丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定

1、3化驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：zmljykxm-001丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定（動(dòng)力法） 第 1 頁(yè) 共 3 頁(yè)起草人莊紅梅起草日期200510生效日期2005.11審核人張慶芳審核日期200510頒布后重審日期2005.11批準(zhǔn)人許清泉批準(zhǔn)日期200510 頒布部門檢驗(yàn)科頒布部門走馬嶺中心衛(wèi)生院丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定 1.原理： ALTL-丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸LOH丙酮酸+NADH+H+ L-乳酸+NAD+2.標(biāo)本采集與處理：2.1受檢者準(zhǔn)備：病人必須空腹12小時(shí)，不飲酒24小時(shí)后采集血樣。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般采血取坐位，從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過(guò)1分鐘

2、，穿刺成功后立即松開止血帶；2.3標(biāo)本處理:血清要迅速與血細(xì)胞分離，因紅細(xì)胞中ALT比血清中ALT的濃度高。血清中的ALT能在室溫（2025）下保存24小時(shí)或者在4下保存1周。2.4采血管要求:采血時(shí)要求使用一次性無(wú)菌注射器，一人一管，用后毀形，用500mg/L有效氯浸泡消毒分鐘，回收、焚燒、做好登記。2. 5標(biāo)本拒收；接收標(biāo)本應(yīng)檢查是否符合要求（有無(wú)溶血）試管是否填寫完整，對(duì)不合格標(biāo)本應(yīng)重新采集。3.試劑：3.1試劑盒組成：（柏定生物工程（北京）有限公司）a-酮戊二酸 15mmol/LNADH 0.18 mmol/L乳酸脫氫酶（LDH） >5000U/LTris緩沖液 100 mmol

3、/L化驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：zmljykxm-001丙氨酸氨基轉(zhuǎn)酶測(cè)定（動(dòng)力法） 第 2 頁(yè) 共 3 頁(yè)起草人莊紅梅起草日期200510生效日期2005.11審核人張慶芳審核日期200510頒布后重審日期2005.11批準(zhǔn)人許清泉批準(zhǔn)日期200510 頒布部門檢驗(yàn)科頒布部門走馬嶺中心衛(wèi)生院3.2質(zhì)控血清：應(yīng)在測(cè)量未知樣本的同時(shí)檢測(cè)質(zhì)控物并確保質(zhì)控在可接受的范圍內(nèi)，并且結(jié)果必須在范圍內(nèi)。質(zhì)控品批號(hào)及范圍:批號(hào)022431，范圍*±2st和*±3s。保存環(huán)境:在28保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。3.3試劑貯存及穩(wěn)定性：試劑在28保存可穩(wěn)定至瓶簽所示失效日期；工作液28可穩(wěn)定30天。4.儀

4、器： 上海迅達(dá)公司的半自動(dòng)生化分析儀XD811。5.操作程序：5.1試劑準(zhǔn)備：在室溫中按瓶簽標(biāo)定的體積，定量加入新鮮去離子水，輕輕混勻至試劑完全溶解。5.2分析參數(shù)：方法：速率法；波長(zhǎng)340nm 溫度：37比色杯光徑: 1cm 延遲時(shí)間60秒5.3操作步驟：質(zhì)控管標(biāo)本管工作液100ml1.00ml樣品0.10ml 質(zhì)控品0.10ml混合均勻，在反應(yīng)溫度保溫60秒，分別讀取吸光度。5.4計(jì)算方法:樣品中ALT活動(dòng)；ALT（U/L）=A/分*F V1 F= *1000=1746 Vs*消光系數(shù)V1=反應(yīng)總體積 Vs=樣品體積NADH在340的毫克分子消光系數(shù)=6.3 6.操作性能:線性范圍：010

5、00U/L（37）如果血清中ALT活力超出范圍，則用生理鹽水稀釋血清重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7.參考范圍：040U/L 化驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：zmljykxm-001丙氨酸氨基轉(zhuǎn)酶測(cè)定（動(dòng)力法） 第 3 頁(yè) 共 3 頁(yè)起草人莊紅梅起草日期200510生效日期2005.11審核人張慶芳審核日期200510頒布后重審日期2005.11批準(zhǔn)人許清泉批準(zhǔn)日期200510 頒布部門檢驗(yàn)科頒布部門走馬嶺中心衛(wèi)生院8.結(jié)果審核：8.1室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果的判斷：對(duì)質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行分析是否在控。8.2對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行審核，包括檢驗(yàn)項(xiàng)目是否漏項(xiàng)，打印是否清楚、正確，難以解釋的結(jié)果，并決定是否需要復(fù)查。9.臨床意義：ALT在下列疾病可增高：（1）充血性心臟衰竭；各種肝臟疾病。 （2）傳染病白細(xì)胞增多癥（3）嚴(yán)重的心肌梗塞 （4）骨骼肌疾病