒定DNA時(shí)在試管中先加入物質(zhì)的量的濃度為2mol/L 的NaCl溶液5ml于兩只試管中,其中一只加入DNA絲狀物,各加入二苯胺4ml 試劑?;旌暇鶆蚝?,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩只試管中溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否有藍(lán)色整理課件實(shí)驗(yàn)中對(duì)實(shí)驗(yàn)中對(duì)DNA進(jìn)行鑒定時(shí)做如下操作進(jìn)行鑒定時(shí)做如下操作:AB1加入加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5mL加入加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5mL2加絲狀物并攪拌加絲狀物并攪拌不加不加3加加4mL二苯胺二苯胺,混勻混勻 加加4mL二苯胺二苯胺,混勻混勻4沸水浴沸水浴5min沸水浴沸水浴5min實(shí)驗(yàn)
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