常用技術(shù)經(jīng)典案例ci研究

1、技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）目錄【文獻(xiàn)精講】circRNAs 功能機(jī)制研究2【文獻(xiàn)精講】circRNA 功能新視角：復(fù)合體5【文獻(xiàn)精講】外泌體中的 circular RNAs，精準(zhǔn)醫(yī)療的大門(mén)已為你打開(kāi)9生物1 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）【文獻(xiàn)精講】circRNAs 功能機(jī)制研究circRNA 是一類(lèi)具有調(diào)控表達(dá)潛能的非編碼環(huán)狀閉合 RNA。隨著 NGS 的發(fā)展及生物信息分析的進(jìn)步，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物細(xì)胞中，存在著成千上萬(wàn)的 circRNAs。而對(duì)其功能的研究發(fā)現(xiàn)也表明，circ

2、RNA 可以作為 microRNA 的海綿吸附體而影響下游的表達(dá)，是一種典型的 ceRNA 作用機(jī)制。另外， 由于 circRNA 與其相同來(lái)源靶的線(xiàn)性 mRNA 的序列高度相似性，可通過(guò) cis 調(diào)控其因的表達(dá)。來(lái)自中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)的研究通過(guò)對(duì) circRNAs新思路。作用機(jī)制的研究為我們提供了 circRNA 研究的circRNAs 篩選已有研究表明 ncRNAs 可以參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控。因此，為了直接找到相關(guān)的 circRNA，用 CLIP 實(shí)驗(yàn)，篩選了能特異性地與 RNA 聚合酶（Pol）結(jié)合的 ncRNAs。研究在 HeLa 細(xì)胞中將 Pol CLIP 樣本進(jìn)行 RNA，共鑒定到 111

3、個(gè)高通量二代circRNAs ， 同時(shí)也發(fā)現(xiàn)大部分的 circRNA 表達(dá)豐度比較低。對(duì) 15 個(gè)表達(dá)高的circRNAs 進(jìn)行了 RNAIP 和 RT-PCR 驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)一些 circRNAs（circCLTC），特異性地在 HeLa 和和 circPAIP2 子間的內(nèi)含containing ci核中，表明HEK293 cells 細(xì)胞中表達(dá)。另外，研究也對(duì)其中的兩個(gè)，circEIF3J-PCR 驗(yàn)證，表明在這些 circRNAs 中，外顯生物特異性保留內(nèi)含子的環(huán)狀 RNA 為 intron-驗(yàn)表明 circEIF3J 和 circPAIP2于細(xì)胞控的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。circRNA 表達(dá)與功能分析

4、1 EIciRNAs 可以帶著側(cè)翼序列過(guò)表達(dá)2 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）之前的研究表明 circRNAs 的外顯子側(cè)翼序列包含有 Alu 原件，側(cè)翼序列由于序列的重復(fù)而成環(huán)。對(duì) 15 個(gè)驗(yàn)證的 circRNAs 序列進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)其中有 4 個(gè)是包含有側(cè)翼Alu 原件，另外 4 個(gè)不只包含側(cè)翼 Alu 原件。研究將不包含和包含側(cè)翼序列，包含1-kb 互補(bǔ)重復(fù)序列的 circEIF3J 和 circPAIP2 構(gòu)建載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)包含側(cè)翼序列的circEIF3J 和 circPAIP2在 HeLa 和 HEK293 細(xì)胞中表達(dá)明顯

5、增加。該研究表明，包含有側(cè)翼序列的 circRNA 是可以進(jìn)行過(guò)表達(dá)構(gòu)建的。該構(gòu)建有便于對(duì) circRNA 進(jìn)行功能研究。2 EIciRNAs 通過(guò) cis 模式調(diào)控表達(dá)為了研究 EIciRNAs 的調(diào)控功能，研究首先對(duì) circEIF3J 和 circPAIP2 進(jìn)行了敲降實(shí)驗(yàn)（siRNA or ASOs）。RT-PCR 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)因的 mRNA 表達(dá)明顯降低，而對(duì)EIF3J 和 PAIP2附近的其他表達(dá)沒(méi)有明顯影響。為了確認(rèn)因轉(zhuǎn)錄的影響，將敲降后的細(xì)胞進(jìn)行 run-on 實(shí)驗(yàn)，表明 EIF3J 和 PAIP2 的轉(zhuǎn)錄水平確實(shí)降低。但當(dāng)將EIF3J 和 PAIP2 的 mRNA 進(jìn)行敲降后進(jìn)行

6、 run-on 實(shí)驗(yàn)，EIF3J 和 PAIP2 的轉(zhuǎn)錄水平?jīng)]有顯著性影響，circEIF3J 和 circPAIP2 的表達(dá)水平也沒(méi)有收到影響。用前面實(shí)驗(yàn)的載體進(jìn)行過(guò)表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，EIF3J 和 PAIP2 的 mRNA 表達(dá)水平?jīng)]有明顯變化。RNA-DNA 雙FISH 實(shí)驗(yàn)表明 circEIF3J 和 circPAIP2 除了在因區(qū)域出現(xiàn)外，在整個(gè)細(xì)胞一半以上區(qū)域達(dá)。3 EIciRNAs為了找了 Pol外，circPAIP2 可能通過(guò) cis 模式調(diào)控的表生物啟動(dòng)子結(jié)合，研究進(jìn)行了 pulldown 實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)除NA(snRNA)與 circEIF3J 和 circPAIP2 結(jié)合。進(jìn)一步的

7、染色質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn)（ChIRP）表明 EIciRNA 可以結(jié)合到其 因的啟動(dòng)子區(qū)域。ChIP 實(shí)驗(yàn)表明 U1 snRNP 可以結(jié)合到 EIF3J 和 PAIP2 的啟動(dòng)子區(qū)域。該結(jié)果表明，circEIF3J 和 circPAIP2 可能通過(guò)與 U1 snRNP 和 Pol形成復(fù)合體，結(jié)合到其因的啟動(dòng)子區(qū)域調(diào)控其表達(dá)。4 U1 snRNP 是 EIciRNAs 行使 cis 調(diào)控必需的為了確認(rèn) U1 snRNP 是否調(diào)控了 EIciRNAs 的功能，研究用 U1 阻塞劑（AMO）消除 U1 snRNP 表達(dá)，發(fā)現(xiàn)可以抵消因?yàn)?EIciRNA 敲降而引起的對(duì)因表達(dá)的影響。同時(shí)，run-on 實(shí)驗(yàn)表明，

8、U1 AMO 處理可以減少 EIF3J 和 PAIP2 的轉(zhuǎn)錄水平。另外，U1 AMO 處理也減弱了 Pol和 EIciRNAs 的結(jié)合效率。EIciRNAs 和因啟動(dòng)子區(qū)的結(jié)合也降低。當(dāng)敲除 EIciRNAs 后，Pol與 U1 snRNP 蛋白與其因啟動(dòng)子的結(jié)合也減弱。FISH 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了 EIciRNA 和 U1 snRNA 在細(xì)胞核中與表明 U1 snRNP 是 EIciRNAs 行使 cis 調(diào)控必需的。5 U1 snRNA-EIciRNAs 的結(jié)合對(duì)功能行使非常重要因的共。該結(jié)果既然 U1 snRNA 能和 EIciRNAs 結(jié)合行使功能，那么，U1 snRNA 結(jié)合的位點(diǎn)在哪？通

9、過(guò)序列分析發(fā)現(xiàn)，在 EIciRNAs 的 5端保留的內(nèi)含子區(qū)域含有一個(gè) U1 snRNA 結(jié)合位點(diǎn)。研究用 AMO 阻斷該位點(diǎn)后發(fā)現(xiàn) U1 snRNA 和 EIciRNAs 的結(jié)合能力降低。同3 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）時(shí)，Pol CLIP 實(shí)驗(yàn)也驗(yàn)證了 AMO 阻斷后 Pol和 EIciRNAs 的結(jié)合也降低，run-on表明因的轉(zhuǎn)錄水平也相應(yīng)的下降。ChIP 和 ChIRP 實(shí)驗(yàn)分別表明，用 AMO 進(jìn)行阻斷后，U1 snRNP 和 EIciRNA 與因啟動(dòng)子的結(jié)合能力也降低。該結(jié)果表明這種特異的 U1 snRNA 和 EI

10、ciRNA 結(jié)合對(duì)于 EIciRNA 轉(zhuǎn)錄調(diào)控的獲得是非常必要的。最后，依據(jù)以上實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，研究繪制了一種名為 EIciRNAs 的環(huán)狀 RNA 調(diào)控表達(dá)的作用模式圖，為我們理解 circRNA 的調(diào)控機(jī)制提供了強(qiáng)的參考。生物小結(jié)circRN但是，作為機(jī)制，使得對(duì)環(huán)狀 RNA 的研究起步比較晚。，circRNA 是目前以致未來(lái)幾年內(nèi)轉(zhuǎn)以看到，由于環(huán)狀 RNA 特有的環(huán)錄組研究領(lǐng)域中熱點(diǎn)中的熱點(diǎn)。從現(xiàn)有的形結(jié)構(gòu)以及表達(dá)豐度低、功能作用方式未知等，目前可循或可參考的資料非常非常少。該文獻(xiàn)從前期篩選，結(jié)構(gòu)分析，下游及調(diào)控模式探究等方面提供了方法學(xué)和思路的詳盡描述，為我們想趕在第一波就進(jìn)入該研究領(lǐng)域的

11、科研提供了參考。原文出處：Li Z, Huang C, Bao C,. Exon-intron circular RNAs regulate transcription in the nucleus.Nat Struct Mol Biol. 2015,256-64.4 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）【文獻(xiàn)精講】circRNA 功能新視角：復(fù)合體circular RNAs 是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)新的具有調(diào)控功能的非編碼 RNA。circular RNAs 廣泛存在于生物發(fā)育各個(gè)階段，由于其封閉環(huán)狀的特性而能穩(wěn)定存在?，F(xiàn)有研究認(rèn)為 circR

12、NAs 可以通過(guò)作為 miRNA 的海綿吸附體調(diào)控的表達(dá)。circRNAs 是否可以通過(guò)其他的形式行使功能呢？今天，小編和大家一起通過(guò)一篇在Nucleic AcidsResearch上的研究來(lái)了解下 circRNAs 通過(guò)和蛋白形成復(fù)合體影響細(xì)胞周期的生物學(xué)功能。研究背景Foxo3 是一個(gè)參與發(fā)展過(guò)程的，通過(guò)增強(qiáng) Akt 的活性或者抑制 PTEN 的活性而抑制腫瘤發(fā)展。已有研究表明，上調(diào) Foxo3 會(huì)影響細(xì)胞周期過(guò)程而減少細(xì)胞衰老。circular Foxo3（circ-Foxo3）和線(xiàn)性 Foxo3 都來(lái)源于 Foxo3。既然 Foxo3 影響了細(xì)胞周期過(guò)程，circ-Foxo3 是否也參

13、與其中呢？本研究通過(guò)一系列的實(shí)驗(yàn)證明， circ-Foxo3 可以和p21 與 CDK2 形成三元復(fù)合體，抑制了細(xì)胞周期過(guò)程。研究結(jié)果1 circ-Foxo3人和小circ-Foxo3（ 非腫瘤細(xì)胞可能也參與生物研究，研究檢測(cè)了小鼠腫瘤細(xì)胞系中源性）和 Foxo3 的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞系和呈負(fù)相關(guān)性。因此 該結(jié)果暗示 circ-Foxo3胞系培養(yǎng)和細(xì)胞周期分布與 circ-Foxo3 表達(dá)檢測(cè)表明，circ-Foxo3 表達(dá)水平在細(xì)胞周期抑制時(shí)顯著增加。在用細(xì)胞增殖因子表皮生長(zhǎng)因子（ EGF） 處理后 circ-Foxo3 表達(dá)水平顯著減少， 而在增加 EGF 抑制子AG1478 時(shí)會(huì)顯著增加

14、。因此，circ-Foxo3 的表達(dá)和細(xì)胞周期與細(xì)胞增殖相關(guān)。為了確認(rèn) circ-Foxo3 在細(xì)胞周期過(guò)程中的作用，研究用 siRNA 敲降了 circ-Foxo3。細(xì)胞增殖 assay 檢測(cè)表明 circ-Foxo3 siRNA 增加細(xì)胞增殖能力。細(xì)胞周期分析顯示大部分的 circ-Foxo3 siRNA 細(xì)胞處于 S 和 G2 期。因此，敲降 circ-Foxo3 siRNA 提高了細(xì)胞周期過(guò)程。此外， 研究檢測(cè)了 circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的細(xì)胞增殖能力。結(jié)果顯示，circ-Foxo3轉(zhuǎn)染細(xì)胞系 NIH3T3 的增殖速度變慢。細(xì)胞周期分析顯示期。小結(jié)的轉(zhuǎn)染細(xì)胞停滯在 G1 時(shí)以上

15、做了一系列的細(xì)胞表型實(shí)驗(yàn)，無(wú)論是 siRNA 還是過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)染，最后想說(shuō)明的問(wèn)題是，circ-Foxo3 的表達(dá)異常影響了細(xì)胞周期和細(xì)胞的增殖能力。2 circRNA 互作蛋白分析找到了生物學(xué)表型，接下來(lái)的問(wèn)題是內(nèi)在的作用機(jī)制是什么？5 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）本研究的思路比較特殊，研究想看看是否有和 circ-Foxo3 結(jié)合的相關(guān)細(xì)胞周期蛋白。IP 實(shí)驗(yàn)表明，circ-Foxo3 可以特異性拉下 CDK2，CDK6，p16，p21 和 p27。反向 IP 實(shí)驗(yàn)表明這些蛋白也能在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中拉下的 circ-Foxo3。其中，CD

16、K2 和p21 的作用更為顯著，CDK2 和 p21 在主要在 G1 時(shí)期的細(xì)胞中能拉出 circ-Foxo3。因此，研究猜測(cè) CDK2 和 p21 參與了 circ-Foxo3 調(diào)控細(xì)胞周期過(guò)程。生物為了驗(yàn)證這三者之間的互作關(guān)系，研究又做了進(jìn)一步的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。首先，Western blot 分析表明在 circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中，CDK2 能結(jié)合的 p21，對(duì)照細(xì)胞中結(jié)合的 cyclin A 和 cyclin E。同時(shí)，轉(zhuǎn)染細(xì)胞中，cyclin A 和cyclin E 也是拉下更少的 CDK2。另外，研究也試著將其他的（circ-Amotl1 和 Foxo3）轉(zhuǎn)染測(cè)試 CDK2 和 p

17、21 的結(jié)合能力，結(jié)果顯示 p21 可以特異性的在 circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中拉下 CDK2，CDK2 也是特異性的在 circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中拉下p21。由于 circ-Foxo3 是特異性的存在于 G1 時(shí)期，因此，研究在 G1 時(shí)期的細(xì)胞也進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示，G1 時(shí)期 p21 可以拉下的 CDK2。同樣，在 G1 時(shí)期，CDK2 可以拉下的 p21。以上的實(shí)驗(yàn)來(lái)回進(jìn)行兩兩作用驗(yàn)證，最終的結(jié)論指向一個(gè)，circ-Foxo3，CDK2 和p21 很有可能形成了三元復(fù)合體。為了驗(yàn)證該假設(shè)，研究又進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，在 circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染細(xì)胞中，p21 形成

18、略大于 CDK2 和 p21 大小相加的蛋白，而6 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）在對(duì)照細(xì)胞系中，主要是 p21 的單體蛋白。CDK2 的實(shí)驗(yàn)也同樣驗(yàn)證了在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中，會(huì)形成集合 p21 的 dimer。小結(jié):以上進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)說(shuō)明了一個(gè)問(wèn)題，circ-Foxo3 可以和 CDK2 和 p21 形成三元復(fù)合體。3 復(fù)合體功能驗(yàn)證既然 circ-Foxo3 和 CDK2，p21 形成復(fù)合體。那么，破壞該復(fù)合體會(huì)引起什么變化呢？研究首先在 siRNA circ-Foxo3 細(xì)胞中 IP 檢測(cè) CDK2 和 p21，結(jié)果顯示和 p21結(jié)合

19、的 CDK2 減少了，和 CDK2 結(jié)合的 p21 也減少了。生檢測(cè)表明，siR物NA 細(xì)胞系中 p21 和 CDK2同樣，主要以單體存在。當(dāng)把 p21 和 CDK2 敲除后，p21 和 CDK2 探針拉下的 circ-Foxo3 也變少。因此，破壞復(fù)合體中任何一個(gè)，直接影響整個(gè)復(fù)合體的形成。另外，為了驗(yàn)證 circ-Foxo3 特異性結(jié)合 CDK2 和 p21，研究用 circ-Foxo3 用來(lái)Northern blot 的探針 pull down p21 和 CDK2。結(jié)果顯示，circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染細(xì)胞系能拉下來(lái)，而 siRNA 細(xì)胞系拉下很少。在 p21 siRNA 細(xì)胞系只能拉下

20、 CDK2，CDK2 siRNA只能拉下p21，表明在細(xì)胞中存在著 circ-Foxo2-CDK2 和 circ-Foxo2-p21 復(fù)合體。7 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）為了進(jìn)一步驗(yàn)證復(fù)合體的穩(wěn)定性，研究用 RNAse A 處理了 circ-Foxo3 轉(zhuǎn)染細(xì)胞和對(duì)照。發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中還是能檢測(cè)到 CDK2 和 p21。因此，circ-Foxo3 能保護(hù)CDK2 和 p21 而維持三元復(fù)合體的穩(wěn)定。生物小結(jié)該部分還起到保護(hù)21 形成的三元復(fù)合體彼此依賴(lài)，circ-Foxo3小編點(diǎn)評(píng)該研究是一篇典型的作用機(jī)制探究。該研究通過(guò)正反向，

21、敲除過(guò)表達(dá)，不同細(xì)胞系等實(shí)驗(yàn)，反復(fù)驗(yàn)證了 circ-Foxo3 能與 CDK2 和 p21 形成復(fù)合體，影響細(xì)胞周期和增殖過(guò)程。為我們拓寬 circRNA 的生物學(xué)功能提供了新的見(jiàn)解，非常值得大家參考。原文出處:Du WW, Yang WN, Liu E, et al. Foxo3 circular RNA retards cell cycle progression via forming ternary complexes with p21 and CDK2. Nucleic Acids Research. 2016.8 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 15

22、1 號(hào)（201203）【文獻(xiàn)精講】外泌體中的circular RNAs，精準(zhǔn)醫(yī)療的大門(mén)已為你打開(kāi)Circular RNAs(circRNAs)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的，最新的一類(lèi)可能具有廣泛調(diào)控功能的非編碼 RNA。由于其封閉成環(huán)的特性，我們很容易就聯(lián)想到，circRNAs 是否可以作為臨床診斷的 biomarker 呢？今天，小編通過(guò)一篇在cell research上的文獻(xiàn)告訴您，circRNAs 作為診斷的 biomarker 是可行的。研究背景circRNAs 是一類(lèi)廣泛存在的內(nèi)源性非編碼 RNA，近年來(lái)的研究表明其可以調(diào)控哺乳動(dòng)物的表達(dá)。在不同的細(xì)胞類(lèi)型和發(fā)育階段，circRNAs 都穩(wěn)定存在。

23、由于其結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)和潛在的調(diào)控功能，circRNAs 是這兩年，乃至未來(lái)幾年 RNA 領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。外泌體是細(xì)胞的一類(lèi)小膜囊泡。外泌體中包含了很多特異性的蛋白，mRNA和 miRNA，可調(diào)控外泌體接收細(xì)胞的功能行使，是理想的疾病診斷 biomarker 候選。那么，外泌體中有 circRNAs 存在么？血來(lái)源外泌體中能檢測(cè)到穩(wěn)定存在的 circRNAs么？外泌體中的 circRNAs 可作為疾病診斷的 biomarkers 么？該文章的我們一一解答了這些問(wèn)題。研究結(jié)果向1 外泌體中有研究circRNAs 的circRNAs 表qPCR 驗(yàn)證生物M3 和該細(xì)胞系中提取的外泌體進(jìn)行了6751 個(gè)

24、circRNAs。同時(shí)，外泌體中的表達(dá)豐度高是能否進(jìn)行檢測(cè)的首要條件）。能驗(yàn)證出來(lái)。此外，exo-circRNA 與細(xì)胞中circRNA 的相關(guān)性也不是很明顯（r=0.43），暗示著外泌體中的 circRNAs 可能是被精確調(diào)控的。9 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）為了進(jìn)一進(jìn)行了 RNA 細(xì)胞中 circR 相比線(xiàn)性 m中的普遍性的表達(dá)豐度，研究用 RNase R-treats 樣本生物circRNA 相對(duì)于其線(xiàn)性 RNA 的表達(dá)豐度是豐度的 6 倍以上，表明外泌體中的 circRNA了進(jìn)一步驗(yàn)證 circRNAs 在癌細(xì)胞系外泌體，

25、胃癌，和癌細(xì)胞系來(lái)源外泌體進(jìn)行了 qRT-PCR 驗(yàn)證，充分說(shuō)明了外泌體中 circRNAs 的廣泛存在性。由于circRNA 可以結(jié)合 miRNA，而外泌體中有廣泛存在著 miRNAs。因此，研究在外泌體中分析了 circRNA 和 miRNA 的表達(dá)關(guān)系。結(jié)果顯示，miR-7 mimics 細(xì)胞系外泌體中 CDR1as 表達(dá)顯著降低。該結(jié)果表明，外泌體中的 circRNAs 表達(dá)可能受到來(lái)自miRNA 的表達(dá)影響。10 / 12技術(shù)服務(wù)Tel：/ Web：上海市張江高科技園區(qū)李冰路 151 號(hào)（201203）因此，第一部分的結(jié)果解答了一個(gè)重要的問(wèn)題：外泌體中存在著特異性穩(wěn)定的circRNAs。2 血清外泌體中很檢測(cè)到 circRNAs 么？用于臨床診斷檢測(cè)最理想的檢測(cè)材料是血來(lái)源樣本，那么，血清中的外泌體是否也能檢測(cè)到 circRNAs 呢？（血液檢測(cè)是無(wú)創(chuàng)診斷的理想方式）通過(guò)對(duì) 3 個(gè)健康血清分離外泌體，RNA-seq 檢測(cè) exo-circRNAs，鑒定到 1215 個(gè) circRNAs。數(shù)據(jù)的對(duì)顯示，有 90% circRNAs