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文檔簡介
1、血液血液學檢查學檢查dxx 血液學(hematology)是以血液和造血組織為主要研究對象的醫(yī)學科學的一個獨立分支學科。 祖國醫(yī)學早在黃帝內(nèi)經(jīng)一書中有關(guān)于血液的記載,國外在公元前34世紀時已有人提到血液的名字。然而對于血液組成和功能的認識長期以來是唯心的和不完全的,有些概念是從點滴的現(xiàn)象和不完整的觀察中推測出來的。系統(tǒng)地和科學地研究血液開始于顯微鏡的問世以后,用顯微鏡觀察血液中的紅細胞(1673年)、白細胞(1749年)和血小板(1842年),稱為血液中的有形部分,是血液學家研究的重點對象。血液中的體液部分,亦稱為血液無形成分(或血漿),許多年來由生物化學家和免疫學家所研究。目錄 1,血液的采
2、取方法 2,抗凝血的制備 3,血漿、血清的制備 4,血紅蛋白的測定 5,紅細胞(RBC)計數(shù) 6,紅細胞壓積(PCV)測定方法 7,紅細胞沉降率(ESR)的測定 8,白細胞(WBC)計數(shù) 9,白細胞分類計數(shù) 10,血小板(PC)計數(shù)血液的組成血液的組成 血液是由液態(tài)的血漿和懸浮在血漿中的血細胞組成。 全血全血45血細胞55血漿 血細胞血細胞:紅細胞、白細胞、血小板; 血漿血漿:(9092)水(810)溶質(zhì) 溶質(zhì)溶質(zhì):血漿蛋白(白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原)、無機鹽、非蛋白氮、不含氮的有機物。 血液流出血管后,如不經(jīng)抗凝處理,很快會凝集成血塊,隨著血塊逐漸縮緊還會析出的淡黃色清亮液體,叫血血清。清
3、。 血清中沒有纖維蛋白 血清中缺乏血漿中參與凝血反應(yīng)的一些成分。出血時,輸血清沒用,要輸血紅蛋白。 血清是不含纖維蛋白原的血漿。血液的組成血液的組成血液的理化特性1. 顏色:紅色 動脈血:鮮紅 (血紅蛋白含氧多) 靜脈血:暗紅 (血紅蛋白含氧少)2.密度:畜禽全血的相對密度1.040-1.0753.氣味: 血液中由于存在揮發(fā)性脂肪酸而有腥味,又因其中含有氯化鈉而稍帶咸味。 血液樣品血液樣品采集采集血液的采取方法血液的采取方法 1,采血部位和方法 犬采血部位在前肢的前臂頭靜脈和后肢的隱靜脈。采血時,犬側(cè)臥保定,局部剪毛消毒,助手或犬主人用手握住采血部的向心端,或用橡皮條扎緊,使靜脈怒張,用消毒干
4、燥的注射器采血。 2,注意事項 (1)血樣必須在進行任何藥物治療前采集,如果已經(jīng)進行了治療,須在采血記錄上予以注明,否則動物接受了某些藥物治療,一些檢查方法就無法得到準確的治療。 (2)保定過程中盡量減少動物應(yīng)激,否則會造成樣品結(jié)果誤差??鼓闹苽?1,抗凝劑及其應(yīng)用 血液檢查多用抗凝血液,為防止血液凝固,通常在血液中加一下抗凝劑,而制備抗凝血??鼓齽┛鼓齽┳饔米饔眠m用范圍適用范圍乙二胺四乙酸二鈉乙二胺四乙酸二鈉草酸鉀草酸鉀草酸銨與草酸鉀草酸銨與草酸鉀合劑合劑枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉肝素肝素脫鈣作用脫鈣作用脫鈣作用 脫鈣作用抗凝血酶一般血液檢查不宜作鉀定量不宜作氮定量 血沉、血凝固一般血液檢查 2,
5、抗凝血的制備方法 根據(jù)檢測項目選擇特定的抗凝劑。采集血樣后,將其裝入含有適當抗凝劑的容器內(nèi),輕輕搖動,使其與抗凝劑混合。 3,注意事項 (1)血液采集后要盡快與適當?shù)目鼓齽┗旌?,搖動手法應(yīng)輕柔,劇烈晃動可造成溶血,紅細胞內(nèi)的化學物質(zhì)釋放入血漿,從而影響分析結(jié)果的準確性。 (2)采血后1h內(nèi)不進行檢測的樣品應(yīng)冷藏,檢測前應(yīng)先取出恢復(fù)到室溫,并輕輕搖勻??鼓闹苽溲獫{、血清的制備 血液流出血管后,如不經(jīng)抗凝處理,很快會凝集成血塊,隨著血塊逐漸縮緊還會析出的淡黃色清亮液體,叫血清血清。 血血清與血漿的區(qū)別:清與血漿的區(qū)別: (1)血清中不含纖維蛋白原,血漿中含有纖維蛋白原。 (2)血清中缺乏凝血因
6、子,血漿中含有凝血因子。 血漿的制備方法: (1)采集血液樣品,置于含有適量抗凝劑的試管內(nèi)。 (2)緩慢搖動試管,使抗凝劑與血液混勻。 (3)2000-3000 r/min離心5-10min,上層即為血漿。 (4)小心地用毛細移液管將血漿層移出至空白試管內(nèi)。 (5)標記日期、采集時間、動物名稱和病歷號,冷藏或冷凍保存。血漿、血清的制備 血清的制備方法: (1)采集血液樣品,并將其放置于不含有抗凝劑的試管內(nèi)。 (2)室溫下或25-37溫水中斜置,自然凝集20-30min 。 (3)密封試管,2000-3000 r/min離心10min,析出淡黃澄清的液體即為血清。 (4)用毛細移液管將血清移出至
7、空白試管內(nèi)。 (5)標記日期、采集時間、動物名稱和病歷號,冷藏或冷凍保存。血漿、血清的制備血紅蛋白的測定 血紅蛋白測定通常是指測定血液中各種血紅蛋白的總濃度,用 g/L 表示。 1,器材與試劑 (1)沙利氏血紅蛋白計。在測定管上有兩種刻度,一側(cè)表示血紅蛋白在每百毫升血液內(nèi)的克數(shù),另一側(cè)表示百分數(shù)。國產(chǎn)的血紅蛋白計是以每百毫升血液含14.5g血紅蛋白做為100%而設(shè)制。 (2)0.1mol/L 鹽酸 血血紅蛋白紅蛋白 2,原理 血紅蛋白本身的色澤常隨結(jié)合的氧量而改變,不便于比色。在定量鹽酸中加入少量稀鹽酸,Hb被酸化后變?yōu)楦哞FHb,呈現(xiàn)穩(wěn)定的褐色,與標準柱相比,求出每百毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)或
8、百分數(shù)。血紅蛋白的測定 3,操作步驟 (1)向沙利氏比色管內(nèi)加入1%鹽酸5滴。 (2)用沙利氏吸血管吸血至20l刻度處,用干脫脂棉擦去吸管外沾附的血液。 (3)徐徐吹入沙利氏比色管內(nèi),不要產(chǎn)生氣泡,再反復(fù)吸、吹數(shù)次,以洗出沙利氏吸血管中的血液。輕輕振動比色管,使血液與鹽酸充分混合。 (4)靜置10min,待血液變成褐色后,緩緩滴加蒸餾水,每加1滴,用細玻璃棒攪動一次,直到顏色與標準色柱完全相同為止。液柱凹面所指的刻度數(shù),即為每百毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)。血紅蛋白的測定 4,正常值 犬的血紅蛋白為120-194 g/L ,貓為110 g/L 5,臨床意義 (1)血紅蛋白增多:主要是見于脫水而血液
9、濃縮的各種疾病,如腹瀉、嘔吐、大出汗、多尿等,也見于腸便秘及某些中毒??;血也見于真性紅細胞增多癥,是一種原因不明的骨髓增生性疾病,目前認為是多能干細胞受累所致。其特點是紅細胞持續(xù)性顯著增多,全身總血量也增加,見于馬、牛、犬和貓。 (2)血紅蛋白量減少:主要見于各種貧血。血紅蛋白的測定紅細胞(RBC)計數(shù) 紅細胞計數(shù)即測量單位體積(L)血液中紅細胞的數(shù)量,用1012個/ L表示。紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù) 紅細胞計數(shù)板紅細胞計數(shù)板 1,器材與試劑 (1)血細胞計數(shù)板。 (2)血蓋片。 (3)沙利氏吸管、小試管、試管架等。 (4)赫姆氏稀釋液、生理鹽水。紅細胞(RBC)計數(shù)紅細胞(RBC)計數(shù)2,操,操
10、作步驟作步驟 (1)稀釋血液:用5mL刻度吸管吸取紅細胞稀釋液4.0ml。 用沙利氏吸管準確吸取供檢血液至10l 或20l 刻度處,用棉球擦去管尖外部余血,將吸管插入盛有紅細胞稀釋液的試管底部,輕輕將血放出,并吸取上清液洗吸管3次,使血液與 稀釋液充分混合。 (2)充液:將計數(shù)板和蓋玻片擦凈,玻棒蘸取1滴混懸液充入血細胞計數(shù)池內(nèi),靜置2-3分鐘,待紅細胞下沉,開始鏡檢計數(shù)。 計數(shù)時,先用低倍鏡后轉(zhuǎn)高倍鏡,依次計數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中五個中方格內(nèi)的紅細胞數(shù)。對于壓線的紅細胞,應(yīng)采取數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右的原則,保證計數(shù)域的一致性,使計數(shù)準確。 3,計計算算 紅細胞數(shù)(個/L)= 5個中方格內(nèi)的
11、RBC數(shù)510106血液稀釋倍數(shù)(400或200) 式中:5 表示5個中方格內(nèi)紅細胞數(shù)折算為1個大方格紅細胞數(shù) 10 因一個大格容積為0.1立方毫米 ,換算為1立方毫米 200 血液稀釋倍數(shù) 106 將1立方毫米換算為1L 4,臨床意義 (1)紅細胞數(shù)增多: 相對性紅細胞增多:多為血液濃縮而引起,常見于腹瀉、嘔吐、大出汗、急性胃炎、腸阻塞、腸變位、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎及發(fā)熱性疾病等。 絕對性紅細胞增多:較為少見,多由于紅細胞增生所致。 (2)紅細胞數(shù)減少:見于各種類型的貧血,如失血、溶血等。紅細胞(RBC)計數(shù) 5,注意事項 (1)紅細胞計數(shù)關(guān)鍵是防凝、防溶,取樣準確。 (2)稀釋液充入
12、計數(shù)室的量不可過多或過少。 (3)顯微鏡載物臺應(yīng)保持水平,否則,計數(shù)室的液體流向一側(cè)而使計數(shù)不準。紅細胞(RBC)計數(shù)紅紅細胞壓積容量細胞壓積容量PCV-PCV-紅細胞壓積(PCV)測定方法紅細胞壓積:壓緊的紅細胞在全血中所占的容積百分比,稱為紅細胞比容。紅細胞壓積(PCV)測定方法 1,將雙草酸混合液0.5mla(或10%EDTA,2滴)放入小瓶中,將小瓶置于烤箱中烤干。 2,用注射器抽血5ml,注入小瓶中,搖勻,勿使其凝固。 3.用長針頭吸滿抗凝血,插入溫氏管底部,輕捏膠皮乳頭,自下而上擠入血液至刻度10處。 4.置離心機中,以3000轉(zhuǎn)/min的速度離心30-45min,取出觀察,記錄紅
13、細胞層高度,再離45min,如與第一離心的高度一致,此時紅細胞柱層所占的刻度數(shù),即為PCV數(shù)值,用%表示。如無離心機,靜置24小時后,讀取數(shù)值。紅細胞沉降率(ESR)的測定1,紅細胞沉降率是指將抗凝血裝入特制的玻璃管內(nèi),在一定的時間內(nèi)觀察紅細胞下降的毫米數(shù),采用魏氏法測定。2,原理紅細胞沉降速度主要與紅細胞串錢狀的形成、紅細胞數(shù)目的多少、血漿蛋白的組成有關(guān)。通常血漿中球蛋白、纖維蛋白原和膽固醇含量增多時,可加速紅細胞疊連、沉降。血漿中白蛋白和卵磷脂含量增多時,則紅細胞疊連、沉降減慢。 3,臨床意義 血沉測定是一種非特異性試驗,它只能說明體內(nèi)存在有某種病理過程,不能單獨用于疾病診斷。 發(fā)現(xiàn)貧血時
14、,血沉顯著加快。 脫水時,血沉顯著變慢。紅細胞沉降率(ESR)的測定白細胞(WBC)計數(shù)白細胞計數(shù)是測定每升血液中各種白細胞總數(shù),以109個/ L表示。 白細胞稀釋液:3%(V/V)冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液,混合后加2滴10%結(jié)晶紫或1%美蘭染液,使呈淡紫色,以便與紅細胞稀釋液相區(qū)別。原理:一定量的血液用冰醋酸溶液稀釋后,可將紅細胞破壞,然后在細胞計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi)計數(shù)一定容積的白細胞,以此推算出每升血液內(nèi)白細胞數(shù)。白細胞分類計數(shù) 血小板:是從骨髓成熟的巨核細胞裂解脫落下來的活細胞,無色、無細胞核,呈橢圓形、桿形或不規(guī)則形。 常用復(fù)方尿素稀釋液。 原理:尿素能溶解紅細胞和白細胞而保存完整形態(tài)的血
15、小板,血液經(jīng)此稀釋后在血細胞計數(shù)室內(nèi)直接計數(shù),以求每升血液中的血小板數(shù),以109個/ L表示。 血小板(PC)計數(shù)血小板(PC)計數(shù)寵物血液生化的意義寵物血液生化的意義 1.血糖【正常值】3.9-5.9mmol/L(約60-110mg/dl)?!九R床意義】對于胰島素,糖皮質(zhì)激素、腎上腺素等分泌不足或過多有鑒別意義;對于監(jiān)測糖尿病的治療效果有一定意 2.葡萄糖耐量【正常值】服糖后60分鐘血糖160mg/dl,(9mmol/L)120分鐘恢復(fù)到空腹水平;各次尿中無糖。【臨床意義】糖耐量曲線,對于糖尿病、腎性糖尿病、甲亢等有診斷和鑒別診斷意義。3.二氧化碳結(jié)合力【正常值】23-31mmol/L?!九R
16、床意義】對于判斷代謝性或呼吸性酸中毒、堿中毒有一定意義。4.尿素氮(BUN)【正常值】3.2-7mmol/L。【臨床意義】判定腎功能。增高可見于各種原因的腎功能損害;肝功能嚴重損害時減低。寵物血液生化的意義寵物血液生化的意義 5.肌酐 【正常值】88-177mol/L?!九R床意義】對急、慢性腎炎的診斷和預(yù)后有重要意義。6.肌酸【正常值】230-530mol/L?!九R床意義】肌肉嚴重損傷,腎臟重度損害或尿閉時增高。7.尿酸【正常值】119-238mol/L。【臨床意義】增高:臨床多見于痛風、急性及慢性腎炎、白血病、多發(fā)性骨髓瘤等。8.鉀【正常值】3.5-5.3mmol/L?!九R床意義】判定電解質(zhì)
17、及酸堿平衡情況。寵物血液生化的意義寵物血液生化的意義 9.鈉【正常值】136-145mmol/L?!九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。10.氯【正常值】100-106mmol/L?!九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。11.鈣【正常值】2.2-2.7mmol/L?!九R床意義】判定甲狀旁腺機能,維生素缺乏癥,骨腫瘤,多發(fā)骨髓瘤有意義。12.無機磷【正常值】1.0-1.6mmol/L?!九R床意義】判定甲狀旁腺機能,維生素缺乏癥,骨腫瘤,多發(fā)骨髓瘤有意義。寵物血液生化的意義寵物血液生化的意義 13.鎂【正常值】0.8-1.2mmol/L。【臨床意義】判定腎功能、脫水甲亢、洋地黃中毒等有一定意義。1
18、4.血清鐵 【正常值】11-27pmol/L?!九R床意義】鑒別各種貧血有意義。15.氨氮【正常值】6-35mol/L。【臨床意義】判定肝昏迷有價值。16.總蛋白【正常值】65-85g/L。【臨床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的一般情況:對肝腎損害,多發(fā)性骨髓瘤等有一定診斷、鑒別診斷意義。寵物血液生化的意義寵物血液生化的意義 17.白蛋白【正常值】35-55g/L?!九R床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的一般情況:對肝腎損害,多發(fā)性骨髓瘤等有一定診斷、鑒別診斷意義。18.血清總膽紅質(zhì)【正常值】1.7-17.1mol/L?!九R床意義】診斷、鑒別診斷黃疸類型有重要意義。19.血清直接膽紅質(zhì)【正常值】0.3-3
19、.4mol/L?!九R床意義】診斷、鑒別診斷黃疸類型有重要意義。20.丙谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT)【正常值】20-40。【臨床意義】對心肌梗塞、肝臟實質(zhì)病變的診斷及病情變化的觀察有重要意義。寵物血液生化的意義寵物血液生化的意義 21.門谷轉(zhuǎn)氨酶(AST)【正常值】40?!九R床意義】急性心肌梗塞時升高,肝病及其它臟器炎癥時也常增高。22.r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶或轉(zhuǎn)酞酶(r-GT)【正常值】6-47/ml?!九R床意義】肝膽系統(tǒng)病變特別是肝癌時明顯增高。23.肌酸磷酸激酶(CK)【正常值】5.5-75IU/L?!九R床意義】骨胳肌疾病、甲狀腺功能減退、急性心肌梗塞時顯著升高。24.乳酸脫氫酶(LDH)【正常值】150-450?!九R床意義】心、肝、肺等組織急性損害時明顯增高。 25.堿性磷酸酶(AKP)【正常值】1.5-4.0?!九R床意義】阻塞性黃疸、肝炎、肝硬化、
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