移液器操作技巧

1、精選文檔移液器操作技巧前言：移液結(jié)果會很容易受到使用技法的影響。為了獲得最佳結(jié)果，需要采用良好的移液技法。技巧 1：一致性在按壓與釋放定位銷時，需要保持一致的節(jié)奏、速度和技法。吸液速度過快會導致套柄與活塞噴濺、產(chǎn)生氣霧以及受到污染，甚至導致樣品量損耗。一致性可使準確度提高達 5%。技巧 2：正確填充吸頭當某一吸頭的建議（標稱）范圍為最大吸頭容量（標稱容量）的 10% 至 100% 時，可在 35% 至 100% 這一較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實現(xiàn)最高精確度。在如此小的范圍內(nèi)移液會減少對操作人員技法的要求，并可將結(jié)果準確度提高約 1%。當達到標稱容量的 50% 時可提供最佳結(jié)果。技巧 3：吸液時保持垂

2、直入水角使入水角盡可能地接近垂直位置 否則垂直液柱較小，這樣將會吸入過多樣品。（分液時，吸頭應(yīng)當與容器壁保持較小角度，從而確保良好的排液效果。關(guān)于分液的更多技巧將在下一期電子快訊中提供）使用垂直位置（尤其是使用微量移液器時），可使準確度提高達 2%。技巧 4：一致性千分尺設(shè)置始終從同一方向設(shè)置您的千分尺。最好從高至低進行：在將容量設(shè)置從高容量減少降至低容量時，只需將表盤下調(diào)至所需容量設(shè)置。提高容量設(shè)置時，轉(zhuǎn)動選擇輪使其略微超過所需容量，然后緩慢回調(diào)至正確設(shè)置。這可避免機械回沖。正確設(shè)置容量可使準確度提高達 0.5%。技巧 5：吸頭入水深度正確的吸頭入水深度對于微量移液器尤為重要。如果吸頭入水過

3、深，則隨著壓力的加大，吸液量將會增多。保留在吸頭表面的液體會影響結(jié)果。如果吸頭未入水過深，則會造成空氣進入，從而產(chǎn)生氣泡以及導致容量不準確。正確的入水深度可使準確度提高達 5%。 移液器容量 入水深度 2 與 10ul 1mm 20 與 100ul 2-3mm 200 與 1000ul 3-6mm 5000ul 與 10ML 6-10mm技巧 6：分液技法對于大多數(shù)應(yīng)用而言，建議在分液時將吸頭的末端貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在吸頭上的樣品。沿側(cè)壁向上滑動吸頭末端將移液器拆下

4、，從而去除吸頭孔處的任何殘留液滴。此技法可使結(jié)果準確度提高達 1%。另一種技法是直接分液到液體表面。使用諸如 RAININ FinePoint 吸頭之類的薄壁吸頭十分重要，這是因為這些吸頭允許充分排液。如果直接分液至液體中，則建議進行反向模式移液，從而防止分液后吸液。技巧 7：預清洗移液前至少預清洗兩遍，從而補償位于吸頭內(nèi)部的液體。這還有助于中和毛細管效果以及使移液器內(nèi)部的空氣溫度等于樣品溫度。使用正在分液的相同液體進行預清洗。使用吸頭吸液，然后將其重新分液至儲罐或者廢液箱預清洗可為所有等分溶液提供相同的接觸表面當與水液一同使用時，兩次預先沖洗可使準確度提高達 0.2%技巧 8：預清洗異常處理

5、盡管預清洗在大多數(shù)情況下可提高準確性，但是當對非常溫和或者冰冷的溶液進行移液時，它會對結(jié)果產(chǎn)生不利影響。不建議進行預清洗的例外情況為：- 對非常冰冷的溶液（如：冰?。┻M行移液- 對 37°C 或以上的溫和溶液進行移液對溫和或者冰冷溶液進行預清洗有可能造成高達 5% 的錯誤率。技巧 9：恒定室溫在恒定室溫條件下移液。移液的理想室溫為 +- 21.5°C，此溫度同樣適用于校準。防止溫度大幅度或者突然變化，這是因為移液器中的空氣無法足夠快速地適應(yīng)，以及樣品量可能會受到影響。在恒溫條件下移液可使準確度提高達 5%。技巧 10：始終垂直存放移液器不要將移液器平放在抽屜內(nèi)或者工作臺上。

6、這有可能損壞套柄末端，從而造成泄漏。此外，殘留液體還會流入套柄中，從而污染移液器。正確儲存移液器可防止不可估量的錯誤以及保護儀器。技巧 11：吸頭入水時間在將樣品吸入吸頭時，在樣品中的入水時間是良好移液技法中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn)松開定位銷按鈕之后，必須進行短暫暫停，然后再從樣品中取出，以確保將全量樣品吸入吸頭中。如果量較大以及對于粘性物質(zhì)而言，必須在等候較長時間后再取出，因為移液器中的氣室需要一秒鐘的時間才能實現(xiàn)均衡。技巧 12：吸液速率移液器的吸液速率不盡相同，因此會對結(jié)果的精度與準確度產(chǎn)生影響。用戶應(yīng)使用以一種平穩(wěn)并且受控的方式釋放移液器定位銷按鈕。釋放過快的定位銷可能出現(xiàn)的最常見后果是：氣霧會進入移液器套柄中，從而損壞移液器的內(nèi)部部件。當出現(xiàn)向上噴濺液體的情況時，這種現(xiàn)象更為明顯。如果液體具有腐蝕性，則有可能損壞移液器的套柄并且會造成樣品交叉污染。技巧 13：反向移液模式對于科研人員而言，使用移液器對粘性與密致液體進行精準吸液與分液一直是一道難題。對策是使用反向移液模式。