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1、測定纖維形態(tài)的實驗方案(2011年4月4日)一、纖維形態(tài)的測定方法1(馮利群):離析試樣:采用1年、2年、3年生枝條的不同部位進行纖維形態(tài)分析。選取的試樣制成火柴桿狀,首先排氣,然后用硝酸及氯酸鉀混合液蒸煮離析,若為了進一步觀察可制得永久切片標(biāo)本。(采用硝酸法將試材解離,將解離的纖維稀釋至0.1%的濃度,然后制片觀察)方法2(郭愛龍):采用舒爾茲法,用番紅染色,加少量甘油固定制成臨時切片,在裝有螺旋測微儀的顯微鏡下測量,共測定100根完整的木纖維,測定其長充,寬度和長寬比等。方法3(王欣):主要對纖維的長度、寬度、壁厚及胞腔直徑進行測定。試樣以煮沸法排除空氣后,放入按比例配置的離析液中(30%
2、雙氧水與99.5%冰醋酸體積比為1:1)煮沸,直至木質(zhì)膨大變白甚至透明即可取出。把離析的纖維用清水沖洗數(shù)次,直至無酸性,經(jīng)番紅染色后制成臨時性試片,在OlmpusBX51光學(xué)顯微鏡下觀察,每試樣隨機測定50根纖維,取其平均值。方法4(李曉平):纖維形態(tài)研究:將各樣品做成火柴桿大小,在沸水中煮數(shù)小時,直至樣品沉于水底。用體積比為1:1的雙氧水(30%)和冰醋酸(分析純)混合液在60的水中煮數(shù)小時,直至樣品變白。將煮好的樣品用水洗數(shù)遍,直到用pH試紙試之不呈酸性為止。將樣品置于試管中,加適量的水后,劇烈震蕩,直到樣品都分離成單根纖維。用10g/L的番紅溶液進行染色,制成臨時載玻片107-110,利
3、用Motic Images Plus 2.0圖像處理系統(tǒng)測量纖維的尺寸,先在40倍顯微鏡下量取纖維的長度,后在400倍的顯微鏡下找到對應(yīng)纖維,量取其寬度和細胞腔寬,每個樣品取50根纖維進行測量;共對4株蓖麻稈進行了研究即每個部位共有4個樣品,共需測量纖維200根。方法5(聶玉靜):2.2紅麻芯桿纖維形態(tài)實驗方法實驗設(shè)備和藥劑:水浴鍋,試管,培養(yǎng)皿,30%硝酸,氯酸鉀,蓋玻片,載玻片,光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS BX-51)。方法:將不同部位的紅麻芯桿試樣劈成火柴桿大小,長約1-2cm,放入試管中注入適量的水。將試管在水浴鍋中加熱蒸煮至試樣下沉。將水倒出,再加入30%的硝酸,微熱至發(fā)出黃色氣體,
4、再加入少許氯酸鉀固體,與硝酸反應(yīng),在水浴鍋中加熱約10分鐘左右,至紅麻桿顏色變淺。倒出藥液,用水反復(fù)沖洗數(shù)次至無酸為止。將離析好的漿液放入培養(yǎng)皿中,加入幾點番紅溶液進行染色。制成臨時切片,在光學(xué)顯微鏡下觀察紅麻芯桿細胞形態(tài)并利用計算機顯微圖像分析系統(tǒng)對每個部位100根纖維的長度、寬度、壁厚等進行測量,求平均值。方法6(吳芹):速生黑楊枝椏材纖維形態(tài)、化學(xué)組分及APMP制漿性能的研究2010年6月(林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè))1 材料及方法1. 1 材料速生黑楊枝椏材及相應(yīng)主干材由山東省林科院提供,樹齡7 a,規(guī)格為 ( 1020)mm×35mm, 包括ZY- a、ZY- b、ZY- c 3個品種
5、。選取部分有代表性的原料試樣,去皮,并適量切成體積為1 cm3 的小立方體,用于生物結(jié)構(gòu)觀察及壁腔比值的測定。選取部分有代表性的原料試樣,去皮,將其沿縱向切成規(guī)格為1mm×2mm×30mm的小木條, 用于纖維質(zhì)量性能分析。將原料去皮,然后進行手工削片,用Willey磨粉碎, 取粒徑245 350m 的木粉, 平衡水分, 用于化學(xué)組分分析。將原料切成規(guī)格為35mm×( 10 20) mm×3mm 的木片, 用于化學(xué)機械法( APMP)制漿實驗。1. 2 方法1. 2. 1 生物結(jié)構(gòu)觀察及壁腔比值的測定 8 試樣經(jīng)過排氣、軟化處理后橫向切片、染色和制片, 用
6、THM SE 600熱臺偏光顯微鏡對其生物結(jié)構(gòu)進行觀察。通過采用計算機測量軟件及Excel工具的分析,測定纖維細胞的壁厚、腔徑及壁腔比值。1. 2.2 纖維形態(tài)的測定 8 在60下, 試樣經(jīng)冰醋酸和過氧化氫(體積比1:1)浸泡約30 48 h, 以使試樣變白、纖維分散。采用FQA 纖維質(zhì)量分析儀(加拿大Optes,t 型號Ka jaan i FS- 100)測定試樣纖維的長度、寬度、粗度及細小纖維含量。1. 2. 3 化學(xué)組分的分析 1% NaOH 抽提物的測定參見GB /T 2677. 5- 1993,聚戊糖的測定參見GB /T2677. 9- 1994,苯-乙醇抽提物測定參見GB /T 2
7、677. 6 1994,酸不溶木質(zhì)素測定參見GB /T 2677. 8-1994,纖維素的測定采用硝酸-乙醇纖維素的測定方法 8 , 灰分的測定參見GB /T 2677. 3- 1993。問題:為什么王欣和李曉平測纖維形態(tài)的方法與馮老師的不同?是因為她們測的都是草本植物與木材測纖維形態(tài)的方法有所不同嗎?王欣老師的回答:用雙氧水與冰醋酸混合液浸泡試件得到的纖維形態(tài)好,但時間較長。確定最終的實驗方案:一、按照王欣老師和李曉平的實驗方案需準(zhǔn)備的試材和實驗藥品為:1、30%雙氧水與99.5%冰醋酸(分析純)體積比為1:12、PH試紙3、番紅溶液(配成10g/L)進行染色:染色方法查一下論文。4、載玻片
8、、蓋玻片:制作切片的方法查一下。5、水浴鍋6、試管7、培養(yǎng)皿8、聶子(是否需要濾紙?)9、光學(xué)顯微鏡及圖像處理系統(tǒng)10、試材:按年份、按部位(上、中、下、皮、芯),每個部位測200根、100根、50根? (試材部位的確定參照木材PH值測定方法GB/T6043-2009中的試材取樣方法:關(guān)鍵的問題是:下部、中部、梢部的位置如何確定?根據(jù)木材PH值測定方法GB/T6043-2009中的試材取樣方法:下部(樹高1/5處),中部(全長1/3處),梢部直徑大于10cm,下部、中部沒問題,梢部如何確定其位置?)最后定出最終的取樣部位:首先看一下年輪,能否界定出年輪的差別,(如果有差別的話,需按生長年限的年輪不同,進行區(qū)分。)如果沒差別的話,對枝條從上到下選取近7-8個部位,并將木質(zhì)部、髓心(也可考慮髓心和木質(zhì)部放在一起)、皮部分開,取樣部位和樣品要記錄清楚。芯部做成火柴桿大小,皮部就直接剝下來,長度做成火柴桿長,大約30mm就行。附:木材PH值測定方法GB/T6043-2009中的試材取樣方法:二、按照馮利群老師和聶玉靜的實驗方案需準(zhǔn)備的試材和實驗藥品為:1、硝酸(30%)及氯酸鉀2、PH試紙3、番紅溶
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