實驗室安全操作要求

1、.實驗室安全操作要求1制定實驗室安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SsoP)，這些規(guī)程應(yīng)適用 于現(xiàn)有的條件，并與其它的規(guī)則和操作過程相一致。實驗室 負(fù)責(zé)人應(yīng)保證工作人員和參觀人員理解這些安全要求。2實驗室工作人員要熟悉生物安全操作知識和消毒技術(shù)。3實驗室用品(包括工作服)不得用于其他用途；不可將私人和無關(guān)的物品帶入實驗室。4在進(jìn)入微生物檢測實驗室工作時，要穿隔離衣和工作衣，戴工作帽，戴一次性手套，如接觸物傳染性危險大，可戴雙層(兩付)手套以增加保護(hù)。操作時手套破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并戴上新手套。5不要用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。6盡量避免使用尖銳物品和利器，包括注射器、針頭、刀片、玻

2、璃制品、載玻片等，它們在接觸傳染性材料后非常危險，最好不要在微生物實驗室使用這些利器而使用不易破碎材料制品，如塑料移液管等。7工作結(jié)束，要對工作臺面消毒，如用消毒液清洗后要干燥20分 鐘以上；操作時有標(biāo)本、檢測試劑外濺時應(yīng)及時消毒；平時要保 持環(huán)境整潔。8工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手。 25液)可以作為液體滅菌劑。注：甲醛是一種可疑的致癌劑。它具有刺鼻的氣味，其氣體能夠刺激眼睛和黏膜，因此必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方儲存和使用。使用前必須參考有關(guān)化學(xué)品安全的使用規(guī)定。（三）戊二醛象甲醛一樣，戊二醛0HC(CH。)。CH0也對繁殖的細(xì)菌、孢子、真菌和脂或不含脂的病毒

3、具有活性。它不具有腐蝕性，比甲醛作用迅速，但也需要幾個小時才能殺死細(xì)菌孢子。通常所供應(yīng)的戊二醛是濃度約20L(2】的溶液，絕大部分產(chǎn)品使用前需要加入與產(chǎn)品一同提供的碳酸氫鹽混合物進(jìn)行“活化”(變成堿性)?；罨娜芤焊鶕?jù)其配方設(shè)計、應(yīng)用類型和使用頻率等情況可以重復(fù)使用卜4與有些產(chǎn)品一同提供的指示條（dipstick)僅用于粗略指示溶液中的活性戊二醛水平。如果戊二醛溶液變混濁，就應(yīng)當(dāng)將其廢棄。 注：戊二醛具有毒性，并對皮膚和黏膜具有刺激性，應(yīng)當(dāng)避免與其接觸。必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方使用。不建議采用其噴霧劑或溶液來清除環(huán)境表面的污染。使用前必須考慮化學(xué)品安全使用的有關(guān)規(guī)定。（四）醇類乙醇(c2H

4、sOH)和異丙醇(cH。)：CHOH具有相似的滅菌特性。它們對于繁殖的細(xì)菌、真菌和含脂病毒具有活性，但不能滅活孢子，而對非含脂病毒的作用則不確定。其水溶液最有效的使用濃度約為70(vv)：更高或更低的濃度均不適宜殺菌。醇類溶液的主要優(yōu)點是處理后物品不會留下任何殘留物 。將醇類與其他試劑混合使用比單獨使用醇類更有效，如70(vv)醇 18*和，100gL的甲醛混合使用，以及使用含有2gL有效氯的醇。70(vv)乙醇溶液可以用于消毒皮膚、實驗臺和生物安全柜的工作臺面，以及浸泡小的外科手術(shù)器械。使用時皮膚的接觸時間不應(yīng)少于10秒，環(huán)境表面不應(yīng)少于3分鐘。由于乙醇可以使皮膚干燥，所以經(jīng)常與潤滑劑混合使

5、用。在不便于或不可能進(jìn)行徹底洗手的情況下，推薦使用含醇類的擦手液對輕度污染的手進(jìn)行消毒。但是必須記住，乙醇對孢子無效，而且不能殺死所有類型的非含脂類病毒。 注：醇類是易揮發(fā)和易燃的，不能在明火附近使用。其工作液應(yīng)儲存在適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)以避免醇類揮發(fā)。醇類可以硬化橡膠并溶解某些膠質(zhì)。為了避免乙醇用于其他非滅菌目的，在實驗室里對乙醇進(jìn)行專門地清點和儲存是非常重要的。由于宗教原因，乙醇的獲得和使用在有些地區(qū)可能受到限制。含有醇類溶液的瓶子必須清楚標(biāo)記以避免被意外高壓滅菌。碘和碘伏 這類滅菌劑的作用與氯類似，只是有機(jī)質(zhì)對它們的抑制作用略弱。碘可以使纖維和環(huán)境表面著色，一般不適合作為消毒劑。但是，碘伏和碘酊

6、是很好的抗菌劑。多聚碘(P01yvidone iodine)是一種安全可靠的外科手術(shù)擦手劑和手術(shù)前皮膚抗菌劑。碘類抗菌劑一般不適于醫(yī)療牙醫(yī)器械的消毒。碘不能在鋁或銅上使用。注：碘有毒性。含有有機(jī)碘的產(chǎn)品必須于4一10。c儲存以避免有潛在危害性的細(xì)菌在里面生長。過氧化氫和過氧乙酸 像氯一樣，過氧化氫(H。0。)和過氧乙酸(CH。COOH)是強(qiáng)氧化劑，是一種廣譜殺菌劑。對人和環(huán)境它們較氯更為安全。通常供應(yīng)的過氧化氫是可以立即使用的3的溶液，或是用無菌水稀釋 19510倍體積后使用的30的水溶液。但是，那種單獨含有3一6過氧化氫的溶液殺菌作用緩慢而有限。現(xiàn)有產(chǎn)品中含有其他成分來穩(wěn)定過氧化氫，加速其殺

7、菌作用并降低其腐蝕性。 過氧化氫能夠用于清除實驗臺和生物安全柜工作臺面的污染，較高濃度的溶液適于清除對熱敏感的醫(yī)療(牙醫(yī)器械的污染。采用過氧化氫或過氧乙酸熏蒸來消毒對熱敏感的醫(yī)療牙醫(yī)器械時，需要特殊的設(shè)備。 注：過氧化氫和過氧乙酸能腐蝕鋁、銅、黃銅和鋅等金屬，也能使纖維、頭發(fā)、皮膚及黏膜褪色。經(jīng)它們處理的物品必須經(jīng)過徹底的漂沈后才能接觸眼睛和黏膜。它們應(yīng)當(dāng)儲存在避熱和避光的地方。四、清除局部環(huán)境的污染 需要聯(lián)合應(yīng)用液體和氣體消毒劑來清除實驗室空間、用具和設(shè)備的污染。清除表面污染時可以使用次氯酸鈉(NaOC：1)溶液；含有1有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生設(shè)備，但是當(dāng)處理高危環(huán)境時，建議使用高濃度

8、(5gL)溶液。用于清除環(huán)境污染時，含有3過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。 可以通過加熱多聚甲醛或煮沸福爾馬林所產(chǎn)生的甲醛蒸氣熏蒸來清除房間和儀器的污染。產(chǎn)生甲醛蒸氣前，房間的所有開口(如門窗等)都應(yīng)用密封帶或類似物加以密封。熏蒸應(yīng)當(dāng)在室溫不低于21。C且相對濕度70的條件下進(jìn)行(見下面“清除生物安全柜的污染”部分)。 清除污染時氣體需要與物體表面至少接觸8小時。熏蒸后，該區(qū)域必須徹底通風(fēng)后才能允許人員進(jìn)入。在通風(fēng)之前需要進(jìn)入房間時，必須戴適當(dāng)?shù)姆蓝久婢??？梢圆捎脷鈶B(tài)的碳酸氫銨來中和甲醛。 已有報道，可采用過氧化氫溶液的氣霧熏蒸污染的空間，但對此還需 20要進(jìn)一步的研究。 注：甲醛是一

9、種危險和有刺激性的氣體，并懷疑有致癌性。應(yīng)使用具有供氣系統(tǒng)的全面罩式防毒面具。操作時應(yīng)當(dāng)采用“雙人”制。五、清除生物安全柜的污染 清除I級和II級生物安全柜的污染時，應(yīng)當(dāng)將適量的多聚甲醛(空氣中的終濃度達(dá)到08)放在電熱板或電熱盤上(在生物安全柜外進(jìn)行控制)。然后在生物安全柜內(nèi)放置第二個放有比多聚甲醛多10的碳酸氫銨的加熱板或盤。第二個盤上覆蓋一個能夠從遠(yuǎn)處將其移走的蓋子(如連接一個能夠從生物安全柜外拉動的繩子)，從而盡量減少對甲醛氣體的提前中和。 如果相對濕度低于70在使用強(qiáng)力膠帶如“管道密封膠帶”(ducttape)密封前部封閉板前，還要在安全柜內(nèi)部放置一個開口的盛有熱水的容器。如果前部沒

10、有封閉板，則可以用重型塑料布(leavy gaugeplasticsheet ing)粘貼覆蓋在前部以保證氣體不會泄漏進(jìn)入房間。 打開多聚甲醛盤的加熱開關(guān)，1小時后或多聚甲醛完全蒸發(fā)后關(guān)閉。讓生物安全柜靜置過夜。移去第二個盤子的蓋后打開加熱開關(guān)，讓碳酸氫銨揮發(fā)。然后，關(guān)閉開關(guān)并啟動安全柜讓碳酸氫銨氣體循環(huán)l時。移去前封閉板(或塑料布)后就可以使用生物安全柜了。六、洗手清除手部污染 接觸生物危害性材料時，必須戴合適的手套。但是這并不能代替實驗室人員需要經(jīng)常地、徹底地洗手。接觸過生物危害性材料和動物后、使用過衛(wèi)生間后、離開實驗室前以及吃東西前都必須洗手。 大多數(shù)情況下，用普通的肥皂和水徹底沖洗對于

11、清除手部污染就足夠 21了。但在高度危險的情況下，建議使用殺菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓沈至少10秒鐘，用干凈水沖洗后再用干凈的紙巾或毛巾擦干(如果有條件，也推薦使用暖風(fēng)干手器)。 推薦使用腳控或肘控的水龍頭。如果沒有安裝，應(yīng)使用紙巾或毛巾關(guān)上水龍頭以防止再度污染洗凈的手。 如上所述，如果沒有條件徹底洗手或洗手不方便，應(yīng)該用酒精擦手來清除雙手的輕度污染。七、加熱滅菌和消毒 加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段。“干”熱沒有腐蝕性，可用來處理實驗器材中許多可耐受160。C或更高溫度24小時的物品。燃燒或焚化(見下)也是一種干熱方式。高壓滅菌的濕熱法則最為有效。 煮沸并不一定能殺死所有的微生物或

12、病原體，但如果其他方法(化學(xué)殺菌、清除污染、高壓滅菌)不可行或沒有條件時，也可以作為一種最起碼的消毒措施。 滅菌后的物品必須小心操作并保存，以保證在使用之前不再被污染。(一)高壓滅菌壓力飽和蒸汽滅菌(高壓滅菌)是對實驗材料進(jìn)行滅菌時最有效和最可靠的方法。對于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：134、3分鐘126、10分鐘12l。C、15分鐘 22了。但在高度危險的情況下，建議使用殺菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓沈至少10秒鐘，用干凈水沖洗后再用干凈的紙巾或毛巾擦干(如果有條件，也推薦使用暖風(fēng)干手器)。 推薦使用腳控或肘控的水龍頭。如果沒有安裝，應(yīng)使用紙巾或毛巾關(guān)上水龍頭

13、以防止再度污染洗凈的手。 如上所述，如果沒有條件徹底洗手或洗手不方便，應(yīng)該用酒精擦手來清除雙手的輕度污染。七、加熱滅菌和消毒 加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段?！案伞睙釠]有腐蝕性，可用來處理實驗器材中許多可耐受160。C或更高溫度24小時的物品。燃燒或焚化(見下)也是一種干熱方式。高壓滅菌的濕熱法則最為有效。 煮沸并不一定能殺死所有的微生物或病原體，但如果其他方法(化學(xué)殺菌、清除污染、高壓滅菌)不可行或沒有條件時，也可以作為一種最起碼的消毒措施。 滅菌后的物品必須小心操作并保存，以保證在使用之前不再被污染。(一)高壓滅菌壓力飽和蒸汽滅菌(高壓滅菌)是對實驗材料進(jìn)行滅菌時最有效和最可靠的方

14、法。對于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：134、3分鐘126、10分鐘12l。C、15分鐘 228、應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。八、焚燒 在處理那些經(jīng)過或事先未經(jīng)清除污染的動物尸體以及解剖組織或其他實驗室廢物時，焚燒是一種有效的方法。只有在實驗室可以控制焚燒爐，并且能夠有效地控制溫度和配備了二級焚燒室時，才能用焚燒代替高壓滅菌來處理感染性物質(zhì)。許多焚燒爐，尤其是那些只有單個焚燒室的，不能滿足處理感染性物質(zhì)、動物尸體和塑料制品的要求。這些材料可能不能完全銷毀，微生物、有毒化學(xué)試劑和煙塵還可能通過煙囪排放而污染大氣。但也有許多結(jié)構(gòu)令人滿

15、意的焚燒室。理想的是一級焚燒室的溫度至少應(yīng)達(dá)到800。C，二級焚燒室的溫度至少應(yīng)達(dá)到1000【)C。需要焚燒的材料(即使事先已清除污染)應(yīng)當(dāng)用袋子運送到焚燒室，最好使用塑料袋。負(fù)責(zé)焚燒的工作人員應(yīng)當(dāng)接受關(guān)于如何裝載和控制溫度等的正確指導(dǎo)。還需要注明的是，焚燒爐的操作是否有效主要取決于對需要處理的廢物中物品的正確混合。 人們已經(jīng)關(guān)注到現(xiàn)有的或計劃制造中的焚燒爐可能對環(huán)境造成的負(fù)面影響，并正努力使焚燒爐對環(huán)境的影響更小，也更節(jié)約能源。九、廢物處理 實驗室和醫(yī)學(xué)廢物的處理要遵守各個地區(qū)、國家和國際的規(guī)定，在設(shè)計和補(bǔ)充關(guān)于生物危害性廢物處理、運輸和廢棄的規(guī)程時，必須參考最新版的相關(guān)文件。一般情況下，焚

16、燒爐內(nèi)的灰燼可以作為普通家庭廢物處理并由當(dāng)?shù)夭块T運走。高壓滅菌過的廢物可以在其他地方焚燒后處理，或在指定垃圾場掩埋處理.24嚴(yán)格的個人防護(hù)及保健1嚴(yán)格的個人防護(hù)對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、患病都會增加感染的危險性。2很小的傷口和擦傷都應(yīng)以防水的敷料覆蓋。3·進(jìn)實驗室前要修剪長的、帶刺的手指甲，以免刺破手套。4在脫去隔離衣、帽，離開實驗室前必須洗手。5·在實驗室工作的人員應(yīng)盡量避免用可能已受到污染的手套觸摸面部。6·在有危險化學(xué)品濺出可能時，應(yīng)佩戴防護(hù)眼鏡和面罩，7·不得在微生物和相關(guān)實驗室用嘴吸取液體。不得在實驗室內(nèi)吃食 物、喝飲料、吸煙和化妝

17、打扮等，不得在實驗室內(nèi)會客。8·遇有高危意外事故，應(yīng)立即進(jìn)行處理和報告，同時應(yīng)立即采取預(yù)防措施，包括對其隨訪、按醫(yī)囑服用抗微生物藥物進(jìn)行預(yù)防。實驗室安全事故處理方案工作人員發(fā)生意外事故時，如針刺損傷、感染性標(biāo)本濺及體表或口鼻眼內(nèi)，或污染實驗臺面等均視為安全事故，應(yīng)立即進(jìn)行緊急處理。事故緊急處理：根據(jù)事故情況采用相應(yīng)的處理方法1小型事故：任何一種小的損傷，包括皮膚的破損或刺傷等都可能與傳染性物質(zhì)接觸，必須用肥皂和水沖洗，如果可能盡量擠出損傷處的血液，使用70乙醇或其他皮膚消毒劑，立即進(jìn)行醫(yī)療處理；2皮膚污染：污染部位用水和肥皂沖洗，并用適當(dāng)?shù)南緞┙荩纾?0乙醇或皮膚消毒劑(外科

18、用藥)；3針刺和切割傷：懷疑皮膚有損傷或針刺時，建議盡可能擠壓傷口，然后用大量的水沖洗；4眼睛濺入液體：必須迅速用生理鹽水沖洗，且避免揉擦眼睛。連續(xù)沖洗至少十分鐘。5衣物污染(1)盡快脫掉隔離衣以防止感染物觸及皮膚并防止進(jìn)一步擴(kuò)散。脫 掉防護(hù)手套，洗手并更換隔離衣及手套；27實驗室安全事故處理方案工作人員發(fā)生意外事故時，如針刺損傷、感染性標(biāo)本濺及體表或口鼻眼內(nèi)，或污染實驗臺面等均視為安全事故，應(yīng)立即進(jìn)行緊急處理。事故緊急處理：根據(jù)事故情況采用相應(yīng)的處理方法1小型事故：任何一種小的損傷，包括皮膚的破損或刺傷等都可能與傳染性物質(zhì)接觸，必須用肥皂和水沖洗，如果可能盡量擠出損傷處的血液，使用70乙醇或其他皮膚消毒劑，立即進(jìn)行醫(yī)療處理；2皮膚污染：污染部位用水和肥皂沖洗，并用適當(dāng)?shù)南緞┙?，例如?0乙醇或皮膚消毒劑(外科用藥)；3針刺和切割傷：懷疑皮膚有損傷或針刺時，建議盡可能擠壓傷口，然后用大量的水沖洗；4眼睛濺入液體：必須迅速用生理鹽水沖洗，且避免揉擦眼睛。連續(xù)沖洗至少十分鐘。5衣物污染(1)盡快脫掉隔離衣以防止感染物