粉針無菌灌裝工藝過程驗證方案匯總

1、粉針無菌灌裝工藝過程驗證方案 方案編號：文件類別：技術 車 間：起草人： 日期： 年 月 日審核人： 日期： 年 月 日審核人： 日期： 年 月 日批準人： 日期： 年 月 日目 錄1、 目的 32、 范圍 33、 職責 34、 內容 34.1設備概述 34.2設備條件確認 34.3試驗條件確認 44.4培養(yǎng)基模擬分裝前各項準備試驗 44.5培養(yǎng)基模擬試驗過程 54.6實驗過程監(jiān)測 65、驗證偏差處理 86、驗證周期 8記錄9驗證結論及評價方案18驗證方案批準書191、目的在廠房及空調凈化系統(tǒng)、工藝用水系統(tǒng)及設備已驗證合格，無菌室按規(guī)定方法和要求清潔消毒，無菌作業(yè)所用的工器具等物品已滅菌,工藝

2、規(guī)程、標準操作程序、質量標準和檢驗操作規(guī)程等技術文件已制訂并批準執(zhí)行，人員已經(jīng)過培訓的基礎上,進行培養(yǎng)基模擬分裝試驗。通過培養(yǎng)基模擬分裝試驗,證明分裝過程所采用的各種方法和各種規(guī)程在防止微生物污染的水平達到可接受的合格標準的能力，提供保證所生產(chǎn)產(chǎn)品的無菌性的可信限度達到可接受的合格標準的證據(jù)，綜合評價粉針車間無菌保證能力。2、范圍適用于粉針車間培養(yǎng)基模擬分裝試驗。3、職責3.1 驗證小組負責驗證方案及報告的起草。3.2 質管部負責驗證過程的監(jiān)督、取樣及檢驗工作。 3.3驗證小組組長負責結果的評估。3.4驗證委員會主任負責驗證方案及報告的批準。3.5驗證小組部門姓名驗證小組組長質 管 部車 間4

3、、內容：4.1設備概述：粉針劑無菌藥品的分裝采用XLF型西林瓶高速螺桿分裝機。共5臺，編號分別為1號機、2號機、3號機、4號機、5號機。4.2設備條件確認 ： 項目標準要求檢查結果1號機2號機3號機4號機5號機設備資料齊全設備預確認完成安裝確認（IQ）完成運行確認（OQ）完成 性能確認（PQ）完成設備清潔、滅菌完成檢查人日期結論：5臺設備均可承擔培養(yǎng)基模擬分裝試驗。（是 否）確認人： 日期： 4.3試驗條件確認項 目標準要求檢查結果分裝加塞機驗證完成甲醛熏蒸消毒效果驗證完成無菌壓縮空氣驗證完成干熱滅菌過程驗證完成濕熱滅菌過程驗證完成空氣凈化系統(tǒng)驗證完成純化水系統(tǒng)驗證完成注射用水系統(tǒng)驗證完成操作

4、人員培訓完成廠房設施已消毒并按無菌區(qū)管理完成檢查人日期結論：具備進行培養(yǎng)基模擬分裝試驗的條件。（是 否）確認人： 日期： 4.4培養(yǎng)基模擬分裝前各項準備試驗4.4.1胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基滅菌效果試驗方法：培養(yǎng)基分裝于1000毫升錐形瓶中，于121濕熱滅菌20min，冷卻至室溫,取樣10支于32培養(yǎng)14天（附表1）。合格標準：應無細菌生長。結論：無細菌生長。（是 否） 確認人： 日期： 4.4.2培養(yǎng)基的微生物生長性能及乳糖對其影響試驗方法：取30支裝有經(jīng)滅菌的胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基的無菌管制瓶，每10支一組，共分三組，每一組中5支各加0.25g乳糖，5支不加乳糖。a. 第一組10支無菌管制瓶

5、進行枯草芽孢桿菌接種，接種量100cfu，30-35培養(yǎng)3-5天。b. 第二組10支無菌管制瓶進行生孢梭菌接種，接種量100 cfu，30-35培養(yǎng)3-5天。c. 第三組10支無菌管制瓶進行白色念珠菌接種，接種量100cfu，23-28培養(yǎng)3-5天（附表2）。合格標準：均應出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長。結論：均出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長。（是 否）確認人： 日期： 乳糖無菌性試驗方法：乳糖分裝于雙層塑料袋中，密封，用鈷60射線照射滅菌。將滅菌乳糖粉末在無菌室取樣，按無菌檢查法檢驗。 合格標準：應無細菌生長。結論：無細菌生長。（是 否） 確認人： 日期： 乳糖溶解性試驗 方法：在兩個裝有1

6、.0 g無菌乳糖粉末的20ml西林瓶中，分別加入溫度約為25和32的SCDM培養(yǎng)基適量，振搖，使乳糖粉末全部溶解，計算濃度，取濃度數(shù)值小的作為乳糖溶解性結果。結論：乳糖能溶解于25和35的SCDM培養(yǎng)基中，最大濃度約為 %（g/ml）。 確認人： 日期： 4.5培養(yǎng)基模擬分裝試驗過程人員數(shù)量及人員行為：在分裝室內當班工作的操作人員14名、QA監(jiān)督員1名、車間管理人員1名、其他人員4名（附表3）。所有人員均按實際生產(chǎn)時狀態(tài)工作或移動。試驗方法：西林瓶在超聲波洗瓶機中，用純化水粗洗、注射用水精洗，在隧道烘箱內350以上干熱滅菌不少于5分鐘，除菌、除熱原。鹵化丁基膠塞經(jīng)注射用水漂洗，在121濕熱滅菌

7、30分鐘，干燥。乳糖粉末在100級潔凈度層流保護下經(jīng)螺桿分裝機定量分裝到西林瓶中，每瓶0.25g，分裝機速度調至最低。用蠕動泵（配裝時間繼電器）手工注入SCDM培養(yǎng)基，每瓶2.5ml（其硅膠管應經(jīng)121，濕熱滅菌20分鐘），壓塞、軋蓋，按分裝時間對每個盛裝西林瓶的托盤編號，并記錄每盤的分裝時間。模擬分裝進行3批，每批不少于1050011000瓶。將模擬分裝生產(chǎn)的全部樣品上下顛倒振搖，使乳糖全部溶解，并使培養(yǎng)基與整個瓶子的內表面及膠塞內表面充分接觸。然后放入培養(yǎng)房中，先在23-28，培養(yǎng)7天，再轉入30-35條件下，培養(yǎng)7天。檢查培養(yǎng)的全部樣品的微生物生長情況并分別記錄。若發(fā)現(xiàn)污染應明確記錄瓶數(shù)

8、，同時應檢查鋁蓋、膠塞的密封情況，若有破損應記錄并檢查破損原因（附表4）。微生物生長瓶數(shù)污染率（陽性生長率）=×100% 分裝總瓶數(shù)-破損瓶數(shù)合格標準：可信限為95時污染率0.1%，即10000瓶模擬分裝允許染菌的瓶數(shù)量不得超過4瓶。結論：污染率0.1%,符合規(guī)定。（是 否） 確認人： 日期： 陽性對照方法：在模擬分裝過程中，隨機取出30支裝有培養(yǎng)基的西林瓶，其中10支接入小于100 cfu的白色念珠菌，在23-28培養(yǎng)3-5天；10支接入小于100 cfu的枯草芽孢桿菌；10支接入小于100 cfu的生孢梭菌，在30-35各培養(yǎng)3-5天。做為陽性對照（附表5）。合格標準：3-5天內

9、至少50%的西林瓶中加菌培養(yǎng)基中有明顯的接種微生物的生長。結論：符合規(guī)定。（是 否） 確認人： 日期： 4.5.4陰性對照在模擬分裝過程結束時，取僅裝有培養(yǎng)基的西林瓶10支，壓塞、軋蓋，作為陰性對照（附表5。合格標準：應無菌生長。結論：無菌生長。（是 否）確認人： 日期： 4.6 實驗過程監(jiān)測4.6.1空瓶、膠塞無菌檢查在分裝前、中、后分別從每臺分裝線上隨機抽取膠塞、空西林瓶，5臺機共抽60支膠塞、30支空瓶，進行無菌檢驗（附表5）。合格標準：應無菌生長。結論：無菌生長。（是 否） 確認人： 日期： 4.6.2人員檢測人員更衣完畢，在實驗操作前、實驗操作過程中、實驗結束后隨機抽取5人，用棉簽擦

10、拭法（滅菌棉簽用無菌生理鹽水濕潤）在易污染部位取樣（如手、前胸、手臂）等考察微生物污染情況，每棉簽約10×102，結果見附表6。合格標準：細菌1cfu/棉簽結論：符合規(guī)定。（是 否） 確認人： 日期： 4.6.3無菌區(qū)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測標準及監(jiān)測頻次潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級別動態(tài)監(jiān)測標準潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)0.5µm5µm浮游菌/立方米沉降菌/皿100級3,50005110,000級350,00020001003依據(jù)空氣凈化系統(tǒng)驗證方案檢測方法檢測，檢測頻次為每批分裝前、中、后三次。如果監(jiān)測結果不符合潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級別動態(tài)監(jiān)測標準，則

11、應對該區(qū)域內的人員進行精減,直至監(jiān)測合格。結論： 確認人： 日期： 4.6.4實驗前及結束后，用棉簽擦拭法在操作臺面，墻面，地面等處各取樣1次，考察微生物污染情況，每棉簽約10×102（附表7）。合格標準：細菌1 cfu /棉簽結論：符合規(guī)定。（是 否） 確認人： 日期： 4.6.5無菌操作區(qū)最多人員數(shù)量確認：培養(yǎng)基模擬分裝驗證結果合格，則在培養(yǎng)基模擬分裝試驗過程中操作、管理、監(jiān)督的人數(shù)即為無菌區(qū)最多人數(shù)。結論： 確認人： 日期： 4.6.6分別在西林瓶滅菌后4、6小時（置于100級垂直層流保護下），各取10支，分別分10管，每管1支瓶，對不同暫存時間的瓶分別進行無菌檢查。（附表8）

12、分別取滅菌后貯存于暫存間24、36、48小時的膠塞各50支，分別分10管，每管5支膠塞，對不同暫存時間的膠塞分別進行無菌檢查。（附表9）合格標準：應無菌。結論：無菌生長。（是 否）確認人： 日期： 4.6.7分別取滅菌后存放于三更24、36、48小時的無菌服各兩件，用一無菌鑷子夾住無菌鹽水棉簽在每件衣服各取五點擦拭，將取樣后的5個棉簽分別用無菌吸管加水2ml，在旋渦振蕩器上振蕩2分鐘，用吸管吸取加入的水，分別置于5個培養(yǎng)皿中，向培養(yǎng)皿中注入培養(yǎng)基，待其凝固后在30-35培養(yǎng)2天，同時作空白對照。（附表10）合格標準：細菌1 cfu /棉簽結論：符合規(guī)定。（是 否）確認人： 日期： 5、驗證偏差

13、處理在整個驗證過程中，對于不合格的條項，應進行有針對性的分析，查明原因及時整改，并對該條項加倍驗證，直到驗證合格為止。6、驗證周期6.1大修后或重大生產(chǎn)工藝的變更后要進行再驗證。6.2出現(xiàn)無菌檢查陽性、內毒素不合格質量問題時進行再驗證。6.3每年至少進行一次培養(yǎng)基分裝試驗每次至少一批。6.4無菌分裝生產(chǎn)線的每位員工每年至少參加一次培養(yǎng)基分裝試驗，以檢定無菌作業(yè)人員的操作是否規(guī)范。附表1 培養(yǎng)基無菌性試驗記錄培養(yǎng)基名稱分裝量培養(yǎng)時間 年 月 日 年 月 日培養(yǎng)溫度瓶號12345678910培養(yǎng)情況試驗人審核人時間注：培養(yǎng)后瓶中培養(yǎng)基無任何微生物生長填“”，否則填：“+”。附表2 培養(yǎng)基微生物生長

14、性能試驗記錄接種菌名枯草芽孢桿菌接種量培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時間年 月 日 年 月 日樣品瓶號加乳糖不加乳糖12345678910培養(yǎng)情況試驗人審核人接種菌名生孢梭菌接種量培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時間年 月 日 年 月 日樣品瓶號加乳糖不加乳糖12345678910培養(yǎng)情況試驗人審核人接種菌名白色念珠菌接種量培養(yǎng)溫度23-28培養(yǎng)時間年 月 日 年 月 日樣品瓶號加乳糖不加乳糖12345678910培養(yǎng)情況試驗人審核人注：培養(yǎng)后瓶中培養(yǎng)基無任何微生物生長填“”，否則填“+”。附表3培養(yǎng)基模擬分裝試驗無菌室人員簽名表姓名職務姓名職務總人數(shù)QA附表4污染率監(jiān)測記錄車間： 批次項目第一批第二批第三批2

15、3-2830-3523-2830-3523-2830-35總培養(yǎng)瓶數(shù)微生物數(shù)生長瓶數(shù)破損瓶數(shù)污染率（陽性生長率）%結論方案日期監(jiān)測人復核人附表 5 對照品培養(yǎng)記錄樣品陰性對照品種類培養(yǎng)基10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結果微生物生長率%培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間14天試驗人復核人取樣日期方案日期樣品陽性對照品種類白色念珠菌10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結果微生物生長率%培養(yǎng)溫度23-28培養(yǎng)時間14天試驗人審核人取樣日期方案日期樣品陽性對照品種類枯草芽孢桿菌10支第一批第二批第三批培養(yǎng)結果微生物生長率%培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時間14天試驗人審核人取樣日期方案日期樣品陽性對照品種類生孢梭菌10支第一批第二批第三

16、批培養(yǎng)結果微生物生長率%培養(yǎng)溫度30-35培養(yǎng)時間14天試驗人審核人取樣日期方案日期附表6實驗過程無菌監(jiān)測記錄 結果名稱分裝前分裝中分裝后結論123451234512345第一批需、厭菌瓶塞真菌瓶塞第二批需、厭菌瓶塞真菌瓶塞第三批需、厭菌瓶塞真菌瓶塞人員擦拭第一批第二批第三批第一批第二批第三批取樣人取樣日期檢測人方案日期審核人注：培養(yǎng)后培養(yǎng)基中無任何微生物生長填“”，否則填：“+”。附表7實驗過程潔凈室空氣潔凈度（環(huán)境）監(jiān)測記錄結果名稱分裝前分裝中分裝后結論123123456789123塵粒數(shù)/m3第一批0.5µm5µm第二批0.5µm5µm第三批0.5µm5µm浮游菌/m3第一批第二批第三批沉降菌/皿第一批第二批第三批表面擦拭菌第一批第二批第三批第一批第二批第三批取樣人取樣日期檢驗人方案日期復核人附表8空瓶無菌監(jiān)測記錄 結果名稱空瓶4h空瓶6h結果1234512 345第一批需、厭菌真菌第二批需、厭菌真菌第三批需、厭菌真菌第一批取樣日期方案日期第二批取樣日期方案日期第三批取樣日期方案日期取樣人檢測人復核人注：培養(yǎng)后培養(yǎng)基中無任何微生物生長填“”，否則填：“+”。附表9膠塞無菌監(jiān)測記錄 結果名稱24h（暫存室）36h（暫存室）48h（暫存室）結果123451234512345第一批需、厭