移液器操作技巧

1、精選文檔移液器操作技巧前言：移液結(jié)果會(huì)很容易受到使用技法的影響。為了獲得最佳結(jié)果，需要采用良好的移液技法。技巧 1：一致性在按壓與釋放定位銷(xiāo)時(shí)，需要保持一致的節(jié)奏、速度和技法。吸液速度過(guò)快會(huì)導(dǎo)致套柄與活塞噴濺、產(chǎn)生氣霧以及受到污染，甚至導(dǎo)致樣品量損耗。一致性可使準(zhǔn)確度提高達(dá) 5%。技巧 2：正確填充吸頭當(dāng)某一吸頭的建議（標(biāo)稱）范圍為最大吸頭容量（標(biāo)稱容量）的 10% 至 100% 時(shí)，可在 35% 至 100% 這一較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)最高精確度。在如此小的范圍內(nèi)移液會(huì)減少對(duì)操作人員技法的要求，并可將結(jié)果準(zhǔn)確度提高約 1%。當(dāng)達(dá)到標(biāo)稱容量的 50% 時(shí)可提供最佳結(jié)果。技巧 3：吸液時(shí)保持垂

2、直入水角使入水角盡可能地接近垂直位置 否則垂直液柱較小，這樣將會(huì)吸入過(guò)多樣品。（分液時(shí)，吸頭應(yīng)當(dāng)與容器壁保持較小角度，從而確保良好的排液效果。關(guān)于分液的更多技巧將在下一期電子快訊中提供）使用垂直位置（尤其是使用微量移液器時(shí)），可使準(zhǔn)確度提高達(dá) 2%。技巧 4：一致性千分尺設(shè)置始終從同一方向設(shè)置您的千分尺。最好從高至低進(jìn)行：在將容量設(shè)置從高容量減少降至低容量時(shí)，只需將表盤(pán)下調(diào)至所需容量設(shè)置。提高容量設(shè)置時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)選擇輪使其略微超過(guò)所需容量，然后緩慢回調(diào)至正確設(shè)置。這可避免機(jī)械回沖。正確設(shè)置容量可使準(zhǔn)確度提高達(dá) 0.5%。技巧 5：吸頭入水深度正確的吸頭入水深度對(duì)于微量移液器尤為重要。如果吸頭入水過(guò)

3、深，則隨著壓力的加大，吸液量將會(huì)增多。保留在吸頭表面的液體會(huì)影響結(jié)果。如果吸頭未入水過(guò)深，則會(huì)造成空氣進(jìn)入，從而產(chǎn)生氣泡以及導(dǎo)致容量不準(zhǔn)確。正確的入水深度可使準(zhǔn)確度提高達(dá) 5%。 移液器容量 入水深度 2 與 10ul 1mm 20 與 100ul 2-3mm 200 與 1000ul 3-6mm 5000ul 與 10ML 6-10mm技巧 6：分液技法對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用而言，建議在分液時(shí)將吸頭的末端貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在吸頭上的樣品。沿側(cè)壁向上滑動(dòng)吸頭末端將移液器拆下

4、，從而去除吸頭孔處的任何殘留液滴。此技法可使結(jié)果準(zhǔn)確度提高達(dá) 1%。另一種技法是直接分液到液體表面。使用諸如 RAININ FinePoint 吸頭之類(lèi)的薄壁吸頭十分重要，這是因?yàn)檫@些吸頭允許充分排液。如果直接分液至液體中，則建議進(jìn)行反向模式移液，從而防止分液后吸液。技巧 7：預(yù)清洗移液前至少預(yù)清洗兩遍，從而補(bǔ)償位于吸頭內(nèi)部的液體。這還有助于中和毛細(xì)管效果以及使移液器內(nèi)部的空氣溫度等于樣品溫度。使用正在分液的相同液體進(jìn)行預(yù)清洗。使用吸頭吸液，然后將其重新分液至儲(chǔ)罐或者廢液箱預(yù)清洗可為所有等分溶液提供相同的接觸表面當(dāng)與水液一同使用時(shí)，兩次預(yù)先沖洗可使準(zhǔn)確度提高達(dá) 0.2%技巧 8：預(yù)清洗異常處理

5、盡管預(yù)清洗在大多數(shù)情況下可提高準(zhǔn)確性，但是當(dāng)對(duì)非常溫和或者冰冷的溶液進(jìn)行移液時(shí)，它會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生不利影響。不建議進(jìn)行預(yù)清洗的例外情況為：- 對(duì)非常冰冷的溶液（如：冰?。┻M(jìn)行移液- 對(duì) 37°C 或以上的溫和溶液進(jìn)行移液對(duì)溫和或者冰冷溶液進(jìn)行預(yù)清洗有可能造成高達(dá) 5% 的錯(cuò)誤率。技巧 9：恒定室溫在恒定室溫條件下移液。移液的理想室溫為 +- 21.5°C，此溫度同樣適用于校準(zhǔn)。防止溫度大幅度或者突然變化，這是因?yàn)橐埔浩髦械目諝鉄o(wú)法足夠快速地適應(yīng)，以及樣品量可能會(huì)受到影響。在恒溫條件下移液可使準(zhǔn)確度提高達(dá) 5%。技巧 10：始終垂直存放移液器不要將移液器平放在抽屜內(nèi)或者工作臺(tái)上。

6、這有可能損壞套柄末端，從而造成泄漏。此外，殘留液體還會(huì)流入套柄中，從而污染移液器。正確儲(chǔ)存移液器可防止不可估量的錯(cuò)誤以及保護(hù)儀器。技巧 11：吸頭入水時(shí)間在將樣品吸入吸頭時(shí)，在樣品中的入水時(shí)間是良好移液技法中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn)松開(kāi)定位銷(xiāo)按鈕之后，必須進(jìn)行短暫暫停，然后再?gòu)臉悠分腥〕?，以確保將全量樣品吸入吸頭中。如果量較大以及對(duì)于粘性物質(zhì)而言，必須在等候較長(zhǎng)時(shí)間后再取出，因?yàn)橐埔浩髦械臍馐倚枰幻腌姷臅r(shí)間才能實(shí)現(xiàn)均衡。技巧 12：吸液速率移液器的吸液速率不盡相同，因此會(huì)對(duì)結(jié)果的精度與準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。用戶應(yīng)使用以一種平穩(wěn)并且受控的方式釋放移液器定位銷(xiāo)按鈕。釋放過(guò)快的定位銷(xiāo)可能出現(xiàn)的最常見(jiàn)后果是：氣霧會(huì)進(jìn)入移液器套柄中，從而損壞移液器的內(nèi)部部件。當(dāng)出現(xiàn)向上噴濺液體的情況時(shí)，這種現(xiàn)象更為明顯。如果液體具有腐蝕性，則有可能損壞移液器的套柄并且會(huì)造成樣品交叉污染。技巧 13：反向移液模式對(duì)于科研人員而言，使用移液器對(duì)粘性與密致液體進(jìn)行精準(zhǔn)吸液與分液一直是一道難題。對(duì)策是使用反向移液模式。