肺炎支原體的診斷方法

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上支原體肺炎是肺炎支原體引起的急性呼吸道感染伴肺炎，過去稱為“原發(fā)性非典型肺炎”的病原體中，肺炎支原體最為常見。可引起流行，約占各種肺炎的10%，嚴(yán)重的支原體肺炎也可導(dǎo)致死亡。主要發(fā)病機(jī)理肺炎支原體在發(fā)病前23天直至病愈數(shù)周，皆可在呼吸道分泌物中發(fā)現(xiàn)。它通過接觸感染，長在纖毛上皮之間，不侵入肺實(shí)質(zhì)，其細(xì)胞膜上有神經(jīng)氨酸受體，可吸附于宿主的呼吸道上皮細(xì)胞表面，抑制纖毛活動和破壞上皮細(xì)胞，同時產(chǎn)生過氧化氫進(jìn)一步引起局部組織損傷。其致病性可能與患者對病原體或其代謝產(chǎn)物的過敏反應(yīng)有關(guān)。感染后引起體液免疫，大多成年人血清中都已存在抗體，所以很少發(fā)病。臨床表現(xiàn)潛伏期23周，起病緩慢

2、，約1/3病例無癥狀。以氣管-支氣管炎、肺炎、耳鼓膜炎等的形式出現(xiàn)，而以肺炎最重。發(fā)病初有乏力、頭痛、咽痛、發(fā)冷、發(fā)熱、肌肉酸痛、食欲減退、惡心、嘔吐等，頭痛顯著。發(fā)熱高低不一，可高達(dá)39。23天后出現(xiàn)明顯的呼吸道癥狀，如陣發(fā)性刺激性咳嗽，咳少量黏痰或黏液膿性痰，有時痰中帶血。發(fā)熱可持續(xù)23周。熱度恢復(fù)正常后尚可遺有咳嗽，伴胸骨下疼痛，但無胸痛。體檢示輕度鼻塞、流涕，咽中度充血。耳鼓膜常有充血，約15%有鼓膜炎。頸淋巴結(jié)可腫大。少數(shù)病例有斑丘疹、紅斑或唇皰疹。胸部一般無明顯異常體征，約半數(shù)可聞干性或濕性啰音，10%15%病例發(fā)生少量胸腔積液。肺炎支原體是兒童及青少年社區(qū)獲得性肺炎的重要致病菌之

3、一，由于肺炎支原體感染的臨床癥狀并不典型，無法與其他肺炎相區(qū)別，因此支原體肺炎的診斷主要靠實(shí)驗(yàn)室檢測，常用的方法包括：支原體培養(yǎng)、血清學(xué)方法及分子診斷方法。 標(biāo)本采集肺炎支原體檢測常用的標(biāo)本包括：鼻咽拭子、口咽拭子、痰、組織、支氣管灌洗液、腦脊液等。 采樣時應(yīng)注意盡量采用帶塑料柄的尼龍拭子、滌綸拭子、植絨拭子或人造棉拭子，而不要采用帶木柄的棉花拭子，因?yàn)楹笳呖赡芎幸种浦гw生長及抑制分子反應(yīng)的成分。 支原體培養(yǎng)肺炎支原體培養(yǎng)通常采用 SP4 培養(yǎng)基，有液體和固體兩種。在液體培養(yǎng)基中加有酚紅，肺炎支原體水解葡萄糖使培養(yǎng)基 pH 值發(fā)生變化從而使培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。在固體培養(yǎng)基上，肺炎支原體呈典

4、型的油煎蛋樣菌落，培養(yǎng)法由于需要時間較長，很少用于臨床診斷。 優(yōu)點(diǎn)：1. 特異性高，陽性結(jié)果意味著 100% 的特異性；2. 能獲得致病菌株，可以進(jìn)一步用于分型或藥敏試驗(yàn)；3. 有商品化的培養(yǎng)基（SP4 培養(yǎng)基）。 缺點(diǎn)：1. 由于支原體生長緩慢，培養(yǎng)時間較長，通常需要數(shù)天至數(shù)周；2. 對操作者技術(shù)要求較高；3. 敏感性較差，培養(yǎng)陽性率低。 血清學(xué)方法血清學(xué)檢測方法是肺炎支原體診斷和流行病學(xué)調(diào)查的主要方法，檢測的抗體包括 IgM 和 IgG 兩種。通常在感染后 1 周可以測到肺炎支原體抗體，3-6 周抗體滴度達(dá)到高峰，然后開始下降。急性期 IgG 抗體的陽性率小于 50%，恢復(fù)期 IgG 抗體

5、陽性率可以達(dá)到 82%。同樣，在兒童患者中，急性期 IgM 抗體的敏感性僅為 31.8%，但利用急性期好恢復(fù)期雙份血清檢測時，IgM 抗體的敏感性可以增加到 88.6%。因此單獨(dú)的一次血清學(xué)檢測存在漏診的風(fēng)險(xiǎn)，恢復(fù)期與急性期相比抗體滴度升高 4 倍或以上有診斷意義。 優(yōu)點(diǎn)：1. 有商品化試劑盒應(yīng)用；2. 可以進(jìn)行半定量的檢測； 缺點(diǎn)：1. 特異性較差，有可能出現(xiàn)假陽性；2. 通常需要急性期和恢復(fù)期雙份血清才能確診；3. 樣本周轉(zhuǎn)時間較長，可能會影響臨床的診斷及治療；4. 部分病人 IgM 抗體持續(xù)陰性或者 IgG 抗體持續(xù)增高會影響診斷。 分子診斷方法最常用的分子診斷方法為 PCR 技術(shù)，針對

6、肺炎支原體的 ATP 酶基因序列，P1 粘附素基因序列及 16SrRNA 的保守區(qū)域等設(shè)計(jì)引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。同時實(shí)時定量 PCR 也可用于肺炎支原體的檢測，與普通 PCR 相比，可以縮短樣本周轉(zhuǎn)時間，減少電泳等步驟。 優(yōu)點(diǎn)：1. 有商品化試劑盒應(yīng)用；2. 高靈敏度高特異性；3. 檢測速度快，樣本周轉(zhuǎn)時間短，利于臨床診斷及治療； 4. 可以對支原體菌株進(jìn)行分子分型。 缺點(diǎn)：1. 價(jià)格比較貴；2. 需要特殊的設(shè)備和技術(shù)；3. 檢測沒有標(biāo)準(zhǔn)化，缺乏臨床比較驗(yàn)證。 總 結(jié)多種檢測方法聯(lián)合應(yīng)用可以提高檢測的敏感性及特異性，但是由于各種方法的敏感性及特異性不同，當(dāng)同時應(yīng)用兩種或兩種以上方法時，可能會出現(xiàn)各種方法間結(jié)果并不相