口腔頜面cxcl12cxcr4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用_第1頁
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1、口腔頜面外科學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 CXCL12/CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用關(guān)鍵詞:腺樣囊性癌 嗜神經(jīng)侵襲 雪旺細(xì)胞 免疫印跡 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)摘要:目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)

2、檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和A

3、CC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD31

4、00能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。正文內(nèi)容 目的:檢測(cè)趨化因子CXCL

5、12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)

6、胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá)

7、;HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受

8、體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其

9、受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及C

10、XCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液

11、中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通

12、過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HS

13、C趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3

14、細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明

15、顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXC

16、R4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化

17、因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的

18、趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨

19、化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎

20、腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮

21、抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑

22、制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的

23、趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL

24、12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體

25、CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效

26、應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(

27、HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋

28、白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXC

29、R4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12

30、的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)

31、侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)

32、。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培

33、養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL1

34、2和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC

35、-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)。 第二部分:應(yīng)用趨化實(shí)驗(yàn)觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,t檢驗(yàn)進(jìn)行分析 結(jié)果: 第一部分:HSC中趨化因子CXCL12基因有較高的表達(dá),而ACC-3細(xì)胞中表達(dá)量極少;HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4基因均有

36、表達(dá),而ACC-3細(xì)胞表達(dá)量明顯較多(p0.05);HSC有趨化因子CXCL12蛋白明顯陽性表達(dá),ACC-3細(xì)胞有趨化因子受體CXCR4蛋白明顯陽性表達(dá);HSC細(xì)胞膜上的趨化因子受體CXCR4陽性表達(dá)率為67.10,ACC-3細(xì)胞膜上趨化因子受體CXCR4的陽性表達(dá)率為74.15;HSC培養(yǎng)上清液中可檢測(cè)到趨化因子CXCL12,而在ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中未檢測(cè)到;免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12的表達(dá)量明顯減少(p0.05): 第二部分:HSC培養(yǎng)上清液能夠?qū)CC-3細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用,應(yīng)用CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100能明顯的抑制這種趨化效應(yīng)。 結(jié)論: 第一

37、部分:人雪旺細(xì)胞表達(dá)趨化因子CXCL12并能分泌到細(xì)胞外,并且人雪旺細(xì)胞細(xì)胞膜上有趨化因子受體CXCR4表達(dá);涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR4,而趨化因子CXCL12的表達(dá)量極少;免疫抑制劑甲氨喋呤作用后可明顯抑制人雪旺細(xì)胞趨化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞的趨化遷移作用可能是通過人雪旺細(xì)胞分泌的趨化因子CXCL12和涎腺腺樣囊性癌ACC-3細(xì)胞所表達(dá)的趨化因子受體CXCR4介導(dǎo)的,CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100可以抑制這種作用。目的:檢測(cè)趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在人雪旺細(xì)胞(HSC)和涎腺腺樣

38、囊性癌細(xì)胞(ACC-3)的表達(dá)情況,觀察HSC培養(yǎng)上清液對(duì)ACC-3細(xì)胞的趨化作用及CXCR4受體激活拮抗劑的趨化抑制效應(yīng)。探討趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用。 方法:本實(shí)驗(yàn)共分兩部分: 第一部分:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)HSC趨化因子CXCL12的表達(dá)和ACC-3細(xì)胞趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC和ACC-3細(xì)胞膜的趨化因子受體CXCR4的表達(dá);應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)在HSC和ACC-3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中趨化因子CXCL12蛋白的表達(dá);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)免疫抑制劑作用后HSC培養(yǎng)上清液中趨化因子C

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