微生物限度檢查法標準操作規(guī)范流程

1、xxxxxxx中藥飲片廠微生物限度檢查法標準操作規(guī)程編RZL - SOP - 05 - 062-01頁 數(shù)共9頁制定人制定日期年 月 日修訂日期年 月 日審核人審核日期年 月 日頒發(fā)部門質(zhì)量管理部批準人批準日期年 月 日生效日期年 月 日分發(fā)部門質(zhì)量管理部、質(zhì)量控制科目的 建立微生物限度檢查法標準操作規(guī)程，規(guī)范操作，保證結(jié)果的準確性。范 圍 成品、輔料、內(nèi)包裝袋及純化水的檢驗。責 任 微生物限度檢驗人員內(nèi) 容 本檢驗操作規(guī)程依據(jù)中國藥典 2015年版四部通則1105非無菌產(chǎn)品微生物 限度檢查：微生物計數(shù)法和通則1106非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查 法進行檢查。微生物計數(shù)法一、計數(shù)方法1

2、、微生物計數(shù)法系用于能在有氧條件下生長的嗜溫細菌和真菌的計數(shù)。2、計數(shù)方法 本法包括平皿法、薄膜過濾法。3、計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查和供試品計數(shù)方法適用性檢查供試品微生物計數(shù)中所使用的培養(yǎng)基應(yīng)進行適用性檢查。供試品的微生物計數(shù)方法應(yīng)進行方法適用性試驗，以確定采用的方法適合于該產(chǎn)品的微生物計數(shù)。4、菌種及菌液的制備4.1 試驗用菌株的傳代次數(shù)不得超過 5代(從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0袋)，并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進行保藏。計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查和計數(shù)方法適用 性試驗。4.2 菌液制備 按規(guī)定培養(yǎng)各試驗菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽 抱桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用 PH7.0無

3、菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液或0.9%無 菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3-5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液，將抱子洗脫。采用適宜的方法吸出抱子懸液至無菌試管中，用含 0.05% (ml/ml)聚 山梨酯80的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃 度的黑曲霉抱子懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在 2小時內(nèi)使用；若保存在 2-8 C,可在24小時內(nèi)使用。黑曲霉抱子懸液可保存在2-8 C,在驗證過的貯存期內(nèi)使用。雌藥悻試驗苗糧的制備計榭百界基適用性檢否1怪方斷性試蛉需班商

4、總裁霉菌*DS母 菌翻需氧菌總救萼苗和附 重然金黃色葡萄厚苗皿用褥CCMOC(B)腰酩大豆原瓊脂培養(yǎng)基 我懶 大豆廝濯體理界 :，河養(yǎng)溫度3035Cr培養(yǎng)時1司整24h膜酪大豆麻 瓊胎塘赤基 我腰酩大豆 麻液體招養(yǎng) 基，培養(yǎng)褂 魔30 35C.用界 時間不超過 3 天.Stt 量不大于 lOOcfo*腰酪大豆豚 諫脂培界基 或噗酪大豆 麻液體培養(yǎng) 基，培養(yǎng)溫 度效增界 時間不超過 3 天.量不大于 1。1二Fg聊假單胞葭Psfudamcrnas aenjguKfsa CMCC(BJ 10104枯蕈身泥桿菌Bxilhts subtihs (CMCC(BJ 63501)白色念珠菌Candida a

5、lUams CMCC(F) 98001)沙氏H萄蓿瓊脂培養(yǎng)基 或沙氏葡萄糖做體場界 基塔界科度2025c. 濟弄呵間27天鼠酪大豆麻 瓊脂培養(yǎng) 基*理養(yǎng)溫 演30 35C，塢養(yǎng) 時間不超過 5天.接種 量不大于 lOOcfu.沙氏需萄精 碟盾培養(yǎng) 基.招養(yǎng)混 度20 25c,培養(yǎng) 時間不超過 5天.我神 量下大于 lOOtfu,族能大豆麻 瓊脂培養(yǎng) 基，培養(yǎng)損 度為 BC.焙界 時間不超過 5天,受腫 量不大于 100cfuv沙氐犧噓 尊照埼養(yǎng) 基，培養(yǎng)海 度20 25c培養(yǎng) 時間不超過 5天，接胖 量不大于 100 血.黑朗嘉西Asperg Hus fliger CMCCff) 93003)

6、沙氏需萄格瓊脂陽界基 或馬智暮愜瓊脂塞 界基.環(huán)界態(tài)度20 25CJ的時間57天， 或宜多聯(lián)得不事的肝4.3 陰性對照 為確認試驗條件是否符合要求，應(yīng)進行對照試驗，陰性對照試驗應(yīng)無 菌生長。4.4 培養(yǎng)基適用性檢查 按照表規(guī)定，接種不大于100cfu的菌液至胰酪大豆豚液體培 養(yǎng)基或胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基平板或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板，置規(guī)定的條件下 培養(yǎng)。每一試驗菌株平行制備2管或2個平皿。同時用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢 培養(yǎng)基進行上述試驗。被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均 數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。被檢 液體培養(yǎng)基管與對照培養(yǎng)基

7、管比較，試驗菌應(yīng)生長良好。5、計數(shù)方法適用性檢查5.1 供試品制備 根據(jù)供試品的理化特性與生物學(xué)特性，采用適宜的方法制備供試液。制備時若需加溫應(yīng)加熱均勻且溫度不得超過45 C o供試液從制備到加入檢驗用培養(yǎng)基不得超過1小時。5.1.1 成品、輔料供試液的制備 取供試品，力口 PH7.0無菌氯化鈉-蛋白凍緩沖溶液 或PH7.2磷酸鹽緩沖溶液，或胰酪大豆豚液體培養(yǎng)基或稀釋制成1:10供試液，若需要，調(diào)節(jié)供試液PH至6-8,必要時用同一稀釋液將供試液進一步10倍稀釋系列。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。5.1.2 內(nèi)包裝膜、袋：取供試品100cm2 ,剪碎，力口 PH7.0無菌氯化鈉

8、-蛋白陳緩沖 液或PH7.2磷酸鹽緩沖溶液，或胰酪大豆豚液體培養(yǎng)基，浸泡，振搖，制成 1:10 供試液。若需要，調(diào)節(jié)供試液 PH至6-8,必要時用同一稀釋液將供試液進一步 10 倍稀釋系列。5.2 接種和稀釋按下列要求進行供試液的接種和稀釋，制備微生物回收試驗用供試 液。所加菌液的體積應(yīng)不超過供試液體積的 1%。為確認供試品中微生物能被充分檢 出，應(yīng)首先選擇最低稀釋級的供試液進行計數(shù)方法適用性試驗。5.2.1 試驗組 取上述制備好的供試液，加入試驗菌液，混勻，使每 1ml供試液所含 菌量不大于100cfu o5.2.2 供試品對照組 取制備好的供試液，以稀釋液代替菌液同試驗組操作。5.2.3

9、菌液對照組取不含中和劑及滅活劑的相應(yīng)稀釋液替代供試液，按試驗組操作 加入試驗菌液并進行微生物回收試驗。5.3 供試品中微生物的回收 表1所列的計數(shù)方法適用性試驗的各試驗菌應(yīng)逐一進行 微生物回收，微生物回收采用平皿法。5.3.1 平皿法采用傾注法，表1中每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備 2個平皿。取照 上述“供試液的制備”和“接種和稀釋”制備的供試淅1,置直徑90mm的無菌平皿中， 注入15-20m1溫度不超過45 c熔化的胰酪大豆陳瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)、計數(shù)。同法測定供試品對照組及菌液對照組菌液，計算各試 驗組的平均菌落數(shù)。5.3.2 薄膜過濾法采用的濾膜孔徑不大于0.

10、45um。濾膜直徑一般為50mm。濾器及 濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。使用時，應(yīng)保證濾膜在過濾前后的完整性。水 溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。為發(fā)揮濾膜的最大過濾效率， 應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個濾膜表面。供試液經(jīng)薄膜過濾后，若需要 用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量不超過100ml ,總沖洗量不得超過1000ml; 以免濾膜上的微生物受損傷。取照上述“供試液的制備”和“接種和稀釋”制備的供試液適量（一般取相當于1g、1ml、10cm2的供試品，若供試品中所含菌數(shù)校對，供 試液可酌情減量），加至適量的稀釋液總，混勻，過濾，用適量的沖洗液沖洗濾膜。測定需氧菌總數(shù)

11、，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基平板上；測定霉菌和酵母菌總數(shù)，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，按規(guī)定條件培養(yǎng)、技術(shù)。每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備1張濾膜。同法測定供試品對照組和菌液對照組菌數(shù)。6、結(jié)果判斷 計數(shù)方法適用性試驗中，采用平皿法或薄膜過濾法，試驗組菌落數(shù)減去供試品對照組菌落數(shù)的值與菌液對照組菌落數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2范圍內(nèi)。若各試驗驗菌的回收試驗均符合要求，照所用的供試液制備方法及計數(shù)方法進行該供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)計數(shù)。若存在一株或多株試驗菌的回收達不到要求，應(yīng)選擇回收最接近要求的方法和試驗條件進行供試品檢查。二供試品的檢查1、檢驗量 即一次

12、試驗所用的供試品量（g、ml或cm2）。一般隨機抽取不少于 2個最小包裝的供試品，混合，取 10g、10ml或100cm2進行檢驗。2、供試品檢查 按計數(shù)方法適用性試驗確認的計數(shù)方法進行供試品中需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的測定。胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆豚液體培養(yǎng)基用于測定需氧菌總數(shù)；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于測定霉菌和酵母菌總數(shù)。2.1 陰性對照試驗以稀釋液代替供試液進行陰性對照試驗，陰性對照試驗應(yīng)無菌生長。若有菌生長應(yīng)進行偏差調(diào)查。2.2 平皿法取規(guī)定量的供試品，按方法適用性試驗確認的方法進行供試液制備和菌數(shù)測定，每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備 2個平板。2.2.1 培養(yǎng)和計數(shù) 胰酪大豆陳

13、瓊脂培養(yǎng)基平板倒置于 3035c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)35大。沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板倒置于 2025c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)57天，觀察菌落生長情況，點計平板上生長的所有菌落數(shù)并報告。菌落蔓延成片的平板不宜計數(shù)。點計菌落數(shù)后計算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報告規(guī)則報告菌落數(shù)。若 同稀釋級兩個平板的菌落數(shù)平均值不小于 15,則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或 以上。2.2.2 菌數(shù)報告規(guī)則需氧菌總數(shù)宜選取平均菌落數(shù)小于 300cfu的稀釋級、霉菌和酵 母菌總數(shù)宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu的稀釋級，作為菌數(shù)報告的依據(jù)。取最高平 均菌落數(shù)，計算1g、1ml或10cm2供試品中所含微生物，取兩位有效數(shù)字報告。如

14、 各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅最低稀釋級的平板有菌落生長，但平均茵落數(shù) 小于1時，以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告菌數(shù)。2.3 薄膜過濾法 按計數(shù)方法適用性試驗確認的計數(shù)方法進行供試液制備。取相當于每張濾膜含1g、1ml或10cm2供試品的供試液，若供試品所含的菌數(shù)較多時，可取 適宜稀釋級的供試液，照方法適用性試驗確認的方法加至適量稀釋液中，立即過濾，沖洗，沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培 養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。2.4 培養(yǎng)和計數(shù)培養(yǎng)條件和計數(shù)方法同平皿法，每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超過100cfu。2.5 菌數(shù)報告規(guī)則 以相當于1g、1ml或10cm2供試品的菌落數(shù)報

15、告菌數(shù)；若濾膜 上無菌落生長，以 1報告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g、1ml或10cm2供試品），或 1 乘以最低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。3、結(jié)果判斷3.1 需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)（包括真菌菌落數(shù)）；霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)（包括細菌菌落 數(shù)）0若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的細菌使霉菌和酵母菌的計數(shù)結(jié)果不符合微 生物限度要求，可使用含抗生素（如氯霉素、慶大霉素）的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或其他選擇性培養(yǎng)基(如玫瑰紅鈉培養(yǎng)基)進行霉菌和酵母菌總數(shù)測定。使用選擇 性培養(yǎng)基時應(yīng)進行培養(yǎng)基適用性檢查。3.2 各品種項下規(guī)定的微生物限度標準解釋如下：10

16、1cfu:可接受的最大菌數(shù)為20; 102cfu:可接受的最大菌數(shù)為200; 103cfu:可接受的最大菌數(shù)為2000,以 此類推。3.3 若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的檢查結(jié)果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定?？刂凭鷻z查法1、簡述 控制菌檢查法是用于在規(guī)定的試驗條件下，檢查供試品中是否存在某些特定微生物。本標準的控制菌為大腸埃希菌CMCC(B) 44102、銅綠假單胞菌CMCC(B) 10104和金黃色葡萄球菌CMCC(B) 26003供試品檢出控制菌或其他致病菌時，按一次檢出結(jié)果為準，不再復(fù)試。供試液制備及實驗環(huán)境

17、要求同“微生物計數(shù)法”。2、培養(yǎng)基適用性檢查和控制菌檢查方法適用性試驗 供試品控制菌檢查中所使用的培養(yǎng)基應(yīng)進行適用性檢查。供試品的控制菌檢查方法應(yīng)進行適用性驗證。2.1 菌種 試驗用菌株的傳代次數(shù)不得超過 5代(從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0袋)，并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進行保藏。金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )CMCC(B) 26003銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa) CMCC(B) 10104大腸埃希菌(Escherichia coli) CMCC(B) 44102) 乙型副傷寒沙門菌(Salmonella paratyphi

18、B) CMCC(B) 50094白色念珠菌(Candida albicans ) CMCC(F) 98001生抱梭菌(Clostridium sporogenes ) CMCC(B) 649412.2 菌液制備將金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、沙門菌分別接種于胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆豚液體培養(yǎng)基上，3035 c培養(yǎng)1824h ;將白色念珠菌接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，2025 c培養(yǎng)23天；將生抱梭菌接種于梭菌增菌培養(yǎng)基中置厭氧條件下 3035c培養(yǎng)2448h,或接種于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中3035c培養(yǎng)1824h。上述培養(yǎng)物用PH7.0無菌氯化鈉-蛋白

19、凍緩沖液或 0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液。 菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在 2小時內(nèi)使用；若保存在2-8 C,可在24 小時內(nèi)使用。生抱梭菌抱子懸液可替代新鮮的菌懸液， 抱子懸液保存在2-8 C,在驗 證過的貯存期內(nèi)使用。2.3 陰性對照 為確認試驗條件是否符合要求，應(yīng)進行對照試驗，陰性對照試驗應(yīng)無 菌生長。2.4 培養(yǎng)基適用性檢查 控制菌檢查用的培養(yǎng)基應(yīng)進行培養(yǎng)基適用性檢查。檢查項目 包括促生長能力、抑制能力及指示特性的檢查。各培養(yǎng)基的檢查項目及所用菌株。表控制檢查用培養(yǎng)基的促生長能力-抑制能力及指示特性控制前檢查培養(yǎng)基特性試除葡株耐月西革攔艇的題*菌增苗液體J直養(yǎng)基促生檜能力

20、大覷般希苗.啊般華 陶笛抑制前力金黃色裔塞耳菌紫紅粒鹽南甜糖麻朋塔養(yǎng)基便生長能力 詠 示的惟大題埃奇兩、手吩捺單ISW大艇埃布西促空長能力大輛埃卷菌抑制能力金黃色葡帝球菌復(fù)國機京脂焙界基促生長能力H冒小杯性大舸淀亳葩沙門西KV沙門的Iff/悻拓君基1足生代就力乙堂舟僚喋色1曲師制能力至黃庫能JiT荀本錯犯氨登脫氧膽酸油導(dǎo)蠟 培養(yǎng)基便繪標能力討8示將性乙型副南京沙門葩三地快球制埴養(yǎng)基指示能力乙型的指暮紗門苗f陞f(xié)微單腦曲4H用范比十六烷基三甲接球增堀促生長胡力七用亢展華的融押期能力大底域而朝2.4.1 液體培養(yǎng)基促生長能力檢查 分別接種不大于100cfu的的試驗菌株與被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在

21、相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最短培養(yǎng)時 問下培養(yǎng)，與對照培養(yǎng)基比較，被檢培養(yǎng)基試驗菌應(yīng)生長良好。2.4.2 固體培養(yǎng)基促生長能力檢查用涂布法分別接種不大于100cfu的試驗菌株與被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)，被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)應(yīng)一致。2.4.3 培養(yǎng)基抑制能力檢查接種不少于100cfu的試驗菌株與被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)， 試驗菌應(yīng)不得生長。2.4.4 培養(yǎng)基指示特性的檢查用涂布法分別接種不大于100cfu的試驗菌株與被檢 培養(yǎng)

22、基和對照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最 短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)，被檢培養(yǎng)基上試驗菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑能力 等英語對照培養(yǎng)基一致。2.5 控制菌檢查方法適用性檢查2.5.1 供試液制備：按“供試品檢查”中規(guī)定的方法制備供試液。2.5.2 試驗菌根據(jù)各品種項下微生物限度標準中規(guī)定的檢查控制菌選擇相應(yīng)的試驗菌株。確認耐膽鹽革蘭陰性菌檢查方法是，采用大腸埃希菌和銅綠假單胞菌為試驗 菌。2.5.3 適用性檢查按控制菌檢查法取規(guī)定量供試液及不大于100cfu的試驗菌接入規(guī)定的培養(yǎng)基中，采用薄膜過濾法是取規(guī)定量供試液，過濾沖洗，在最后一次沖洗液中加入試驗菌，過濾后注入規(guī)

23、定的培養(yǎng)基或取出濾膜接入規(guī)定的培養(yǎng)基中。依相 應(yīng)控制菌檢查方法，在規(guī)定的溫度和最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)，應(yīng)能檢出所加試驗菌相 應(yīng)的反應(yīng)特征。2.5.4 結(jié)果判斷上述試驗若檢出試驗菌，按此供試液之被罰和控制菌檢查方法進行 供試品檢查；若未檢出試驗菌，營銷處供試品中的抑菌活性(中國藥典2015年版四 部通則1105中抗菌活性的去除或滅活)，并重新進行方法適用性試驗。若經(jīng)過試驗確證供試品對試驗菌的抗菌作用無法消除，可認為受抑制的微生物不易存在于該供 試品中，選擇抑菌成分消除相對徹底的方法進行供試品的檢查。3、供試品檢查供試品的控制菌檢查應(yīng)經(jīng)方法適用性試驗確認的方法進行。3.1 陽性對照陽性對照試驗方法同供

24、試品的控制菌檢查，對照菌的加入量應(yīng)不大于 100cfu ,陽性對照應(yīng)檢出相應(yīng)的控制菌。3.2 陰性對照 以稀釋劑代替供試液照相應(yīng)控制菌檢查法檢查，陰性對照應(yīng)無菌生 長。3.3 大腸埃希菌(Escherichia coli)3.3.1 供試液制備和增菌培養(yǎng)取供試品，照“微生物計數(shù)法”制成:10的供試液，取 相當于1g或1ml供試品的供試液，接種于適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗確定）的胰 酪大豆豚液體培養(yǎng)基中，混勻，3035 c培養(yǎng)1824h。3.3.2 選擇和分離培養(yǎng) 取上述培養(yǎng)物1ml接種至100ml麥康凱液體培養(yǎng)基中，4244 c培養(yǎng)2448h。取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上，3035 c培養(yǎng)1872h。3.3.3 結(jié)果判斷若麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長，應(yīng)進行分離、純化及適宜 的鑒定試驗，確證是否為大腸埃希菌；若麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上沒有菌落生長， 或雖有菌落生長但鑒定結(jié)果為陰性，判供試品未檢出大腸埃希菌。3.4 銅綠彳貿(mào)單胞菌（Pseudomonas aerug