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文檔簡介
1、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)一、選擇題1DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解。相關(guān)操作正確的是( )A以菜花為材料進(jìn)行研磨時,可以適當(dāng)加熱以促進(jìn)DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸餾水,使DNA快速析出C將絲狀物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后,加水析出D向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌2下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述,正確的是( )A洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取D用玻棒緩慢攪拌濾液會導(dǎo)致DNA獲得量減少3關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)
2、驗(yàn)的表述哪項(xiàng)是錯誤的( )A離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了提取DNAB氯化鈉溶液的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時,DNA溶解C向溶解DNA的燒杯中加蒸餾水是漂洗DNAD離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質(zhì)4下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的敘述,不正確的是( )A鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中,要先將雙縮脲試劑A、B等量混勻后再加入待測樣液B綠葉色素分離實(shí)驗(yàn)中,要先加適量層析液再放劃好濾液細(xì)線的濾紙條C進(jìn)行DNA粗提取實(shí)驗(yàn)時,可使用新鮮的雞血細(xì)胞作為理想材料D在果酒制作的過程中,應(yīng)將裝置密封放在25左右的環(huán)境下5下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯誤的是( )A酵母菌和菜花均可作為提取DNA的材料B2 mol/L和
3、0014 mol/L的NaCl溶液均可溶解DNAC研磨植物細(xì)胞時加入洗滌劑是為了溶解DNAD在沸水浴條件下DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色6DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解。相關(guān)操作正確的是A以菜花為材料進(jìn)行研磨時,可以適當(dāng)加熱以促進(jìn)DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸餾水,使DNA快速析出C將絲狀物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后,加水析出D向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌7有關(guān)PCR技術(shù)的說法,不正確的是( )APCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)BPCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制C利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段已
4、知目的基因的核苷酸序列DPCR擴(kuò)增中必須有解旋酶才能解開雙鏈DNA8(2011廣東)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是( )A洗滌紅細(xì)胞時,使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時雜蛋白較少C血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測D在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動慢9(2014春臺江區(qū)校級期末)PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)的縮寫,下列有關(guān)PCR過程敘述中不正確的是( )A目的基因DNA變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成C延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷
5、酸DPCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高10(2013秋和平區(qū)期末)有關(guān)PCR技術(shù)的說法,不正確的是( )APCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)BPCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制C利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列DPCR擴(kuò)增中必須有解旋酶才能解開雙鏈DNA11下面說法不正確的是( )A在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH基本不變B緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成C電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程D透析袋能使大分子自由進(jìn)出,而將小分子保留在袋內(nèi)12SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法
6、中加入SDS的作用是( )A增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量B改變蛋白質(zhì)分子的形狀C掩蓋不同蛋白質(zhì)分子間的電荷差別D減小蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量13在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中,加入與濾液體積相等的、冷卻的A溶液,靜置23 min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物。上面的A溶液是指 ( )A0.9%的NaCl溶液B0.14 mol/L的NaCl溶液C質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的HClD體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液14關(guān)于DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的操作及原理的敘述,正確的是A用蒸餾水使豬的紅細(xì)胞漲破獲取含DNA的濾液B控制NaCl溶液的濃度可以實(shí)現(xiàn)去除雜質(zhì)的目的C用玻璃棒輕緩攪拌濾液可使析出的DNA量減少D利用DNA溶于乙醇的性質(zhì)進(jìn)
7、一步純化DNA15關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn),敘述正確的是A用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNABPCR的每個循環(huán)一般依次經(jīng)過變性-延伸-復(fù)性三步CDNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物D用甲基綠對人的口腔上皮細(xì)胞染色,細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色16下列屬于PCR技術(shù)的條件的是( )單鏈的脫氧核苷酸序列引物 目的基因所在的DNA片段 脫氧核苷酸 核糖核苷酸 DNA連接酶 DNA聚合酶 DNA限制性內(nèi)切酶A BC D17下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯誤的是( )ADNA既溶于2mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水B向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水是為了釋放出DNAC向溶解DNA的濃鹽溶液中加蒸餾水
8、是為了析出DNAD用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料,其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同18下列化學(xué)試劑在實(shí)驗(yàn)中的作用不同的是( )A酒精在“微生物培養(yǎng)”和“檢測生物組織中的脂肪”中的作用B鹽酸在“觀察植物細(xì)胞有絲分裂”和“探究pH對酶的活性”中的作用CCuSO4在“檢測生物組織中的還原糖”和“檢測生物組織中的蛋白質(zhì)”中的作用D蒸餾水在“提取純凈的動物細(xì)胞膜”和“利用雞血粗提取DNA”中的作用19將釋放出的血紅蛋白以2 000 r/min的速度離心10 min后,可以看到試管中的溶液分為4層,其中哪一層是血紅蛋白的水溶液( )A第一層無色透明 B第二層白色C第三層紅色透明 D第四層暗紅色20下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白
9、的敘述,錯誤的是( )A樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液B通過透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì),此為樣品的粗提取C可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化D可通過SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度二、綜合題21玉米為一年生植物某農(nóng)場種植的H品種玉米自交后代中,發(fā)現(xiàn)了葉片顏色為黃綠色的變異植株此變異植株因光合作用不足,在開花前死亡讓H品種玉米進(jìn)行單株自交,其中某株玉米所結(jié)種子再種植,子一代中葉片黃綠色有125株,葉片綠色有335株有研究者對上述變異提出兩種假設(shè):假設(shè)1:與葉綠素合成相關(guān)的酶的基因(M基因)發(fā)生了基因突變;假設(shè)2:葉片黃綠色是由于“含M
10、基因”的染色體片段丟失所致請分析回答:(1)上述性狀分離結(jié)果可用假設(shè) 解釋假設(shè)2所述的變異屬于 變異(2)若假設(shè)1成立,則葉片黃綠色變異為 (顯性,隱性)突變檢測該變異是否由單基因突變引起(能,不能)用測交實(shí)驗(yàn),理由是 (3)提取 的DNA,利用PCR技術(shù)進(jìn)行特異性擴(kuò)增,若 ,則證明假設(shè)2不成立22 PCR技術(shù)有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對樣品進(jìn)行研究的問題,而被廣泛應(yīng)用,此過程需要一種Taq DNA聚合酶。請回答有關(guān)問題:(1)體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA,而PCR技術(shù)中應(yīng)用_。(2)Taq DNA聚合酶是從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離的。Taq DNA聚合酶的功能是
11、_。Taq DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),可用_法和_法進(jìn)行分離。(3)相對于細(xì)菌分離,DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜的多。在DNA提取中兩次用到蒸餾水,其目的分別是_、_。實(shí)驗(yàn)中能否以哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料?為什么?_。(4)與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較,PCR反應(yīng)要在_中才能進(jìn)行,并且要嚴(yán)格控制_條件。(5)PCR中加入的引物有_種,加入引物的作用是_。23花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程
12、如下圖。據(jù)圖回答下列問題:(1)過程所需的酶是 。(2)過程后,在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的 存在,這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是 。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖,通過 、 、染色和制片等過程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA 進(jìn)行PCR 擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株14 進(jìn)行PCR 擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判
13、斷,再生植株14 中一定是雜種植株的有 。(6)對雜種植株進(jìn)行 接種實(shí)驗(yàn),可篩選出具有高抗性的雜種植株。24回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐中的問題。I(1)果酒的制作離不開酵母菌。酵母菌是 微生物,在缺氧、 的發(fā) 酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。(2)醋酸菌是一種好氧細(xì)菌,只有當(dāng)氧氣充足時,才能進(jìn)行旺盛的生理活動。當(dāng)缺少糖源時, 醋酸菌將變?yōu)?,再變?yōu)榇姿?,該過程需控制的溫度條件是_。II(1)植物組織培養(yǎng)中的細(xì)胞,從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為_。(2)在再分化階段所用的培養(yǎng)基中,含有植物激素 X 和植物激素 Y,逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種 植物激
14、素的濃度比,未分化細(xì)胞群的變化情況如下圖所示,據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與 形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系:當(dāng)植物激素 X 與植物激素 Y 的濃度比等于 1 時,未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織;_;_;切取經(jīng)光照一段時間后的幼苗芽尖處的組織塊,消毒后,接種到誘導(dǎo)再分化的培養(yǎng)基中 培養(yǎng),該培養(yǎng)基中兩種植物激素濃度相同。從理論上分析,分化的結(jié)果是_;原因 是_。III選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來提取和分離血紅蛋白。(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液,要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進(jìn)行離心,收 集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。(2)在對樣品進(jìn)行處理時,主要包括_、血紅蛋白的
15、釋放、分離血紅蛋白溶液、透析 等步驟。其中透析技術(shù)的原理是_。(3) 利用凝膠色譜法進(jìn)行血紅蛋白的分離,基本原理是_ (填“相對 分子質(zhì)量大”或“相對分子質(zhì)量小”)的蛋白質(zhì),路程較短,移動速度較快。25請分析回答下列問題:(1)無菌技術(shù)主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染常用的滅菌方法有 滅菌、干熱滅菌和 滅菌稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是 土壤取樣稱取lOg土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液吸取0.1mL溶液進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A BC D(2)利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定的空間內(nèi),這項(xiàng)技術(shù)稱
16、為 (3)利用凝膠色譜法, 蛋白質(zhì)先洗脫出來(4)通過電泳法分離提純蛋白質(zhì)時,影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素是蛋白質(zhì)分子的 、分子大小和分子形狀(5)通過分析發(fā)現(xiàn)、DNA的復(fù)制方向總是從子鏈的 端向 端延伸26某實(shí)驗(yàn)小組以洋蔥組織為實(shí)驗(yàn)材料,進(jìn)行DNA粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)主要過程如下圖,回答下列問題:(1)步驟一中需加入一定量的洗滌劑和 對洋蔥組織進(jìn)行處理,加入前者是為了瓦解細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),加入后者的目的是_。將攪拌和研磨后的物質(zhì)進(jìn)行過濾,即可得到含有DNA的濾液。(2)步驟二是DNA純化過程中的關(guān)鍵步驟,可以采用以下幾種不同的方法:濾液中NaCl濃度在0.14 molL時可分離出DNA,若要再次提
17、純,需要將其溶解在 molL的NaCl溶液中;通常會向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是_;將得到的DNA粗提取物放在6075水浴中保溫1015 min,蛋白質(zhì)被破壞,但仍能得到純度較高的DNA,說明了DNA .(3)步驟三中向?yàn)V液中加入DNA體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的目的是_ _,依據(jù)的原理是 。得到純凈的DNA后,可利用DNA與 在沸水浴條件下發(fā)生顯色反應(yīng),來對其進(jìn)行鑒定。27中國女科學(xué)家屠呦呦獲2015年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎,她研制的抗瘧藥青蒿素挽救了數(shù)百萬人的生命。但是青蒿中青蒿素的含量很低,且受地域性種植影響較大。通過傳統(tǒng)育種和現(xiàn)代生物技術(shù)可培育高青蒿素含量的植株。(1)青蒿組織培養(yǎng)利用
18、的生物學(xué)原理是 。應(yīng)選用生理狀況好的青蒿嫩棱莖段作為外植體,這是因?yàn)槠涓菀妆徽T導(dǎo) 。(2)培養(yǎng)基中生長素和 兩種激素的用量比例會影響細(xì)胞的分化方向,過程的比值相對過程的比值 (大、小或相等)(3)為了研究青蒿素的產(chǎn)生原理,科學(xué)家通過一定方法提取青蒿的DNA,可用 試劑鑒定提取物中的DNA,沸水浴呈 色。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增該DNA,需用耐高溫的_催化,一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、復(fù)性和 三步。28運(yùn)用學(xué)過的知識,回答有關(guān)現(xiàn)代技術(shù)實(shí)踐的問題:(1)在生產(chǎn)過程中,發(fā)現(xiàn)葡萄酒變酸,表面觀察到菌膜,造成此現(xiàn)象的生物是 腐乳外部有一層致密的“皮”,這是 的匍匐菌絲形成的制作泡菜時,有時
19、壇內(nèi)會長一層白膜,這是 繁殖形成的(2)培養(yǎng)基配制和滅菌時,滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是 ;一般對配制的培養(yǎng)基采用 法滅菌(3)提取洋蔥DNA時,要在切碎的洋蔥中加入一定的 ,并進(jìn)行充分地攪拌和研磨,待過濾后再收集研磨液(4)下圖為花粉植株的培育途徑為了挑選到單核期的花藥,通常選擇 的月季花蕾選擇花藥時一般通過鏡檢確定花粉發(fā)育時期,此時需要對花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色圖中通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株,有兩種途徑,這兩種途徑之間沒有并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中 。29(2015秋朔州校級期末)圖為人珠蛋白基因與其mRNA雜交的示意圖,表示基因的不同功能區(qū)據(jù)圖回答:(1)上述分子雜交的原理是 ;細(xì)胞中珠
20、蛋白基因中不能翻譯的序列是 (填寫圖中序號)(2)細(xì)胞中珠蛋白基因開始轉(zhuǎn)錄、識別和結(jié)合中調(diào)控序列的酶是 (3)決定珠蛋白基因的編碼區(qū)有7000個堿基對,其中有1000個堿基對的序列不編碼蛋白質(zhì),剩下的序列轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的MRNA含 個密碼子,最多能編碼 個氨基酸(考慮終止)(4)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的 和 之間(5)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、對干擾素基
21、因特異的DNA引物對;TaqDNA聚合酶、 和 (6)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時,貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以 ,增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換30隨著人類基因組計劃的進(jìn)展和多種生物基因組測序工作的完成,人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時代。對蛋白質(zhì)進(jìn)行研究時,首先要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。下圖是某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中,準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,設(shè)計的“血紅蛋白提取、分離流程圖”:請回答下列有關(guān)問題:(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用_反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH 70的緩沖液并充分?jǐn)嚢瑁?/p>
22、以破碎紅細(xì)胞,破碎細(xì)胞的原理是_。(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是_,若要盡快達(dá)到理想的透析效果,可以_(寫出一種方法)。(3)血紅蛋白的純化是通過_法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,(4)電泳利用了待分離樣品中各種分子的_等的差異,而產(chǎn)生不同遷移速度,實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。(5)一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳,觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如上圖所示。由圖可知攜帶者有_種血紅蛋白,從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是_參考答案1D【解析】DNA耐高溫,因此適當(dāng)加熱不會促進(jìn)DNA溶解,A錯誤;在0.14mol/LNaCl溶液中,DNA的溶解度最低,因此用蒸餾水將NaCl
23、溶液濃度調(diào)至0.14mol/L,濾去濾液,B錯誤;DNA絲狀物溶解在2 mol/LNaCl溶液中,加95%的冷酒精析出,C錯誤;DNA不溶于酒精,因此可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精并沿同一方向緩慢攪拌析出DNA,D正確?!究键c(diǎn)定位】DNA的粗提取和鑒定【名師點(diǎn)睛】DNA的粗提取和鑒定的原理是:(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶液酒精。(3)DNA和蛋白質(zhì)對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。(4)DNA的鑒定:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。2C【解析】試題分析:DNA溶解度與洗滌劑無關(guān),DNA與二苯
24、胺水浴加熱變藍(lán),不需要冷卻;用玻璃棒攪拌,使DNA吸附在玻璃棒上,且DNA量不會減少解:A、洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但不能增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度,故A錯;B、應(yīng)將DNA絲狀物放入一定濃度氯化鈉溶解,再滴加二苯胺試劑,故B錯;C、常溫下菜花勻漿中有些酶類可破壞DNA而影響DNA的提取,故C正確;D、用玻璃棒攪拌的目的是讓DNA充分溶解,慢攪拌濾液不會導(dǎo)致DNA獲得量減少,故D錯故選:C考點(diǎn):DNA的粗提取和鑒定3C【解析】試題分析:DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氯化鈉濃度的變化而變化的當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時DNA的溶解度最低利用這一原理,可以使溶解在
25、氯化鈉溶液中的DNA析出DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNADNA遇二苯胺(沸水?。境伤{(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑解:A、離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了使血細(xì)胞破裂釋放DNA,從而提取DNA,A正確;B、氯化鈉溶液的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時,DNA溶解,B正確;C、向溶解DNA的燒杯中加蒸餾水是為了降低氯化鈉溶液的濃度,從而是DNA析出,C錯誤;D、離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質(zhì),D正確故選:C考點(diǎn):DNA的粗提取和鑒定4A【解析】試題分析:生物組織中化合物的鑒定:(1)斐林試劑可用于鑒定還原糖,在
26、水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀)斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉)(2)蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)鑒定類實(shí)驗(yàn)的操作流程模板:取材(應(yīng)該選取無色且富含被鑒定物質(zhì)的材料)處理材料(制備組織樣液或制片)加鑒定劑(根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理和要求,準(zhǔn)確添加所需的鑒定試劑)觀察,得出結(jié)論(對應(yīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行準(zhǔn)確描述,并做出肯定結(jié)論)解:A、鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中,要先加雙縮脲試劑A液,形成堿性環(huán)境后再加B液,A錯誤;B、綠葉色素分離實(shí)驗(yàn)中,要先加適量層析液,然后往層析液中放入劃好濾液細(xì)線的濾紙條,B正確;C、進(jìn)行DNA粗提取實(shí)驗(yàn)時,可使用新
27、鮮的雞血細(xì)胞作為理想材料,C正確;D、在腐乳制作的毛霉生長階段,應(yīng)將豆腐塊整齊排放并留有一定空隙,給毛霉生長的空間,D正確故選:A考點(diǎn):檢測蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn);葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn);酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋;DNA的粗提取和鑒定5C【解析】此酵母和菜花的細(xì)胞都含有DNA,都可以作為提取DNA的材料,A正確;2 mol/L和0014 mol/L的NaCl溶液均可溶解DNA ,2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度較高,而0014 mol/L的NaCl溶液中溶解度較低,B正確;研磨植物細(xì)胞時加入洗滌劑是為了瓦解細(xì)胞膜,C錯誤;在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,D正確?!究键c(diǎn)定位】
28、“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)【名師點(diǎn)睛】DNA粗提取和鑒定的原理:1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。2、DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。6D【解析】在實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)該盡可能避免DNA斷裂和降解,從而獲取更多的DNA,要做到緩慢攪拌并加入冷酒精析出DNA,加蒸餾水也要緩慢,防止DNA斷裂,同時不能加入,否則DNA水解酶活性會上升,會加速分解DNA。評講時應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)的分析?!究键c(diǎn)定位】DNA粗提取7D【解析】試題分析:解答本題需識記有關(guān)PC
29、R技術(shù)的相關(guān)知識:1、概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)2、原理:DNA復(fù)制3、前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物4、過程:高溫變性:DNA解旋過程;低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;中溫延伸:合成子鏈PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開解:A、PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),A正確;B、PCR技術(shù)以解開的雙鏈作為模版,利用的原理是DNA復(fù)制,B正確;C、前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物,C正確;D、雙鏈DNA模版在熱作用下,氫鍵斷裂
30、,形成單鏈DNA,可見該過程不需要解旋酶解開雙鏈DNA,D錯誤故選:D考點(diǎn):PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用8D【解析】試題分析:A、洗滌紅細(xì)胞時,洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分離純化,加入的是生理鹽水,可防止紅細(xì)胞破裂,A 正確;B、哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核與眾多的細(xì)胞器,提純時雜蛋白較少,B 正確;C、血紅蛋白是有色蛋白,因此在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液(如果操作都正確,C 正確;D、在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白的分子量比雜蛋白大,質(zhì)量越大的,通過凝膠色譜柱的速度越快,D錯誤故選:D考點(diǎn):蛋白質(zhì)的提取和分離9C【解析】試題分析:A、目的基因DN
31、A變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,使雙鏈DNA得以打開,A正確;B、引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成的,B正確;C、PCR技術(shù)是在較高溫度條件下進(jìn)行的,該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶,且PCR反應(yīng)的產(chǎn)物是DNA,因此原料是四種游離的脫氧核苷酸,不是核糖核苷酸,C錯誤;D、PCR技術(shù)是在較高溫度條件下進(jìn)行的,因此PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高PCR,D正確故選:C考點(diǎn):PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用10D【解析】試題分析:A、PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),A正確;B、PCR技術(shù)以解開的雙鏈作為模版,
32、利用的原理是DNA復(fù)制,B正確;C、前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物,C正確;D、雙鏈DNA模版在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA,可見該過程不需要解旋酶解開雙鏈DNA,D錯誤故選:D考點(diǎn):PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用11D【解析】試題分析:緩沖物質(zhì)指能調(diào)節(jié)溶液的pH值,使溶液的pH值在加入一定量的酸性物質(zhì)或堿性物質(zhì)時保持恒定或小范圍變化的一種物質(zhì),A正確;緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成,B正確;電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程,C正確;透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子保留在袋內(nèi),D錯誤。考點(diǎn):本題考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識,意在考查考生能理解所學(xué)
33、知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。12C【解析】試題分析:SDS(十二烷基硫酸鈉)聚丙烯酰胺凝膠電泳法加入SDS的目的是使蛋白質(zhì)完全變性,SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同蛋白質(zhì)間的電荷差別。所以C正確。A、B、D不正確??键c(diǎn):本題考查SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法的相關(guān)知識,意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。13D【解析】試題分析:在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中,加入與濾液體積相等的、冷卻的A溶液,靜置23 min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物。上面的A溶液是指 體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液。所以D正確。A、B、C不
34、正確。考點(diǎn):本題考查教材中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識,意在考查考生能理解相關(guān)實(shí)驗(yàn)的原理和方法,把握材料和試劑的選擇,熟練完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)的能力。14B【解析】試題分析:DNA主要位于細(xì)胞核,哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,因此不能用來作為提取DNA的材料,A錯誤;由于DNA和蛋白質(zhì)等物質(zhì)在氯化鈉的溶解度不同,因此可以控制氯化鈉的濃度來去掉雜質(zhì),用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì),用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì),B正確;用玻璃棒攪拌的目的是讓DNA充分溶解,C錯誤;DNA不溶于酒精,而其它雜質(zhì)溶解于酒精,故利用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精來純化DNA,D錯誤??键c(diǎn):
35、DNA的粗提取和鑒定15C【解析】試題分析:兔的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核及細(xì)胞器,故不能用于提取DNA,A錯誤;PCR的每個循環(huán)一般依次經(jīng)過變性-復(fù)性-延伸三步,B錯誤;DNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物,C正確;用甲基綠吡羅紅試劑對人的口腔上皮細(xì)胞染色,細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色,D錯誤??键c(diǎn):DNA的粗提取和鑒定;DNA、RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn);PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用16B【解析】試題分析:PCR需要一對引物,即一對單鏈的脫氧核苷酸序列引物,正確;PCR需要模板,即目的基因所在的DNA片段,正確;需要脫氧核苷酸作為原料,正確;核糖核苷酸是合成RNA的原料,而PCR合成的是DN
36、A,錯誤;采用PCR合成DNA時,不需要DNA連接酶,錯誤;體外合成DNA時,需要DNA聚合酶,正確;體外合成DNA時,不需要限制性內(nèi)切酶,錯誤考點(diǎn):基因工程的原理及技術(shù)17D【解析】試題分析:DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度較高,也溶于蒸餾水中,A項(xiàng)正確;向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水,雞血細(xì)胞會大量吸水,導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜破裂,釋放出DNA,B項(xiàng)正確;DNA在014mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,向溶解DNA的濃鹽溶液中加蒸餾水是為了降低NaCl溶液的濃度使其達(dá)到014mol/L,從而析出DNA,C項(xiàng)正確;如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,在破碎細(xì)胞、獲取含DNA的濾液前,需要先用洗滌劑溶解
37、細(xì)胞膜,D項(xiàng)錯誤。 考點(diǎn):本題考查“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識,意在考查學(xué)生能理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能,并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用的能力。18ABC【解析】試題分析:酒精在“微生物培養(yǎng)”中用于消毒,在“檢測生物組織中的脂肪”中用于洗去浮色,A項(xiàng)正確;鹽酸在“觀察植物細(xì)胞有絲分裂”的實(shí)驗(yàn)中與體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精按1:1混合配制成解離液,其作用是使組織細(xì)胞相互分離,在“探究pH對酶的活性”中的作用是提供酸性環(huán)境,B項(xiàng)正確;在“檢測生物組織中的還原糖”的實(shí)驗(yàn)中,是利用 CuSO4和NaOH反應(yīng)生成的Cu(OH)2與還原糖發(fā)生作用,在水?。?0
38、650C)加熱條件下,生成磚紅色的Cu2O沉淀,在“檢測生物組織中的蛋白質(zhì)”的實(shí)驗(yàn)中,實(shí)質(zhì)上是在堿性條件下,Cu2+與肽鍵形成紫色的絡(luò)合物,C項(xiàng)正確;蒸餾水在“提取純凈的動物細(xì)胞膜”和“利用雞血粗提取DNA”中的作用都是使細(xì)胞吸水漲破,D項(xiàng)錯誤。考點(diǎn):本題考查“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識,意在考查學(xué)生能理解相關(guān)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能,并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用的能力。19C【解析】試題分析:分離血紅蛋白溶液時,將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,經(jīng)過中速長時離心后,可明顯看到試管中溶液分為4層,從上往下數(shù),第1層為甲苯層,第2層為脂溶性物
39、質(zhì)的沉淀層,第3層為血紅蛋白水溶液,第4層為雜質(zhì)沉淀層。所以C正確。A、B、D不正確??键c(diǎn):本題考查教材中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識,意在考查考生能理解相關(guān)實(shí)驗(yàn)的原理和方法,把握材料和試劑的選擇,熟練完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)的能力。20B【解析】試題分析:樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液,所以A正確;通過透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),此為樣品的粗提取,B錯誤;可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化,C正確;SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法是蛋白質(zhì)純化鑒定使用最多的方法,所以D正確??键c(diǎn):本題考查提取和分離血紅蛋白的相關(guān)知識,意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在
40、聯(lián)系,能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn),通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理,做出合理判斷或得出正確結(jié)論的能力。21(1)1和2 染色體結(jié)構(gòu)(2)隱性 不能 黃綠色植株開花前死亡(無隱性純合的成熟個體)(3)黃綠色植株 能擴(kuò)增出M基因片段【解析】解:(1)由題意知,假若:與葉綠素合成相關(guān)的酶的基因(M基因)發(fā)生了基因突變,設(shè)用Aa×Aa表示,進(jìn)行單株自交,產(chǎn)生子代的基因型為MM:Mm:mm=1:2:1,即子一代中葉片綠色:黃綠色=3:1,推測假說一符合題意染色體片段丟失屬于染色體結(jié)構(gòu)變異,若為染色體片段丟失,設(shè)用MO×MO表示,進(jìn)行單株自交,產(chǎn)生子代的基因型為MM:
41、MO:OO=1:2:1,則也會出現(xiàn)子一代中葉片綠色:黃綠色=3:1的比例(2)若發(fā)生基因突變,根據(jù)題意,子一代中葉片綠色:黃綠色=3:1,黃綠色的突變植株應(yīng)為隱性突變由題意知,此變異植株因光合作用不足,在開花前死亡,故不能得到隱性純合的成熟個體,所以不能進(jìn)行測交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證(3)提取黃綠色植株的DNA,利用PCR技術(shù)進(jìn)行特異性擴(kuò)增,若能擴(kuò)增出M基因片段,則證明假設(shè)2不成立故答案為:(1)1和2 染色體結(jié)構(gòu)(2)隱性 不能 黃綠色植株開花前死亡(無隱性純合的成熟個體)(3)黃綠色植株 能擴(kuò)增出M基因片段22(1)高溫使DNA分子熱變性(2)催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵 凝膠色譜 電泳(3)使
42、血細(xì)胞破裂,釋放出DNA分子 稀釋NaCl溶液,使DNA分子析出 不能,哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無DNA 分子(4)一定的緩沖溶液 溫度(5)2 作為DNA復(fù)制的起點(diǎn)【解析】試題分析:(1)PCR技術(shù)中用高溫使DNA分子中的氫鍵打開,從而解旋。(2)在DNA分子復(fù)制中,TaqDNA聚合酶將兩個脫氧核苷酸的脫氧核糖和另一脫氧核苷酸的磷酸連結(jié)形成磷酸二酯鍵。蛋白質(zhì)的分離可以根據(jù)其分子大小和帶電的性質(zhì)和多少使之分離,即凝膠色譜法和電泳法。(3)在使用蒸餾水時,第一次使血細(xì)胞破裂,第二次使NaCl溶液濃度降低至0.14 mol/L。(4)PCR反應(yīng)是在一定的緩沖溶液中進(jìn)行的,并需嚴(yán)格控制好溫度條件。(5
43、)PCR中與體內(nèi)DNA復(fù)制過程中的原料是完全相同的,并加入小段單鏈DNA或RNA作為引物,引導(dǎo)DNA復(fù)制,可以使游離的脫氧核苷酸與之結(jié)合形成磷酸二酯鍵,成為DNA復(fù)制的起點(diǎn)??键c(diǎn):本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識,意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn),形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。23(1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質(zhì)體完整性 細(xì)胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥) 解離 漂洗(5)1、2、4 (6)(6)黑腐病菌【解析】試題分析:(1)過程表示原生質(zhì)體的制備,要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。(2)用于融合的兩個細(xì)胞,一個是黑芥苗的葉肉細(xì)胞,一個
44、是花椰菜的根部細(xì)胞,其中供體細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體,可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁的保護(hù),需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定,以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性;原生質(zhì)體通過細(xì)胞壁雜聲形成雜種細(xì)胞,進(jìn)而形成愈傷組織。(4)分析再生植株染色體變異類型,需要將再生植株細(xì)胞染色體和黑芥苗與花椰菜細(xì)胞中的染色體制片觀察進(jìn)行比較,制片的基本程序是解離、漂洗、染色、制片。(5)根據(jù)圖譜,花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段,黑芥還有堿基對為1000、1300和1500的片段,再生植株3,只含有長度為300和600的片段,與花椰菜一致,1
45、、2、4既含有花椰菜DNA片段,又含有黑芥DNA片段,為雜種植株。(6)對雜種植株接種黑腐病菌,能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株??键c(diǎn):植物細(xì)胞工程、細(xì)胞分裂24I(1)兼性厭氧 呈酸性(2)乙醇 乙醛 3035II(1) 去分化(脫分化)(2)當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時 未分化細(xì)胞群分化形成芽當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時 未分化細(xì)胞群分化形成根生根 培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素的濃度相等,而經(jīng)光照后的幼苗芽尖處組織塊含較多生長素,因此組織塊處的細(xì)胞分裂素相對較少,生長素相對較多,故誘導(dǎo)生根III(1)防止血液凝固 (2)紅細(xì)胞的洗滌 小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透
46、膜),而大分子不能通過 (3)相對分子質(zhì)量大?!窘馕觥縄(1)酵母菌是兼性厭氧微生物,在缺氧、呈酸性 的發(fā) 酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。(2)醋酸菌是一種好氧細(xì)菌,只有當(dāng)氧氣充足時,才能進(jìn)行旺盛的生理活動。當(dāng)缺少糖源時, 醋酸菌將 變?yōu)橐掖?,再變?yōu)橐胰?,該過程需控制的溫度條件是3035 。II(1)植物組織培養(yǎng)中的細(xì)胞,從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為去分化(脫分化)。(2)據(jù)圖分析,兩種激素的不同濃度比與 形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系:當(dāng)植物激素 X 與植物激素 Y 的濃度比等于 1 時,未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織;當(dāng)植物激素X與植物
47、激素Y的濃度比大于1時,未分化細(xì)胞群分化形成芽;當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時,未分化細(xì)胞群分化形成根;從理論上分析,分化的結(jié)果是生根;原因是培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素的濃度相等,而經(jīng)光照后的幼苗芽尖處組織塊含較多生長素,因此組織塊處的細(xì)胞分裂素相對較少,生長素相對較多,故誘導(dǎo)生根。III (1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液,要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。(2)在對樣品進(jìn)行處理時,主要包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析 等步驟。其中透析技術(shù)的原理是小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜),而大分子不能通過
48、。(4) 利用凝膠色譜法進(jìn)行血紅蛋白的分離,基本原理是相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì),路程較短,移動速度較快。【考點(diǎn)定位】果酒果醋的制作、植物組織培養(yǎng)、血紅蛋白的提取和分離25(1)高壓蒸汽 灼燒 C(2)固定化酶(3)分子量大的(4)帶電性質(zhì)及帶電量(5)5端 3端【解析】試題分析:微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作,常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌和干熱滅菌等從土壤中分離微生物的一般步驟是:土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布和篩選菌株蛋白質(zhì)的分離常用凝膠色譜法解:(1)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌和干熱滅菌等稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是土壤取樣,稱取10
49、g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液,進(jìn)行梯度稀釋,即依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度,涂布和篩選菌株故選:C(2)固定化酶是指利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定的空間內(nèi)的技術(shù)(3)利用凝膠色譜法,分子量大的蛋白質(zhì)經(jīng)過的路程較短,移動速度較快,會先洗脫出來(4)通過電泳法分離提純蛋白質(zhì)時,影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素是蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)及帶電量,分子大小和分子形狀(5)DNA的復(fù)制方向總是從子鏈的5端向3端延伸故答案為:(1)高壓蒸汽 灼燒 C(2)固定化酶(3)分子量大的(4)帶電性質(zhì)及帶電量(5)5端 3端考點(diǎn):微生物的分離和培養(yǎng);蛋白質(zhì)的
50、提取和分離26(1)食鹽(氯化鈉) 溶解DNA(2)2(1分) 破壞其中的蛋白質(zhì) 具有較高的穩(wěn)定性(或耐較高溫度)(3)析出DNA DNA不溶于酒精,但酒精可以使蛋白質(zhì)變性并與DNA分離 二苯胺【解析】(1) 進(jìn)行DNA粗提取和鑒定時,步驟一中需加入一定量的洗滌劑和食鹽(氯化鈉)對洋蔥組織進(jìn)行處理,加入前者是為了瓦解細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),加入后者的目的是溶解DNA,將攪拌和研磨后的物質(zhì)進(jìn)行過濾,即可得到含有DNA的濾液。(2)步驟二是DNA純化過程中的關(guān)鍵步驟,可以采用以下幾種不同的方法:利用DNA在濃度為0.14 molL的NaCl溶液中溶解度最低可分離出DNA;若要再次提純,需要將其溶解在2molL
51、的NaCl溶液中。通常會向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,由于嫩肉粉中含有蛋白酶,可破壞其中的蛋白質(zhì)。由于DNA具有較高的穩(wěn)定性(或耐較高溫度),將得到的DNA粗提取物放在6075水浴中保溫1015 min,則蛋白質(zhì)被破壞,可得到純度較高的DNA。(3)由于DNA不溶于酒精,但酒精可以使蛋白質(zhì)變性并與DNA分離,故步驟三中向?yàn)V液中加入DNA體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的目的是析出DNA。得到純凈的DNA后,可利用DNA與二苯胺在沸水浴條件下發(fā)生顯色(藍(lán)色)反應(yīng),來對其進(jìn)行鑒定?!究键c(diǎn)定位】DNA粗提取和鑒定27(1)植物細(xì)胞的全能性(2分) 脫分化和再分化(2分)(2) 細(xì)胞分裂素(1分) 小(1分)(3)二苯胺(1分) 藍(lán)色(1分) (Taq)DNA聚合酶(2分) (中溫)延伸(1分)【解析】(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性,選用青蒿嫩棱莖段作為外植體,因?yàn)槠淙菀酌摲只驮俜只?)生長素和細(xì)胞分裂素會影響細(xì)胞的分化方向,過程為脫分化,過程為再分化,前者比后者的比值?。?)二苯胺可檢測DNA,沸水浴呈藍(lán)色,在PCR技術(shù)中,需用Taq酶,循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸過程?!究键c(diǎn)定位】植物組織培養(yǎng)和PCR技術(shù)【名師點(diǎn)睛】本題主要考查了學(xué)
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